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抑制性寡核苷酸对染矽尘小鼠γ-干扰素和pSTAT4表达的影响 被引量：2
1
作者 雷鹏 孔海霞 +3 位作者 张静妹 何宁 王世鑫 翁亚光 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期522-525,共4页
目的探讨抑制性寡核苷酸（suppressive0ligodeoxynucleotides，SupODN）对染矽尘小鼠y-干扰素（IFN-Y）和磷酸化的信号转导子及转录激活子4（pSTAT4）表达的影响。方法Balc小鼠60只随机分为空白对照组、矽尘组、抑制性寡核苷酸组、对照... 目的探讨抑制性寡核苷酸（suppressive0ligodeoxynucleotides，SupODN）对染矽尘小鼠y-干扰素（IFN-Y）和磷酸化的信号转导子及转录激活子4（pSTAT4）表达的影响。方法Balc小鼠60只随机分为空白对照组、矽尘组、抑制性寡核苷酸组、对照寡核苷酸（controloligodeoxynucleotides，ConODN）组，每组15只。抑制性寡核苷酸组和对照寡核苷酸组分别腹腔注射抑制性寡核苷酸组、对照寡核苷酸各0.3ml（1mg／m1）3h后，经气管一次性注入0．1mlSiO2悬液（5g／L），空白对照组经气管一次性注入等量生理盐水。不同处理7d后处死动物，采用ELISA法检测血清IFN-Y水平；免疫组织化学法检测肺组织中IFN-Y和pSTAT4的表达，并作定量分析；HE染色观察肺组织病理变化。结果HE染色显示，矽尘组小鼠肺组织间隔水肿并增厚，抑制性寡核苷酸组小鼠肺组织炎症较矽尘组减轻。与空白对照组血清：（280．1±41-3）pg／ml，肺组织：（0．249±0．373）ILL较，矽尘组小鼠肺组织IFN-y表达血清：（886_3±81．7）pg／m]，肺组织：（0．270±0．300）]增加，差异有统计学意义（P〈0．05）。抑制性寡核苷酸组小鼠血清中IFN-y表达[（478．5±38．6）pg／m1]明显低于矽尘组和对照寡核苷酸组[（894．5±91．6）pg／m1]，差异有统计学意义（P〈0．01）。与矽尘组比较，抑制性寡核苷酸组小鼠肺组织内IFN-1表达（O．241±0．250）减少，差异有统计学意义（P〈0．05）。与空白对照组（0．279±0．353）比较，矽尘组小鼠肺组织pSTAT4表达（0．313±0．231）增加，差异有统计学意义（P〈O．01）；与矽尘组比较，抑制性寡核苷酸组小鼠肺组织内pSTAT4表达（0．269±0．523）明显减少，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论抑制性寡核苷酸可抑制IFN-y和pSTAT4的表达，对染矽尘小鼠早期炎症有一定的抑制作用，具体机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 抑制性寡核苷酸 矽尘 干扰素Ⅱ型
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抑制性寡核苷酸（CpG-N ODN）拮抗刺激性寡核苷酸（CpG-S ODN）的作用及其机制研究 被引量：1
2
作者 蒋为薇 周红 《中国药理通讯》 2007年第3期32-33,共2页
目的：寻找有效的抑制性CpG ODN，并研究其对刺激CpG ODN（CpG-SODN）1826诱导细胞分泌TNF-α的影响及其作用机制和对脓毒症小鼠的影响。方法：选用本室前期采用生物信息学技术合成的21种CpG ODN，筛选出对CpG-SODN诱导hPBMC释放TNF-α... 目的：寻找有效的抑制性CpG ODN，并研究其对刺激CpG ODN（CpG-SODN）1826诱导细胞分泌TNF-α的影响及其作用机制和对脓毒症小鼠的影响。方法：选用本室前期采用生物信息学技术合成的21种CpG ODN，筛选出对CpG-SODN诱导hPBMC释放TNF-α具有抑制作用的CpG-N ODN；采用亲和传感技术观察该CpG-N ODN与CpG-S ODN间的相互结合；采用流式细胞技术观察CpG-N ODN对的影响；并采用RT-PCR技术和EMSA技术观察CpG-NODN对CpG-SODN诱导的hPBMC TLR9表达的影响以及NF-xB活化的影响。同时观察了CpG-N0DN对脓毒症小鼠的保护作用，并检测小鼠血清TNF-α水平。结果：从前期合成的CpGODN中成功的筛选出了能有效抑制CpG-SODN诱导hPBMC释放TNF-α的CpG-NODN，并发现当浓度比为3：5，4：5，和1：1时均能有效抑制CpG-SODN对hPBMC的刺激活性，其中浓度比为1：1的CpG-NODN对刺激性CpG-SODN诱导hPBMC分泌TNF-α抑制作用最强，并呈一定时效关系；应用亲和传感技术可以看出CpG-SODN与CpG-NODN没有直接结合作用；同时CpG-NODN还可以明显抑制hPBMC表面结合和内化CpG-SODN，并抑制CpG-SODN刺激的hPBMC TLR9 mRNA的表达及NF-xB的活化。同时CpG-NODN还可有效的降低由于细菌DNA导致的小鼠死亡，并降低小鼠小鼠血清TNF-α水平。结论：成功筛选出有效的CpG-N0DN，该CpG-NODN对CpG-S ODN活化hPBMC具有抑制作用，这种抑制作用可能与影响hPBMC表面结合和内化CpG-S ODN，抑制TLR9表达，进而抑制NF-xB的活化有关。同时该CpG-NODN对脓毒症小鼠的具有保护作用。 展开更多
关键词 抑制性寡核苷酸 刺激性寡核苷酸 脓毒症 RT-PCR技术 EMSA技术
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抑制性寡核苷酸对狼疮样模型小鼠的治疗作用
3
作者 孙波峰 欧颖烨 +2 位作者 陆叶 陈海霞 力弘 《中国临床药学杂志》 CAS 2018年第2期77-82,共6页
目的观察抑制性寡核苷酸(TLE)对狼疮样综合征模型小鼠的治疗作用。方法采用空肠弯曲菌CJ-S131诱导构建红斑狼疮样综合征小鼠模型。将小鼠随机分为7组,即正常组、模型对照组、狼疮样模型组,抑制性寡核苷酸皮下给药(给药剂量分别为5、10... 目的观察抑制性寡核苷酸(TLE)对狼疮样综合征模型小鼠的治疗作用。方法采用空肠弯曲菌CJ-S131诱导构建红斑狼疮样综合征小鼠模型。将小鼠随机分为7组,即正常组、模型对照组、狼疮样模型组,抑制性寡核苷酸皮下给药(给药剂量分别为5、10、20、40μg)的4个组。检测TLE对小鼠脏器指数、血清抗自身抗体、血清肌酐和尿蛋白与尿肌酐比值,以及对肾损伤的影响。结果与模型组相比,TLE(给药剂量为20、40μg)能显著抑制血清抗双链DNA和抗核小体抗体的水平(P<0.05);TLE(给药剂量为10、20、40μg)明显改善肾病理和功能的损伤(P<0.05)。结论 TLE对小鼠狼疮样综合征有一定的保护作用。 展开更多
关键词 抑制性寡核苷酸 狼疮 自身抗体
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A151对糖氧剥夺和脂多糖诱导的BV-2细胞极化的影响
4
作者 闵傲雪 朱天瑞 +2 位作者 张凤 王冉冉 李晓红 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2021年第3期1-9,共9页
目的探讨抑制性寡核苷酸A151治疗对糖氧剥夺(OGD)和脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞M1/M2极化的影响。方法倒置显微镜下观察A151治疗对BV-2细胞形态改变的影响。ELISA检测细胞上清液中细胞因子含量。RT-PCR检测细胞因子转录水平。Western b... 目的探讨抑制性寡核苷酸A151治疗对糖氧剥夺(OGD)和脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞M1/M2极化的影响。方法倒置显微镜下观察A151治疗对BV-2细胞形态改变的影响。ELISA检测细胞上清液中细胞因子含量。RT-PCR检测细胞因子转录水平。Western blotting检测小胶质细胞M1表型、M2表型表面标志物的表达,检测NLRP3炎症小体的表达。免疫荧光检测小胶质细胞M1表型、M2表型表面标志物的表达。结果A151可抑制LPS和OGD共同刺激引起的BV-2细胞形态变化。A151能下调小胶质细胞M1表型表面标志物和高表达的细胞因子诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、CD16/CD32、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)(P均<0.001),下调TNF-αmRNA、IL-1βmRNA的转录水平(P均<0.001)。上调小胶质细胞M2表型表面标志物和高表达的细胞因子:精氨酸酶-1(Arg-1)、CD206、白介素-10(IL-10)、白介素-4(IL-4)(P_(Arg-1)<0.001,PCD206<0.001,P_(IL-10)<0.001,PIL-4=0.046),上调IL-10 mRNA、IL-4 mRNA转录水平(P均<0.001),下调NLRP3炎症小体表达(P均<0.001)。结论A151通过抑制NLRP3炎症小体的活化,促使小胶质细胞从M1表型向M2表型的极化,发挥调节炎症的作用。 展开更多
关键词 抑制性寡核苷酸A151 小胶质细胞 极化 炎症反应 NLRP3炎症小体
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拮抗细菌DNA的CpG-N ODN筛选 被引量：2
5
作者 王良喜 鲁永玲 +2 位作者 丁国富 罗平 周红 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期53-56,共4页
目的在抑制性CpG寡核苷酸(CpG-NODN)分子设计的基础上,选择部分序列加以合成并对其生物学活性进行鉴定,筛选出能够拮抗细菌DNA的CpG-NODN。方法对合成的10条CpGODN进行生物学活性的初筛和复筛,观察其自身的刺激性及其对CpG-SODN诱导的T... 目的在抑制性CpG寡核苷酸(CpG-NODN)分子设计的基础上,选择部分序列加以合成并对其生物学活性进行鉴定,筛选出能够拮抗细菌DNA的CpG-NODN。方法对合成的10条CpGODN进行生物学活性的初筛和复筛,观察其自身的刺激性及其对CpG-SODN诱导的TNF-α释放的抑制作用。使用RNAstructureversion3.71预测CpGODN的二级结构及自由能,根据10条CpGODN构效关系分析结果,对CpG-NODN分子进行再设计,并从中选择11个序列进行生物活性的筛选。结果首次合成的10条CpGODN仅1条是对细菌DNA拮抗作用较弱的CpG-NODN。通过对其构效关系进行分析,推测CpGODN的生物活性可能与自由能相关。在此基础上对CpG-NODN分子进行了再设计,合成的11条CpGODN中有5条是拮抗作用较强的CpG-NODN。结论获得了6条CpG-NODN。CpGODN的生物活性可能与自由能密切相关。 展开更多
关键词 DNA 细菌 脓毒症 CPG基序 抑制性CpG寡核苷酸 分子设计
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2型、5型腺病毒DNA与12型腺病毒DNA、大肠杆菌DNA序列的对比研究 被引量：1
6
作者 王良喜 丁国富 +2 位作者 鲁永玲 罗平 周红 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1095-1098,共4页
目的通过对2型、5型人腺病毒DNA(Adv2、5DNA)与Adv12DNA及大肠杆菌DNA(ECDNA)序列进行对比研究,确定Adv2、5DNA中能够拮抗细菌DNA的可能的活性片段——抑制性CpG寡核苷酸(CpG-NODN)。方法从NCBI核酸数据库中获取Adv2、5、12DNA和ECDNA序... 目的通过对2型、5型人腺病毒DNA(Adv2、5DNA)与Adv12DNA及大肠杆菌DNA(ECDNA)序列进行对比研究,确定Adv2、5DNA中能够拮抗细菌DNA的可能的活性片段——抑制性CpG寡核苷酸(CpG-NODN)。方法从NCBI核酸数据库中获取Adv2、5、12DNA和ECDNA序列,采用DNATools、BioEdit等软件对Adv2、5、12DNA和ECDNA进行序列分析和比较,确定Adv2、5DNA特征性的CpG基序,查找出Adv2、5DNA中以上述CpG基序为核心的12碱基寡核苷酸(12-ODN)。结果确定了19种Adv2、5DNA特征性的CpG基序,Adv2、5DNA中以这19种CpG基序为核心的12-ODN共504条。结论504条12-ODN可能是Adv2、5DNA的CpG-NODN。 展开更多
关键词 DNA 细菌 DNA 腺病毒 CPG基序 抑制性CpG寡核苷酸 计算生物学
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