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四物汤对环磷酰胺和乙酰苯肼致血虚证模型小鼠骨髓细胞凋亡的影响 被引量：5
1
作者 冯伟科 刘俊志 袁红燕 《山东中医杂志》 2020年第4期386-389,共4页
目的:探讨四物汤对环磷酰胺和乙酰苯肼致血虚证模型小鼠骨髓细胞凋亡的影响及机制。方法:实验动物随机分为正常对照组、模型对照组、四物汤组和阳性药对照组。除正常对照组外,其余三组小鼠分别于给药后第2天、第5天皮下注射乙酰苯肼每日... 目的:探讨四物汤对环磷酰胺和乙酰苯肼致血虚证模型小鼠骨髓细胞凋亡的影响及机制。方法:实验动物随机分为正常对照组、模型对照组、四物汤组和阳性药对照组。除正常对照组外,其余三组小鼠分别于给药后第2天、第5天皮下注射乙酰苯肼每日20 mg/kg、40 mg/kg,从第5天起,每日腹腔注射环磷酰胺40 mg/kg,连续4 d,制备血虚证小鼠模型。利用血细胞计数仪、流式细胞术和蛋白免疫印迹技术分别检测各组小鼠外周血象、骨髓细胞凋亡率及骨髓细胞Bcl-2蛋白表达。结果:与模型对照组相比,四物汤组血红细胞数升高非常显著(P<0.01),白细胞数和血红蛋白含量均无显著变化(P> 0.05);四物汤组小鼠骨髓细胞凋亡率下降非常显著(P<0.01),Bcl-2蛋白表达量显著增加(P<0.05)。结论:四物汤能够促进小鼠骨髓细胞中Bcl-2蛋白的表达,抑制骨髓细胞凋亡,提高外周血象,此可能是其发挥补血作用的机制之一。 展开更多
关键词 四物汤 环磷酰胺 乙酰苯肼 血虚证 细胞凋亡 抗凋亡蛋白bcl-2
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Bax BH3结构域的多肽链(H2-H3)通过抑制Bcl-2的成孔和中和Bcl-2的抗Bax作用而引起细胞凋亡 被引量：4
2
作者 彭军 Suzanne M.Lapolla +1 位作者 张志 林家陵 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第4期829-835,共7页
成孔和蛋白间的相互作用在Bcl-2家族对凋亡的调节过程中起着重要的作用。促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2通过在线粒体外膜上形成不同的孔来调节膜的通透性。Bcl-2的过度表达与许多肿瘤的发生密切相关,因此研制能抑制Bcl-2功能的小分子... 成孔和蛋白间的相互作用在Bcl-2家族对凋亡的调节过程中起着重要的作用。促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2通过在线粒体外膜上形成不同的孔来调节膜的通透性。Bcl-2的过度表达与许多肿瘤的发生密切相关,因此研制能抑制Bcl-2功能的小分子化合物一直是抗肿瘤研究领域的一个重点。由于Bax可以通过其BH3结构域和Bcl-2结合,继而抑制Bcl-2的抗凋亡功能;所以来源于Bax BH3结构域的多肽链(H2-H3)被认为是Bcl-2的拮抗剂。我们最近发现,H2-H3能够激活Bax以及抑制Bcl-2的抗Bax作用,从而诱导细胞色素C的释放和细胞凋亡;但其中的分子机制尚未完全阐明。本文通过对Bcl-2和Bax在脂质体膜上成孔过程的研究,发现:H2-H3可以抑制Bcl-2的成孔;并且可以中和Bcl-2对Bax成孔的抑制作用。造成H2-H3促凋亡功能丧失的点突变同样也会造成H2-H3对Bcl-2的抑制作用。因此本文的研究结果提示:H2-H3的促凋亡功能与其抑制Bcl-2的成孔和中和Bcl-2的抗Bax作用有关。 展开更多
关键词 抗凋亡蛋白bcl-2 促凋亡蛋白Bax BAX BH3结构域的肽链 成孔 低聚反应
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槲皮素对小细胞肺癌细胞株H446的凋亡调控作用 被引量：4
3
作者 苏珊 邹建军 +3 位作者 孔少颜 李磊 岑文昌 张贤兰 《临床肺科杂志》 2015年第6期987-989,共3页
目的初步探讨槲皮素对人小细胞肺癌细胞株凋亡的影响。方法以不同浓度槲皮素培养H446细胞24 h后,运用免疫荧光染色法检测细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2的表达情况,同时采用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化。结果以0、15、30、60μmol/L浓度的... 目的初步探讨槲皮素对人小细胞肺癌细胞株凋亡的影响。方法以不同浓度槲皮素培养H446细胞24 h后,运用免疫荧光染色法检测细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2的表达情况,同时采用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化。结果以0、15、30、60μmol/L浓度的槲皮素作用于细胞株24 h后,细胞凋亡率分别为(1.30±0.32)%(12.95±0.08)%,(16.8±0.19)%,(25.81±1.01)%,各组间均值具有显著性差异(P<0.01),并且随着槲皮素浓度的增加,H446细胞凋亡率逐渐增加,两者呈正性相关。采用免疫荧光染色法检测发现,随着槲皮素作用浓度的增加,抗凋亡蛋白BCL-2的表达信号亦逐渐降低。结论槲皮素对人小细胞肺癌细胞株有促进凋亡的作用,其机制可能与抑制抗凋亡蛋白BCL-2的表达有关。 展开更多
关键词 槲皮素 抗凋亡蛋白bcl-2 凋亡 小细胞肺癌
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在酸性pH值下Bcl-2的胞浆结构域通过低聚反应在脂质体膜上成孔 被引量：2
4
作者 彭军 Suzanne M.Lapolla +1 位作者 张志 林家陵 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第3期631-637,共7页
促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2的三维结构与白喉毒素和大肠杆菌成孔结构域极其相似。与结构相似性一致的是,现有的研究表明Bax和Bcl-2均具有成孔特性。但具有成孔特性的多种蛋白,其成孔的机制却不尽相同。Bax和白喉毒素是通过形成寡... 促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2的三维结构与白喉毒素和大肠杆菌成孔结构域极其相似。与结构相似性一致的是,现有的研究表明Bax和Bcl-2均具有成孔特性。但具有成孔特性的多种蛋白,其成孔的机制却不尽相同。Bax和白喉毒素是通过形成寡聚体成孔,而大肠菌素A却通过形成单体成孔。虽然现有的研究发现Bcl-2可以在正常细胞和凋亡细胞的线粒体形成寡聚体,但对低聚反应是否参与成孔却知道甚少。为了探讨Bcl-2的成孔机制,本文利用Bcl-2的纯化蛋白和脂质体膜研究了其成孔过程。结果发现:Bcl-2的孔径大小与其浓度有关;在一定的浓度下,脂质体包埋的小分子物质比大分子物质可以更快地从脂质体释放;预形成的Bcl-2寡聚体引起的从脂质体的物质释放明显快于Bcl-2单体。因此,研究结果提示:Bcl-2的成孔与其低聚反应有关。 展开更多
关键词 抗凋亡蛋白bcl-2 成孔 脂质体 低聚反应
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脑梗死大鼠模型急性期抗凋亡蛋白Bcl-2和热休克蛋白70的动态表达 被引量：1
5
作者 王晓平 罗永杰 +1 位作者 冯建华 刘君霞 《武警后勤学院学报（医学版）》 CAS 2013年第10期900-903,共4页
【目的】观察SD大鼠大脑中动脉闭塞模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO)急性期热休克蛋白70(heat shock response 70,Hsp70)和抗凋亡蛋白Bcl-2(B cell lymphoma/leukemia 2)随时间变化的动态表达,探讨其变化的规律,为临床治疗... 【目的】观察SD大鼠大脑中动脉闭塞模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO)急性期热休克蛋白70(heat shock response 70,Hsp70)和抗凋亡蛋白Bcl-2(B cell lymphoma/leukemia 2)随时间变化的动态表达,探讨其变化的规律,为临床治疗靶点提供实验依据。【方法】选用健康雄性SD大鼠36只,采用完全随机设计方法分为3组,空白对照组(n=4)、假手术组(n=16)、手术组(n=16)。手术组采用改良线栓法建立急性大脑中动脉闭塞模型,术后0.5 h、2 h、3 h、6 h、12 h、24 h、3 d、7 d共8个时相采血。用ELISA法测定Bcl-2和Hsp70的OD值,绘制标准曲线并计算对应的浓度。【结果】(1)Bcl-2的表达:手术组Bcl-2术后6 h显著升高,12 h到达高峰,3 d时下降接近空白对照组水平。手术组与假手术组在6、12、24 h时间点比较差异有统计学意义(P<0.05);手术组与空白对照组在2 h、3 h、6 h、12 h、24 h、3 d、7 d时间点比较差异有统计学意义(P<0.05);手术组内6、12、24 h与其他时间点比较差异有统计学意义(P<0.05)。(2)Hsp70的表达:手术组Hsp70在术后0.5 h就开始表达,24 h达到高峰,3 d时逐渐下降接近对照组水平。手术组内24 h与各时间点内表达水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】Bcl-2和Hsp70在脑梗死急性期均显著升高,参与神经元缺血缺氧的病理过程,在神经细胞损伤早期发挥重要作用。二者的表达水平呈正相关性。 展开更多
关键词 脑梗 抗凋亡蛋白bcl-2 热休克蛋白70
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幽门螺杆菌对胆管癌细胞增殖与凋亡及细胞核转录因子NF-KB表达的影响 被引量：1
6
作者 吴雨田 陈燕凌 +3 位作者 余菲菲 唐南洪 王小茜 李秀金 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2009年第4期247-251,F0003,F0004,共7页
目的探讨幽门螺杆菌(Hp)对人类胆管癌细胞增殖和凋亡的影响,以及该影响的细胞内信号转导途径。方法用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法和流式细胞仪法检测Hp对胆管癌细胞增殖、凋亡及细胞周期分布的影响,利用免疫细胞化学和凝胶电泳迁移率... 目的探讨幽门螺杆菌(Hp)对人类胆管癌细胞增殖和凋亡的影响,以及该影响的细胞内信号转导途径。方法用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法和流式细胞仪法检测Hp对胆管癌细胞增殖、凋亡及细胞周期分布的影响,利用免疫细胞化学和凝胶电泳迁移率变动实验(EMSA)分析细胞核转录因子NF-KB在Hp作用前后的表达活化情况;使用特异性NF-KB阻断剂吡咯烷二硫氨基甲酸酯(PDTC)阻断NF-KB的活化,利用细胞免疫化学技术和RT-PCR半定量技术分析比较抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-XL在转录因子NF-KB失活前后的表达情况。结果在MOI值(细菌与细胞浓度比)为0.5∶1的状态下,Hp对QBC939细胞有促增殖作用,第1、3d的增殖率分别为(15.24±4.2)%和(34.18±2.6)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。在该MOI值时无诱导细胞凋亡作用,但可推动细胞周期的进展;在此过程中伴有细胞NF-KB活化和抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-XL表达上调;PDTC阻断实验证明抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-XL的表达受到NF-KB活性的调控。结论幽门螺杆菌—核转录因子NF-KB抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-XL传导通路的活化在胆管癌细胞的增殖、凋亡及恶性转化中可能具有重要作用。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 胆管癌细胞 细胞增殖 细胞凋亡 核转录因子NF-KB 抗凋亡蛋白bcl-2、bcl-XL
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兔源抗凋亡蛋白Bcl-2的表达、抗体的制备及初步应用 被引量：2
7
作者 陈萌萌 潘渊婷 +7 位作者 范志宇 胡波 宋艳华 魏后军 仇汝龙 朱伟峰 徐为中 王芳 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第6期1397-1401,共5页
为了原核表达兔源抗凋亡蛋白Bcl-2,并诱导表达纯化该蛋白后制备多抗,采用RT-PCR扩增Bcl-2编码序列,并将该序列克隆至pET-32a(+)载体,获得重组pET-32a-Bcl-2质粒转化BL21(DE3),筛选最佳表达条件,通过亲和层析纯化目的蛋白质,最后经Wester... 为了原核表达兔源抗凋亡蛋白Bcl-2,并诱导表达纯化该蛋白后制备多抗,采用RT-PCR扩增Bcl-2编码序列,并将该序列克隆至pET-32a(+)载体,获得重组pET-32a-Bcl-2质粒转化BL21(DE3),筛选最佳表达条件,通过亲和层析纯化目的蛋白质,最后经Western blot鉴定后免疫小鼠。结果显示,成功扩增Bcl-2编码序列并构建了pET-32a-Bcl-2表达载体;SDS-PAGE结果显示,在16℃,5 h,0.5 mmol/L IPTG的表达条件下,重组蛋白Bcl-2能够高效可溶性表达;Western blot结果表明纯化后的表达产物为高纯度的Bcl-2重组蛋白,将该蛋白质免疫小鼠后获得了特异性抗体,该抗体能够特异性识别重组Bcl-2蛋白,并应用该抗体鉴定RK13-B细胞中Bcl-2蛋白的过表达。 展开更多
关键词 兔源抗凋亡蛋白bcl-2 原核表达 亲和层析 多抗制备
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