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题名新生SD大鼠心肌细胞的原代培养
被引量：6
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作者
孟云辉
李永新
于慧卿
刘晓燕
刘真
王强
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机构
石家庄市中医院
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出处
《中西医结合心脑血管病杂志》
2014年第1期78-79,共2页
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基金
河北省中医药管理局基金课题(No.2011053)
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文摘
目的探讨新生SD大鼠心肌细胞原代培养的方法,并进行鉴定。方法取24h以内的新生SD大鼠,采用胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶联合消化的方法分离心肌细胞,进行两次差速贴壁法并加用化学抑制剂5-溴脱氧尿嘧啶纯化心肌细胞,采用Actin免疫组化对心肌细胞进行鉴定。结果本实验方法心肌细胞的存活率为93.83%,最早在6h内观察到心肌细胞搏动,24h内大部分心肌细胞搏动,但搏动频率不同,48h后见心肌细胞相互连接,第5天见心肌细胞铺展成片或成细胞簇,搏动频率基本一致。结论本实验方法是较为稳定理想的培养心肌细胞的方法。
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关键词
心肌细胞
原代培养
心肌细胞鉴定
Actin免疫组化
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分类号
R-331
[医药卫生]
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题名C57BL/6J乳鼠心肌细胞的提取及鉴定
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作者
张新会
罗文龙
裴汉军
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机构
内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院
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出处
《包头医学院学报》
CAS
2020年第5期90-93,共4页
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基金
内蒙古自治区自然科学基金(2015MS0858),内蒙古科技大学包头医学院扬帆计划(BYJJ-YF201689)。
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文摘
目的:改良C57BL/6J乳鼠心肌细胞提取方法,使C57BL/6J乳鼠心肌细胞提取规范化、细胞产量、细胞纯度有所提高。方法:在消化时加入自制搅拌子,采用0.06%胰蛋白酶预处理,后以0.04%Ⅱ型胶原蛋白酶给予消化,采用差速贴壁90 min,同时给予0.1 mmol/L 5-溴-2-脱氧尿核苷(Brdu)抑制成纤维细胞生长,同时进行心肌细胞鉴定,及细胞活力鉴定。结果:心肌细胞成活率95.5%,心肌细胞纯度94%。24 h心肌细胞基本贴壁,部分已经出现搏动,72 h可出现同步性搏动。细胞活力在培养至4~7 d逐渐升高,第7 d活力最好,超过7d细胞活力降低。结论:通过此种方法对C57BL/6J乳鼠心肌细胞进行提取,并进行改良,C57BL/6J乳鼠心肌细胞成活率和纯度均能够保持较高水平。心肌细胞在4~7d活力逐渐升高,推荐再此时间段进行实验。
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关键词
C57BL/6J乳鼠
原代心肌细胞提取
心肌细胞鉴定
心肌细胞活力测定
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Keywords
C57BL/6J neonatal mice
Extraction of primary cardiomyocytes
Identification of cardiomyocytes
Determination of myocardial cell viability
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分类号
R542.2
[医药卫生—心血管疾病]
R-332
[医药卫生—内科学]
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