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弓形虫多表位基因的构建及其在大肠杆菌系统中的表达鉴定 被引量:30
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作者 杨培梁 陈晓光 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第2期37-40,16,共5页
目的 构建弓形虫和破伤风毒素多个表位的编码基因 ,将其在大肠杆菌系统进行表达 ,评价重组抗原的特异反应性。方法 从弓形虫保护性抗原及通用免疫增强佐剂破伤风毒素中选取含有T和 (或 )B细胞表位的抗原片段 ,通过软件分析在各片段之... 目的 构建弓形虫和破伤风毒素多个表位的编码基因 ,将其在大肠杆菌系统进行表达 ,评价重组抗原的特异反应性。方法 从弓形虫保护性抗原及通用免疫增强佐剂破伤风毒素中选取含有T和 (或 )B细胞表位的抗原片段 ,通过软件分析在各片段之间插入适当数目、起间隔作用的氨基酸 ,以保持个片段的空间构象独立性 ,从而确定氨基酸顺序。根据氨基酸序列选取适当的密码子构成弓形虫多表位基因。将该基因合成并鉴定后 ,亚克隆入原核表达载体 ,在大肠杆菌中表达并分析表达产物的表达形式和抗原活性。结果 成功构建了长度为 36 0bp的弓形虫多表位基因。该基因在原核表达系统中经诱导 ,得到了 14 4kDa的包涵体形式的表达产物。免疫印迹实验表明该产物具有强特异性抗原活性。 展开更多
关键词 弓形虫 多表位基因 大肠杆菌 蛋白表达 抗原活性
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大肠埃希氏菌表达FMDV3AB非结构蛋白的纯化复性与活性检测 被引量:11
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作者 曹轶梅 卢曾军 +1 位作者 刘在新 谢庆阁 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2003年第8期22-25,共4页
采用超声波裂解细菌 ,高浓度尿素裂解包涵体和金属螯合亲合层析的方法对大肠埃希氏菌中表达的FMDV 3AB非结构蛋白进行纯化 ,经SDS PAGE分析 ,3AB融合蛋白纯度达 90 %以上。采用稀释法和氧化型、还原型谷胱甘肽系统相结合方法对融合蛋白... 采用超声波裂解细菌 ,高浓度尿素裂解包涵体和金属螯合亲合层析的方法对大肠埃希氏菌中表达的FMDV 3AB非结构蛋白进行纯化 ,经SDS PAGE分析 ,3AB融合蛋白纯度达 90 %以上。采用稀释法和氧化型、还原型谷胱甘肽系统相结合方法对融合蛋白进行复性 ,通过Westernblotting分析 ,表明复性后的 3AB融合蛋白能与抗FMDV抗体发生特异性结合。ELISA检测表明 ,复性后的 3AB融合蛋白有很好的抗原活性。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 3AB非结构蛋白 纯化 复性 抗原活性 大肠埃希氏菌表达
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酶解大豆分离蛋白的抗原活性变化及其抗原表位分析 被引量:8
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作者 王章存 袁路阳 +3 位作者 张露 胡金强 安广杰 赵学伟 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第10期64-69,共6页
研究酶解过程中大豆蛋白分子成分和抗原性变化规律及酶解物中是否存在抗原表位序列。用碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白后,首先分别用电泳和酶联免疫法分析蛋白质分子组分和抗原活性变化,结果发现,酶解过程中新生成23 ku和21 ku抗酶解肽链... 研究酶解过程中大豆蛋白分子成分和抗原性变化规律及酶解物中是否存在抗原表位序列。用碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白后,首先分别用电泳和酶联免疫法分析蛋白质分子组分和抗原活性变化,结果发现,酶解过程中新生成23 ku和21 ku抗酶解肽链直到酶解120min时仍未消失,同时酶解物中剩余28%抗原活性。进一步通过胰蛋白酶对这两个肽链胶内酶解并用基质辅助激光解析串联飞行时间质谱仪分析后,将所得肽段氨基酸序列分别与抗原数据库中抗原表位序列和大豆分离蛋白氨基酸序列进行匹配解析,结果发现,在21 ku组分中含有两个完整的序列抗原表位(LQRFNQRSPQLQNLR和SEDKPFNLRSRDPIYSNKLGKFFEITPEKN),且均来自β-伴大豆球蛋白中的α-亚基,21 ku组分抗原剩余率为15.7%;在23 ku肽链中含有抗原表位的部分氨基酸序列,但未发现含有完整的抗原表位序列,23 ku组分抗原剩余率为2.1%,该组分中是否含有新的未知抗原表位或是否与糖链有关尚待深入研究。上述研究结果揭示了大豆蛋白酶解物中仍残留抗原性的部分原因。 展开更多
关键词 大豆分离蛋白 酶解 抗原活性 抗原表位
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梧桐花粉主要变应原的分离纯化 被引量:3
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作者 刘叶青 崔玉敏 +1 位作者 张秀萍 陈国豪 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期357-360,共4页
以离子交换和凝胶过滤层析对梧桐花粉变应原进行分离和纯化。采用生物素 -链霉亲和素酶联免疫吸附分析法 ( BSA- ELISA)测定其抗原活性 ,得到两个具高活性的单一变应原组分 PT13和 PT53 。经 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得它们的分子质量... 以离子交换和凝胶过滤层析对梧桐花粉变应原进行分离和纯化。采用生物素 -链霉亲和素酶联免疫吸附分析法 ( BSA- ELISA)测定其抗原活性 ,得到两个具高活性的单一变应原组分 PT13和 PT53 。经 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得它们的分子质量分别为 2 0 ku和 1 展开更多
关键词 梧桐花粉 变应原 离子交换层析 凝胶过滤层析 分离 纯化 抗原活性 分子量
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截短猪流行性腹泻病毒N蛋白的可溶性表达及其抗原活性 被引量:6
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作者 朱卫霞 袁万哲 +3 位作者 李丽敏 宋勤叶 孙泰然 李潭清 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1561-1566,共6页
应用原核表达系统表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白,并探讨其抗原活性。通过RT-PCR扩增截短的PEDV N蛋白(truncated N protein,tN蛋白)基因;构建包含tN蛋白基因的原核表达质粒(pET32a-PEDV-tN),将质粒转化E.coli BL21感受态细胞,诱导表... 应用原核表达系统表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白,并探讨其抗原活性。通过RT-PCR扩增截短的PEDV N蛋白(truncated N protein,tN蛋白)基因;构建包含tN蛋白基因的原核表达质粒(pET32a-PEDV-tN),将质粒转化E.coli BL21感受态细胞,诱导表达目的蛋白;通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定重组tN蛋白的表达及其免疫反应原性;用提纯的tN蛋白皮下接种BLAB/c小鼠,通过ELISA和免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)检测重组tN蛋白的免疫原性。结果应用RT-PCR扩增到了预期705bp的tN蛋白基因;在E.coli BL21内,携带tN蛋白基因的重组质粒能够以可溶性表达形式诱导表达重组tN蛋白;该蛋白在体外可以与猪抗PEDV抗体特异性结合,能够诱导小鼠产生特异性抗体。本研究应用原核表达系统实现了截短猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白的可溶性表达,该蛋白具有良好的完全抗原活性。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 N蛋白 可溶性原核表达 抗原活性
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介绍一种骨髓活检组织脱钙方法
6
作者 彭先稳 缐霂 +1 位作者 班宁溥 孙琦 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期406-409,共4页
骨髓活检是血液病理诊断的重要手段之一,对于多种良、恶性淋巴造血系统疾病均具有决定性的诊断意义,其诊断价值包括形态学观察,以及免疫组化、遗传学和分子生物学等辅助检测。由于骨髓活检组织本身的特殊性,脱钙是前期处理过程中必不可... 骨髓活检是血液病理诊断的重要手段之一,对于多种良、恶性淋巴造血系统疾病均具有决定性的诊断意义,其诊断价值包括形态学观察,以及免疫组化、遗传学和分子生物学等辅助检测。由于骨髓活检组织本身的特殊性,脱钙是前期处理过程中必不可少的环节,其目的是将骨组织中钙盐去掉,保留完整的胶原纤维成分,以利于组织切片以及避免染色时掉片。如果骨髓活检脱钙不充分,则难以制片,但如果脱钙过度,又会严重破坏组织抗原活性,因此,一种脱钙效率高且抗原破坏小的脱钙方法对于临床病理骨髓活检十分重要。本文介绍一种高效且抗原破坏较小的骨髓活检组织脱钙方法:12%甲酸-8%盐酸脱钙液室温摇床脱钙,供广大同仁参考和指正。 展开更多
关键词 骨髓活检 脱钙方法 脱钙液 抗原活性 辅助检测 病理诊断 组织切片 处理过程
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猪伪狂犬病病毒gE蛋白的真核表达及其活性鉴定
7
作者 王清龙 王瑞宁 +6 位作者 王勋 李青梅 李鸽 张真真 杨苏珍 郭军庆 张改平 《河南农业科学》 北大核心 2023年第3期127-134,共8页
为制备猪伪狂犬病病毒(PRV)gE重组蛋白并评估其抗原活性,将优化的PRV gE基因胞外区插入真核表达载体pCMV并在其C端加入Hexa-His标签,构建真核表达质粒pCMV-gE;将重组质粒转染HEK293F细胞,Dot blot鉴定转染细胞中gE重组蛋白的分泌表达;... 为制备猪伪狂犬病病毒(PRV)gE重组蛋白并评估其抗原活性,将优化的PRV gE基因胞外区插入真核表达载体pCMV并在其C端加入Hexa-His标签,构建真核表达质粒pCMV-gE;将重组质粒转染HEK293F细胞,Dot blot鉴定转染细胞中gE重组蛋白的分泌表达;利用镍亲和层析和凝胶过滤层析从转染细胞培养上清中纯化gE表达蛋白;以SDS-PAGE和Western blot鉴定gE重组蛋白,利用PRV阳性血清以ELISA分析gE重组蛋白的抗原活性,通过去糖基化酶PNGase F鉴定其糖基化修饰及其对抗原活性的影响。Dot blot结果显示,gE重组蛋白通过自身信号肽实现在细胞培养上清的分泌表达,其表达量在转染96 h达到峰值。SDS-PAGE和Western blot结果显示,从细胞培养上清中纯化获得gE重组蛋白纯度约为90%,经去糖基化酶PNGase F处理的gE重组蛋白分子质量显著降低。间接ELISA结果显示,gE重组蛋白检测PRV阳性血清的抗体效价为1∶12800;PRV阳性血清对gE蛋白的检出限为31.25 ng/mL,其抗原活性是原核表达的4倍。对临床血清的检测结果显示,基于gE重组蛋白的ELISA与IDEXX抗体检测试剂盒的符合率为96.5%。综上,在真核细胞中分泌表达了具有高表达量、高纯度、高活性和糖基化修饰的gE重组蛋白,在PRV感染鉴别检测中具有良好的应用潜力。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 gE蛋白 分泌表达 糖基化修饰 抗原活性
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三种小鼠在体灌注方法效果的比较 被引量:4
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作者 黄小雨 刘亚萍 +2 位作者 余浩 董红燕 董富兴 《解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第6期753-754,F0003,共3页
在进行病理学实验研究中,一般动物处死前需对其进行灌注固定处理。目的就是快速、均匀地保存标本,避免组织细胞自溶破坏,最大限度地保存细胞及组织的形态结构和抗原活性。良好的灌注固定不仅能很好地保存组织结构,还能有效降低切片... 在进行病理学实验研究中,一般动物处死前需对其进行灌注固定处理。目的就是快速、均匀地保存标本,避免组织细胞自溶破坏,最大限度地保存细胞及组织的形态结构和抗原活性。良好的灌注固定不仅能很好地保存组织结构,还能有效降低切片掉片率。目前,科研实验中使用的灌注器具有多种,对初学者来说比较盲目;再者,使用不同的灌注器械对切片及染色是否有区别,目前未见相关报道。为此,笔者采用了3种实验室常用的灌注器具,比较了3种灌注方式的效果,现介绍如下。 展开更多
关键词 灌注方法 在体 小鼠 组织细胞 实验研究 固定处理 抗原活性 形态结构
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不同酶解方式对豆粕大豆蛋白组分和抗原活性的影响 被引量:3
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作者 王章存 贺志铮 +4 位作者 章银良 安广杰 张培旗 卫梦雅 李秀芳 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2022年第4期17-21,共5页
以低温脱脂豆粕提取的大豆蛋白为原料,分别采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和双酶联合方法水解大豆蛋白,分别采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳和竞争法酶联免疫吸附试验分析水解过程中蛋白质组分和抗原活性的变化。结果表明:碱性蛋白... 以低温脱脂豆粕提取的大豆蛋白为原料,分别采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和双酶联合方法水解大豆蛋白,分别采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳和竞争法酶联免疫吸附试验分析水解过程中蛋白质组分和抗原活性的变化。结果表明:碱性蛋白酶水解30 min即可基本去除大豆蛋白7S组分中的α-亚基和α'-亚基,木瓜蛋白酶水解10 min即可水解所有的亚基,但新产生的多条分子量小于30 kDa的谱带表现出较强的抗酶解特性;双酶联合水解既可消除碱性蛋白酶不能水解的亚基,也不会使木瓜蛋白酶水解生成新肽段。采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶及双酶联合水解120 min后,大豆蛋白7S组分的抗原活性分别下降为原蛋白的64.25%、48.79%、28.57%,大豆蛋白11S组分的抗原活性分别下降为原蛋白的78.43%、62.35%、33.93%。上述结果表明,与单酶水解相比,两种酶联合水解具有明显的加成效果。 展开更多
关键词 大豆蛋白 酶解方式 碱性蛋白酶 木瓜蛋白酶 蛋白质组分 抗原活性
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基于响应面分析的高抗原活性鸭疫里默氏杆菌疫苗培养基的研制及其效果评价
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作者 牛得权 万强 +8 位作者 苗森 刘翔 张阳阳 蒋富凤 曲晓莹 张菊梅 蔡芷荷 陈博 吴清平 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3526-3537,共12页
【背景】鸭疫里默氏杆菌广泛存在于养殖场,引起雏鸭发生传染性浆膜炎,严重危害养鸭业的发展。【目的】提高鸭疫里默氏杆菌发酵培养水平和抗原活性,为鸭疫里默氏杆菌灭活疫苗的研制提供技术指引。【方法】利用单因素及响应面的试验设计方... 【背景】鸭疫里默氏杆菌广泛存在于养殖场,引起雏鸭发生传染性浆膜炎,严重危害养鸭业的发展。【目的】提高鸭疫里默氏杆菌发酵培养水平和抗原活性,为鸭疫里默氏杆菌灭活疫苗的研制提供技术指引。【方法】利用单因素及响应面的试验设计方法,针对鸭疫里默氏杆菌进行疫苗培养基的研制,并探究不同发酵时间点该菌的抗原活性,选择抗原活性最高点时制备灭活疫苗,通过动物免疫保护试验评价疫苗免疫效果。【结果】使用研制的疫苗培养基发酵培养鸭疫里默氏杆菌,其活菌数能够达到4.68×10^(10) CFU/mL,较市面上该菌专用的培养基提高2.29倍。该菌发酵12 h后抗原活性达到最高,在此时制备的灭活疫苗诱导小鼠产生的抗体水平显著高于商品化灭活疫苗,攻毒保护率达到了100%。【结论】本研究研制的培养基具有优异的增菌效果,可作为生产鸭疫里默氏杆菌灭活疫苗抗原的发酵培养基,疫苗生产过程中可选择菌株抗原活性达到最高时收集菌体。 展开更多
关键词 鸭疫里默氏杆菌 疫苗培养基 抗原活性 响应面
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大豆发芽过程中抗原蛋白降解及营养特性变化 被引量:4
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作者 安广杰 靳颖 +4 位作者 张培旗 胡金强 赵学伟 刘洋 王章存 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第8期42-47,共6页
研究大豆发芽过程中抗原蛋白降解、抗原活性和营养成分的变化规律。结果表明,发芽期间,大豆子叶组织结构变得疏松;主要抗原蛋白β-伴球蛋白的α′-和α-亚基降解较快,而β-亚基降解缓慢。大豆11S球蛋白的酸性链降解快,而碱性肽链降解慢... 研究大豆发芽过程中抗原蛋白降解、抗原活性和营养成分的变化规律。结果表明,发芽期间,大豆子叶组织结构变得疏松;主要抗原蛋白β-伴球蛋白的α′-和α-亚基降解较快,而β-亚基降解缓慢。大豆11S球蛋白的酸性链降解快,而碱性肽链降解慢。ELISA分析表明,在发芽的前4 d中,β-伴球蛋白和11S球蛋白的抗原活性剩余率分别为58%和76%,延长发芽时间抗原活性降低较小。整个发芽期间,必需氨基酸和总氨基酸含量变化不大,但天冬氨酸含量显著增加,谷氨酸的含量明显降低。抗坏血酸含量在发芽第3 d时达到最大值,延长发芽时间,其含量降低。综上可知,在发芽4 d时大豆的食用安全性和营养价值较为理想。 展开更多
关键词 大豆发芽 蛋白质降解 抗原活性 营养特性
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放射对流免疫电泳自显影诊断血吸虫病的研究 被引量:1
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作者 金慰鄂 周梓林 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 1989年第2期46-40,共2页
用放射对流电泳自显影法(以下简称本法)检查血吸虫抗体以诊断血吸虫病,具有敏感、特异的特点,可以用作早期诊断,且观察结果明确,记录可保存,抗原用量少。 一、基本原理 在免疫电泳基础上,用放射性同位素<sup>125</sup>碘... 用放射对流电泳自显影法(以下简称本法)检查血吸虫抗体以诊断血吸虫病,具有敏感、特异的特点,可以用作早期诊断,且观察结果明确,记录可保存,抗原用量少。 一、基本原理 在免疫电泳基础上,用放射性同位素<sup>125</sup>碘或<sup>131</sup>碘标记抗原,结合自显影技术,建立放射对流免疫电泳自显影方法。放射标记抗原和相应的抗体在适合的比例下相遇时,呈现沉淀线。但在抗原—抗体复合物水平很低的样品中,肉眼不能看到的沉淀线。 展开更多
关键词 对流免疫电泳 血吸虫抗体 对流电泳 抗原活性 自显影 间接血凝试验 虫卵抗原 纯化抗原 早期诊断 循环抗原
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鹅源副粘病毒SF02株的生物学特性研究 被引量:2
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作者 胡永强 单松华 +1 位作者 何水林 姚龙涛 《上海农业学报》 CSCD 2004年第2期109-113,共5页
研究鹅源副粘病毒SF0 2株的生物学特性 ,结果表明 :毒株的血凝素热稳定性指数为 3min ,血凝为快速解脱型 ;能凝集鸡、鸭、鼠、鸽、鹅、人 (O型和A型 )的红细胞 ,对绵羊和山羊的红细胞略凝 ,不凝集牛和猪的红细胞 ;病毒SF0 2株对胰蛋白... 研究鹅源副粘病毒SF0 2株的生物学特性 ,结果表明 :毒株的血凝素热稳定性指数为 3min ,血凝为快速解脱型 ;能凝集鸡、鸭、鼠、鸽、鹅、人 (O型和A型 )的红细胞 ,对绵羊和山羊的红细胞略凝 ,不凝集牛和猪的红细胞 ;病毒SF0 2株对胰蛋白酶、氯仿、乙醚、pH3.0敏感 ,二价镁离子对病毒有保护作用 ;0 .0 1%的甲醛溶液既能灭活病毒 ,又能保持较好的抗原活性 ;鸡胚平均致死时间 (MDT)为 5 4h ,1日龄雏鸡脑内致病指数 (ICPI)为 1.88;实验感染草鹅、白皇鸽、七彩山鸡、鹧鸪、番鸭等 10 0 %发病与死亡 ,对杂交黄鸡、鹌鹑也有 5 0 %以上的致死率 ,对绿头野鸭则无死亡 ;这些结果为全面了解病毒的特性提供了一些科学依据。 展开更多
关键词 鹅源副粘病毒 SF02株 生物学特性 血凝素热稳定性指数 抗原活性
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血浆凝血因子ⅩⅢ抗原及活性的测定 被引量:3
14
作者 段宝华 王鸿利 +3 位作者 王学锋 胡翊群 谢爽 王振义 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期437-439,共3页
目的 建立血浆F抗原及活性定量测定的方法。方法 对 4 6例正常人及两个遗传性F缺陷症家系部分成员采用双抗体夹心法检测F抗原 ,生物素化戊胺测定F活性 ,以F标准品建立标准曲线。结果  3例患者FA :Ag均为 0 % ,FB :Ag... 目的 建立血浆F抗原及活性定量测定的方法。方法 对 4 6例正常人及两个遗传性F缺陷症家系部分成员采用双抗体夹心法检测F抗原 ,生物素化戊胺测定F活性 ,以F标准品建立标准曲线。结果  3例患者FA :Ag均为 0 % ,FB :Ag分别为正常人的 78.4 6 %、6 6 .4 3%、5 7.2 9%。 4 6例正常人血浆F活性F∶C平均值为 86 .34%± 17.98% ,范围在5 6 .5 %~ 16 5 .17%之间 ,3例患者为 0 % ,家系中杂合子范围为 2 9.6 0 %~ 10 4 .86 %。结论 双抗体夹心法和生物素标记法均为简捷、灵敏而且特异的F测定方法。 展开更多
关键词 凝血因子Ⅷ 抗原活性 遗传性FⅧ缺陷症 双抗体夹心法 生物素标记法
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Ca2+离子对榛子过敏原Cor h 1二级结构和抗原活性影响研究 被引量:3
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作者 吴海强 王晓娟 +2 位作者 邬玉兰 张昉 刘志刚 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期24-27,共4页
目的:研究Ca2+离子对非CaBPs蛋白类过敏原二级结构和抗原活性的影响。方法:以重组榛子主要过敏原Cor h 1为研究对象,用圆二色谱(CD)研究了系列浓度的Ca2+和EDTA各自存在情况下,不同蛋白浓度溶液中rCor h 1二级结构的变化及规律,并以榛... 目的:研究Ca2+离子对非CaBPs蛋白类过敏原二级结构和抗原活性的影响。方法:以重组榛子主要过敏原Cor h 1为研究对象,用圆二色谱(CD)研究了系列浓度的Ca2+和EDTA各自存在情况下,不同蛋白浓度溶液中rCor h 1二级结构的变化及规律,并以榛子过敏患者血清为一抗,用ELISA实验分析了Ca2+和EDTA对rCor h 1抗原活性的影响。结果:在高浓度rCor h 1溶液中Ca2+的加入可以引起椭圆率的增加,而在低浓度的rCor h 1溶液中则引起椭圆率的降低;EDTA在高浓度和低浓度的rCor h 1溶液中均能引起rCor h 1二级结构相对含量的降低;椭圆率增加(或降低)的幅度与Ca2+、EDTA终浓度成正比。ELISA实验表明Ca2+和EDTA都能显著降低rCor h 1的抗原活性。结论:Ca2+离子可以显著影响rCor h 1的二级结构,降低其抗原活性,为非CaBPs蛋白类低致敏原的研究奠定了较好的前期研究基础。 展开更多
关键词 榛子 rCor H 1 Ca2+结合特性 圆二色谱 ELISA 抗原活性
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单克隆抗体亲合层析法快速提纯乙肝表面抗原
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作者 陶伟英 王开利 《中国公共卫生管理》 2005年第3期232-233,共2页
用乙型肝炎病毒单克隆抗体(抗-HBsMcAb)与活化琼脂糖(MinileakLow)结合制备亲合层析柱,用于提纯乙型肝炎病毒的表面抗原(HBsAg)。对纯化前后的表面抗原活性用RPHA法进行了检测,提纯后的效价比提纯前提高了20多倍。用免疫电镜(IEM)对提... 用乙型肝炎病毒单克隆抗体(抗-HBsMcAb)与活化琼脂糖(MinileakLow)结合制备亲合层析柱,用于提纯乙型肝炎病毒的表面抗原(HBsAg)。对纯化前后的表面抗原活性用RPHA法进行了检测,提纯后的效价比提纯前提高了20多倍。用免疫电镜(IEM)对提纯物观察可见满视野22mm的小园颗粒。经SDS-PAGE电泳得出一条较清楚的带。 展开更多
关键词 单克隆抗体 乙肝表面抗原 亲合层析法 提纯 乙型肝炎病毒 PAGE电泳 RPHA法 抗原活性 免疫电镜 琼脂糖 层析柱 效价比 SDS
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ELISA抗原标准化初步研究—硫酸铵沉淀血吸虫卵抗原的化学与免疫学特性
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作者 詹丽君 杨旭明 +2 位作者 郑志国 楼涤 朱冠 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 1991年第3期154-157,共4页
本文初步分析了硫酸铵沉淀血吸虫卵抗原(AE)的一些化学及免疫学特性.结果表明,AE抗原含糖量较高,对热处理稳定,SDS—PAGE分析,分子量分布范围在12~76KD,其中14.5、26.55KD区带着色较深,免疫活性强于SEA,以pH9.6的碳酸盐缓冲液作为抗原... 本文初步分析了硫酸铵沉淀血吸虫卵抗原(AE)的一些化学及免疫学特性.结果表明,AE抗原含糖量较高,对热处理稳定,SDS—PAGE分析,分子量分布范围在12~76KD,其中14.5、26.55KD区带着色较深,免疫活性强于SEA,以pH9.6的碳酸盐缓冲液作为抗原稀释液包被反应板,检测效果最佳,包被抗原的反应板在4℃条件下至少能放置半年,适合于现场应用。 展开更多
关键词 免疫学特性 ELISA抗原 血吸虫卵 抗原活性 包被抗原 反应板 硫酸铵沉淀 碳酸盐缓冲液 免疫活性 可溶性虫卵抗原
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RhD和HBsAg双表达载体的构建与表达研究 被引量:1
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作者 许纪玲 蔡杰 +2 位作者 陆玉婷 蔡旭兵 杨永林 《中国实验诊断学》 2016年第11期1836-1840,共5页
人类Rh血型系统是临床上最重要的血型系统之一,是人类红细胞血型系统最具有多态性的血型系统。到目前为止已发现了至少49种不同抗原,其中与临床相关的主要抗原为D、C、E、c和e等5种。Rh血型抗原定位于人类1号染色体短臂1p34.3-lp36.1,... 人类Rh血型系统是临床上最重要的血型系统之一,是人类红细胞血型系统最具有多态性的血型系统。到目前为止已发现了至少49种不同抗原,其中与临床相关的主要抗原为D、C、E、c和e等5种。Rh血型抗原定位于人类1号染色体短臂1p34.3-lp36.1,分别编码2个非糖基化的疏水性跨膜蛋白质RhD和RhCE。 展开更多
关键词 血型系统 红细胞血型 血型抗原 表达载体 基因同源性 跨膜蛋白质 RHD 免疫原性 抗原抗体 抗原活性
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日本血吸虫干卵抗原的标准鉴定血清客观指标研究 被引量:1
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作者 马维聚 王之怀 +8 位作者 胡万富 许强 谢静芬 管其洲 尹小梅 郝晓君 李同山 梅继德 徐伏牛 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 1989年第4期25-27,14,共4页
本研究通过对感染日本血吸虫的兔血清实验结果分析,证实了影响其COPT反应活性的主要因素是血清γ-球蛋白的含量水平。首次提出以感染兔血清作为COPT抗原活性检测的标准血清必须达到的客观指标以及相应的日本血吸虫干卵抗原的质量标准。... 本研究通过对感染日本血吸虫的兔血清实验结果分析,证实了影响其COPT反应活性的主要因素是血清γ-球蛋白的含量水平。首次提出以感染兔血清作为COPT抗原活性检测的标准血清必须达到的客观指标以及相应的日本血吸虫干卵抗原的质量标准。实验结果表明,γ-球蛋白含量在20~30mg/ml的感染兔血清作为干卵抗原的标准鉴定血清具有测定干卵活性客观、稳定的特点。用以检测时,环沉率在30%以上的日本血吸虫干卵抗原,具有良好的敏感性(84.0~94.4%)和特异性(96.0~94.0%),适宜于作为COPT诊断抗原。 展开更多
关键词 干卵抗原 日本血吸虫 诊断抗原 γ-球蛋白 实验结果分析 环卵沉淀试验 血吸虫病人 IgG 抗原活性 寄生虫学教研室
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牛白血病病毒结构蛋白及抗原活性分析 被引量:2
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作者 吴保成 张春生 +2 位作者 张永久 刘瑞凝 谢占武 《中国兽医科技》 CSCD 1992年第6期3-4,共2页
对从FLK/BLV带毒细胞系培养上清提纯的病毒粒子经SDS-PAGE分析,发现主要有11种蛋白组分,其分子量分别为12kd、15kd、24kd、28kd、30kd、45kd、52kd、62kd、70kd、83kd、92kd。其中30kd、52kd、62kd、70kd为糖蛋白;Western Bloting实验表... 对从FLK/BLV带毒细胞系培养上清提纯的病毒粒子经SDS-PAGE分析,发现主要有11种蛋白组分,其分子量分别为12kd、15kd、24kd、28kd、30kd、45kd、52kd、62kd、70kd、83kd、92kd。其中30kd、52kd、62kd、70kd为糖蛋白;Western Bloting实验表明,BLV主要有8种抗原活性组分,分别是P_(15)、P_(24)、P_(28)、gP_(30)、gP_(52)、gP_(62)、gP_(83)和gP_(92)。 展开更多
关键词 白血病 病毒 结构蛋白 抗原活性
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