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甲钴胺对牙髓干细胞体外成神经向分化的影响 被引量：3
1
作者 吴作栋 潘爽 +3 位作者 李艳萍 何丽娜 张维甲 牛玉梅 《医学综述》 CAS 2021年第5期1001-1006,1011,共7页
目的探讨甲钴胺对兔牙髓干细胞体外成神经向分化的影响。方法无菌环境下取出兔牙髓组织,分离培养兔牙髓干细胞。分别以25、50、100 mg/L的甲钴胺处理3 d后,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性,蛋白免疫印迹法检测巢蛋白(Nestin)的表达... 目的探讨甲钴胺对兔牙髓干细胞体外成神经向分化的影响。方法无菌环境下取出兔牙髓组织,分离培养兔牙髓干细胞。分别以25、50、100 mg/L的甲钴胺处理3 d后,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性,蛋白免疫印迹法检测巢蛋白(Nestin)的表达。选取100 mg/L的甲钴胺进行神经诱导,采用蛋白免疫印迹法和免疫荧光染色检测神经丝H(NF-H)和S100的表达,茜素红染色观察矿化结节。结果与对照组相比,不同浓度甲钴胺处理3 d后均可促进兔牙髓干细胞Nestin的表达,且对细胞活性无明显影响,100 mg/L甲钴胺组Nestin蛋白表达量高于50 mg/L甲钴胺组和25 mg/L甲钴胺组[(0.959±0.008)比(0.862±0.019)、(0.689±0.031)](P<0.05)。神经诱导实验显示,100 mg/L甲钴胺能促进兔牙髓干细胞NF-H和S100的表达,甲钴胺+神经诱导液组NF-H和S100的表达量均明显高于单纯诱导液组[(0.939±0.021)比(0.710±0.030)、(0.867±0.015)比(0.761±0.018)](P<0.05)。免疫荧光染色显示,100 mg/L的甲钴胺诱导后牙髓干细胞NF-H和S100呈阳性表达。茜素红染色结果显示,经过100 mg/L甲钴胺处理3 d后细胞排列呈以矿化结节为中心的火山口样、漩涡状,局部聚集成灶,矿化结节数多于对照组[(2.41±0.14)个比(0.82±0.11)个](P<0.05)。结论甲钴胺在体外能够促进兔牙髓干细胞的成神经向分化,可为临床上应用甲钴胺及牙髓干细胞治疗面神经损伤提供理论依据。 展开更多
关键词 甲钴胺 牙髓干细胞 成神经向分化 面神经损伤
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兔牙髓干细胞与雪旺细胞体外间接共培养对增殖和兔牙髓干细胞成神经向分化的研究 被引量：1
2
作者 张维甲 潘爽 +3 位作者 李艳萍 何丽娜 吴作栋 牛玉梅 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2020年第10期968-972,共5页
目的:体外间接共培养兔牙髓干细胞(rabbit dental pulp stems cells,rDPSCs)与兔雪旺细胞(rabbit Schwann cells,rSCs),研究两种细胞对彼此增殖的影响以及rSCs诱导rDPSCs神经向分化的可能性。方法:通过Transwell间接共培养系统构建rSCs/... 目的:体外间接共培养兔牙髓干细胞(rabbit dental pulp stems cells,rDPSCs)与兔雪旺细胞(rabbit Schwann cells,rSCs),研究两种细胞对彼此增殖的影响以及rSCs诱导rDPSCs神经向分化的可能性。方法:通过Transwell间接共培养系统构建rSCs/rDPSCs间接共培养体系,采用MTT法检测两种细胞对彼此增殖的影响;通过免疫荧光染色和Western bolt检测S-100β和NF-H的表达,研究rSCs诱导rDPSCs神经向分化的可能性。结果:将rDPSCs与rSCs以1∶2比例间接共培养5 d时,rDPSCs能够促进rSCs的增殖(P<0.05),同时rSCs对rDPSCs的增殖也有明显的促进作用(P<0.05);在与rSCs间接共培养7 d与14 d后,rDPSCs形态与神经细胞类似,并表达S-100β和NF-H,并且14 d时两种蛋白表达更高(P<0.01)。结论:将rDPSCs与rSCs间接共培养,5 d时rDPSCs与rSCs能显著促进彼此的增殖,且rSCs能诱导rDPSCs神经向分化。 展开更多
关键词 兔牙髓干细胞 兔雪旺细胞 间接共培养 细胞增殖 成神经向分化
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小鼠胚胎间充质干细胞系C3H／10T1／2的多向分化潜能研究 被引量：4
3
作者 王明科 邹仲敏 +5 位作者 粟永萍 罗成基 王军平 冉新泽 王涛 闫国和 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第21期2029-2033,共5页
目的建立小鼠胚胎间充质干细胞系C3H/10T1/2细胞成肌、成脂、成内皮、成神经元分化的细胞实验模型。方法用化学诱导剂5-氮杂胞苷诱导C3H/10T1/2细胞成肌、成脂,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维... 目的建立小鼠胚胎间充质干细胞系C3H/10T1/2细胞成肌、成脂、成内皮、成神经元分化的细胞实验模型。方法用化学诱导剂5-氮杂胞苷诱导C3H/10T1/2细胞成肌、成脂,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)联合诱导C3H/10T1/2细胞成内皮,bFGF、β-巯基乙醇(β-mercaptoethanol,β-ME)、DMSO诱导C3H/10T1/2细胞成神经元细胞分化。诱导期间应用细胞形态学观察、油红"O"染色、免疫细胞化学染色检测内皮细胞表面标志CD31和神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)对分化细胞进行鉴定。结果5-氮杂胞苷诱导C3H/10T1/210d后细胞变长,17d后可见明显肌管形成,15d少量细胞出现脂滴,25d油红"O"染色见细胞质大量红色脂滴;VEGF和bFGF诱导5d后细胞呈现"鹅卵石"样形态,8d后阳性表达CD31;bFGF、β-巯基乙醇和DMSO联合诱导3d后细胞胞体收缩,突起变长,15dNSE染色阳性。结论C3H/10T1/2细胞具有多向分化的潜能,可用作研究间充质干细胞生物学特性的模型。 展开更多
关键词 C3H/10T1/2 成肌分化 成脂分化 成内皮分化 成神经元分化
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人神经干细胞在宿主鼠脑内分化成神经元呈脑位点特征 被引量：1
4
作者 尹国才 栾佐 +5 位作者 胡晓红 屈素青 卜笑松 张晓鸥 吴南海 钱阳明 《海军总医院学报》 2005年第4期196-200,共5页
目的研究人胎脑神经干细胞植入年幼大鼠脑后的成神经元分化作用,探讨神经干细胞替代治疗小儿脑病的可行性。方法自孕16周的胎脑组织分离培养出神经干细胞球,在小儿脑脊液中培养诱导分化以证明其分化潜能。将培养14 d的神经干细胞球移植1... 目的研究人胎脑神经干细胞植入年幼大鼠脑后的成神经元分化作用,探讨神经干细胞替代治疗小儿脑病的可行性。方法自孕16周的胎脑组织分离培养出神经干细胞球,在小儿脑脊液中培养诱导分化以证明其分化潜能。将培养14 d的神经干细胞球移植10 d龄鼠的侧脑室内,于移植后第4、7、14天杀鼠取脑,切片,行人神经丝特异性标志的免疫荧光分析,显示神经元的分布和细胞形态。结果培养获得典型神经干细胞球,呈漂浮生长,在小儿脑脊液中能分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。用抗人神经丝混合单抗检测移植物的成神经元分化,移植后的第4天,观察到阳性反应细胞在颗粒层表现为颗粒性细胞,锥体细胞层则出现长突起的锥体细胞,还有连接神经元样中间神经元,小脑内有单层排列的浦肯野细胞。对比各时间点的观察结果,阳性细胞分布位置未变。随着移植后天数的后延,阳性细胞数量呈减少趋势,但锥体细胞的突起明显加长。结论体外培养获得的人神经干细胞脑室途径移植年幼大鼠,在脑内发生迁移,并分化成形态上与其临近宿主细胞一致的神经元。提示宿主脑组织局部微环境在引导移植物分化成神经元中发挥了重要作用。 展开更多
关键词 人胎脑神经干细胞 移植 成神经元分化 年幼大鼠
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人胎脑神经干细胞在年幼大鼠脑内的成神经元分化
5
作者 尹国才 张长征 +2 位作者 张淼涛 魏和平 吴甘霖 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期2281-2284,共4页
目的:脑组织中不同部位的的神经元因功能不同具有特定的细胞形态,移植的神经干细胞能不能在相应部位分化成其相应的神经元还不明确。实验拟观察人胎脑神经干细胞植入年幼大鼠脑后的成神经元分化的作用,探讨神经干细胞替代治疗小儿脑病... 目的:脑组织中不同部位的的神经元因功能不同具有特定的细胞形态,移植的神经干细胞能不能在相应部位分化成其相应的神经元还不明确。实验拟观察人胎脑神经干细胞植入年幼大鼠脑后的成神经元分化的作用,探讨神经干细胞替代治疗小儿脑病的可行性。方法:实验于2007-04/07在海军总医院细胞实验室内完成。①实验材料:16周孕龄的人胎脑组织由海军医院妇产科提供,实验经孕妇及家属知情同意,并经医院伦理委员会批准。14只出生后10d的同窝年幼SD大鼠,雌雄不分,由北京大学医学部实验动物中心提供,为二级清洁动物,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。②实验方法:自孕16周的人胎脑组织分离培养神经干细胞球,在脑脊液中培养诱导分化实验以证明其分化潜能。将培养14d的神经干细胞球移植于10d龄大鼠侧脑室内,于移植后第4,7,14天行人神经丝特异性标志的免疫荧光分析,显示神经元的分布和细胞形态。结果:①培养获得典型神经干细胞球,呈漂浮生长,在小儿脑脊液中能分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。②采用抗人神经丝混合单抗检测移植物的成神经元分化,移植后第4天,观察到阳性反应细胞在颗粒层表现为颗粒性细胞,锥体细胞层则出现长突起的锥体细胞,还有连接神经元样中间神经元,小脑内有单层排列的浦肯野细胞。对比各时间点的观察结果,阳性细胞分布位置未变,随着移植后天数的后延,阳性细胞数量呈减少趋势,但锥体细胞的突起明显加长。结论:体外培养获得的人神经干细胞经脑室途径移植于年幼大鼠,在脑内发生迁移,并分化成形态上与其所在位置的宿主细胞一致的神经元。提示宿主脑组织微环境在引导移植物分化成神经元中发挥了重要作用,该结果对细胞替代治疗小儿脑病有重要启示意义。 展开更多
关键词 人胎脑神经干细胞 年幼大鼠 移植 成神经元分化
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WDR63促进人根尖牙乳头干细胞成神经分化功能
6
作者 周家玮 范志朋 《口腔生物医学》 2024年第4期193-199,共7页
目的:研究WD重复结构域63(WDR63)对人根尖牙乳头干细胞(SCAPs)体外成神经分化能力的作用。方法:通过实时荧光定量PCR检测未转染慢病毒SCAPs中WDR63基因在成神经分化诱导3、6、9 d的表达变化,利用慢病毒转染分别获得WDR63稳定过表达和敲... 目的:研究WD重复结构域63(WDR63)对人根尖牙乳头干细胞(SCAPs)体外成神经分化能力的作用。方法:通过实时荧光定量PCR检测未转染慢病毒SCAPs中WDR63基因在成神经分化诱导3、6、9 d的表达变化,利用慢病毒转染分别获得WDR63稳定过表达和敲低的SCAPs,通过类神经球形成实验对各组SCAPs进行神经分化诱导,对类神经球的直径进行定量分析,免疫荧光染色实验检测SCAPs中巢蛋白(Nestin)和βⅢ-微管蛋白(βⅢ-tubulin)的表达,实时荧光定量PCR实验检测神经分化相关指标βⅢ-tubulin、神经源性分化蛋白(NeuroD)、神经细胞黏附分子(NCAM)和Nestin基因的表达。结果:未转染慢病毒SCAPs中WDR63的表达量在成神经分化后的3、6、9 d逐渐增加(P<0.05);过表达WDR63后,WDR63基因(P<0.001)和蛋白表达增加,神经球直径增加(P<0.01),Nestin和βⅢ-tubulin神经球样细胞荧光强度增加(P<0.01),βⅢ-tubulin、NeuroD、NCAM和Nestin基因表达升高(P<0.05);敲低WDR63后,WDR63基因(P<0.01)和蛋白的表达降低,神经球直径降低(P<0.05),Nestin和βⅢ-tubulin神经球样细胞荧光强度减少(P<0.05),βⅢ-tubulin、NeuroD、NCAM和Nestin基因表达降低(P<0.05)。结论:WDR63可促进SCAPs的成神经分化功能。 展开更多
关键词 根尖牙乳头干细胞 成神经分化 WDR63 类神经球 神经分化指标
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大鼠骨髓间充质干细胞在静电纺丝素/聚乳酸纳米纤维上的培养及成神经诱导 被引量：3
7
作者 宋琳 朱爱思 +5 位作者 徐路尧 张锋 左宝齐 王敏 包普花 张焕相 《苏州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第3期396-399,F0002,共5页
目的通过将骨髓间充质干细胞(BMSCs)培养在静电纺丝素/聚乳酸纳米纤维上,研究BMSCs的生长及成神经分化情况。方法用家蚕丝素、柞蚕丝素分别与聚乳酸共混制成静电纺丝素/聚乳酸纳米纤维,将第5代大鼠BMSCs培养其上,于24h后通过活细胞工作... 目的通过将骨髓间充质干细胞(BMSCs)培养在静电纺丝素/聚乳酸纳米纤维上,研究BMSCs的生长及成神经分化情况。方法用家蚕丝素、柞蚕丝素分别与聚乳酸共混制成静电纺丝素/聚乳酸纳米纤维,将第5代大鼠BMSCs培养其上,于24h后通过活细胞工作站观察细胞的黏附情况,并进行表型鉴定及存活检测。接种后待细胞长至60%左右,用bFGF/BHA诱导细胞成神经分化,并设多聚赖氨酸组进行对照。在诱导5h和维持48h时,观察细胞的形态学改变,通过免疫荧光法鉴定神经细胞特异性标志物Nestin,β-Ⅲ-Tubulin和NCAM的表达并进行定量统计分析。结果BMSCs在静电纺丝素/聚乳酸纳米纤维上的黏附情况良好,细胞生长于纳米纤维上。存活检测中几乎未发现死细胞,多数细胞在材料上可存活。神经分化的形态学改变与多聚赖氨酸组一致,并且培养在纳米纤维上的细胞分化时出现的突起可缠绕在纺丝纤维上。神经特异标志的表达情况与多聚赖氨酸对照组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论静电纺丝素/聚乳酸纳米纤维具有良好的生物相容性,可支持BMSCs的黏附及成神经分化,且对细胞生存无毒性。 展开更多
关键词 静电纺丝素 聚乳酸纳米纤维 骨髓间充质干细胞 成神经分化
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牙髓干细胞治疗神经系统疾病的研究进展 被引量：2
8
作者 赵哲 赵红宇 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第10期925-927,共3页
牙髓干细胞是来源于神经嵴的间充质干细胞,具有自我更新和多向分化能力,在特定条件下可以分化为骨细胞、脂肪细胞、神经细胞等。牙髓干细胞分泌多种神经营养因子并表达神经标记物,许多研究已证实其在神经修复再生方面有巨大的潜力,本文... 牙髓干细胞是来源于神经嵴的间充质干细胞,具有自我更新和多向分化能力,在特定条件下可以分化为骨细胞、脂肪细胞、神经细胞等。牙髓干细胞分泌多种神经营养因子并表达神经标记物,许多研究已证实其在神经修复再生方面有巨大的潜力,本文就牙髓干细胞特性、成神经分化方案、中枢神经和周围神经损伤修复的研究进行综述。 展开更多
关键词 牙髓干细胞 成神经分化 神经损伤
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脂肪间充质干细胞成神经元诱导分化研究进展 被引量：1
9
作者 出晓军 程飚 《国际骨科学杂志》 2010年第2期108-109,124,共3页
增加具有完整功能的种子细胞数目及提高其定向分化能力一直是组织工程研究的重要课题。脂肪间充质干细胞(ADSC)诸多优点在成体干细胞研究中备受青睐,有望成为组织工程种子细胞的新成员。该文就神经组织工程中ADSC生物学特性、获取与培... 增加具有完整功能的种子细胞数目及提高其定向分化能力一直是组织工程研究的重要课题。脂肪间充质干细胞(ADSC)诸多优点在成体干细胞研究中备受青睐,有望成为组织工程种子细胞的新成员。该文就神经组织工程中ADSC生物学特性、获取与培养、成神经元分化能力及其与生物支架的相容性等方面的研究进展,作一综述。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 成神经元诱导分化 组织工程
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