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NELL-1调控RUNX2的P1启动子诱导成骨分化 被引量：7
1
作者 张弘 姚宇 +2 位作者 孙佳栋 于潇楠 张志光 《中华口腔医学研究杂志（电子版）》 CAS 2017年第4期197-203,共7页
目的探讨骨生长因子Nel样蛋白1(NELL-1)与骨核心转录因子RUNX2之间的调控机制。方法构建并产生含RUNX2的P1启动子和绿色荧光蛋白报告基因的慢病毒,感染小鼠骨髓间充质细胞系M2-10B4细胞,通过流氏细胞仪检测绿色荧光蛋白细胞记数值,观察... 目的探讨骨生长因子Nel样蛋白1(NELL-1)与骨核心转录因子RUNX2之间的调控机制。方法构建并产生含RUNX2的P1启动子和绿色荧光蛋白报告基因的慢病毒,感染小鼠骨髓间充质细胞系M2-10B4细胞,通过流氏细胞仪检测绿色荧光蛋白细胞记数值,观察不同浓度外源NELL-1蛋白对RUNX2的P1启动子的调控作用。茜素红染色半定量法检测NELL-1促进M2-10B4细胞成骨作用以及实时定量聚合酶链反应(PCR)检测NELL-1蛋白对小鼠M2-10B4细胞成骨相关基因表达的影响。采用单因素方差分析数据。结果当加入800和1600 ng/ml NELL-1蛋白时,NELL-1蛋白组绿色荧光蛋白细胞记数值分别较对照组增高82.09%、92.36%,且差异均有统计学意义(F_(N800)=26.979,P_(N800)<0.05;F_(N1600)=28.410,P_(N1600)<0.01)。茜素红染色定量检测结果表明,800 ng/ml NELL-1组小鼠M2-10B4细胞较对照组产生的矿化结节升高约73.41%,差异具有统计学意义(F_(N800)=31.179,P_(N800)<0.01)。实时定量PCR结果显示,NELL-1蛋白促进成骨相关基因骨核心转录因子RUNX2、骨桥蛋白(OPN)、骨钙蛋白(OCN)和碱性磷酸酶(ALP)表达上调。结论 NELL-1蛋白可以通过调控RUNX2的P1启动子促进RUNX2表达诱导骨髓间充质细胞成骨分化。 展开更多
关键词 骨髓 基质细胞 小鼠 NELL-1基因 成骨分化 慢病毒属载体
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