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猪的骨骼肌生长发育研究进展 被引量:19
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作者 赵晓 莫德林 +3 位作者 张悦 龚雯 李安宁 陈瑶生 《生命科学》 CSCD 北大核心 2011年第1期37-44,共8页
瘦肉率对生猪产业来说是一个极其重要的经济指标,而这一指标完全取决于骨骼肌的生长发育。因此,猪骨骼肌生长发育机理的研究是十分必要的。然而,在早期由于各种因素的限制,猪骨骼肌单个基因的研究一直进展缓慢;相反,以小鼠为模型,其骨... 瘦肉率对生猪产业来说是一个极其重要的经济指标,而这一指标完全取决于骨骼肌的生长发育。因此,猪骨骼肌生长发育机理的研究是十分必要的。然而,在早期由于各种因素的限制,猪骨骼肌单个基因的研究一直进展缓慢;相反,以小鼠为模型,其骨骼肌单基因的功能研究却取得了较大进展。在这一时期,影响肌决定和肌分化的基因,如MRFs家族和MEF2家族相继被发现,这些基因在猪的肌肉发育中也发挥着同样的作用。然而,这些结果并不能很好地揭示骨骼肌发育过程中复杂的基因间互作关系。随着近年来芯片和测序技术的不断发展,更多人试图从整个转录谱的水平来阐述猪肌肉发育的分子机理,并且也取得了较大的进展。为了对猪骨骼肌生长发育有一个更为清晰的认识,该文将以目前猪骨骼肌生长发育研究结果为基础,同时结合模式动物小鼠骨骼肌单基因的研究成果,对猪的骨骼肌生长发育分子调控机理进行详细的阐述。 展开更多
关键词 骨骼 生长发育 调节因子
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Hedgehog信号通路在肌少-骨质疏松症中的肌骨共生作用
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作者 刘晏东 邓强 +5 位作者 李中锋 彭冉东 王雨榕 李家明 马平怡 杜健强 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第16期2433-2437,共5页
本文阐述了肌少-骨质疏松症所涉及的肌肉和骨骼间的复杂串扰和密切联系及其发病机制,并概括性指出其治疗难点在于需要同时兼顾肌肉和骨骼。还阐述了Hedgehog通路对于胚胎发育、组织形态建立以及人体组织的再生和修复的关键作用。从肌肉... 本文阐述了肌少-骨质疏松症所涉及的肌肉和骨骼间的复杂串扰和密切联系及其发病机制,并概括性指出其治疗难点在于需要同时兼顾肌肉和骨骼。还阐述了Hedgehog通路对于胚胎发育、组织形态建立以及人体组织的再生和修复的关键作用。从肌肉干细胞的增殖和分化、前体细胞和肌纤维生成、抑制炎症和调控免疫3个方面探讨了Hedgehog通路对骨骼肌的重塑作用;从促进骨形成和抑制骨吸收2个方面阐述了Hedgehog通路在骨重建中的作用。 展开更多
关键词 HEDGEHOG信号通路 少-骨质疏松症 作用机制
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肌骨共生相关信号通路研究进展
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作者 刘晏东 邓强 +5 位作者 张彦军 李中锋 彭冉东 郭铁峰 王雨榕 陈博 《协和医学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第1期147-152,共6页
骨质疏松症是一种以骨量降低、骨组织微结构损坏、骨脆性增加、易发生骨折为特征的全身代谢性骨病,而肌少症是以进行性全身肌量减少和功能减退为主要特征的综合征。基于二者共同的病理生理机制及密切相关性,逐渐衍生出“肌少-骨质疏松... 骨质疏松症是一种以骨量降低、骨组织微结构损坏、骨脆性增加、易发生骨折为特征的全身代谢性骨病,而肌少症是以进行性全身肌量减少和功能减退为主要特征的综合征。基于二者共同的病理生理机制及密切相关性,逐渐衍生出“肌少-骨质疏松症”这一概念,以描述肌肉与骨骼同时发生衰减的现象。信号通路作为肌肉与骨骼之间重要的信号传递途径,如发生异常,则会导致肌少-骨质疏松症的发生。因此,本文就Hedgehog、Hippo、mTOR和MAPK等成骨与成肌相关信号通路进行综述,以期为肌少-骨质疏松症的靶向治疗提供新思路。 展开更多
关键词 信号通路 少-骨质疏松症
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Hippo信号通路成骨、成肌分化功能研究进展
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作者 陈博 邓强 +3 位作者 李中锋 彭冉东 王雨榕 刘晏东 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1538-1543,共6页
Hippo信号通路在器官发育和组织修复等多种生物学行为中起着重要作用。Hippo通路下游效应因子YAP和TAZ与TEAD转录因子共同构成Hippo信号转导网络的连接点来调节基因表达。越来越多的证据表明,Hippo通路既可通过调节骨髓间充质干细胞(bon... Hippo信号通路在器官发育和组织修复等多种生物学行为中起着重要作用。Hippo通路下游效应因子YAP和TAZ与TEAD转录因子共同构成Hippo信号转导网络的连接点来调节基因表达。越来越多的证据表明,Hippo通路既可通过调节骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)和骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMPs)来影响成骨分化功能,又可通过调节骨骼肌卫星细胞和成肌细胞来影响成肌分化功能。本文对Hippo信号通路的结构,以及成骨、成肌的研究进展作一综述,以期更深入理解Hippo通路成骨、成肌功能,并为肌少-骨质疏松症的临床治疗提供新的研究方向。 展开更多
关键词 Hippo信号通路 研究进展
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中国地方猪种成肌与肌内沉脂的遗传机制解析——国家自然科学基金重大项目介绍 被引量:1
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作者 任红艳 胡景杰 杜生明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1096-1098,共3页
中国是世界上第一养猪大国和猪肉消费国,猪肉的产量及品质既关乎国家食品安全,又与人们生活质量、公众健康息息相关。中国拥有全世界最丰富的地方猪种资源,可以为品种改良提供重要支撑。国家自然科学基金委员会设立了重大项目"中... 中国是世界上第一养猪大国和猪肉消费国,猪肉的产量及品质既关乎国家食品安全,又与人们生活质量、公众健康息息相关。中国拥有全世界最丰富的地方猪种资源,可以为品种改良提供重要支撑。国家自然科学基金委员会设立了重大项目"中国地方猪种成肌与肌内沉脂的遗传机制解析"旨在为我国地方猪基因资源利用和遗传改良奠定坚实的理论基础。经过公开申请、同行评议、评审论证会答辩、专家讨论投票、国家自然科学基金委委务会审批,江西农业大学黄路生教授申请的项目获资助。 展开更多
关键词 中国地方猪 内沉脂 遗传机制 重大项目
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滩羊骨骼肌卫星细胞体外培养及成肌和成脂诱导分化研究 被引量:1
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作者 徐小春 赵瑞 +2 位作者 陈文娟 马文平 马森 《家畜生态学报》 北大核心 2020年第12期32-39,共8页
为了建立滩羊骨骼肌卫星细胞(Skelatal muscle satellite cells,SMSCs)的体外培养体系,并探讨在成肌和成脂诱导分化过程细胞形态、标志基因表达等变化规律,该试验采集10日龄健康滩羊(公羔)腿部肌肉组织,用I型胶原酶和胰蛋白酶消化分离... 为了建立滩羊骨骼肌卫星细胞(Skelatal muscle satellite cells,SMSCs)的体外培养体系,并探讨在成肌和成脂诱导分化过程细胞形态、标志基因表达等变化规律,该试验采集10日龄健康滩羊(公羔)腿部肌肉组织,用I型胶原酶和胰蛋白酶消化分离骨骼肌卫星细胞进行原代和传代培养,并进行成肌和成脂诱导分化。采用qRT-PCR检测成肌分化基因(Pax7、Desmin、MyoG)及成脂分化关键基因(PPARγ、C/EBPα、FAS)mRNA在诱导前、后的表达水平变化。结果表明:(1)SMSCs在酶消化法分离后约9 h后开始贴壁,呈现为小梭形与不规则三角形。经传代后,细胞呈现梭形及不规则三角形,可见部分融合细胞,折射率增加;培养过程中发生更多融合,细胞长梭形且平行排列紧密,呈长管状;(2)细胞接种后的潜伏期为0~4 d,此时完成贴壁和伸展;4~6 d进入对数生长期,增殖迅速;第6天开始进入到平台期,细胞增殖缓慢;(3)SMSCs成肌诱导分化第8天,明显观察到细胞核和肌管;成脂诱导第8天时细胞内沉积大量脂肪滴,油红O着色呈明显红色;(4)SMSCs成肌诱导第8天Pax7表达量显著降低(P<0.05),为诱导第0天的0.08倍;MyoG和Desmin在诱导第8天表达量显著增加(P<0.05),分别是诱导第0天的11.03倍和5.48倍。SMSCs成脂诱导分化第8天与诱导第0天相比,PPARγ表达量增加,差异不显著(P>0.05);而C/EBPα和FAS的表达量显著增加(P<0.05),表达水平分别提高5.51倍和2.01倍。该研究成功分离滩羊骨骼肌卫星细胞,并具有较强成肌和成脂分化能力,为滩羊骨骼肌的发育及再生机制提供了可靠的细胞模型。 展开更多
关键词 滩羊 SMSCs 诱导分化
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SD大鼠骨骼肌卫星细胞系的建立及诱导其向成肌、成脂和成骨分化
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作者 石钊 王修杰 +2 位作者 王凡 董立华 张全波 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期299-303,306,共6页
目的:建立SD大鼠骨骼肌卫星细胞的细胞系,为组织工程学提供种子细胞和研究资料。方法:采用两步酶消化法结合差速贴壁技术,获得较高纯度的骨骼肌卫星细胞。MTT法观察骨骼肌卫星细胞的体外增殖特性并绘制生长曲线图,流式细胞仪检测... 目的:建立SD大鼠骨骼肌卫星细胞的细胞系,为组织工程学提供种子细胞和研究资料。方法:采用两步酶消化法结合差速贴壁技术,获得较高纯度的骨骼肌卫星细胞。MTT法观察骨骼肌卫星细胞的体外增殖特性并绘制生长曲线图,流式细胞仪检测细胞周期。观察不同诱导条件下骨骼肌卫星细胞的成肌、成脂、成骨的分化特性。结果:骨骼肌卫星细胞可传50代以上,第7代时,倍增时间约为60h,80.7%的细胞处于G1期,在特定诱导作用下骨骼肌卫星细胞可以向成肌、成脂、成骨方向分化,显示了骨骼肌卫星细胞的多向分化潜能,成功建立了骨骼肌卫星细胞的细胞系。结论:建立了SD大鼠骨骼肌卫星细胞系,为组织工程学提供种子细胞。 展开更多
关键词 骨骼卫星细胞 分化
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结缔组织生长因子诱导肾成纤维细胞转为成肌纤维细胞 被引量:66
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作者 黄海长 李惊子 王海燕 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第1期37-40,共4页
结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)是介导转化生长因子(TGF-β)促纤维化效应的蛋白,但它能否诱导肾脏慢性纤维化中的关键细胞,即间质成纤维细胞转化为成肌纤维细... 结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)是介导转化生长因子(TGF-β)促纤维化效应的蛋白,但它能否诱导肾脏慢性纤维化中的关键细胞,即间质成纤维细胞转化为成肌纤维细胞(myofibroblast),目前尚无报道.实验应用体外基因转染技术建立稳定表达CTGF蛋白的肾间质成纤维细胞系,并观察在不同培养条件下成肌纤维细胞数量及其产生的生物学效应.结果发现细胞表达出的CTGF蛋白能直接诱导成纤维细胞转化为成肌纤维细胞,并增加细胞外基质胶原Ⅲ mRNA水平,提示CTGF可作为肾纤维化防治中的新靶位蛋白,为临床延缓肾脏疾病慢性进展提供新思路. 展开更多
关键词 结缔组织生长因子 纤维细胞 纤维细胞 肾脏 肾间质纤维化 慢性肾功能衰竭 CTGF 靶位蛋白
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氧化应激在特发性肺纤维化中的作用及其机制研究进展 被引量:35
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作者 钟长军 李琳 +1 位作者 李俊 高建 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期169-172,共4页
特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是以弥漫性肺泡炎和成纤维细胞病理性增生最终导致肺间质纤维化为病理特征的慢性进展性疾病。IPF发病机制尚未完全明确。成肌纤维细胞(myofibroblast)增多是目前学术界认为最为重要的... 特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是以弥漫性肺泡炎和成纤维细胞病理性增生最终导致肺间质纤维化为病理特征的慢性进展性疾病。IPF发病机制尚未完全明确。成肌纤维细胞(myofibroblast)增多是目前学术界认为最为重要的IPF发生致病的主要机制。同时氧化/抗氧化失衡引起的氧化应激反应是其发病重要机制之一。纠正体内氧化/抗氧化失衡能减轻肺纤维化的程度,因此有望成为治疗特发性肺纤维化的一种新方法。该文就近年来氧化应激反应在IPF中的作用及其机制研究进展作一综述。 展开更多
关键词 特发性肺纤维化 氧化应激 纤维细胞 抗氧化系统 上皮细胞 细胞因子 蛋白酶/抗蛋白酶
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成肌调节因子MyoD和Myf-5在人体失神经骨骼肌中的表达及其临床意义 被引量:20
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作者 沈燕国 徐建光 +3 位作者 顾玉东 胡韶楠 黄汉伟 李继峰 《复旦学报(医学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第4期264-267,共4页
目的 研究人体骨骼肌失神经支配后成肌调节因子MyoD和Myf 5蛋白的表达变化 ,了解骨骼肌的再生状态。方法  2 0例不同时间人体失神经骨骼肌与 3例正常骨骼肌标本 ,HE染色和透射电镜观察肌卫星细胞形态变化 ;抗MyoD和Myf 5多克隆抗体免... 目的 研究人体骨骼肌失神经支配后成肌调节因子MyoD和Myf 5蛋白的表达变化 ,了解骨骼肌的再生状态。方法  2 0例不同时间人体失神经骨骼肌与 3例正常骨骼肌标本 ,HE染色和透射电镜观察肌卫星细胞形态变化 ;抗MyoD和Myf 5多克隆抗体免疫组织化学染色 (ABC法 ) ,统计阳性染色细胞核数。 结果 抗MyoD和Myf 5抗体阳性染色细胞核数在人体骨骼肌失神经 1~ 2月时的肌卫星细胞中最多 ;3个月后急剧下降 ,并维持在一低水平 ;1年后几乎无表达。结论 人体骨骼肌失神经支配后早期肌卫星细胞通过MyoD和 (或 )Myf 5途径激活。 展开更多
关键词 调节因子 MYOD Myf-5 人体 失神经 骨骼 临床意义 卫星细胞
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成肌调节因子MyoD与myogenin在肌肉损伤修复过程的动态变化 被引量:20
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作者 曾缨 张成 +5 位作者 刘克玄 李才明 冯善伟 李群 柳太云 黄文 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第5期542-545,共4页
目的探讨成肌调节因子MyoD与myogenin在肌肉损伤修复过程中的动态表达。方法用盐酸布比卡因局部注射制作肌肉损伤模型,在损伤后不同时间点取腓肠肌行冰冻切片,HE染色显示损伤肌肉的病理变化,用SABC法检测MyoD与myogenin的表达。结果Myo... 目的探讨成肌调节因子MyoD与myogenin在肌肉损伤修复过程中的动态表达。方法用盐酸布比卡因局部注射制作肌肉损伤模型,在损伤后不同时间点取腓肠肌行冰冻切片,HE染色显示损伤肌肉的病理变化,用SABC法检测MyoD与myogenin的表达。结果MyoD在肌肉损伤后18 h开始表达,48 h达高峰;myogenin在肌肉损伤后24 h开始表达,72 h达高峰。结论MyoD与myogenin在肌肉损伤后的再生修复过程中起作用,可作为鉴定肌肉前体细胞和反映肌肉再生的指标。 展开更多
关键词 调节因子 MYOD MYOGENIN 肉损伤 修复过程 动态变化
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PI3K/Akt/mTOR信号通路在大鼠急性骨骼肌钝挫伤修复中的作用 被引量:23
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作者 张安宁 罗雪林 +6 位作者 黄思琴 唐成林 赵丹丹 罗翱 谭程方 代妮 于芒 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期594-600,共7页
目的:研究PI3K/Akt/mTOR信号通路在大鼠急性骨骼肌钝挫伤修复中的作用及变化趋势,探讨骨骼肌损伤修复的可能生物学机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组和损伤后1 d组、3 d组、5 d组、7 d组、14 d组,每组各6只,采用自制打击装置建立腓... 目的:研究PI3K/Akt/mTOR信号通路在大鼠急性骨骼肌钝挫伤修复中的作用及变化趋势,探讨骨骼肌损伤修复的可能生物学机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组和损伤后1 d组、3 d组、5 d组、7 d组、14 d组,每组各6只,采用自制打击装置建立腓肠肌钝挫伤模型。HE染色观察各组腓肠肌的形态结构;免疫印迹检测各组腓肠肌中磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化的蛋白激酶B(P-Akt Ser473)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(P-mTORSer2448)的蛋白表达量;逆转录实时定量聚合酶链反应检测腓肠肌中成肌分化抗原(MyoD)、肌细胞生成素(MyoG)的mRNA相对表达量。结果:(1)HE染色结果显示:损伤后1 d可见肌细胞变性坏死,炎性细胞浸润;损伤后3 d和5 d可见新生的成肌细胞和肌管;损伤后7 d和14 d可见新生肌细胞和胶原纤维。(2)免疫印迹结果显示:与正常对照组比较,损伤后1 d、3 d、14 d组的各蛋白表达量升高,差异无统计学意义(P>0.05);损伤后5 d组PI3K、Akt、P-Akt Ser473表达量显著升高(P<0.01),mTOR和P-mTORSer2448表达量显著升高(P<0.05);损伤后7 d组PI3K、P-Akt Ser473、mTOR、P-mTORSer2448表达量显著升高(P<0.05),Akt表达量显著升高(P<0.01)。(3)逆转录实时定量聚合酶链反应结果显示:与正常对照组比较,损伤后1 d组Myo D1和MyoG的mRNA表达量显著升高(P<0.05,P<0.01);损伤后3 d、5 d、7 d各组Myo D1和Myo G的mRNA表达量显著升高(P<0.01);损伤后14 d组MyoG的mRNA表达量显著升高(P<0.05),MyoD1的mRNA表达量升高,但无统计学意义(P>0.05)。结论:PI3K/Akt/mTOR信号通路具有时间规律性地正向调控骨骼肌钝挫伤后的自我修复,可以作为临床治疗及科学研究骨骼肌损伤的靶点。 展开更多
关键词 骨骼钝挫伤 PI3K/Akt/mTOR信号通路 分化抗原 细胞生
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结缔组织生长因子通过活化Erk-1/2信号通路促成肌纤维细胞生成 被引量:17
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作者 黄海长 杨敏 +1 位作者 李惊子 王海燕 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第19期1322-1326,共5页
目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)协同转化生长因子β1(TGFβ1)促进成肌纤维细胞生成分子机制。方法用TGFβ1预处理大鼠肾间质成纤维细胞(NRK49F),使部分细胞转化为成肌纤维细胞,然后将预处理后的细胞分为对照组,CTGF刺激组,TGFβ1刺激组... 目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)协同转化生长因子β1(TGFβ1)促进成肌纤维细胞生成分子机制。方法用TGFβ1预处理大鼠肾间质成纤维细胞(NRK49F),使部分细胞转化为成肌纤维细胞,然后将预处理后的细胞分为对照组,CTGF刺激组,TGFβ1刺激组和PD98059干预组。通过免疫细胞化学双染技术分别检测成肌纤维细胞标志蛋白α平滑肌肌动蛋白(αSMA)和掺入的细胞增殖标志物5溴2'脱氧尿嘧啶(BrdU);并以Western免疫印迹法检测αSMA水平。结果TGFβ1预处理的各组细胞都有胞浆内αSMA染色阳性,CTGF刺激组αSMA蛋白表达均明显高于对照组(P<0.05);但CTGF组部分αSMA阳性细胞核内BrdU阳性率明显高于对照组和TGFβ1组。进一步实验显示CTGF刺激细胞30min能明显诱导细胞内Erk1/2磷酸化,TGFβ1组无此反应。用PD98059阻断Erk1/2磷酸化可以明显抑制CTGF引起的细胞核内BrdU阳性表达和αSMA蛋白表达(P<0.05)。结论CTGF通过Erk1/2信号通路促进TGFβ1诱导的成肌纤维细胞增殖。 展开更多
关键词 结缔组织 生长因子 Erk-1/2 信号通路 纤维细胞
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电针血清对多裂肌卫星细胞增殖及Pax-7、成肌分化抗原、磷酸化蛋白激酶B表达的影响 被引量:21
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作者 刘通 于佳妮 +5 位作者 邹德辉 陈玉佩 卢宗孝 晏珺 张莉 霍则军 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期402-409,共8页
目的:观察电针血清对大鼠多裂肌卫星细胞增殖及Pax-7、成肌分化抗原(MyoD)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达的影响,从血清学角度探讨电针促进多裂肌损伤修复的部分作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针委中组、电针肾俞... 目的:观察电针血清对大鼠多裂肌卫星细胞增殖及Pax-7、成肌分化抗原(MyoD)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达的影响,从血清学角度探讨电针促进多裂肌损伤修复的部分作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针委中组、电针肾俞组,每组各8只,采用0.5%布比卡因肌肉注射复制多裂肌损伤模型,各电针组分别选取"委中"穴、"肾俞"穴进行电针治疗,每日1次,每次20min,4d后收集血清。原代培养大鼠腰多裂肌卫星细胞并进行鉴定,随机分为正常血清组、模型血清组、电针委中血清组、电针委中血清+LY 294002组、电针肾俞血清组、电针肾俞血清+LY 294002组,分别以各组血清培养24h,CCK-8、EdU法观察肌卫星细胞的增殖,Western blot法检测肌卫星细胞Pax-7、MyoD、p-Akt蛋白表达。结果:与正常血清组相比,模型血清组多裂肌卫星细胞增殖速度明显加快(P<0.01),两电针血清组又高于模型血清组(P<0.01)。与正常血清组相比,模型血清组MyoD、p-Akt表达明显升高(P<0.05),两电针血清组高于模型血清组(P<0.05,P<0.01)。与电针血清组相比,加LY 294002后,细胞增殖速度及MyoD、p-Akt表达均显著下降(P<0.01,P<0.05)。各组之间Pax-7蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:电针"委中"血清和电针"肾俞"血清均可通过磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B通路促进肌卫星细胞的增殖,且有促进成肌分化的趋势。 展开更多
关键词 电针血清 多裂卫星细胞 Pax-7 分化抗原 蛋白激酶B
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结缔组织生长因子增加TGFβ活化成肌纤维细胞的作用 被引量:14
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作者 杨敏 黄海长 +1 位作者 李惊子 王海燕 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2005年第1期25-29,共5页
探讨结缔组织生长因子 (CTGF)对转化生长因子 β1(TGFβ1)诱导成肌纤维细胞的影响及其与Smad信号通路的关系。细胞免疫组化检测成纤维细胞表型转化。Western免疫印迹法检测细胞α 平滑肌肌动蛋白 (α-SMA)及磷酸化Smad2的水平 ,免疫共... 探讨结缔组织生长因子 (CTGF)对转化生长因子 β1(TGFβ1)诱导成肌纤维细胞的影响及其与Smad信号通路的关系。细胞免疫组化检测成纤维细胞表型转化。Western免疫印迹法检测细胞α 平滑肌肌动蛋白 (α-SMA)及磷酸化Smad2的水平 ,免疫共沉淀检测Smad2 / 3与Smad4复合物的水平 ,提取核蛋白后再用Western免疫印迹法检测Smad2在细胞核内的聚积。结果显示CTGF不能使细胞表达α-SMA ,TGFβ1显著促进α- SMA表达 (p <0.0 1) ,CTGF加TGFβ1共同刺激又明显高于TGFβ1(p <0. 0 5 )。TGFβ1可明显诱导Smad2磷酸化、Smad2 / 3,4复合物形成以及Smad2在细胞核内的聚集 ,CTGF加TGFβ1联合刺激与TGFβ1相比没有明显变化。提示CTGF可以增强TGFβ1诱导的成肌纤维细胞生成 。 展开更多
关键词 TGFΒ1 SMAD2 CTGF 纤维细胞 Α-SMA 结缔组织生长因子 诱导 细胞核 磷酸化 信号传导
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阻断PI3K/AKT通路通过激活FoxO1抑制猪骨骼肌卫星细胞分化 被引量:17
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作者 史新娥 吴国芳 +4 位作者 宋子仪 路宏朝 贾龙 朱嘉宇 杨公社 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期154-160,共7页
【目的】在骨骼肌生长或损伤刺激下,骨骼肌卫星细胞被激活、增殖分化形成肌管,促进骨骼肌的生长发育或修复组织创伤。FoxO1负调控骨骼肌的生成,但在骨骼肌卫星细胞分化过程中的作用未见报道。因此,笔者探索FoxO1对猪骨骼肌卫星细胞分化... 【目的】在骨骼肌生长或损伤刺激下,骨骼肌卫星细胞被激活、增殖分化形成肌管,促进骨骼肌的生长发育或修复组织创伤。FoxO1负调控骨骼肌的生成,但在骨骼肌卫星细胞分化过程中的作用未见报道。因此,笔者探索FoxO1对猪骨骼肌卫星细胞分化的影响,希望为深入研究FoxO1调控骨骼肌生长发育的作用机理奠定基础。【方法】以1—3日龄健康大白猪为材料,采用单根肌纤维法分离培养猪骨骼肌卫星细胞,接种第2天、第4天和第6天在倒置显微镜下观察细胞形态并拍照。在细胞分化第8天,用免疫荧光染色方法染肌管,DAPI染核,并在荧光倒置显微镜下观察拍照。待细胞汇合至70%—80%时,将培养基换成含50 nmol·L-1渥曼青霉素(wortmannin,WM)的分化培养基,分别于细胞分化第0天、第4天和第8天收集细胞,提取总RNA和总蛋白,采用real-time qPCR和Western blotting方法检测WM对FoxO1以及骨骼肌卫星细胞分化标志基因表达的影响。【结果】猪骨骼肌卫星细胞在接种第2天开始贴壁,呈梭形。第4天细胞数量增加,部分发生融合。第6天时细胞呈方向性生长。第8天细胞进一步融合形成肌管。WM处理组的FoxO1 mRNA表达水平未发生显著变化(P>0.05),非磷酸化的FoxO1蛋白表达显著高于对照组(P<0.05),而p-FoxO1蛋白表达较对照组显著下降(P<0.05)。WM处理组的细胞在分化第8天,虽然也出现了蜂窝状生长,但是与对照组相比细胞未呈方向性生长并形成肌管。Western blotting结果显示,WM明显抑制猪骨骼肌卫星细胞分化早期标志基因MyoD、中后期标志基因MyoG和末期标志基因MyHC蛋白的表达。【结论】以WM阻断PI3K信号通路能使FoxO1去磷酸化,抑制猪骨骼肌卫星细胞的分化,延迟肌管的形成,并降低成肌分化标志基因MyoD、MyoG和MyHC的表达。总之,阻断PI3K信号通路通过激活FoxO1抑制猪骨骼肌卫星细胞分化。 展开更多
关键词 PI3K AKT通路 FOXO1 骨骼卫星细胞 分化 FOXO1
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失神经骨骼肌萎缩的研究现状 被引量:12
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作者 姜浩 徐建光 《国外医学(骨科学分册)》 2002年第1期12-14,共3页
本文从失神经后骨骼肌血管床的变化、肌卫星细胞的变化、肌细胞凋亡、生物因子、成肌调节因子等方面综述了失神经骨骼肌萎缩的病因、病理及防治研究的现状。
关键词 骨骼 失神经 萎缩 周围神经损伤 血管床 调节因子 病因 卫星细胞 细胞凋亡 生物因子 病理
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骨骼肌卫星细胞的生物学特性 被引量:10
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作者 申传安 柴家科 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期373-374,共2页
关键词 细胞生物学 卫星细胞 骨骼 调节因子
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MyoD基因诱导骨髓间充质干细胞分化为成肌细胞的实验研究 被引量:7
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作者 张勇 邹仲敏 +5 位作者 郭朝华 周进明 王劲 范文辉 罗成基 程天民 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期1423-1426,共4页
目的 探讨MyoD基因诱导骨髓间充质干细胞 (MSCs)分化为成肌细胞的可能性。方法 利用脂质体转染方法 ,将真核表达的双顺反子质粒载体pIRES2 EGFP MyoD转入MSCs中 ,G418筛选 ;用RT PCR检测MyoD的表达 ,扩增产物纯化测序鉴定 ;荧光显微... 目的 探讨MyoD基因诱导骨髓间充质干细胞 (MSCs)分化为成肌细胞的可能性。方法 利用脂质体转染方法 ,将真核表达的双顺反子质粒载体pIRES2 EGFP MyoD转入MSCs中 ,G418筛选 ;用RT PCR检测MyoD的表达 ,扩增产物纯化测序鉴定 ;荧光显微镜和激光共聚焦观察报告基因产物 ;免疫组化检测MyoD、myogenin、myosin、myoglobin、desmin的表达 ;电镜观察转染前后细胞超微结构的变化。结果 RT PCR可检测出转染后细胞表达MyoD ,扩增产物纯化测序与GeneBank比较完全一致 ;荧光显微镜和激光共聚焦观察均可见绿色荧光 ;免疫组化检测MyoD、myogenin、myosin、myoglobin、desmin表达均为阳性 ;转染后的MSCs观察表现为较为成熟细胞的形态学特点 ,且胞浆中有丝状物结构。结论 MyoD基因可成功诱导体外培养的骨髓MSCs分化为成肌细胞 。 展开更多
关键词 间充质干细胞 分化 MYOD 诱导
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血管成形术后外膜细胞表型转化和迁移的实验研究 被引量:10
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作者 王永利 贺能树 +4 位作者 张家兴 司同国 范海伦 葛夕洪 徐锐 《介入放射学杂志》 CSCD 2006年第7期424-429,共6页
目的观察和分析血管成形术后血管外膜成纤维细胞表型转化和外膜细胞向血管内膜的迁移。方法改良导丝法损伤24只大鼠颈总动脉(CCA),制作血管再狭窄模型;采用5-溴,2尿苷嘧啶(BrDU)标记增殖和迁移的成纤维细胞,以免疫组化,BrDU单染结合α-... 目的观察和分析血管成形术后血管外膜成纤维细胞表型转化和外膜细胞向血管内膜的迁移。方法改良导丝法损伤24只大鼠颈总动脉(CCA),制作血管再狭窄模型;采用5-溴,2尿苷嘧啶(BrDU)标记增殖和迁移的成纤维细胞,以免疫组化,BrDU单染结合α-肌动蛋白(α-actin)复染,光镜、扫描电镜和图像分析仪观察和分析损伤后3、7、14和28d,血管外、中和内膜上与BrDU结合的成纤维细胞的动态分布。结果1.免疫组化染色:BrDU结合的外膜成纤维细胞在术后第3天外膜上分布较多,至第7天达到峰值并表达α-actin,成纤维细胞发生表型转化成为成肌纤维细胞,细胞外基质(ECM)沉积;第14天,外膜上阳性细胞数下降,中膜和内膜上数量显著上升,内膜增厚,管腔狭窄;第28天,外膜、中膜和内膜阳性细胞数量回归到基线,但内膜ECM沉积较多,内膜仍增厚,管腔狭窄。不同时间点,血管三层结构内阳性细胞数比较均有显著差异(P<0.05)。2.电镜观察:血管成形术后,成纤维细胞胞质饱满,粗面内质网发达,表面分泌颗粒丰富,合成大量微丝束,转化为成肌纤维细胞;第7和14天,成肌纤维细胞形成宽大的伪足,分别伸向血管外弹力板窗孔和内弹力板窗孔,细胞呈腔内方向迁移趋势。结论血管成形术后血管外膜成纤维细胞发生表型转化,合成分泌α-actin;外膜成纤维细胞转化为成肌纤维细胞,向血管内膜迁移、增殖,成为新生内膜的细胞成分;外膜细胞和血管再狭窄有关。 展开更多
关键词 血管形术 血管外膜 纤维细胞 表型 迁移
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