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miR-30e-5p靶向BIM调控缺氧诱导细胞凋亡的应用研究
1
作者 吴宁夏 李飞 《临床医学进展》 2024年第6期344-352,共9页
目的:研究miR-30e-5p与H2O2损伤后心肌细胞凋亡的关系,探讨miR-30e-5p靶向BIM基因调控H2O2损伤后心肌细胞凋亡的作用,为心肌梗死的诊断以及治疗提供新的靶点。方法:将40天CA16分为正常组(N)、缺氧组(H)、过表达对照组(NC+H)、miR-30e-5... 目的:研究miR-30e-5p与H2O2损伤后心肌细胞凋亡的关系,探讨miR-30e-5p靶向BIM基因调控H2O2损伤后心肌细胞凋亡的作用,为心肌梗死的诊断以及治疗提供新的靶点。方法:将40天CA16分为正常组(N)、缺氧组(H)、过表达对照组(NC+H)、miR-30e-5p过表达组(miR+H)。N组置于正常培养箱下培养;H组置于缺氧培养箱培养24 h;NC+H组与miR+H组分别为稳定感染装载有miR-NC和miR-30e-5p的重组慢病毒后缺氧处理24 h。应用RT-qPCR检测CA16中miR-30e-5p和BIM的mRNA表达水平,应用Caspase-3活性实验和流式细胞技术检测hiPSC-CMs的凋亡水平。利用生物信息学miRNA数据库预测miR-30e-5p的靶基因,并应用双荧光素酶报告基因实验进行验证。结果:1) 与N组比较,H组miR-30e-5p表达水平明显下调;与NC+H组比较,miR+H组miR-30e-5p表达水平则明显上调。2) 与N组比较,H组Caspase-3活性水平明显升高;与NC+H组比较,miR+H组Caspase-3活性水平下降。3) 与N组比较,H组CA16细胞凋亡比例明显上升;与NC+H组比较,miR+H组CA16凋亡比例则明显下降。4) 与N组比较,H组蛋白BIM表达水平上调;与NC+H组比较,miR+H组蛋白BIM表达水平下调。5) 通过miRNA数据库分析发现BIM是miR-30e-5p的潜在靶基因之一。结论:1) miR-30e-5p调控缺氧诱导CA16的凋亡。2) BIM是miR-30e-5p的靶基因之一。3) miR-30e-5p靶向BIM调控缺氧诱导CA16的凋亡。4) miR-30e-5p在急性心肌梗死的发生、发展过程中可能发挥抑癌基因的作用。 展开更多
关键词 miR-30e-5p CA16 抑制缺氧 凋亡
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重度子痫前期患者胎盘组织缺氧适应相关基因的表达及意义 被引量：7
2
作者 栾南南 乔宠 +3 位作者 栾奡 何政 尚涛 王永来 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期331-333,336,共4页
目的探讨重度子痫前期患者胎盘组织中缺氧适应相关基因HIF-1α、PHD1、PHD2和FIH-1的表达及意义。方法采用免疫组化方法检测34例重度子痫前期患者和24例正常孕妇的胎盘组织中的HIF-1α、PHD1、PHD2和FIH-1蛋白的表达,对两组的表达水平... 目的探讨重度子痫前期患者胎盘组织中缺氧适应相关基因HIF-1α、PHD1、PHD2和FIH-1的表达及意义。方法采用免疫组化方法检测34例重度子痫前期患者和24例正常孕妇的胎盘组织中的HIF-1α、PHD1、PHD2和FIH-1蛋白的表达,对两组的表达水平进行比较分析。结果在重度子痫前期患者和正常孕妇的胎盘组织中HIF-1α、PHD1、PHD2和FIH-1蛋白均主要表达在合体滋养细胞和细胞滋养细胞的胞浆中。重度子痫前期组HIF-1α和PHD2蛋白表达(+++)者分别为16例(16/34)和14例(14/34),显著高于对照组2例(2/24)和2例(2/24),差异均有统计学意义(P<0.01)。PHD1和FIH-1蛋白在重度子痫前期组中表达(+++)者分别是2例(2/34)和2例(2/34),明显低于对照组14例(14/24)和13例(13/24),2组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 HIF-1α和PHD2的蛋白在重度子痫前期患者胎盘组织中表达水平明显增高;而PHD1和FIH-1的蛋白的表达水平却明显降低。PHD1、PHD2和FIH-1可能通过抑制HIF-1α的机制参与重度子痫前期的发病。 展开更多
关键词 重度子痫前期 胎盘 缺氧诱导因子-1Α 缺氧诱导因子脯氨酸羟化酶 因子抑制缺氧诱导因子1
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dn HIF-1对宫颈癌细胞生物学行为的影响 被引量：6
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作者 唐彬秩 赵凤艳 +5 位作者 韦婷 母得志 毛萌 傅强 张林 屈艺 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期383-387,共5页
目的研究抑制性缺氧诱导因子-1α(dn HIF-1α)对人宫颈癌SiHa细胞生物学行为的影响,探讨HIF-1α在SiHa细胞的血管生成、缺氧保护、凋亡、增殖过程中的作用。方法将表达dn HIF-1α的重组质粒pcDNA3.1-dn HIF-1α转染入SiHa细胞,采用免疫... 目的研究抑制性缺氧诱导因子-1α(dn HIF-1α)对人宫颈癌SiHa细胞生物学行为的影响,探讨HIF-1α在SiHa细胞的血管生成、缺氧保护、凋亡、增殖过程中的作用。方法将表达dn HIF-1α的重组质粒pcDNA3.1-dn HIF-1α转染入SiHa细胞,采用免疫细胞化学法和Western Blotting检测dn HIF-1α转染SiHa细胞后其HIF-1α与血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的变化;CoCl2化学缺氧法处理细胞,MTT法测定细胞增殖情况,原位缺口末端标记法检测细胞凋亡情况,同时与pcDNA3.1组和未转染组进行比较。结果重组质粒pcDNA3.1-dn HIF-1α转染SiHa细胞后,其HIF-1α蛋白表达水平与其它两组相比差异无统计学意义,而VEGF蛋白表达水平有较明显的降低(P<0.05)。转染dn HIF-1α的细胞,常氧培养和CoCl2诱导的化学缺氧条件下其增殖能力均低于其他两组(P<0.05),CoCl2处理后细胞凋亡增加,与其他两组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论dn HIF-1α抑制SiHa细胞的增殖并促进CoCl2化学缺氧引起的细胞凋亡,同时能降低VEGF蛋白的表达。提示dn HIF-1α可望在宫颈癌治疗中发挥作用。 展开更多
关键词 抑制性缺氧诱导因子-1α 宫颈癌 SIHA细胞 增殖 凋亡
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灯盏细辛对低氧环境下肺成纤维细胞Ⅰ型胶原、MMP1和TIMP1表达的干预作用 被引量：3
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作者 郑家群 谢敏 +1 位作者 高艳 张旭 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期325-330,共6页
目的研究灯盏细辛对低氧环境下肺成纤维细胞Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶1(MMP1)和金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)表达的影响。方法以人胚肺成纤维细胞系MRC-5为研究对象,Western blot法检测常氧、低氧、丝/苏氨酸激酶抑制剂星型孢菌素(stra... 目的研究灯盏细辛对低氧环境下肺成纤维细胞Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶1(MMP1)和金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)表达的影响。方法以人胚肺成纤维细胞系MRC-5为研究对象,Western blot法检测常氧、低氧、丝/苏氨酸激酶抑制剂星型孢菌素(straurosporine,SP)、灯盏细辛作用下MRC-5缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1alpha,HIF-1α)、Ⅰ型胶原前α1链(pro-col1α1)、p-smad2蛋白的表达,ELISA法检测细胞培养上清液中Ⅰ型胶原、MMP1和TIMP1蛋白的含量。结果体外培养的MRC-5,常氧环境下细胞内表达一定的pro-col1α1、p-smad2蛋白,几乎不表达HIF-1α,细胞外基质有较低水平的Ⅰ型胶原、MMP1和TIMP1蛋白表达;低氧环境下细胞内pro-col1α1、p-smad2蛋白、HIF-1α和细胞外基质Ⅰ型胶原、MMP1和TIMP1均较常氧组表达增加(P<0.05);SP(5nmol/L)预处理细胞30min与单纯低氧组比较,其胞内的p-smad2蛋白、pro-col1α1和基质中的Ⅰ型胶原、TIMP1降低(P<0.05),而基质中的MMP1表达增加(P<0.05);灯盏细辛组(12.5μg/mL、50μg/mL)与单纯低氧组比较其胞外的Ⅰ型胶原、MMP1、TIMP1蛋白和胞内的HIF-1α、pro-col1α1和p-smad2蛋白表达均有降低(P<0.05)。结论灯盏细辛可降低低氧环境下HIF-1α蛋白的表达,并部分通过p-smad2信号通路抑制Ⅰ型胶原、TIMP1蛋白生成。 展开更多
关键词 人胚肺成纤维细胞 灯盏细辛 Ⅰ型胶原 低氧 基质金属蛋白酶1 金属蛋白酶组织抑制剂1缺氧诱导因子-1α
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