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老年髋部骨折手术前后血清B型尿钠肽和心肌肌钙蛋白的变化 被引量：13
1
作者 高长虹 李震花 张涛 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第22期2042-2045,共4页
[目的]探讨血清B型尿钠肽(BNP)、心肌肌钙蛋白T(c Tn T)检测在老年髋部骨折围手术期心脏评估的意义。[方法]2010年1月~2015年1月于本院进行治疗的142例髋部骨折患者分为低龄组和高龄组,将两组患者术前24 h及术后1、3 d血清BNP、c Tn T... [目的]探讨血清B型尿钠肽(BNP)、心肌肌钙蛋白T(c Tn T)检测在老年髋部骨折围手术期心脏评估的意义。[方法]2010年1月~2015年1月于本院进行治疗的142例髋部骨折患者分为低龄组和高龄组,将两组患者术前24 h及术后1、3 d血清BNP、c Tn T水平进行检测及比较。[结果]两组BNP检测结果显示:低年龄组及高年龄组术后1、3 d均较术前1 d升高,差异有统计学意义(P<0.05),高年龄组在相同时间点明显高于低年龄组,尤其是术后变化更加明显,相同时间点两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组c Tn T测量结果显示:低年龄组及高年龄组术后1、3 d均较术前1 d升高,差异有统计学意义(P<0.05),术后高年龄组在相同时间点明显高于低年龄组,术后3 d两组间比较差异有统计学意义(P<0.05),术前1 d、术后1 d高年龄组有升高趋势,但相同时间点两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。患者年龄与血清BNP、c Tn T检测值的Pearson相关分析显示具有一定相关性。[结论]血清BNP、c Tn T是敏感的心肌梗死及心力衰竭标志物,二者在老年髋部骨折围手术期心脏评估中动态变化价值较高,骨折患者随其年龄及手术升高变化,具有一定规律性。 展开更多
关键词 B型尿钠肽(BNP) 心肌肌钙蛋白T(c TN T) 髋部骨折 风险评估 心血管事件
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心肌肌钙蛋白Ⅰ自身抗体间接酶联免疫吸附分析法的建立 被引量：3
2
作者 吴豫 唐古生 +1 位作者 赵伟国 沈茜 《东南国防医药》 2011年第3期211-213,230,共4页
目的建立以重组心肌肌钙蛋白I-C(cTnI-C)融合蛋白为包被抗原的间接酶联免疫吸附分析法(ELISA),检测人血循环中的抗cTnI自身抗体,为判断心肌损伤的预后提供依据。方法采用自行构建表达的cTnI-C融合蛋白作为包被抗原,以棋盘法优化实验条件... 目的建立以重组心肌肌钙蛋白I-C(cTnI-C)融合蛋白为包被抗原的间接酶联免疫吸附分析法(ELISA),检测人血循环中的抗cTnI自身抗体,为判断心肌损伤的预后提供依据。方法采用自行构建表达的cTnI-C融合蛋白作为包被抗原,以棋盘法优化实验条件,建立检测人血清cTnI自身抗体的间接ELISA方法。采用建立的间接ELISA法在121例急性心肌梗死(AMI)中筛查抗cTnI自身抗体,并用蛋白印迹法(WB)进行确证。结果 121例AMI血清抗cTnI抗体的阳性率为10.74%,ELISA试验的灵敏度100%,特异性95.37%,Kappa值为0.815。结论以cTnI-C融合蛋白作为包被蛋白建立的间接ELISA法具有良好的敏感度、特异性,可用于人血清抗cTnI自身抗体的筛查。 展开更多
关键词 心肌梗死 重组人心肌肌钙蛋白I-c 肌钙蛋白c 人循环心肌肌钙蛋白I自身抗体 间酶联免疫吸附分析法
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cTnI-C质控物制备与评价 被引量：1
3
作者 卢艳华 周志伟 +2 位作者 陈小燕 卢航 王小明 《生物化工》 2022年第1期38-43,共6页
目的:研制人心肌肌钙蛋白I-C(cTnI-C)质控物,并评价cTnI-C质控物的免疫反应性、均一性和稳定性。方法:使用重组的cTnI-C复合蛋白制备质控品,筛选合适基质和冻干保护剂,获得稳定的cTnI-C质控物。结果:胎牛血清基质更有利于cTnI-C质控物... 目的:研制人心肌肌钙蛋白I-C(cTnI-C)质控物,并评价cTnI-C质控物的免疫反应性、均一性和稳定性。方法:使用重组的cTnI-C复合蛋白制备质控品,筛选合适基质和冻干保护剂,获得稳定的cTnI-C质控物。结果:胎牛血清基质更有利于cTnI-C质控物的稳定,添加3%海藻糖可显著提高cTnI-C质控物的热稳定性,质控物瓶间均一性无显著差异(F<2.39),37℃加速条件下可保存14 d,2~8℃贮存有效期为13个月,复溶后在2~8℃下可保存7 d。结论:本研究制备的cTnI-C质控物的免疫反应性、均一性和稳定性良好,可作为cTnI检测系统的校准物和质控物原料,提高临床实验室cTnI检测质量。 展开更多
关键词 心肌肌钙蛋白I-c(cTnI-c) 质控物 冻干保护剂 均一性 稳定性
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人心肌肌钙蛋白I-C融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化 被引量：1
4
作者 闫存玲 徐国宾 夏铁安 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第9期812-817,共6页
提取人心肌组织总RNA,RT PCR扩增出人心肌肌钙蛋白I(cardiactroponinI,cTnI)和肌钙蛋白C(TnC)基因,利用人工合成的可编码 19个中性氨基酸残基为主的DNA序列(Linker),将cTnI和TnC基因连接,插入到质粒pET15b中,将鉴定正确的重组pET15b质... 提取人心肌组织总RNA,RT PCR扩增出人心肌肌钙蛋白I(cardiactroponinI,cTnI)和肌钙蛋白C(TnC)基因,利用人工合成的可编码 19个中性氨基酸残基为主的DNA序列(Linker),将cTnI和TnC基因连接,插入到质粒pET15b中,将鉴定正确的重组pET15b质粒转化入大肠杆菌BL2 1(DE3)pLysS中,用异丙基 β D$C硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白质表达.结果在大肠杆菌中成功实现了全长cTnI C融合蛋白(cTnI linker TnC)的稳定可溶性高表达,在摇瓶中表达量可达 2 1mg/L.利用目的蛋白N端的组氨酸 标签"(His tag),经一步Ni2 + Sepharose柱亲和层析纯化,得到了聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)纯蛋白质.经初步研究,cTnI C具有较好的免疫原性和稳定性,有望成为cTnI测定系统可溯源的候选参考物质。 展开更多
关键词 心肌肌钙蛋白I-c 融合蛋白 表达 纯化
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羟苯氨酮对心肌肌钙蛋白C与Ca^(2+)亲和力的影响 被引量：7
5
作者 张毅 叶益新 乔小英 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第9期658-661,共4页
目的：探讨羟苯氨酮（ｏｘｙｐｈｅｎａｍ ｏｎｅ ， Ｏｘｙ） 的钙增敏机理。方法：从牛心肌组织中提取ｃ Ｔｎ Ｃ，采用荧光探针标记法观察 Ｏｘｙ 对ｃ Ｔｎ Ｃ 与 Ｃａ２ ＋ 亲和力的影响，并和已知的钙增敏剂 Ｍ Ｃ Ｉ１５４... 目的：探讨羟苯氨酮（ｏｘｙｐｈｅｎａｍ ｏｎｅ ， Ｏｘｙ） 的钙增敏机理。方法：从牛心肌组织中提取ｃ Ｔｎ Ｃ，采用荧光探针标记法观察 Ｏｘｙ 对ｃ Ｔｎ Ｃ 与 Ｃａ２ ＋ 亲和力的影响，并和已知的钙增敏剂 Ｍ Ｃ Ｉ１５４ 、磺甲唑（ｓｕｌｍａｚｏｌｅ ， Ｓｕｌ） 作比较。结果： Ｏｘｙ 显著增加ｃ Ｔｎ Ｃ 和 Ｃａ２ ＋ 的亲和力，且呈剂量与效应相关。而５０ μｍ ｏｌ· Ｌ－ １ Ｍ Ｃ Ｉ１５４ 或 Ｓｕｌ 对ｃ Ｔｎ Ｃ 和 Ｃａ２ ＋ 亲和力曲线均无显著影响。结论： Ｏｘｙ 的钙增敏机理可能与直接增加ｃ Ｔｎ Ｃ 与 Ｃａ２ ＋ 的亲和力有关。 展开更多
关键词 羟苯氨酮 心肌肌钙蛋白c 钙增敏剂 磺甲唑
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电针预处理对急性心肌缺血再灌注改进模型大鼠的影响 被引量：7
6
作者 戴求福 伍舒扬 +8 位作者 辛娟娟 刘群 陆凤燕 周晨 陈安莉 高俊虹 赵玉雪 喻晓春 景向红 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期2002-2006,共5页
目的:在改进大鼠心肌缺血再灌注模型的基础上,给予电针预处理,观察针刺内关穴对大鼠急性心肌缺血再灌注模型的预防性治疗作用。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针预处理组,选择大鼠双侧"内关"穴进行连续3d的电针预处理... 目的:在改进大鼠心肌缺血再灌注模型的基础上,给予电针预处理,观察针刺内关穴对大鼠急性心肌缺血再灌注模型的预防性治疗作用。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针预处理组,选择大鼠双侧"内关"穴进行连续3d的电针预处理后,通过改进的造模方法建立缺血再灌注损伤模型,记录心电变化,并于再灌注结束后,进行伊文思蓝-TTC双染色及心律失常评分,采用多重荧光Western Blot法检测损伤局部心肌组织中Troponin C/Ⅰ蛋白相对表达量及其比值。结果:模型组和电针预处理组大鼠心脏结扎以后ST段显著性上抬,呈典型的"墓碑"样变。电针预处理组自再灌1min后ST段逐渐降低至正常组相应水平,与模型组对应时间点ST段幅值比较均降低(P<0.05)。电针预处理组的危险区比例和心律失常评分较模型组显著减少(P<0.01)。与正常组比较,模型组cTnⅠ相对表达量显著降低(P<0.01),cTnC/Ⅰ的比值显著升高(P<0.01);而电针预处理组的cTnC、cTnⅠ相对表达量及cTnC/Ⅰ的比值均降低。与模型组比较,电针预处理组的cTnC相对表达量及cTnC/Ⅰ的比值显著降低(P<0.01),cTnⅠ相对表达量则显著升高(P<0.01)。结论:改进的急性心肌缺血再灌注模型更加稳定可靠,而电针预处理能够有效的降低心肌缺血再灌注导致的心肌损伤。 展开更多
关键词 电针预处理 心肌缺血再灌注 内关 心肌肌钙蛋白c 心肌肌钙蛋白Ⅰ
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心肌肌钙蛋白I-C复合物酶联免疫检测方法的建立 被引量：4
7
作者 李瑞 朱乃硕 《复旦学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期517-523,共7页
为了制备抗人心肌肌钙蛋白I(cTnI)单克隆抗体、建立检测人cTnI链酶亲和素-生物素双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,用基因工程表达的人cTnI免疫雌性BALB/c小鼠,以杂交瘤技术制备得到三株特异性抗人cTnI的单克隆抗体记为6G3,6A6,3... 为了制备抗人心肌肌钙蛋白I(cTnI)单克隆抗体、建立检测人cTnI链酶亲和素-生物素双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,用基因工程表达的人cTnI免疫雌性BALB/c小鼠,以杂交瘤技术制备得到三株特异性抗人cTnI的单克隆抗体记为6G3,6A6,3G9.三株杂交瘤细胞中6G3和6A6为IgG1,3G9为IgG2b,腹水效价分别为4 × 10-5,4×10-5和10-5.亲和常数为5.0×109,6.4×109和3.8×109 mol-1.Western blotting结果表明6G3和6A6能够识别cTnI-C复合物.把6G3抗体生物素化并制备抗cTnI,cTnC和cTnI-C的大鼠多克隆抗体.以多抗作为固相捕捉抗体,生物素化6G3抗体作为检测抗体,建立检测cTnI的双抗体夹心ELISA方法并初步应用于临床病人标本检测.以cTnI-C复合物多抗捕捉检测方法具有良好的灵敏度、特异性和准确性,灵敏度为0.9 ng/mL,较包被其他抗体捕捉方法提高1～2倍.批内变异系数为5.03%,回收率为94.56%.测定17例AMI病人和18例血清样本临床诊断结果符合率为100%. 展开更多
关键词 心肌肌钙蛋白I 心肌肌钙蛋白c 单克隆抗体 酶联免疫吸附测定 生物素
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人心肌肌钙蛋白C两种突变转基因小鼠模型建立与对比分析 被引量：2
8
作者 高珊 陈伟 +5 位作者 刘宁 葛文萍 高翔 吕丹 张连峰 董伟 《中国比较医学杂志》 CAS 2014年第3期67-71,F0003,共6页
目的为建立心肌组织特异性表达人cTnCD145E和cTnCG159D突变基因转基因小鼠,为对比分析两种不同心肌病的发生发展建立模型。方法利用定点突变技术分别制备人cTnC基因的cTnCD145E和cTnCG159D两个突变体,随后插入心肌特异性表达启动子α-MH... 目的为建立心肌组织特异性表达人cTnCD145E和cTnCG159D突变基因转基因小鼠,为对比分析两种不同心肌病的发生发展建立模型。方法利用定点突变技术分别制备人cTnC基因的cTnCD145E和cTnCG159D两个突变体,随后插入心肌特异性表达启动子α-MHC下游构建人cTnCD145E和cTnCG159D基因转基因载体。通过显微注射法建立转基因C57BL/6小鼠。利用心脏超声和病理观察对比分析不同年龄转基因小鼠心脏的结构与功能。结果建立了心肌组织高表达人cTnCD145E和cTnCG159D突变基因转基因小鼠,cTnCD145E和cTnCG159D转基因小鼠随年龄增加,有分别向HCM和DCM发展的趋势,12月龄时,cTnCD145E转基因小鼠收缩末期和舒张末期左室容积(left ventricle end-diastolic volume and end-systolic volume,EDV and ESV)与同窝阴性小鼠相比下降,射血分数(ejection fraction,EF)和收缩末期左心室后壁厚度(left ventricle end-systolic posterior wall thickness,ESPWT)增加,而cTnCG159D转基因小鼠EDV和ESV与同窝阴性小鼠相比上升,EF和ESPWT减少。结论心肌组织特异性表达人cTnCD145E突变基因转基因小鼠表现肥厚型心肌病病理表型,而心肌组织特异性表达人cTnCG159D突变基因转基因小鼠表现扩张型心肌病病理表型,二者可作为对比研究由不同发病机制导致的心肌病模型。 展开更多
关键词 肥厚型心肌病 扩张型心肌病 转基因小鼠 心脏超声
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左西孟旦治疗中重度心力衰竭的疗效 被引量：3
9
作者 祝兴超 侯小锋 雍永宏 《江苏医药》 CAS 北大核心 2013年第15期1840-1841,共2页
随着老龄化社会的到来,心力衰竭的发病率明显增高,心力衰竭已成为老年人患病和死亡的主要原因之一。在我国治疗心力衰竭的药物包括正性肌力药、利尿剂、血管扩张剂、血管紧张素转换酶抑制剂、β2受体阻滞剂等。左西孟旦选择性与心肌肌... 随着老龄化社会的到来,心力衰竭的发病率明显增高,心力衰竭已成为老年人患病和死亡的主要原因之一。在我国治疗心力衰竭的药物包括正性肌力药、利尿剂、血管扩张剂、血管紧张素转换酶抑制剂、β2受体阻滞剂等。左西孟旦选择性与心肌肌钙蛋白C的N-末端结合,稳定心肌钙键,增强心肌肌钙蛋白C对钙离子的敏感性,增强心肌收缩力,但不提高细胞内的钙离子浓度,对心率影响较小, 展开更多
关键词 中重度心力衰竭 左西孟旦 血管紧张素转换酶抑制剂 治疗 心肌肌钙蛋白c β2受体阻滞剂 钙离子浓度 疗效
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重组cTnI-cTnC复合抗原的制备及其性能验证 被引量：1
10
作者 武强 史定刚 丁建静 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2020年第5期530-534,共5页
目的采用E.coli表达系统分别表达心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)和cTnC,制备cTnI-cTnC二元复合蛋白,并验证其抗原性能。方法将合成的cTnI和cTnC基因片段分别插入pET-22b和pET-28a原核表达载体,构建重组表达质粒,并分别转化E.co... 目的采用E.coli表达系统分别表达心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)和cTnC,制备cTnI-cTnC二元复合蛋白,并验证其抗原性能。方法将合成的cTnI和cTnC基因片段分别插入pET-22b和pET-28a原核表达载体,构建重组表达质粒,并分别转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达。将表达的cTnI和cTnC蛋白经Ni2+螯合亲和层析和离子交换层析两步纯化后,在Ca2+存在的条件下按摩尔比1︰1混合,制备cTnI-cTnC二元复合蛋白。采用双抗夹心ELISA法检测复合蛋白的抗原反应性;将cTnI单体和cTnI-cTnC复合蛋白稀释后,均分别于4和37℃条件下放置14 d,检测cTnI抗原放置前后的浓度变化,验证其储存稳定性。结果纯化的cTnI和cTnC重组蛋白的SDSPAGE纯度均达90%以上。与对照抗原(8IC63二元复合抗原)比较,cTnI-cTnC复合蛋白与抗体反应信号较强,且能够同时被cTnI和cTnC抗体识别;经37℃热加速试验后,cTnI单体蛋白浓度降低约80%,而cTnI-cTnC复合蛋白的浓度变化幅度在±15%间。结论制备的cTnI-cTnC二元复合蛋白具有良好的抗原反应性和储存稳定性,为下一步制备反应性良好和储存稳定的cTnI检测质控校准品提供了可靠的原料。 展开更多
关键词 心肌肌钙蛋白I 心肌肌钙蛋白c 大肠埃希菌 复合抗原 抗原反应性 储存稳定性
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