目的：观察迷迭香酸对谷氨酸诱导PC12细胞凋亡的作用，初步探讨迷迭香酸抗谷氨酸诱导PC12细胞凋亡的机制。方法：以谷氨酸损伤的PC12细胞为模型，用普通光镜和吖啶橙荧光染色观察谷氨酸对PC12细胞形态和核形态的影响；用MTT法观察迷迭...目的：观察迷迭香酸对谷氨酸诱导PC12细胞凋亡的作用，初步探讨迷迭香酸抗谷氨酸诱导PC12细胞凋亡的机制。方法：以谷氨酸损伤的PC12细胞为模型，用普通光镜和吖啶橙荧光染色观察谷氨酸对PC12细胞形态和核形态的影响；用MTT法观察迷迭香酸对PC12细胞存活率的量-效关系和时-效关系；用碘化丙啶染色流式细胞术检测迷迭香酸对PC12细胞凋亡率的效应；用RT—PCR、间接免疫荧光法和Western blot分别检测迷迭香酸对PC12细胞Bcl—xl和Bax mRNA含量和蛋白质表达的影响。结果：用不同剂量谷氨酸（1、5、10、12．5、15、20mmol／L）孵育PC12细胞24h后，该细胞存活率随药物浓度的增加依次下降，12.5mmol／L谷氨酸孵育细胞24h后，其细胞形态发生了明显的改变，并出现细胞核浓缩、碎裂和凋亡小体等凋亡特征；Bcl—xl表达下凋，Bax表达上调。用100μmol／L迷迭香酸预处理细胞1h后，再用12．5mmol／L谷氨酸孵育细胞24h，细胞凋亡率由21.63％±0．25％下降至4.23％±1.32％（P〈0．01），Bel—xl表达上调（P〈0．01），Bax表达下调（P〈0.05）。加Bel—xl蛋白质阻断剂HAl4—1（40μmol／L）后，迷迭香酸抗谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡的作用完全被取消（11．62％±0．65％／vs2．55％±0.13％），其凋亡率甚至比单独用Glu处理组还高（11．62％±0．65％ vs 6．83％±0．33％）。结论：迷迭香酸有抗谷氨酸诱导PC12细胞凋亡的作用；其机制可能与调节Bcl—xl和Bax基因和蛋白质的表达有关。展开更多
文摘目的：观察迷迭香酸对谷氨酸诱导PC12细胞凋亡的作用，初步探讨迷迭香酸抗谷氨酸诱导PC12细胞凋亡的机制。方法：以谷氨酸损伤的PC12细胞为模型，用普通光镜和吖啶橙荧光染色观察谷氨酸对PC12细胞形态和核形态的影响；用MTT法观察迷迭香酸对PC12细胞存活率的量-效关系和时-效关系；用碘化丙啶染色流式细胞术检测迷迭香酸对PC12细胞凋亡率的效应；用RT—PCR、间接免疫荧光法和Western blot分别检测迷迭香酸对PC12细胞Bcl—xl和Bax mRNA含量和蛋白质表达的影响。结果：用不同剂量谷氨酸（1、5、10、12．5、15、20mmol／L）孵育PC12细胞24h后，该细胞存活率随药物浓度的增加依次下降，12.5mmol／L谷氨酸孵育细胞24h后，其细胞形态发生了明显的改变，并出现细胞核浓缩、碎裂和凋亡小体等凋亡特征；Bcl—xl表达下凋，Bax表达上调。用100μmol／L迷迭香酸预处理细胞1h后，再用12．5mmol／L谷氨酸孵育细胞24h，细胞凋亡率由21.63％±0．25％下降至4.23％±1.32％（P〈0．01），Bel—xl表达上调（P〈0．01），Bax表达下调（P〈0.05）。加Bel—xl蛋白质阻断剂HAl4—1（40μmol／L）后，迷迭香酸抗谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡的作用完全被取消（11．62％±0．65％／vs2．55％±0.13％），其凋亡率甚至比单独用Glu处理组还高（11．62％±0．65％ vs 6．83％±0．33％）。结论：迷迭香酸有抗谷氨酸诱导PC12细胞凋亡的作用；其机制可能与调节Bcl—xl和Bax基因和蛋白质的表达有关。
