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细胞自噬的研究方法 被引量:70
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作者 马泰 孙国平 李家斌 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第3期204-209,共6页
细胞自噬的研究是目前生物医学领域热点之一,广泛参与各种生理和病理过程.目前普遍采用的自噬检测方法包括电镜、免疫荧光、蛋白质印迹等方法检测自噬体及其标志蛋白.研究的深入对自噬的检测方法也提出了更高的要求,自噬功能障碍包括自... 细胞自噬的研究是目前生物医学领域热点之一,广泛参与各种生理和病理过程.目前普遍采用的自噬检测方法包括电镜、免疫荧光、蛋白质印迹等方法检测自噬体及其标志蛋白.研究的深入对自噬的检测方法也提出了更高的要求,自噬功能障碍包括自噬体形成和降解障碍,因此,准确全面地评估自噬不仅包括自噬体的检测,还包括动态观察整个自噬性降解的过程是否顺畅(即自噬潮分析).另外,通过药物或基因干预技术来人为地调控自噬以观察其在体内体外模型中的作用也是自噬分析的重要内容.需要注意的是,任何一种方法单独应用均不能作为自噬的依据,对任何方法得到的结果进行解释时必须慎重,特别是不能将自噬体的增多减少或自噬相关蛋白表达的高低等同于自噬的增强或减弱. 展开更多
关键词 细胞自噬 自噬体 微管相关蛋白1轻链3 自噬潮 检测方法
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葛根素调节AMPK-mTOR信号通路抑制自噬改善大鼠脑缺血再灌注损伤研究 被引量:44
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作者 黄亚光 王金凤 +2 位作者 杜利鹏 张微 梅志刚 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第13期3127-3133,共7页
目的探讨葛根素通过腺苷一磷酸活化蛋白激酶(AMPK)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-Unc-51样激酶1(Ulk1)通路抑制自噬改善大鼠脑缺血再灌注损伤的作用。方法40只雄性SD大鼠随机分为4组,即假手术组、模型组及葛根素低、高剂量(50、100mg/... 目的探讨葛根素通过腺苷一磷酸活化蛋白激酶(AMPK)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-Unc-51样激酶1(Ulk1)通路抑制自噬改善大鼠脑缺血再灌注损伤的作用。方法40只雄性SD大鼠随机分为4组,即假手术组、模型组及葛根素低、高剂量(50、100mg/kg)组。各组大鼠连续给药7d,末次给药30min后,采用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,缺血1.5h再灌注24h后,进行神经功能评分,TTC染色观察脑梗死体积,电镜观察自噬小体的形成,Western blotting法检测海马组织中微管相关蛋白1轻链3(LC3)、p62、AMPK、p-AMPK、mTOR、p-mTOR、Ulk1、pS757-Ulk1蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠神经功能评分显著增加,脑梗死体积明显增大,自噬小体增多,LC3-II/LC3-I显著增加,p62蛋白表达水平显著降低,p-AMPK表达水平显著升高,p-mTOR和pS757-Ulk1蛋白表达水平显著降低。与模型组比较,葛根素各组大鼠的神经功能损伤明显改善,脑梗死体积减小,自噬小体减少,LC3-II/LC3-I显著降低,p62蛋白表达水平显著升高,p-AMPK蛋白表达水平显著降低,p-mTOR和pS757-Ulk1蛋白表达水平显著升高。结论葛根素可能通过调控AMPK-mTOR-Ulk1信号通路抑制自噬的过度发生,从而减轻脑缺血再灌注损伤的发生。 展开更多
关键词 葛根素 脑缺血再灌注 自噬 AMPK-mTOR-Ulk1信号通路 微管相关蛋白1轻链3 P62
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通腑清胰汤治疗急性胰腺炎疗效及对患者中医证候积分与肠功能的影响 被引量:28
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作者 叶浩 彭余胜 +2 位作者 冯淑涵 李辉萍 雷洪伟 《陕西中医》 CAS 2021年第4期474-477,共4页
目的:探讨通腑清胰汤治疗急性胰腺炎疗效及对患者中医证候积分及肠功能的影响。方法:以98例急性胰腺炎患者为研究对象,按随机数字表法分为对照组(49例,给予常规西药治疗)和研究组(49例,给予通腑清胰汤联合常规西药治疗)。统计治疗后所... 目的:探讨通腑清胰汤治疗急性胰腺炎疗效及对患者中医证候积分及肠功能的影响。方法:以98例急性胰腺炎患者为研究对象,按随机数字表法分为对照组(49例,给予常规西药治疗)和研究组(49例,给予通腑清胰汤联合常规西药治疗)。统计治疗后所有患者临床疗效、肠道相关功能恢复时间及胃肠道功能评分,观察治疗前及治疗后中医证候积分、肠抑胃肽(GIP)、血清胃肠激素活动性肠肽(VIP)、血清微管相关蛋白1轻链3(MAP1-LC3)、髓样细胞触发受体-1(TREM-1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血淀粉酶(Ams)变化情况。结果:治疗前,两组腹痛剧烈、身热口渴、胸闷腹胀、头身沉重胀痛、恶心呕吐、便溏不爽比较,差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组腹痛剧烈、身热口渴、胸闷腹胀、头身沉重胀痛、恶心呕吐、便溏不爽均较治疗前降低,其中研究组腹痛剧烈、身热口渴、胸闷腹胀、头身沉重胀痛、恶心呕吐、便溏不爽均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,研究组临床疗效高于对照组(95.92%与79.59%),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,研究组肠道相关功能恢复时间及胃肠道功能评分均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组GIP、VIP、MAP1-LC3、TREM-1、IL-6、TNF-α、Ams比较,差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组GIP、VIP、MAP1-LC3、TREM-1、IL-6、TNF-α、Ams均较治疗前降低,其中研究组GIP、VIP、MAP1-LC3、TREM-1、IL-6、TNF-α、Ams均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:通腑清胰汤治疗急性胰腺炎可减少患者中医证候积分,缩短肠道功能恢复时间,恢复肠道功能。 展开更多
关键词 通腑清胰汤 急性胰腺炎 中医证候积分 肠道功能 肠抑胃肽 胃肠激素活动性肠肽 微管相关蛋白1轻链3 髓样细胞触发受体-1 白细胞介素-6 肿瘤坏死因子-α 血淀粉酶
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陈皮-半夏对内皮细胞损伤保护机制的研究 被引量:26
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作者 黄小波 陈文强 +2 位作者 王宁群 陈玉静 吴犀翎 《北京中医药》 2014年第11期868-871,共4页
目的研究陈皮-半夏能否通过对Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3(LC-3)等自噬通路的调节作用及其空白干预内皮细胞损伤的机制。方法分离培养脐静脉内皮细胞(HUVEC),将其实验分为空白对照组,ox-LDL损伤模型组(模型组),陈皮-半夏小、中、大剂... 目的研究陈皮-半夏能否通过对Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3(LC-3)等自噬通路的调节作用及其空白干预内皮细胞损伤的机制。方法分离培养脐静脉内皮细胞(HUVEC),将其实验分为空白对照组,ox-LDL损伤模型组(模型组),陈皮-半夏小、中、大剂量组。MTT法,观察陈皮-半夏对内皮细胞存活率的影响;Western blot法观察陈皮-半夏对内皮细胞Beclin-1、LC-3表达的影响。方法与空白对照组比较,模型组细胞存活率显著下降(P<0.01),Beclin-1、LC-3表达显著升高(P<0.01)。陈皮-半夏中、大剂量组细胞存活率均较模型组显著上升(P<0.01),Beclin-1水平较模型组显著下降(P<0.01)。陈皮-半夏3个剂量组的LC-3水平均较模型组显著下降(P<0.05)。结论陈皮-半夏可能通过抑制血管内皮细胞中Beclin-1、LC-3的表达,发挥提高内皮细胞存活率治疗动脉粥样硬化的作用。 展开更多
关键词 陈皮 半夏 Beclin-1基因 微管相关蛋白1轻链3 内皮细胞 大鼠
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BISAP评分联合血清TG、MAP1-LC3检测对急性重症胰腺炎患者病情及预后的评估价值 被引量:23
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作者 陈莹 李越 《山东医药》 CAS 2020年第1期21-24,共4页
目的探讨严重程度床边指数(BISAP)评分联合血清甘油三酯(TG)、微管相关蛋白1轻链3(MAP1-LC3)检测对急性重症胰腺炎(SAP)患者病情及预后的评估价值。方法选择169例急性胰腺炎(AP)患者,根据病情将其分为轻症AP(MAP组,n=97)和重症AP(SAP组,... 目的探讨严重程度床边指数(BISAP)评分联合血清甘油三酯(TG)、微管相关蛋白1轻链3(MAP1-LC3)检测对急性重症胰腺炎(SAP)患者病情及预后的评估价值。方法选择169例急性胰腺炎(AP)患者,根据病情将其分为轻症AP(MAP组,n=97)和重症AP(SAP组,n=72),并于同期选取60例体检健康者为对照组。采用BISAP评分评估各组病情,用酶联免疫吸附法检测血清TG、MAP1-LC3水平,用Pearson积矩相关分析BISAP评分与血清TG、MAP1-LC3的关系。随访3个月,记录SAP患者预后,包括多器官功能障碍综合征(MODS)、胰腺坏死、死亡。绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估BISAP评分及血清TG、MAP1-LC3对SAP患者预后的预测价值。结果SAP组BISAP评分高于MAP组(P<0.05)。MAP、SAP组血清TG、MAP1-LC3水平高于对照组,且SAP组血清TG、MAP1-LC3水平高于MAP组,比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。MAP患者BISAP评分与血清TG、MAP1-LC3水平呈正相关(r分别为0.529、0.617,P均<0.05);SAP患者BISAP评分与血清TG、MAP1-LC3呈正相关(r分别为0.683、0.725,P均<0.05)。不同预后SAP患者BISAP评分及血清TG、MAP1-LC3水平比较差异有统计学意义(P均<0.05)。BISAP评分及血清TG、MAP1-LC3对SAP患者MODS、胰腺坏死、死亡均有一定的预测价值,三指标联合检测对SAP患者预后的预测价值优于单一指标检测(P均<0.05)。结论BISAP评分联合血清TG、MAP1-LC3检测可评估SAP患者病情严重程度,预测其预后。 展开更多
关键词 急性重症胰腺炎 急性胰腺炎严重程度床边指数 甘油三酯 微管相关蛋白1轻链3
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脾气虚证大鼠股四头肌线粒体自噬水平及AMPK/ULK1途径变化的研究 被引量:17
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作者 刘文俊 李振钰 +4 位作者 许欣竹 冷雪 陈文娜 穆靖洲 单德红 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期760-765,共6页
目的观察脾气虚证大鼠股四头肌线粒体自噬水平及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/UNC-51-类似自噬激活激酶1(ULK1)途径的变化,从线粒体方面研究"脾气虚四肢不用"的机制。方法运用饮食失节+劳倦法复制脾气虚证大鼠模型,随机分为对照... 目的观察脾气虚证大鼠股四头肌线粒体自噬水平及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/UNC-51-类似自噬激活激酶1(ULK1)途径的变化,从线粒体方面研究"脾气虚四肢不用"的机制。方法运用饮食失节+劳倦法复制脾气虚证大鼠模型,随机分为对照组和脾气虚模型组(模型组),造模成功后取股四头肌,比色法检测三磷酸腺苷(ATP)含量;JC-1法检测线粒体膜电位(MMP);免疫荧光及印迹法(Western blot)法检测微管相关蛋白1轻链3-B (LC3 B)、选择性自噬接头蛋白(p62)表达水平及与线粒体共定位的量;Western blot法检测AMPKα及ULK1蛋白表达。结果与对照组比较,模型组股四头肌ATP、MMP下降(P<0.05,P<0.01);LC3B-II蛋白表达及与线粒体共定位增加(均P<0.01)、p62蛋白表达及与线粒体共定位减少(均P<0.01);p-AMPKα/AMPKα及p-ULK1/ULK1比值升高(均P<0.01)。结论 "脾气虚四肢不用"可能与AMPK/ULK1途径激活所致的线粒体自噬水平提高不足有关。 展开更多
关键词 脾气虚 股四头肌 线粒体自噬 微管相关蛋白1轻链3 选择性自噬接头蛋白 腺苷酸活化蛋白激酶 UNC-51-类似自噬激活激酶1
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自噬及自噬相关蛋白在帕金森病模型大鼠黑质纹状体中的表达及意义 被引量:16
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作者 刘斌 孙静 +5 位作者 张晋霞 毛文静 马原源 吕超男 成晓华 毕树立 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 北大核心 2014年第3期187-191,共5页
目的观察自噬及自噬相关蛋白Beclin1及微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1light chain 3,MAPlLC3,简称LC3)在帕金森病(Parkinson disease,PD)模型大鼠黑质纹状体中的表达及变化,探讨自噬在PD发病中的作用。方法将90... 目的观察自噬及自噬相关蛋白Beclin1及微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1light chain 3,MAPlLC3,简称LC3)在帕金森病(Parkinson disease,PD)模型大鼠黑质纹状体中的表达及变化,探讨自噬在PD发病中的作用。方法将90只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、PD模型组(模型组),每组又分为模型制备后4d、8d两个亚组,每个亚组各15只。采用颈背部皮下注射鱼藤酮制作PD模型,透射电镜观察自噬体的形成,免疫组化法和Western blotting法检测黑质纹状体自噬相关蛋白Beclin1和LC3的表达水平。结果 (1)电子显微镜下PD模型组黑质纹状体中出现自噬体,呈圆形,大多位于细胞核旁,溶酶体数量增多。8d时,自噬体、溶酶体数量显著增多。(2)与正常组比较,假手术组黑质纹状体中Beclin1和LC3表达略增多,但差异无统计学意义(均P>0.05);与假手术组比较,模型组黑质纹状体Beclin1和LC3的表达明显增多(均P<0.01),8d高于4d,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论 PD模型大鼠黑质纹状体中自噬活性被激活,自噬可能参与了PD的发病过程。 展开更多
关键词 帕金森病 自噬 BECLIN 1 微管相关蛋白 微管相关蛋白1轻链3
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急性胰腺炎患者血清IL-6、IL-10水平变化及其与淋巴细胞自噬凋亡的相关性 被引量:13
8
作者 潘静 覃月秋 +6 位作者 徐晨阳 梁云轩 宋嗣恩 季科 杨复锵 周喜汉 黄赞松 《山东医药》 CAS 2019年第27期21-24,共4页
目的观察急性胰腺炎(AP)患者血清白细胞介素6(IL-6)、IL-10水平变化,探讨其与淋巴细胞自噬、凋亡的关系.方法73例AP患者中轻症急性胰腺炎(MAP,MAP组)25例、中度重症急性胰腺炎(MSAP,MSAP组)25例、重症急性胰腺炎(SAP,SAP组)23例,选择同... 目的观察急性胰腺炎(AP)患者血清白细胞介素6(IL-6)、IL-10水平变化,探讨其与淋巴细胞自噬、凋亡的关系.方法73例AP患者中轻症急性胰腺炎(MAP,MAP组)25例、中度重症急性胰腺炎(MSAP,MSAP组)25例、重症急性胰腺炎(SAP,SAP组)23例,选择同期健康体检者25例为对照组.AP患者入院24 h内采集外周血,对照组体检时采集外周血,ELISA法检测各组血清IL-6、IL-10、细胞自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)及凋亡相关因子半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(Caspase-3),流式细胞术测算各组淋巴细胞自噬率、凋亡率,Pearson相关分析法分析AP患者血清IL-6、IL-10水平与血清LC3、Caspase-3水平的相关性.结果①血清IL-6、IL-10水平:与对照组比较,MAP、MSAP、SAP组血清IL-6、IL-10水平升高(P均<0.05);与MAP组比较,MSAP组血清IL-6水平升高、IL-10水平降低(P均<0.05);与MSAP、MAP组比较,SAP组血清IL-6水平升高、IL-10水平降低(P均<0.05).②淋巴细胞自噬情况:与MSAP、MAP及对照组比较,SAP组血清LC3水平、淋巴细胞自噬率升高(P均<0.05);与MAP组、对照组比较,MSAP组血清LC3水平、淋巴细胞自噬率升高(P均<0.05).③淋巴细胞凋亡情况:与MSAP、MAP及对照组比较,SAP组血清Caspase-3水平、淋巴细胞凋亡率升高(P均<0.05);与MAP组及对照组比较,MSAP组血清Caspase-3水平、淋巴细胞凋亡率升高(P均<0.05).④AP患者血清IL-6、IL-10水平与血清LC3、Caspase-3水平的相关性:MSAP、SAP组患者血清IL-6水平与血清LC3、Caspase-3水平呈正相关(r分别为0.9904,0.9813,P均<0.05;r分别为0.9785,0.9870,P均<0.05),血清IL-10水平与血清LC3、Caspase-3水平呈正相关(r分别为0.9331,0.9732,P均<0.05;r=0.9878,0.8663,P均<0.05).结论AP患者血清IL-6、IL-10、LC3、Caspase-3水平均升高,MSAP、SAP患者淋巴细胞自噬、凋亡水平均升高.血清IL-6、IL-10水平与血清LC3、Caspase-3水平呈正相关.血清IL-6、IL-10可能通过促进AP患者淋巴细胞的自 展开更多
关键词 白细胞介素6 白细胞介素10 急性胰腺炎 微管相关蛋白1轻链3 半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白3
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胰胆舒胶囊联合亚胺培南西司他丁钠治疗急性重症胰腺炎的临床研究 被引量:12
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作者 刘飞 陈曦 +2 位作者 孙晓林 钱国武 刘驰 《现代药物与临床》 CAS 2021年第2期265-268,共4页
目的探讨胰胆舒胶囊联合亚胺培南西司他丁钠治疗急性重症胰腺炎的临床疗效。方法选取2019年3月—2020年4月在南阳市中心医院进行治疗的86例急性重症胰腺炎患者,根据就诊顺序分为对照组(43例)和治疗组(43例)。对照组静脉滴注注射用亚胺... 目的探讨胰胆舒胶囊联合亚胺培南西司他丁钠治疗急性重症胰腺炎的临床疗效。方法选取2019年3月—2020年4月在南阳市中心医院进行治疗的86例急性重症胰腺炎患者,根据就诊顺序分为对照组(43例)和治疗组(43例)。对照组静脉滴注注射用亚胺培南西司他丁钠,1.0g/次,同0.9%氯化钠注射液100mL配伍,每8小时1次;治疗组在对照组基础上口服胰胆舒胶囊,2g/次,3次/d。两组均经2周治疗后进行效果对比。观察两组的临床疗效,比较两组临床症状消失时间、血清学指标、肠道屏障功能指标。结果经治疗,对照组总有效率为81.40%,显著低于治疗组(97.67%,P<0.05)。经治疗,治疗组在口干、腹痛、恶心呕吐、痞满燥实、小便短赤等症状消失时间上均短于对照组(P<0.05)。经治疗,两组血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、微管相关蛋白1轻链3(MAP1-LC3)、可溶性髓系细胞触发受体-1(s TREM-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、P物质、降钙素原(PCT)水平均较治疗前显著降低(P<0.05);治疗后,治疗组患者血清学指标低于对照组(P<0.05)。经治疗,两组血清淀粉酶(AMS)、二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸水平均较治疗前显著降低(P<0.05),并以治疗组降低更显著(P<0.05)。结论胰胆舒胶囊联合注射用亚胺培南西司他丁钠治疗急性重症胰腺炎患者具有较好的疗效,可有效改善患者临床症状,降低机体炎症反应,有利于机体肠道功能的恢复,有着良好临床应用价值。 展开更多
关键词 胰胆舒胶囊 注射用亚胺培南西司他丁钠 急性重症胰腺炎 超敏C反应蛋白 微管相关蛋白1轻链3 可溶性髓系细胞触发受体-1 肿瘤坏死因子-α 降钙素原
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自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤增强鼻咽癌细胞对放射和化学治疗的敏感性 被引量:11
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作者 宋乐乐 马琳艳 +4 位作者 陈根德 黄莹莹 孙小锦 蒋琛琛 刘浩 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期9-18,共10页
目的:探讨自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)增强鼻咽癌细胞对放射治疗(放疗)和化学治疗(化疗)敏感性的作用及其相关的分子机制。方法:采用MTT法检测3-MA对细胞的增殖抑制作用;集落克隆形成法检测3-MA对细胞集落克隆形成的... 目的:探讨自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)增强鼻咽癌细胞对放射治疗(放疗)和化学治疗(化疗)敏感性的作用及其相关的分子机制。方法:采用MTT法检测3-MA对细胞的增殖抑制作用;集落克隆形成法检测3-MA对细胞集落克隆形成的影响;Annexin V/PI双染法、线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)、DAPI染色检测细胞凋亡;Western印迹检测内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、自噬相关蛋白beclin1和微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)表达。结果:不同体积浓度或剂量的顺铂(cisplatin,DDP)、电离辐射(ionizing radiation,IR)、衣霉素(tunicamycin,TM)、3-MA对鼻咽癌细胞HONE-1均具有增殖抑制作用,且随着体积浓度或剂量的增加和作用时间的延长,对HONE-1细胞增殖抑制作用随之增加。经1.00 mmol/L 3-MA预处理细胞后,再次给予6.00 mol/L DDP,4.00 Gy IR,1.00 mol/L TM处理,细胞存活率明显降低,均低于单用组,与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。3-MA增强DDP,IR,TM抑制细胞集落克隆形成作用。用6.00 mol/L DDP或4.00 Gy IR处理HONE-1细胞24 h后,细胞凋亡率分别为5.8%和6.7%,与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。JC-1和DAPI染色显示3-MA增强DDP,IR或TM诱导的细胞凋亡作用;Western印迹结果显示DDP,IR或TM处理组GRP78,beclin1表达呈时间依赖性上调,LC3 I向LC3 II转化,3-MA预处理组beclin1表达明显降低,LC3 I向LC3 II的转化。结论:自噬抑制剂3-MA可增强鼻咽癌细胞对放化疗的敏感性,其机制可能与3-MA抑制内质网应激诱导的自噬所产生的保护作用相关。 展开更多
关键词 鼻咽癌 顺铂 电离辐射 内质网应激 自噬 葡萄糖调节蛋白78 BECLIN1 微管相关蛋白1轻链3 衣霉素
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清热解毒方连花汤提取物诱导子宫内膜癌HEC-1A及Ishikawa细胞自噬的作用及其机制研究 被引量:11
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作者 包晓霞 唐瑶 +1 位作者 鲁周南 薛晓鸥 《中国妇产科临床杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期150-154,共5页
目的探讨清热解毒方连花汤(黄连15 g、白花蛇舌草15 g、半枝莲15 g、生黄芪20 g等)正丁醇和水提取物对人子宫内膜癌细胞系HEC-1A及Ishikawa作用12 h、24 h后自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(light chain 3,LC3)表达及其相关通路的... 目的探讨清热解毒方连花汤(黄连15 g、白花蛇舌草15 g、半枝莲15 g、生黄芪20 g等)正丁醇和水提取物对人子宫内膜癌细胞系HEC-1A及Ishikawa作用12 h、24 h后自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(light chain 3,LC3)表达及其相关通路的影响。方法采用Real-time PCR检测LC3mRNA;采用Westernbolt检测LC3蛋白;采用Phosflow(TM)检测雷帕霉素靶蛋白(MTOR)、蛋白激酶B(AKT)表达。结果与阴性对照组比较,正丁醇组12 h HEC-1A中LC3 mRNA升高但24 h下降,而LC3蛋白在12 h和24 h均下降,水提组则正好相反,雷帕霉素组LC3表达均下降,同时中药复方醇提和水提组AKT/mTOR通路均不同程度表达增加(P〈0.05);而在Ishikawa中,与阴性对照组比较,三组处理后LC3 mRNA表达在12 h增加,除雷帕霉素组其余两组24 h均下降。醇提组12 h、水提组24 h、雷帕霉素组AKT/mTOR双表达与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论在HEC-1A中,连花汤正丁醇提取物与雷帕霉素作用类似,可能激活AKT/mTOR通路抑制细胞自噬;而在Ishikawa细胞中连花汤正丁醇组与水提组均通过激活AKT/mTOR通路自噬先增加后抑制,与雷帕霉素作用后自噬均增加不同。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 连花汤 自噬相关蛋白 微管相关蛋白1轻链3
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重楼皂苷Ⅰ对胃癌SGC-7901细胞线粒体自噬的作用及对LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、Caspase-3表达的影响 被引量:8
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作者 张秉丽 霍成英 李有连 《中医药导报》 2021年第9期31-35,共5页
目的:探究重楼皂苷Ⅰ对胃癌SGC-7901细胞线粒体自噬的作用及对微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅰ(LC3-Ⅰ)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达的影响。方法:将对数生长期的胃癌SGC-7901细胞分为对照组和重楼... 目的:探究重楼皂苷Ⅰ对胃癌SGC-7901细胞线粒体自噬的作用及对微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅰ(LC3-Ⅰ)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达的影响。方法:将对数生长期的胃癌SGC-7901细胞分为对照组和重楼皂苷Ⅰ低、中、高剂量组。重楼皂苷Ⅰ低、中、高剂量组分别以1.5、3.0、6.0 mg/mL重楼皂苷Ⅰ培养胃癌细胞,对照组用含10%胎牛血清的1640-RPMI培养基培养胃癌细胞。噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖抑制率;透射电镜观察SGC-7901细胞超微结构的改变;Lyso-Tracker Red染色观察SGC-7901细胞自噬情况;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blotting法检测胃癌细胞Beclin-1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白相对表达量。结果:与对照组比较,重楼皂苷Ⅰ低、中、高剂量组24、48、72 h增殖抑制率升高,重楼皂苷Ⅰ低剂量组<重楼皂苷Ⅰ中剂量组<重楼皂苷Ⅰ高剂量组(P<0.05);与对照组比较,重楼皂苷Ⅰ低、中、高剂量组细胞椭圆形的双层膜包绕囊泡状结构增多,自噬小体增多。重楼皂苷Ⅰ低、中、高剂量组细胞溶酶体红色荧光小体增加,酸性自噬溶酶体囊泡过度累积。与对照组比较,重楼皂苷Ⅰ低、中、高剂量组细胞凋亡率及Beclin-1、Caspase-3蛋白相对表达量升高,重楼皂苷Ⅰ低剂量组<重楼皂苷Ⅰ中剂量组<重楼皂苷Ⅰ高剂量组;Bcl-2/Bax、LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ比值降低,重楼皂苷Ⅰ高剂量组<重楼皂苷Ⅰ中剂量组<重楼皂苷Ⅰ低剂量组(P<0.05)。结论:重楼皂苷Ⅰ可通过诱导胃癌SGC-7901细胞线粒体自噬,抑制细胞增殖,促进凋亡。 展开更多
关键词 线粒体自噬 重楼皂苷Ⅰ 微管相关蛋白1轻链3- 微管相关蛋白1轻链3-Ⅰ 半胱氨酸天冬氨酸蛋白3 胃癌SGC-7901细胞
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血清微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3及高迁移率族蛋白B1在不同程度急性胰腺炎中的表达及意义 被引量:9
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作者 朱绍华 何创业 赵芯 《陕西医学杂志》 CAS 2022年第9期1098-1101,共4页
目的:探讨血清微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在不同程度急性胰腺炎(AP)中的表达及意义。方法:选取AP患者135为病例组,根据病情严重程度又分为轻症急性胰腺炎(MAP... 目的:探讨血清微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在不同程度急性胰腺炎(AP)中的表达及意义。方法:选取AP患者135为病例组,根据病情严重程度又分为轻症急性胰腺炎(MAP)组、中度重症急性胰腺炎(MSAP)组以及重症急性胰腺炎(SAP)组三个亚组,每组45例。选取同期体检健康者135例为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)对血清LC3-Ⅱ、Caspase-3、HMGB1表达水平进行测定。采用急性生理学和慢性健康状况评估Ⅱ(APACHEⅡ)对病例组患者进行评估。比较病例组与对照组血清LC3-Ⅱ、Caspase-3、HMGB1表达水平。比较不同程度AP患者血清LC3-Ⅱ、Caspase-3、HMGB1表达水平及APACHEⅡ评分。采用Spearman法分析血清LC3-Ⅱ、Caspase-3、HMGB1与AP患者APACHEⅡ评分的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LC3-Ⅱ、Caspase-3、HMGB1对AP的预测价值。结果:与对照组相比,病例组患者血清LC3-Ⅱ、Caspase-3、HMGB1表达水平明显升高(均P<0.05)。血清LC3-Ⅱ、Caspase-3、HMGB1表达水平及APACHEⅡ评分在不同程度AP患者中由高到低依次为SAP组、MSAP组、MAP组,各组间比较差异有统计学意义(均P<0.05)。血清LC3-Ⅱ、Caspase-3、HMGB1与AP患者APACHEⅡ评分呈正相关(r=0.704、0.642、0.723,均P<0.05)。血清LC3-Ⅱ、Caspase-3、HMGB1对AP具有良好的预测价值。结论:血清LC3-Ⅱ、Caspase-3、HMGB1水平在AP患者中升高,且与病情严重程度呈正相关,对AP具有良好的预测价值。 展开更多
关键词 急性胰腺炎 微管相关蛋白1轻链3- 半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3 高迁移率族蛋白B1 预测价值
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督脉电针治疗对脊髓损伤大鼠神经细胞自噬及凋亡的影响 被引量:9
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作者 邹恩苗 高丽萍 +2 位作者 胡洁 林海燕 屠文展 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2019年第11期11-14,共4页
目的:探讨电针治疗对脊髓损伤大鼠神经细胞自噬、凋亡及运动功能的影响。方法:将36只SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、脊髓损伤组、督脉电针组,每组12只。采用MASCIS Impacto1精确撞击制作脊髓损伤模型。假手术组只行椎板切除术,... 目的:探讨电针治疗对脊髓损伤大鼠神经细胞自噬、凋亡及运动功能的影响。方法:将36只SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、脊髓损伤组、督脉电针组,每组12只。采用MASCIS Impacto1精确撞击制作脊髓损伤模型。假手术组只行椎板切除术,不造成脊髓损伤;脊髓损伤组采用MASCIS Impacto1法制作脊髓损伤模型,不进行干预治疗;督脉电针组在脊髓损伤后给予督脉电针治疗。于损伤后第1,3,7天分别对各组大鼠进行BBB运动功能评分。损伤后第7天取脊髓组织,用Western Blot法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ的变化,用TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果:损伤后第3天和第7天,督脉电针组BBB评分为(5.8±0.9)和(9.5±0.9),与脊髓损伤组(4.1±0.8)和(6.4±0.7)分比较显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),而术后第1天两者评分为(2.8±0.7)和(2.4±0.5),差异无统计学意义(P>0.05)。与假手术组相比,脊髓损伤组LC3-Ⅱ表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),细胞凋亡显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);与脊髓损伤组相比,督脉电针组LC3-Ⅱ显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),细胞凋亡显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:督脉电针治疗能增强脊髓损伤大鼠神经细胞自噬,减少凋亡,改善大鼠运动功能。 展开更多
关键词 督脉电针 脊髓损伤 细胞凋亡 自噬 微管相关蛋白1轻链3-
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自噬相关基因Beclin1和LC3与子宫内膜异位症的研究进展 被引量:9
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作者 孔志伟 姚婷婷 《医学综述》 2019年第21期4166-4173,共8页
子宫内膜异位症(EMs)是具有类似恶性肿瘤临床行为学特征的常见妇科良性病变,治疗较困难,复发率高。目前,EMs的发病机制尚不清楚,可能与机体自噬异常以及多种疾病的发生发展相关。自噬相关基因Beclin1和微管相关蛋白1轻链3(LC3)可对哺乳... 子宫内膜异位症(EMs)是具有类似恶性肿瘤临床行为学特征的常见妇科良性病变,治疗较困难,复发率高。目前,EMs的发病机制尚不清楚,可能与机体自噬异常以及多种疾病的发生发展相关。自噬相关基因Beclin1和微管相关蛋白1轻链3(LC3)可对哺乳动物细胞自噬的调节发挥重要作用,EMs中存在自噬异常,异位子宫内膜可能存在自噬活性改变或特定自噬基因的减少、缺失、变异以及蛋白质表达异常,但目前关于EMs中Beclin1和LC3表达的研究较少,且研究结果尚不统一。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 自噬 BECLIN1 微管相关蛋白1轻链3
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IFN-γ,caspase-3,LC3-II在原发性干燥综合征唇腺中的表达及其相关性 被引量:8
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作者 侯佳奇 吴香香 +3 位作者 潘云翠 王守梅 张树辉 薛鸾 《临床与病理杂志》 2019年第4期769-775,共7页
目的:检测干扰素γ(IFN-γ)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)、微管相关蛋白1轻链3-I I (LC 3-I I)在原发性干燥综合征(p r i m a r ySj?g re n’ ss y n d ro m e, p S S)与非干燥综合征患者唇腺中的表达,探讨三者与唇腺灶性指数... 目的:检测干扰素γ(IFN-γ)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)、微管相关蛋白1轻链3-I I (LC 3-I I)在原发性干燥综合征(p r i m a r ySj?g re n’ ss y n d ro m e, p S S)与非干燥综合征患者唇腺中的表达,探讨三者与唇腺灶性指数、血清抗核抗体滴度、补体及免疫球蛋白之间的关系,为进一步探索p SS发病机制提供依据。方法:收集p SS患者及怀疑p SS但最终排除诊断的患者的唇腺各19例,应用免疫组织化学检测组织样本中IFN-γ,caspase-3,LC3-II的表达,统计分析p SS患者及非p SS患者之间三者表达的差异性及三者与唇腺淋巴细胞浸润程度及自身免疫活化程度之间的相关性。结果:IFN-γ主要表达于唇腺中浸润的炎性细胞的细胞质中,caspase-3主要表达于唇腺腺泡上皮细胞及导管上皮细胞的细胞质中,LC3-II在炎性细胞和唇腺上皮细胞的细胞质中均有表达。IFN-γ,caspase-3,LC3-II(上皮细胞)、LC3-II(炎性细胞)在p SS及非p SS患者唇腺中的表达具有显著差异(均P<0.001)。IFN-γ在唇腺中的表达与caspase-3,LC3-II(上皮细胞)、LC3-II(炎性细胞)、灶性指数、抗核抗体滴度存在正相关性(r=0.549,0.822,0.757,0.762, 0.560,均P <0.001)。Caspase-3在唇腺中的表达除与I F N-γ之外,还与LC3-II (上皮细胞)、LC3-II(炎性细胞)、灶性指数、血清Ig A、类风湿因子(rheumatoid factor,RF)水平呈正相关(r=0.646,P<0.001;r=0.454,P=0.004;r=0.688,P<0.001;r=0.376,P=0.020;r=0.337,P=0.039)。LC3-II (上皮细胞)在唇腺中的表达除与IFN-γ, caspase-3之外,还与L C 3-I I (炎性细胞)、灶性指数、抗核抗体滴度呈正相关(r=0.800,P<0.001;r=0.788,P<0.001;r=0.467,P=0.003)。LC3-II (炎性细胞)在唇腺中的表达除与I F N-γ, caspase-3, LC3-II (上皮细胞)之外,还与灶性指数、抗核抗体滴度、类风湿因子呈正相关(r=0.727,P<0.001;r=0.459,P=0.004;r=0.410, P=0.011)。结论:I FN-γ, caspase-3, LC3-I I在pSS患者唇腺中高表达,三者之间存在相 展开更多
关键词 原发性干燥综合征 干扰素Γ 半胱氨酸天冬氨酸蛋白3 微管相关蛋白1轻链3-
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Beclin1和LC3在食管癌组织中的表达水平和临床意义 被引量:8
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作者 夏彦清 赵松 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期907-909,共3页
目的探讨Beclin1和LC3在食管鳞癌和腺癌组织中的表达水平和临床意义。方法通过免疫组织化学SP法检测89例食管癌组织标本中Beclin1和LC3的表达情况。结果 Beclin1和LC3在食管癌中的阳性表达率(47.2%,40.4%)均显著低于正常食管癌组织标本... 目的探讨Beclin1和LC3在食管鳞癌和腺癌组织中的表达水平和临床意义。方法通过免疫组织化学SP法检测89例食管癌组织标本中Beclin1和LC3的表达情况。结果 Beclin1和LC3在食管癌中的阳性表达率(47.2%,40.4%)均显著低于正常食管癌组织标本组(88.9%,80.6%)(P<0.05)。Beclin1和LC3在食管癌中的表达与TNM分期、组织浸润程度、淋巴结转移和组织分化程度有关(P<0.05),与年龄、性别和组织类型(P>0.05)等无明显差异。Beclin1与LC3在食管鳞癌和腺癌中的表达呈正相关(r=7.935,P=0.005)。结论在食管鳞癌和腺癌中,肿瘤分化程度越低、浸润程度越高、有淋巴结转移、临床分期越高,Beclin1和LC3的表达越低,可能与肿瘤的发生发展与侵袭转移相关。 展开更多
关键词 自噬相关蛋白1 微管相关蛋白1轻链3 食管腺癌 免疫组织化学法
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Beclin 1与LC3蛋白在腮腺多形性腺瘤及腮腺癌在多形性腺瘤中的表达和意义 被引量:8
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作者 李冉 李磊 +2 位作者 刘江 杨国海 姚雅琳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第13期1293-1296,共4页
目的探讨自体吞噬相关基因Beclin 1和微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain3,LC3)表达和腮腺肿瘤之间的关系。方法所用组织取自本院2001-2009年手术标本,用免疫组化法和免疫印迹法检测20例正常腮腺组织,37... 目的探讨自体吞噬相关基因Beclin 1和微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain3,LC3)表达和腮腺肿瘤之间的关系。方法所用组织取自本院2001-2009年手术标本,用免疫组化法和免疫印迹法检测20例正常腮腺组织,37例腮腺多形性腺瘤,41例癌在多形性腺瘤中Beclin 1和LC3的表达,并结合临床病理因素进行分析。结果 Beclin 1、LC3在正常腮腺组织表达为(1.045±0.002)、(0.779±0.047),在腮腺多形性腺瘤中表达下降[(0.419±0.051)、(0.243±0.023),P<0.05],在癌在多形性腺瘤中二者阳性表达显著下降[(0.173±0.008)、(0.051±0.010),P<0.05]。淋巴结转移及TNM分期与Beclin 1的表达间有明显差异(P<0.05),不同侵袭性,不同淋巴结转移组与LC3的表达间有明显差异(P<0.05)。结论 Beclin 1和LC3在腮腺多形性腺瘤及癌在多形性腺瘤中表达下调,自体吞噬功能改变可能在腮腺肿瘤形成过程中具有一定作用。 展开更多
关键词 多形性腺瘤 癌在多形性腺瘤中 自体吞噬 BECLIN 1 微管相关蛋白1轻链3
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细胞自噬在宫颈癌中的相关研究进展 被引量:8
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作者 童焰 谭布珍 +3 位作者 方玉婷 赖智清 王玉 王小红 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期111-114,共4页
细胞自噬指细胞利用溶酶体降解细胞质中错误折叠的蛋白质及受损细胞器等,重新利用降解物质及胞内有害物质的过程,以维持细胞内环境稳定。正常状态下细胞的自噬维持在低水平,当细胞处在不利因素条件下,自噬也会被激活应对不利因素。自噬... 细胞自噬指细胞利用溶酶体降解细胞质中错误折叠的蛋白质及受损细胞器等,重新利用降解物质及胞内有害物质的过程,以维持细胞内环境稳定。正常状态下细胞的自噬维持在低水平,当细胞处在不利因素条件下,自噬也会被激活应对不利因素。自噬在肿瘤发生、发展、转移、复发、药物抵抗等方面有着重要作用,但自噬在这些方面的详细机制仍不清楚。我们在文中对宫颈癌细胞中自噬相关基因的表达情况进行了阐述,自噬治疗在宫颈癌中具有重要的应用前景。 展开更多
关键词 宫颈癌 细胞自噬 BECLIN-1 人类乳头瘤病毒 KLOTHO 微管相关蛋白1轻链3
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微管相关蛋白1轻链3在喉癌中的表达及其意义 被引量:8
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作者 万保罗 董俊华 +2 位作者 王琳 张甦琳 孔维佳 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期497-500,共4页
目的:探讨微管相关蛋白1轻链3(LC3)在喉癌中的表达及其意义。方法:采用免疫组织化学染色方法检测LC3蛋白在50例喉癌组织、45例癌旁组织、10例喉乳头状瘤及16例声带息肉中的表达情况。采用RT-PCR法检测LC3mRNA和蛋白在41例喉癌组织、41... 目的:探讨微管相关蛋白1轻链3(LC3)在喉癌中的表达及其意义。方法:采用免疫组织化学染色方法检测LC3蛋白在50例喉癌组织、45例癌旁组织、10例喉乳头状瘤及16例声带息肉中的表达情况。采用RT-PCR法检测LC3mRNA和蛋白在41例喉癌组织、41例癌旁组织及11例声带息肉组织中的表达,并结合临床病理因素进行分析。结果:免疫组织化学结果显示LC3蛋白在喉癌组织、癌旁组织、喉乳头状瘤、声带息肉中的阳性率分别为60.0%、93.3%、90.0%、93.8%。LC3在喉癌组织中的阳性表达率明显低于癌旁及声带息肉组织(χ2=18.135,P<0.01)。RT-PCR检测结果显示LC3mRNA在喉癌组织中相对表达量为0.57±0.08,与癌旁组织(0.99±0.11)及声带息肉组织(1.07±0.05)中的相对表达量比较差异亦有统计学意义(F=255.872,P<0.01)。LC3在喉癌中的蛋白表达与肿瘤部位、病理学分级有关(P<0.05),与患者的年龄、T分期、临床分期及淋巴结转移无关(P>0.05)。结论:LC3在喉癌中的表达下调,自噬活性的改变可能与喉癌发生、发展有关。 展开更多
关键词 喉肿瘤 自噬 微管相关蛋白1轻链3
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