戊型肝炎病毒ORF2 C端抗原片段的表达及其免疫学特性研究 被引量：4

1

作者 马雁冰 孙茂盛 +6 位作者 李鸿钧 唐浩 杜瑞娟 李春宏 张光明 谢天宏 戴长柏 《中华微生物学和免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第5期419-422,共4页

目的　表达戊型肝炎病毒 (hepatitisEvirus ,HEV)ORF2C端 12 8个氨基酸残基的抗原片段ORF2 3 ,并进行其免疫学特性的研究。方法　用pBV2 2 0载体进行抗原的非融合表达 ,包涵体经变性凝胶过滤层析及离子交换层析纯化后透析复性 ,以Weste... 目的　表达戊型肝炎病毒 (hepatitisEvirus ,HEV)ORF2C端 12 8个氨基酸残基的抗原片段ORF2 3 ,并进行其免疫学特性的研究。方法　用pBV2 2 0载体进行抗原的非融合表达 ,包涵体经变性凝胶过滤层析及离子交换层析纯化后透析复性 ,以Westernblot、ELISA、动物免疫与抗原捕获RT nPCR等方法研究其免疫学特性。结果　获得了ORF2 3的高效表达 ,表达量占菌体总蛋白 5 0 %左右 ,纯化后纯度达 98%以上 ,Westernblot表明表达抗原可与戊肝患者阳性血清特异性结合 ;在HEV感染恒河猴实验中用于IgG抗体的检测 ,具有较好灵敏度与特异性 ;用其免疫豚鼠 ,抗体经ELISA法测定效价为 1∶80 0 0 ;用制备的豚鼠抗血清捕获戊型肝炎病毒颗粒 ,经RT nPCR扩增出特异性片段。结论　ORF2 3抗原片段具有HEV抗体识别的抗原表位 ,能够刺激机体产生抗体 。 展开更多

关键词 戊型肝炎病毒 抗原片段 免疫学特性 ORF2C端

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新疆出血热病毒糖蛋白Gc不同区段抗原DNA疫苗诱导小鼠的免疫应答 被引量：4

2

作者 汪梅芳 郭超凡 +3 位作者 朱华兵 陈丽娟 张渝疆 孙素荣 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期443-448,共6页

目的 构建新疆出血热病毒（Xinjiang hemorrhagic fever virus,XHFV）糖蛋白两个区段抗原的DNA疫苗,并观察其免疫应答效果.方法 分别将XHFV YL04057株糖蛋白Gc上的两个抗原区段GcⅠ（1 229~1 349 aa）和GcⅡ（1 443~1 566 aa）编码的DN... 目的 构建新疆出血热病毒（Xinjiang hemorrhagic fever virus,XHFV）糖蛋白两个区段抗原的DNA疫苗,并观察其免疫应答效果.方法 分别将XHFV YL04057株糖蛋白Gc上的两个抗原区段GcⅠ（1 229~1 349 aa）和GcⅡ（1 443~1 566 aa）编码的DNA序列插入真核表达载体pVAX1中,构建真核质粒pVAX1-GcⅠ和pVAX1-GcⅡ;经酶切和测序鉴定,质粒免疫小鼠,通过T细胞增殖试验、细胞因子含量测定和ELISA法检测抗体对其诱导的免疫应答效果进行评价.结果 经双酶切鉴定和测序证实重组质粒构建正确;实验组小鼠IgG产生水平与pVAX1对照组相比有明显升高;pVAX1-GcⅠ和pVAX1-GcⅡ免疫组小鼠血清中的抗体效价均高于1：3 200;pVAX1-GcⅡ免疫组的小鼠脾脏T淋巴细胞增殖明显,IFN-γ的表达水平也高达160.27 pg/ml,与对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.01）.结论 成功构建XHFV糖蛋白两个区段抗原DNA疫苗,靶抗原在体内可有效表达;各免疫组均激起了较强的体液免疫及细胞免疫应答,pVAX1-GcⅡ实验组免疫原性和免疫效果较好,可将其作为新疆出血热病毒的候选疫苗. 展开更多

关键词 新疆出血热病毒 糖蛋白 抗原片段 DNA疫苗

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表达TGEV S基因AD片段的重组乳酸杆菌的构建及免疫研究 被引量：2

3

作者 黄海楠 黄海鸥 +4 位作者 杨金生 程荣华 刘云志 任锐 姚新华 《养殖与饲料》 2015年第11期9-13,共5页

为构建表达TGEV S基因AD片段的重组乳酸杆菌,根据猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S蛋白的抗原决定簇AD片段的基因序列,设计引物,PCR扩增该片段,测序正确后利用穿梭质粒整合进益生乳酸菌中表达。结果显示,经过酶切、PCR和PAGE电泳鉴定重组的r S... 为构建表达TGEV S基因AD片段的重组乳酸杆菌,根据猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S蛋白的抗原决定簇AD片段的基因序列,设计引物,PCR扩增该片段,测序正确后利用穿梭质粒整合进益生乳酸菌中表达。结果显示,经过酶切、PCR和PAGE电泳鉴定重组的r S-AD基因在乳酸菌中得到了表达。所以,获得了表达TGEV S基因AD片段的重组乳酸杆菌。 展开更多

关键词 猪传染性胃肠炎病毒(TGEV) 抗原片段 乳酸菌

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大疱及疱疹性皮肤病

4

《中国医学文摘（皮肤科学）》 1997年第3期161-162,共2页

971487 重组大疱性类天疱疮抗原片段的表达、纯化及鉴定/李冠群…//中华皮肤科杂志.-1996,29（6）.-421 通过基因工程的方法,在体外对大疱性类天疱疮（BP）的自身抗原之一BPAG2片段的重组cDNA克隆进行了诱导表达。将重组质粒pKPL-BPAG... 971487 重组大疱性类天疱疮抗原片段的表达、纯化及鉴定/李冠群…//中华皮肤科杂志.-1996,29（6）.-421 通过基因工程的方法,在体外对大疱性类天疱疮（BP）的自身抗原之一BPAG2片段的重组cDNA克隆进行了诱导表达。将重组质粒pKPL-BPAG2转化至大肠杆菌POP2136中,并经SDS-PAGE分析表达产物。结果发现,细菌表达出分子量为22500的非融合性BPAG2片段,表达产物进一步经凝胶扫描分析显示,重组BPAG2抗原片段占细菌总蛋白的18.1％;与对应的cDNA长度相符合;重组片段经SDS-PAGE分离后得到较纯的重组蛋白片段,未见杂带出现;重组片段与抗BPAG2血清相结合,不能与BP的另一种自身抗原BPAG1的抗血清结合,证实其保留了BPAG2特异的免疫活性。作者认为。 展开更多

关键词 疱疹性 环抱菌素A BPAG2 中国皮肤性病学杂志 冲击疗法 抗原片段 大疮性 重组片段 强的松龙 蛋白片段

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大疱及疱疹性皮肤病

5

《中国医学文摘（皮肤科学）》 1995年第4期216-217,共2页

952210 从人角朊细胞cDNA文库中扩增160 000类天疱疮抗原片段/李冠群…//中华皮肤科杂志。-1995,28(3).-164～166 采用聚合酶链反应(PCR)法,从人角朊细胞cDNA文库中成功地扩增出编码BP AGZ一段588bp的特异性片段,进一步从分子水平证实B... 952210 从人角朊细胞cDNA文库中扩增160 000类天疱疮抗原片段/李冠群…//中华皮肤科杂志。-1995,28(3).-164～166 采用聚合酶链反应(PCR)法,从人角朊细胞cDNA文库中成功地扩增出编码BP AGZ一段588bp的特异性片段,进一步从分子水平证实BP抗原由角朊细胞合成,而直接以表皮DNA为模板未能扩出这一片段,提示大疱性类天疱疮(BP)抗原的有效基因片段可能被一些内含子隔开。扩增出的这一片段用于制备cDNA探针及重组抗原的研究,从分子水平探讨BP的自身免疫机制。 展开更多

关键词 疱疹性皮肤病 cDNA文库 人角朊细胞 类天疱疮 分子水平 抗原片段 皮肤性病学 中华皮肤科杂志 大疱性皮肤病 重组抗原

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丙型肝炎病毒不同抗原片段的检测分析

6

作者 韩瑞 赵自刚 +2 位作者 牛春雨 侯亚利 李延伟 《张家口医学院学报》 1999年第2期10-11,共2页

为了改进丙型肝炎病毒酶联免疫试剂的质量,增加检测结果的可靠性,对现在国内常用的酶联免疫试剂所包被的不同片段的抗原进行检测分析。结果显示,以C_2+C_7作为抗原片段包被液时,与其它几种抗原片段作为包被液所检测阳性血清的OD值有显... 为了改进丙型肝炎病毒酶联免疫试剂的质量,增加检测结果的可靠性,对现在国内常用的酶联免疫试剂所包被的不同片段的抗原进行检测分析。结果显示,以C_2+C_7作为抗原片段包被液时,与其它几种抗原片段作为包被液所检测阳性血清的OD值有显著性差异(P<0.01～0.05),且阳性血清的假阴性率最低(0％);而各不同抗原片段包被液检测阴性血清的假阳性率均为21％,但以C_1、C_2、C_1+C_7为包被液所检测的OD值与其它两组有显著性差异(P<0.01～0.05)。结果提示,进一步改进包被液的抗原片段的质量及各抗原片段的优化组合,是提高HCV酶联免疫试剂质量的一条可行途径。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒 酶联免疫试剂 抗原片段

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人细小病毒B19主要抗原片段的表达及临床初步应用

7

作者 周铁群 李长贵 +2 位作者 王剑锋 邱平 李德富 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期47-48,共2页

关键词 人细小病毒B19 抗原片段 酶联免疫吸附法 献血员 ELISA

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乙脑病毒E-Hsp70与E-肽连接区对小鼠特异性免疫的比较 被引量：5

8

作者 葛菲菲 邱亚峰 +1 位作者 杨耀武 陈溥言 《中国病毒学》 CSCD 2005年第4期357-361,共5页

在本实验室已构建的原核表达载体(含乙脑疫苗株SA14-14-2株E蛋白基因主要抗原片段)的基础上用巴斯德毕赤酵母系统表达,该片段长1113bp,编码371个氨基酸残基,研究酵母表达的该乙脑病毒(Japaneseencephali-tisvirus)E蛋白主要抗原片段与... 在本实验室已构建的原核表达载体(含乙脑疫苗株SA14-14-2株E蛋白基因主要抗原片段)的基础上用巴斯德毕赤酵母系统表达,该片段长1113bp,编码371个氨基酸残基,研究酵母表达的该乙脑病毒(Japaneseencephali-tisvirus)E蛋白主要抗原片段与结核杆菌热休克蛋白70(Hsp70)的融合蛋白以及该抗原肽与Hsp70上的一个功能域-肽连接区(Peptidebindingdomain,以下简称BD)融合形成的蛋白,用这三种蛋白分别免疫BALB/c小鼠,以酵母单独表达的E蛋白主要抗原片段免疫作为对照,比较它们对小鼠抗E蛋白主要抗原片段特异性的细胞免疫和体液免疫的影响。采用腹腔内注射蛋白的方法免疫小鼠,主要从IL-2的mRNA水平,淋巴细胞的增殖和抗体滴度这三个方面进行比较,最后我们得出E-BD融合蛋白在免疫效果方面比E-Hsp70略好一些,所以在本试验中肽连接区是完全可以代替Hsp70独立行使其佐剂功能。 展开更多

关键词 乙脑病毒E蛋白 主要抗原片段 结核杆菌热休克蛋白70(Hsp70) 肽连接区 淋巴细胞的增殖

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乙型脑炎病毒SA14-14-2株E蛋白主要抗原片段的高效表达 被引量：2

9

作者 葛菲菲 邱亚峰 +1 位作者 杨耀武 陈溥言 《中国病毒学》 CSCD 2005年第2期117-120,共4页

在本实验室已构建的原核表达载体(含乙脑疫苗株SA14 14 2株E蛋白基因主要抗原片段)的基础上用巴斯德毕赤酵母系统表达,该片段长1113bp,编码371个氨基酸残基,将其亚克隆入酵母表达载体pPICZαA,以电穿孔法转化酵母X 33,用Zeocin平板筛选... 在本实验室已构建的原核表达载体(含乙脑疫苗株SA14 14 2株E蛋白基因主要抗原片段)的基础上用巴斯德毕赤酵母系统表达,该片段长1113bp,编码371个氨基酸残基,将其亚克隆入酵母表达载体pPICZαA,以电穿孔法转化酵母X 33,用Zeocin平板筛选重组子,经甲醇诱导表达后,SDS PAGE和免疫印迹分析表达产物。由于糖基化不同,所表达产物有两种,其相对分子质量分别为44kDa和50kDa,表达量较高,约为290mg/L,经Western印迹验证,有较好的抗原性。在ELISA试验中,我们直接以PBS透析后的酵母上清包被,能够很明显地区分出乙脑阴阳性血清,与RT PCR检测的相符率达95%,为制备JEV的诊断抗原和基因工程疫苗提供了依据。 展开更多

关键词 乙脑疫苗株SA14—14—2株 E蛋白基因主要抗原片段 巴斯德毕赤酵母 高效表达

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VEGF、CEA、CYFRA21-1对胸腔积液良恶性的鉴别价值 被引量：3

10

作者 姚红卫 于小惠 顾中秋 《中外医学研究》 2012年第34期1-3,共3页

目的:了解分别或联合检测胸腔积液中血管内皮生长因子(VEGF)、癌胚抗原(CEA)和细胞角蛋白19抗原片段(CYFRA21-1)对良、恶性胸腔积液的鉴别诊断价值,提高对胸腔积液的诊断水平。方法:收集胸腔积液患者胸水样本80例,采用酶联免疫吸附法检... 目的:了解分别或联合检测胸腔积液中血管内皮生长因子(VEGF)、癌胚抗原(CEA)和细胞角蛋白19抗原片段(CYFRA21-1)对良、恶性胸腔积液的鉴别诊断价值,提高对胸腔积液的诊断水平。方法:收集胸腔积液患者胸水样本80例,采用酶联免疫吸附法检测VEGF含量,电化学发光法检测CEA、CYFRA21-1含量。计算各指标独立或联合鉴别诊断胸腔积液的敏感性、特异性和准确性。结果:恶性胸腔积液组VEGF、CEA及CYFRA21-1浓度明显高于良性胸腔积液组(P均<0.01),VEGF、CEA及CYFRA21-1联合检测可使鉴别诊断敏感性明显提高,诊断恶性胸腔积液的敏感性为92.3%,特异性为92.9%,准确性为92.5%。结论:胸腔积液中VEGF、CEA及CYFRA21-1测定有助于良恶性胸腔积液的鉴别诊断;恶性胸腔积液中CEA、CYFRA21-1的含量对恶性胸腔积液的组织来源可能有一定的鉴别诊断作用;联合检测胸腔积液中的VEGF、CEA及CYFRA21-1水平,可明显提高诊断恶性腹腔积液的敏感性。 展开更多

关键词 胸腔积液 血管内皮生长因子 癌胚抗原 细胞角蛋白19抗原片段

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乙脑E蛋白与结核杆菌HSP70的融合蛋白对BALB/c小鼠特异性免疫的影响 被引量：1

11

作者 葛菲菲 邱亚峰 +1 位作者 杨耀武 陈溥言 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期441-445,共5页

研究酵母表达的乙脑病毒(JapaneseEncephalitisvirus)E蛋白主要抗原片段与结核杆菌热休克蛋白70 (hsp70 )形成的融合蛋白对小鼠细胞免疫和体液免疫的影响。采用腹膜内注射蛋白的方法免疫小鼠,以直接免疫E蛋白主要抗原片段和以E蛋白主要... 研究酵母表达的乙脑病毒(JapaneseEncephalitisvirus)E蛋白主要抗原片段与结核杆菌热休克蛋白70 (hsp70 )形成的融合蛋白对小鼠细胞免疫和体液免疫的影响。采用腹膜内注射蛋白的方法免疫小鼠,以直接免疫E蛋白主要抗原片段和以E蛋白主要抗原片段和单独表达的hsp70两者均以5 0pmol的量进行混合后的蛋白免疫的小鼠作为对照,用半定量RT PCR检测细胞免疫因子IL 2mRNA的水平,IL 2是细胞介导的免疫反应和巨噬细胞激活中的关键分子,MTT法检测淋巴细胞的增殖情况以及通过ELISA检测抗体水平,从这3个方面来评价融合与未融合蛋白以及等量混合后的免疫效果。结果E蛋白主要抗原片段与结核杆菌hsp70重组后,mIL 2 ,淋巴细胞的增殖以及抗体水平均较重组前明显升高,因此,以乙脑E 展开更多

关键词 乙脑病毒E蛋白主要抗原片段 结核杆菌热休克蛋白70 mIL-2 淋巴细胞的增殖 抗体水平

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乙脑E蛋白主要抗原片段与结核杆菌hsp70在毕赤酵母中的融合表达 被引量：1

12

作者 葛菲菲 邱亚峰 +2 位作者 杨耀武 高小飞 陈溥言 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第12期1081-1085,共5页

目的构建乙脑E蛋白主要抗原片段与结核杆菌热休克蛋白70(Mycobacterium tuberculosisheat shock protein70,Mt.hsp70)基因融合表达载体,并研究其在巴斯德毕赤酵母中的表达情况,为改善发展新的乙脑疫苗打基础。方法以酵母表达载体pPICZ... 目的构建乙脑E蛋白主要抗原片段与结核杆菌热休克蛋白70(Mycobacterium tuberculosisheat shock protein70,Mt.hsp70)基因融合表达载体,并研究其在巴斯德毕赤酵母中的表达情况,为改善发展新的乙脑疫苗打基础。方法以酵母表达载体pPICZα-A为基本单位构建E蛋白基因主要抗原片段与hsp70的融合表达载体,融合基因以酶切位点BamHⅠ连接,用电穿孔法转化酵母X-33,用Zeocin平板筛选重组子,经甲醇诱导表达后,SDS-PAGE和免疫印迹分析表达产物。结果E蛋白基因与hsp70的融合表达载体构建成功,SDS-PAGE显示,其相对分子质量为114kD,与实际大小相符,经凝胶薄层扫描分析,表达量为33mg/L,经Western印迹验证,有良好的抗原性。结论E-hsp70融合蛋白在酵母中的表达为下一步研究hsp70是否能作为E蛋白免疫时的理想佐剂作准备。 展开更多

关键词 乙型脑炎E蛋白主要抗原片段 结核杆菌热休克蛋白70 融合 巴斯德毕赤酵母 抗原性

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携带猪乙型脑炎DNA疫苗减毒沙门菌的构建及其免疫原性 被引量：1

13

作者 李云云 郭万柱 +3 位作者 徐志文 韩国全 林华 漆信桥 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期697-702,共6页

将乙型脑炎病毒E蛋白主要抗原片段基因串联,构建真核表达载体pCI-EAB。将重组质粒pCI-EAB转染Vero细胞,表达产物通过RT-PCR和间接免疫荧光试验可检测出目的基因的转录与表达。质粒pCI-EAB电转化入减毒猪霍乱沙门菌,观察重组菌的安全性... 将乙型脑炎病毒E蛋白主要抗原片段基因串联,构建真核表达载体pCI-EAB。将重组质粒pCI-EAB转染Vero细胞,表达产物通过RT-PCR和间接免疫荧光试验可检测出目的基因的转录与表达。质粒pCI-EAB电转化入减毒猪霍乱沙门菌,观察重组菌的安全性、体内外的稳定性与免疫原性。动物试验表明,重组菌是相对安全和稳定的;重组菌S.C500/pCI-EAB体外培养时,D600值在0.8左右质粒是比较稳定的;以1×108CFU剂量的重组菌S.C500/pCI-EAB口服免疫小鼠,在二免后1周和三免后1周,重组菌抗体水平与S.C500/pCI-neo空载体组差异显著(P<0.01);脾脏淋巴细胞增殖情况显示,重组菌对ConA有显著的反应性,且与对照组差异明显,同时CD3+、CD4+和CD8+T细胞的数量也显著高于对照组(P<0.01)。上述结果初步表明,以减毒沙门菌为载体的猪乙型脑炎DNA疫苗具有良好的安全性、稳定性和免疫原性,为猪乙型脑炎口服活菌疫苗的研制奠定了基础。 展开更多

关键词 猪乙型脑炎病毒 E蛋白主要抗原片段 减毒沙门菌 免疫原性

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SARS病毒E2蛋白保护性抗原片段原核表达载体的构建及表达

14

作者 聂晶 宋承辉 +3 位作者 赵洪礼 张伟建 吴益民 王继群 《沈阳部队医药》 2004年第3期175-176,共2页

为构建SARS病毒E2蛋白保护性抗原片段的原核表达载体,采用人工合成法合成SARS病毒E2蛋白3′端cDNA;用常规分子克隆方法将此cDNA片段克隆入原核表达载体pBV220中,经温度诱导和SDS-PAGE电泳证明外源蛋白表达。结果表明合成的E2蛋白cDNA经... 为构建SARS病毒E2蛋白保护性抗原片段的原核表达载体,采用人工合成法合成SARS病毒E2蛋白3′端cDNA;用常规分子克隆方法将此cDNA片段克隆入原核表达载体pBV220中,经温度诱导和SDS-PAGE电泳证明外源蛋白表达。结果表明合成的E2蛋白cDNA经序列测定,与报道的SARS病毒相应序列一致,内切酶酶切及PCR均得到456bp的cDNA片段,与实验设计一致,证明此cDNA片段已插入pBV220载体中;SDS-PAGE电泳表明有外源蛋白表达。结论:用本文介绍的方法可成功地合成并克隆SARS病毒E2蛋白原核表达载体,此项研究结果为SARS的诊断和预防奠定了基础。 展开更多

关键词 SARS病毒 E2蛋白 保护性抗原片段 原核表达载体 人工合成 分子克隆

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前体mRNA剪接蛋白Tra2α特异抗体的制备和鉴定

15

作者 陈献华 林万敏 +3 位作者 孙凯华 黄嘉 汪凌 徐平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期682-686,共5页

目的 :制备用于检测人胚胎组织Tra2α蛋白的特异抗体。方法 :选择Tra2α中特有的一段编码序列 (第 5 2～ 16 5位核苷酸 ) ,通过克隆至pGEX 3x表达载体形成GST融合基因 ,并以诱导表达和纯化的该融合蛋白为抗原免疫新西兰兔 ,获得了抗Tra... 目的 :制备用于检测人胚胎组织Tra2α蛋白的特异抗体。方法 :选择Tra2α中特有的一段编码序列 (第 5 2～ 16 5位核苷酸 ) ,通过克隆至pGEX 3x表达载体形成GST融合基因 ,并以诱导表达和纯化的该融合蛋白为抗原免疫新西兰兔 ,获得了抗Tra2α的血清。结果 :免疫印迹 (Westernblot)检测结果显示 ,该血清能特异地与人胎脑组织中的Tra2α蛋白结合。免疫组织化学结果显示 ,该血清能用于人胎脑组织中Tra2α蛋白分布的检测。结论 :所制备的抗血清具有很好的特异性 ,可用于人胚胎组织中Tra2α蛋白的检测。 展开更多

关键词 制备 鉴定 Tra2α 前体mRNA剪接蛋白 特异性抗原片段 抗体

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黑素细胞在银屑病发病机制中的作用

16

作者 郑丹 路永红 杜秀君 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期472-474,共3页

T细胞生成的白细胞介素(IL)-17、肿瘤坏死因子(TNF)-α在银屑病发病中起着至关重要的作用,而银屑病皮损、皮损消退后白斑或色素沉着的形成是银屑病的常见表现,这与黑素细胞有着不可分割的联系。黑素细胞衍生的自身抗原——抗原片段样蛋... T细胞生成的白细胞介素(IL)-17、肿瘤坏死因子(TNF)-α在银屑病发病中起着至关重要的作用,而银屑病皮损、皮损消退后白斑或色素沉着的形成是银屑病的常见表现,这与黑素细胞有着不可分割的联系。黑素细胞衍生的自身抗原——抗原片段样蛋白-5(ADAMTSL-5)可激活T细胞产生IL-17,IL-17又可诱导其他炎症因子的产生,最终T细胞、细胞因子、黑素细胞、角质形成细胞之间通过细胞因子相互作用引起炎症反应;另外,IL-17协同TNF-α直接或者通过其他细胞因子增加黑素细胞的数量,下调黑色颗粒生成和色素沉着信号转导通路基因,促进β-防御素3的表达而引起银屑病的炎症。因此,黑素细胞参与了银屑病的发病。 展开更多

关键词 银屑病 黑素细胞 黑素颗粒阳性比例 IL-17 TNF-Α 抗原片段样蛋白-5

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乙脑E蛋白主要抗原片段与hsp70肽连接区融合酵母表达载体的构建

17

作者 葛菲菲 邱亚峰 +1 位作者 杨耀武 陈溥言 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第B04期244-248,共5页

构建乙型脑炎E蛋白主要抗原片段与结核杆菌热休克蛋白70(Mycobacterium tuberculosis hear shock protein70,Mt．hsp70)的肽连接区(Binding domain)基因融合表达载体,利用酵母表达系 统,为下一步研究肽连接区是否能增强乙型脑炎E蛋白主... 构建乙型脑炎E蛋白主要抗原片段与结核杆菌热休克蛋白70(Mycobacterium tuberculosis hear shock protein70,Mt．hsp70)的肽连接区(Binding domain)基因融合表达载体,利用酵母表达系 统,为下一步研究肽连接区是否能增强乙型脑炎E蛋白主要抗原片段的免疫原性作准备。以酵 母表达载体pPICZα-A为基本单位构建,以酶切位点BamHI连接这2个基因,用电穿孔法转化酵 母X-33,Zeocin平板筛选重组子,经甲醇诱导表达后,SDS-PAGE和免疫印迹分析表达产物。E蛋 白主要抗原片段与hsp70肽连接区的融合表达载体构建成功,SDS-PAGE显示,其相对分子质量为 68kDa,与实际大小相符且为分泌表达,表达量约为97mg／L,经Western印迹验证,抗原性较好。将 用同样的酵母表达载体表达的乙脑E蛋白主要抗原片段(另文发表)与上述融合蛋白均以50pmol． 的量分别对6-8周龄的:BALB／c小鼠进行腹膜内注射,3周后进行第二次免疫,从淋巴细胞的增 殖和抗体滴度两个方面进行比较,最后得出E-BD融合蛋白在免疫效果方面比乙脑E蛋白主要抗 原片段效果要好,在试验中肽连接区可以增强乙型脑炎E蛋白主要抗原片段的免疫原性。 展开更多

关键词 乙脑E蛋白主要抗原片段 结核杆菌hsp70肽连接区 巴斯德毕赤酵母 淋巴细胞的增殖

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抗乙型肝炎表面抗原Fab片段联合抗细胞核单抗为载体的肝癌放射免疫治疗实验研究 被引量：10

18

作者 杜阳峰 罗荣城 +4 位作者 李贵平 李爱民 丁雪梅 严晓 黄凯 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期460-462,共3页

目的探讨核素标记人源化抗(乙型肝炎)乙肝表面抗原Fab片段(抗HBsAgFab)联合核素标记抗细胞核单克隆抗体(chTNT)瘤内注射治疗荷人肝癌移植瘤裸鼠的可行性和优越性,为临床应用核素标记多种不同性质的单克隆抗体进行放射免疫治疗肝癌提供... 目的探讨核素标记人源化抗(乙型肝炎)乙肝表面抗原Fab片段(抗HBsAgFab)联合核素标记抗细胞核单克隆抗体(chTNT)瘤内注射治疗荷人肝癌移植瘤裸鼠的可行性和优越性,为临床应用核素标记多种不同性质的单克隆抗体进行放射免疫治疗肝癌提供实验依据。方法荷瘤裸鼠分为五组,分别瘤内注射131I-抗HBsAgFab、131I-chTNT、131I-抗HBsAgFab联合131I-chTNT、131I-无关抗体(131I-IgG)及PBS。治疗后行SPECT显像观察标记抗体在肿瘤内的浓聚,并测量肿瘤大小变化,计算肿瘤抑制率。结果研究发现2种标记抗体联合应用组的肿瘤抑制率为73.09%,明显高于131I-抗HBsAgFab组的47.8%和131I-chTNT组的54.26%。联合应用组标记抗体在肿瘤组织/非肿瘤组织内的放射活度比值(T/NT值)大于单独应用组。结论131I-抗HBsAgFab联合131I-chTNT瘤内注射放射免疫治疗可增加标记抗体在肿瘤组织内的浓聚,并能提高放射免疫治疗效果。 展开更多

关键词 放射免疫治疗 抗乙肝表面抗原Fab片段 抗细胞核抗体 单克隆抗体 裸鼠

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HIV-1 GP120主要抗原性片段的制备及其在HIV诊断中的应用 被引量：6

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作者 郝彦玲 张梦华 +6 位作者 黄云坚 袁国亮 陈佩 朱旭辉 傅晶晶 刘勇 邵一鸣 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期64-67,共4页

目的研制HIV中国流行株RL42GP120主要抗原性片段,以便进一步开发HIV抗体检测试剂。方法克隆RL42毒株GP120蛋白C-端250个氨基酸的编码序列,克隆入大肠杆菌表达载体pBV220进行表达。通过包涵体处理和离子交换层析纯化目的蛋白。将纯化后... 目的研制HIV中国流行株RL42GP120主要抗原性片段,以便进一步开发HIV抗体检测试剂。方法克隆RL42毒株GP120蛋白C-端250个氨基酸的编码序列,克隆入大肠杆菌表达载体pBV220进行表达。通过包涵体处理和离子交换层析纯化目的蛋白。将纯化后的蛋白用狭缝电转技术转印硝酸纤维素膜,利用HIV参考品血清检测其灵敏度和特异性。结果目的蛋白的表达量占菌体总蛋白的10%左右。纯化后其纯度高于95%,HIV参考品血清检测显示出良好的灵敏度和特异性,检测8份阳性临床标本无一漏检,而7份阴性临床标本无交叉反应。结论已研制出具有良好灵敏度和特异性的HIV-1GP120主要抗原性片段。为开发HIV抗体检测试剂创造了条件。 展开更多

关键词 HIV-1 GP120 主要抗原性片段 诊断

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PRV闽A株gE基因抗原编码区片段在昆虫细胞中的表达研究 被引量：3

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作者 敖敬群 王瑾雯 +2 位作者 陈新华 王珣章 龙綮新 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期76-79,共4页

伪狂犬病病毒(PRV)糖蛋白E是一种在伪狂犬病的根除计划中具有重要作用的糖蛋白。将伪狂犬病病毒闽A株gE基因抗原编码区片段克隆到杆状病毒Bac＿to＿Bac系统表达载体pFastBacHTa中,获得的重组表达载体pFastBacHTa＿FS转化大肠杆菌DH10BA... 伪狂犬病病毒(PRV)糖蛋白E是一种在伪狂犬病的根除计划中具有重要作用的糖蛋白。将伪狂犬病病毒闽A株gE基因抗原编码区片段克隆到杆状病毒Bac＿to＿Bac系统表达载体pFastBacHTa中,获得的重组表达载体pFastBacHTa＿FS转化大肠杆菌DH10BAC感受态细胞后,得到的重组BacmidDNA在脂质体介导下转染粉蚊夜蛾Hi5细胞,通过细胞内同源重组,获得了含目的片段的重组病毒。此重组病毒感染Hi5细胞后72h,细胞总蛋白的SDS＿PAGE与Western＿Blot结果表明,gE基因抗原编码区片段在Hi5细胞中得到了正确表达,表达产物约35000,占细胞总蛋白的9 31%。溶解性分析显示该片段在Hi5细胞中为不可溶性表达。 展开更多

关键词 伪狂犬病病毒 gE基因抗原编码区片段 杆状病毒 Bac-to-Bac表达系统 基因表达

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