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温和灸对大鼠肌筋膜激痛点肌卫星细胞激活及成肌修复的影响
1
作者 林业武 曹磊 +2 位作者 陈美雄 高彦平 袁仕国 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期583-586,607,共5页
目的:探讨在SD大鼠肌筋膜激痛点(myofascial trigger point,MTrP)模型上,温和灸对骨骼肌干细胞-肌卫星细胞(skeletal muscle satellite cell,SMSC)激活和成肌修复的影响。方法:30只SD大鼠随机分为正常组、模型组、温和灸组给予相应处理... 目的:探讨在SD大鼠肌筋膜激痛点(myofascial trigger point,MTrP)模型上,温和灸对骨骼肌干细胞-肌卫星细胞(skeletal muscle satellite cell,SMSC)激活和成肌修复的影响。方法:30只SD大鼠随机分为正常组、模型组、温和灸组给予相应处理,并在造模开始的第30天和第60天取MTrP处或相同部位标本,HE染色检测MTrP部位的组织修复情况,免疫荧光法检测SMSC标志Pax7的变化。结果:第30天和第60天正常组大鼠肌细胞呈规则多边形、间隙小、未见明显炎性细胞浸润;模型组肌细胞呈不规则形和类圆形并萎缩、大小不等形成收缩结节且炎性细胞浸润;温和灸组肌细胞趋向规则,紊乱程度和炎性细胞浸润较模型组明显改善。正常组、模型组、温和灸组3组中肌细胞面积百分比在第30天分别为(70.73±7.85、18.63±2.98和44.09±5.23%),第60天分别为(74.98±7.33、12.06±3.24和53.58±6.06%),均为正常组>温和灸组>模型组(F=104.14和152.11,P均<0.05)。3组中Pax7荧光强度在第30天分别为(211.30±18.06、42.75±12.25和138.19±25.95(μm^(2)/mm^(2)×10^(3))),第60天分别为(199.80±28.06、27.34±3.11和187.49±37.46(μm^(2)/mm^(2)×10^(3))),均为正常组>温和灸组>模型组(F=93.24和63.10,P均<0.05)。结论:SD大鼠MTrP温和灸可减轻炎症,避免SMSC过度激活,维持SMSC的更新。这可能是温和灸促进MTrP成肌修复的作用机制之一。 展开更多
关键词 肌筋膜疼痛综合征 肌肉损伤 艾灸 成肌干细胞 配对盒转录因子7
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人肝细胞生长因子基因重组慢病毒载体的构建及其在成肌干细胞中的表达
2
作者 汤维芳 刘菲 +4 位作者 陈世彩 陈东辉 李孟 朱敏辉 郑宏良 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期45-49,共5页
目的构建人肝细胞生长因子(human hepatocyte growth factor,hHGF)基因重组pCMV-G﹠NR-U6-hHGF慢病毒载体,并检测其在成肌干细胞系C2C12细胞中的hHGF表达,为治疗失神经喉肌纤维化的研究提供依据。方法采用RT-PCR法扩增并纯化得到hHGF基... 目的构建人肝细胞生长因子(human hepatocyte growth factor,hHGF)基因重组pCMV-G﹠NR-U6-hHGF慢病毒载体,并检测其在成肌干细胞系C2C12细胞中的hHGF表达,为治疗失神经喉肌纤维化的研究提供依据。方法采用RT-PCR法扩增并纯化得到hHGF基因片段,并将其克隆到pCMV-G﹠NR-U6上,再将重组慢病毒载体转化入感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性菌落并行BamHI和HindⅢ双酶切鉴定。对筛选后的重组质粒阳性克隆行PCR鉴定和测序,将表达质粒与包装质粒共转染293T细胞包装hHGF慢病毒,荧光显微镜检测病毒滴度,再进一步转染C2C12细胞(分为空白对照组、空载体组、HGF重组慢病毒过表达组),最后行PCR和WB检测HGF的表达情况。结果 PCR鉴定和测序结果显示所构建的慢病毒载体正确无误,包装后的病毒滴度>1×109 IU/mL;慢病毒过表达组的HGF表达量均较空白对照组、空载体组明显增高,而且72h仍有稳定的表达。结论本实验成功构建了慢病毒载体pCMV-G﹠NR-U6-hHGF,并能够在离体培养的成肌干细胞系C2C12细胞中稳定高效表达HGF,为治疗失神经喉肌等骨骼肌纤维化、提高神经修复效果的实验研究提供了依据。 展开更多
关键词 人肝细胞生长因子 慢病毒 喉肌 成肌干细胞
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不同生长基质对骨骼肌成肌干细胞分化融合的影响及初步分析
3
作者 李晓雨 高颖娜 +2 位作者 汤维芳 李孟 郑宏良 《医学研究杂志》 2014年第5期23-25,共3页
目的探讨骨骼肌成肌干细胞C2C12在体外分化为肌管的最佳生长条件。方法把C2C12细胞接种于基质胶(matrigel)、Ⅰ型胶原(collagenⅠ)、多聚赖氨酸(PLL)预包被的24孔板,观察细胞生长情况并刺激分化5天后进行免疫荧光染色,分别计算肌球蛋白(... 目的探讨骨骼肌成肌干细胞C2C12在体外分化为肌管的最佳生长条件。方法把C2C12细胞接种于基质胶(matrigel)、Ⅰ型胶原(collagenⅠ)、多聚赖氨酸(PLL)预包被的24孔板,观察细胞生长情况并刺激分化5天后进行免疫荧光染色,分别计算肌球蛋白(myosin)阳性肌管的融合率。结果基质胶组和多聚赖氨酸组肌管融合率明显高于Ⅰ型胶原组(P<0.01),但是多聚赖氨酸组肌管相对较小且多核肌管数(≥3个核)相对较少。结论在3种基质中,基质胶是促进C2C12细胞分化融合的最佳基质,对于C2C12成肌提供了可靠保证。 展开更多
关键词 生长基质 骨骼肌成肌干细胞 肌管生成
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