对鸦胆子进行蛋白质组成分析,并对其球蛋白酶解物细胞毒性进行研究。采用顺序抽提法提取鸦胆子清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白4类蛋白组分,并用凯氏定氮法进行定量;采用不同种蛋白酶水解鸦胆子球蛋白,MTT法考察其小分子量(≤3 k Da)...对鸦胆子进行蛋白质组成分析,并对其球蛋白酶解物细胞毒性进行研究。采用顺序抽提法提取鸦胆子清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白4类蛋白组分,并用凯氏定氮法进行定量;采用不同种蛋白酶水解鸦胆子球蛋白,MTT法考察其小分子量(≤3 k Da)酶解物对人乳腺癌MCF-7的细胞毒性。结果表明:鸦胆子总蛋白含量为17.47%,清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白和残渣蛋白分别占总蛋白含量的15.01%,8.11%,2.47%,44.92%,23.62%;球蛋白的胃蛋白酶酶解物(≤3 k Da)对人乳腺癌MCF-7具有显著的细胞毒性,且作用72 h后,IC_(50)为(6.52±0.01)mg·L^(-1)。鸦胆子蛋白质含量较为丰富,其多肽组分具有明确的体外细胞毒性,可进一步开发抗肿瘤活性成分。展开更多
抗肿瘤蛋白Mere15是从海洋生物文蛤中获得的抗肿瘤多肽。前期研究表明,Mere15具有显著的体内外抗肿瘤活性,但其在文蛤体液中含量极低。利用简并引物技术克隆了Mere15的全基因序列,并在大肠杆菌中获得高效表达。利用亲和层析技术纯化目...抗肿瘤蛋白Mere15是从海洋生物文蛤中获得的抗肿瘤多肽。前期研究表明,Mere15具有显著的体内外抗肿瘤活性,但其在文蛤体液中含量极低。利用简并引物技术克隆了Mere15的全基因序列,并在大肠杆菌中获得高效表达。利用亲和层析技术纯化目的蛋白,经透析除去盐和超滤浓缩,获得Mere融合蛋白,SDS-PAGE分析表明,目的蛋白分子量为33 k Da。MTT结果表明,目的蛋白对多种肿瘤细胞具有显著的抑制作用,为海洋抗肿瘤蛋白研究提供了新的思路,对抗肿瘤新药Mere15的开发应用也有一定的价值。展开更多
文摘对鸦胆子进行蛋白质组成分析,并对其球蛋白酶解物细胞毒性进行研究。采用顺序抽提法提取鸦胆子清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白4类蛋白组分,并用凯氏定氮法进行定量;采用不同种蛋白酶水解鸦胆子球蛋白,MTT法考察其小分子量(≤3 k Da)酶解物对人乳腺癌MCF-7的细胞毒性。结果表明:鸦胆子总蛋白含量为17.47%,清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白和残渣蛋白分别占总蛋白含量的15.01%,8.11%,2.47%,44.92%,23.62%;球蛋白的胃蛋白酶酶解物(≤3 k Da)对人乳腺癌MCF-7具有显著的细胞毒性,且作用72 h后,IC_(50)为(6.52±0.01)mg·L^(-1)。鸦胆子蛋白质含量较为丰富,其多肽组分具有明确的体外细胞毒性,可进一步开发抗肿瘤活性成分。
文摘抗肿瘤蛋白Mere15是从海洋生物文蛤中获得的抗肿瘤多肽。前期研究表明,Mere15具有显著的体内外抗肿瘤活性,但其在文蛤体液中含量极低。利用简并引物技术克隆了Mere15的全基因序列,并在大肠杆菌中获得高效表达。利用亲和层析技术纯化目的蛋白,经透析除去盐和超滤浓缩,获得Mere融合蛋白,SDS-PAGE分析表明,目的蛋白分子量为33 k Da。MTT结果表明,目的蛋白对多种肿瘤细胞具有显著的抑制作用,为海洋抗肿瘤蛋白研究提供了新的思路,对抗肿瘤新药Mere15的开发应用也有一定的价值。
