目的 观察鲎抗脂多糖因子 (L AL F)对 D-氨基半乳糖增敏的小鼠败血症休克是否具有保护作用 ,以及 L AL F对内毒素诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮 (NO)和白介素- 10 (IL- 10 )的影响。 方法 小鼠腹腔注射 E.coli O5 5∶ B5脂多糖 (...目的 观察鲎抗脂多糖因子 (L AL F)对 D-氨基半乳糖增敏的小鼠败血症休克是否具有保护作用 ,以及 L AL F对内毒素诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮 (NO)和白介素- 10 (IL- 10 )的影响。 方法 小鼠腹腔注射 E.coli O5 5∶ B5脂多糖 (L PS)及 D-氨基半乳糖建立败血症休克模型。治疗组小鼠接受 L AL F与 L PS预混合液 ,或 L AL F在 L PS攻击 3h后给予 ;对照组分别给予单独 L PS或在 L PS攻击 3h后给予实验缓冲液。体外实验 :用培养液 RPMI16 4 0收集小鼠腹腔巨噬细胞 ,分别给予单独 L PS、L AL F与 L PS预混合液处理 ,以及 L AL F在 L PS孵育 30 min、12 0 min后给予 ,在间隔不同时间后 ,收集培养上清 ,分别用比色法和 EL ISA法检测NO及 IL - 10浓度。 结果 体内实验表明 ,L AL F与 L PS体外预混合后可明显改善小鼠的生存率 ,L AL F在 L PS攻击之后给予仍有一定的保护作用。体外实验表明 ,L AL F可明显降低 L PS诱导小鼠腹腔巨噬细胞释放 NO,这种抑制效应以 L AL F与 L PS体外预混合时最强 ,并呈剂量依赖关系。同时还发现 L AL F的抑制效应较另一内毒素中和蛋白 -多粘菌素 B(PMB)强。与 NO不同 ,无论 L AL F是与 L PS预混合还是在 L PS孵育之后加入 ,L AL F均能增加 L PS诱导 IL-10的生成。在相同浓?展开更多
基金Supported by the National Natural Science Foundation of China(31570176,31602198)the Natural Science Foundation of Jiangsu Province(BK20151545)Project for Aquaculture in Jiangsu Province(D2015-13,Y2016-28)
文摘为了研究抗脂多糖因子ALFs在日本沼虾先天性免疫中的功能作用,研究从日本沼虾中克隆了2种抗脂多糖因子Mn ALF1、Mn ALF2。Mn ALF1 c DNA全长1008 bp,编码121个氨基酸;Mn ALF2 c DNA全长836 bp,编码124个氨基酸。这2种氨基酸均包含有一个信号肽序列和一个LPS结合位点,并且在结合位点的两端(N-端和C-端)都有2个保守的半胱氨酸残基。这2种Mn ALFs与之前发现的甲壳动物的ALFs是非常相似的。q RT-PCR结果显示Mn ALFs在所有被检测的组织中均有表达。其中Mn ALF1主要在心脏和小肠内表达,而Mn ALF2则主要在血细胞和肝胰脏中表达。在用嗜水气单胞菌刺激之后发现2种Mn ALFs在心脏、小肠、血细胞、肝胰脏中都呈现出明显的时间依赖表达模式(Mn ALF1在刺激之后呈现出先减少后增加的趋势,之后分别在不同组织的不同时间点达到最大值;然而,对于Mn ALF2,在心脏和小肠中先减少后增加,在血细胞和肝胰脏中呈现出先增加后减少,最后都在24h达到最大值)。结果提示这2种Mn ALF具有不同的组织特异性,并且在细菌侵染的免疫防御中起着重要的保护作用。
文摘目的 观察鲎抗脂多糖因子 (L AL F)对 D-氨基半乳糖增敏的小鼠败血症休克是否具有保护作用 ,以及 L AL F对内毒素诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮 (NO)和白介素- 10 (IL- 10 )的影响。 方法 小鼠腹腔注射 E.coli O5 5∶ B5脂多糖 (L PS)及 D-氨基半乳糖建立败血症休克模型。治疗组小鼠接受 L AL F与 L PS预混合液 ,或 L AL F在 L PS攻击 3h后给予 ;对照组分别给予单独 L PS或在 L PS攻击 3h后给予实验缓冲液。体外实验 :用培养液 RPMI16 4 0收集小鼠腹腔巨噬细胞 ,分别给予单独 L PS、L AL F与 L PS预混合液处理 ,以及 L AL F在 L PS孵育 30 min、12 0 min后给予 ,在间隔不同时间后 ,收集培养上清 ,分别用比色法和 EL ISA法检测NO及 IL - 10浓度。 结果 体内实验表明 ,L AL F与 L PS体外预混合后可明显改善小鼠的生存率 ,L AL F在 L PS攻击之后给予仍有一定的保护作用。体外实验表明 ,L AL F可明显降低 L PS诱导小鼠腹腔巨噬细胞释放 NO,这种抑制效应以 L AL F与 L PS体外预混合时最强 ,并呈剂量依赖关系。同时还发现 L AL F的抑制效应较另一内毒素中和蛋白 -多粘菌素 B(PMB)强。与 NO不同 ,无论 L AL F是与 L PS预混合还是在 L PS孵育之后加入 ,L AL F均能增加 L PS诱导 IL-10的生成。在相同浓?
