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敲减lncRNA BAIAP2-AS1对胶质瘤细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其机制
1
作者 李贺扬 龙银波 +2 位作者 金治宾 刘容 倪晓光 《山东医药》 CAS 2024年第4期44-49,共6页
目的探讨敲减长链非编码RNA(lncRNA)BAIAP2反义RNA 1(BAIAP2-AS1)对胶质瘤细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其机制。方法体外传代培养胶质瘤细胞系A172、LN229、U251及正常人星形胶质细胞系NHA。取传3代、对数生长期细胞,采用RT-qPCR法检... 目的探讨敲减长链非编码RNA(lncRNA)BAIAP2反义RNA 1(BAIAP2-AS1)对胶质瘤细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其机制。方法体外传代培养胶质瘤细胞系A172、LN229、U251及正常人星形胶质细胞系NHA。取传3代、对数生长期细胞,采用RT-qPCR法检测各细胞中微小RNA-491-5p(miR-491-5p)、BAIAP2-AS1、O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)mRNA表达,选择lncRNA BAIAP2-AS1、miR-491-5p、MGMT mRNA相对表达量变化较显著的胶质瘤细胞进行后续实验。取上述胶质瘤细胞,随机分为空白对照组、BAIAP2-AS1 shRNA组、NC shRNA组、BAIAP2-AS1 shRNA+miR-491-5p inhibitor组、BAIAP2-AS1 shRNA+NC inhibitor组,BAIAP2-AS1 shRNA组、NC shRNA组分别转染BAIAP2-AS1 shRNA、NC shRNA,BAIAP2-AS1 shRNA+miR-491-5p inhibitor组、BAIAP2-AS1shRNA+NC inhibitor组分别转染BAIAP2-AS1 shRNA与miR-491-5p inhibitor、BAIAP2-AS1 shRNA与NC inhibitor,空白对照组不予转染。转染48 h,收集细胞,采用MTT法检测细胞活性,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用细胞划痕实验检测细胞迁移率,采用RT-qPCR法检测BAIAP2-AS1、miR-491-5p、MGMT mRNA表达。采用StarBase在线数据库预测miR-491-5p与BAIAP2-AS1、MGMT的互补位点,并采用双荧光素酶报告基因实验验证其靶向调控关系。结果与NHA细胞比较,A172、LN229、U251细胞lncRNA BAIAP2-AS1、MGMT mRNA相对表达量较高,miR-491-5p相对表达量较低(P均<0.05)。以U251细胞lncRNA BAIAP2-AS1、MGMT mRNA相对表达量较高,miR-491-5p相对表达量较低,故以U251细胞进行后续实验。与空白组、NC shRNA组比较,BAIAP2-AS1 shRNA组细胞活性、细胞迁移率、BAIAP2-AS1、MGMT表达显著降低(P均<0.05),细胞凋亡率及miR-491-5p表达显著升高(P均<0.05);与BAIAP2-AS1 shRNA组、BAIAP2-AS1 shRNA+inhibitor NC组比较,BAIAP2-AS1 shRNA+miR-491-5p inhibitor组细胞活性、细胞迁移率、MGMT表达显著增加(P均<0.05),细胞凋亡率及miR-491-5p表达显著降低(P均<0.05)。经StarBase在线数据库预测 展开更多
关键词 胶质瘤 长链非编码rna BAIAp2反义rna 1 细胞增殖 细胞迁移 细胞凋亡 微小rna-491-5p O^(6)-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶
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长链非编码RNASUCLG2-AS1通过调节微小RNA-491-5p对非小细胞肺癌细胞增殖和免疫逃逸的影响
2
作者 陈娟 郭金莲 +3 位作者 周慧会 刘琳 杨柳 张华 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第7期884-889,共6页
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)SUCLG2-AS1对非小细胞肺癌细胞增殖和免疫逃逸的影响及对微小RNA-491-5p(miR-491-5p)的调节作用。方法:通过Cancer LncRNA Census数据库分析SUCLG2-AS1在非小细胞肺癌组织中的表达及SUCLG2-AS1表达量与... 目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)SUCLG2-AS1对非小细胞肺癌细胞增殖和免疫逃逸的影响及对微小RNA-491-5p(miR-491-5p)的调节作用。方法:通过Cancer LncRNA Census数据库分析SUCLG2-AS1在非小细胞肺癌组织中的表达及SUCLG2-AS1表达量与非小细胞肺癌患者生存期的关系。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SUCLG2-AS1在非小细胞肺癌株A549、PG49、H1975、H2170和人正常肺支气管上皮细胞BEAS-2B中表达量的变化。培养H1975细胞并分为si-NC组和si-SUCLG2-AS1组。集落实验和流式细胞术检测H1975细胞的增殖能力和细胞周期。蛋白质印迹(Western blot)检测H1975细胞免疫相关蛋白细胞程序性死亡-配体1(PD-L1)、维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)和细胞周期相关蛋白细胞周期依赖性蛋白激酶3(Cdk3)、细胞周期蛋白C(Cyclin C)、细胞周期依赖性蛋白激酶2(Cdk2)的表达。LncRMap生物信息学软件预测SUCLG2-AS1可结合的微小RNA。RNA pull-down实验验证SUCLG2-AS1与miR-491-5p的直接结合。通过qRT-PCR检测SUCLG2-AS1对miR-491-5p表达的调节作用。结果:与正常肺组织比较,非小细胞肺癌组织中SUCLG2-AS1表达升高(P<0.01)。SUCLG2-AS1高表达的非小细胞肺癌患者生存期短于SUCLG2-AS1低表达患者(P<0.01)。与BEAS-2B细胞比较,非小细胞肺癌株中SUCLG2-AS1表达升高,H1975细胞中SUCLG2-AS1表达升高最明显(均P<0.05)。与si-NC组比较,si-SUCLG2-AS1组H1975细胞增殖能力降低,G0/G1期细胞比例上升,S期细胞比例减少,G2/M期细胞比例减少(均P<0.01)。与si-NC组比较,si-SUCLG2-AS1组H1975细胞中免疫相关蛋白PD-L1、RORγt表达减少,细胞周期相关蛋白Cdk3、Cyclin C、Cdk2表达减少(均P<0.01)。SUCLG2-AS1靶向直接结合miR-491-5p(均P<0.01)。与si-NC组比较,si-SUCLG2-AS1组H1975细胞中miR-491-5p表达上升(P<0.01)。结论:沉默SUCLG2-AS1可能通过上调miR-491-5p表达抑制非小细胞肺癌细胞的增殖和免疫逃逸。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 SUCLG2-AS1 微小rna-491-5p 细胞增殖 细胞周期 免疫逃逸
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杜仲皮水提取物调节circFADS2靶向miR-491-5p干预类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞生长与凋亡 被引量：4
3
作者 郑国洪 孙斌 +1 位作者 王晶晶 杨正明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期2044-2049,共6页
目的:探讨杜仲皮水提取物(water extract of Eucommia cortex,WEEC)对类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes,RA-FLS)生长与凋亡的影响及分子机制。方法:采用不同浓度WEEC(0.1、0.3、0.9和... 目的:探讨杜仲皮水提取物(water extract of Eucommia cortex,WEEC)对类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes,RA-FLS)生长与凋亡的影响及分子机制。方法:采用不同浓度WEEC(0.1、0.3、0.9和2.7 g/L)处理RA-FLS,CCK-8法检测细胞活力,选取最适WEEC浓度进行后续实验。细胞分别转染pcDNA-circFADS2和/或anti-miR-491-5p,探讨WEEC对RA-FLS生长与凋亡的影响及分子机制:用CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot法检测cleaved caspase-3的蛋白水平;RT-qPCR检测环状RNA-FADS2(circular RNA-FADS2,circFADS2)和miR-491-5p的表达水平;双萤光素酶基因报告实验检测circ-FADS2和miR-491-5p的靶向关系。结果:不同浓度WEEC处理后,RA-FLS的活力降低,凋亡率升高,cleaved cas-pase-3蛋白水平升高,circFADS2表达水平降低,miR-491-5p表达水平升高(P<0.05)。过表达circFADS2或抑制miR-491-5p表达后,WEEC处理的细胞活力升高,凋亡率及cleaved caspase-3蛋白水平降低(P<0.05)。circFADS2靶向调控miR-491-5p,过表达miR-491-5p逆转了circFADS2质粒对WEEC处理的RA-FLS活力与凋亡的影响。结论:杜仲皮水提取物通过调节circFADS2/miR-491-5p抑制类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞生长并促进其凋亡。 展开更多
关键词 杜仲皮水提取物 环状rna-FADS2 微小rna-491-5p 类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞 细胞活力 细胞凋亡
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MiR-491-5p过表达对人鼻咽癌HONE-1细胞增殖和迁移的影响
4
作者 王丹丹 周宁 +4 位作者 刘冬芹 赵杰 梁超 代娟娟 武艳 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1134-1139,共6页
目的:探讨微小RNA-491-5p (miR-491-5p)过表达对人鼻咽癌HONE-1细胞增殖和迁移的影响,为研究鼻咽癌的发病机制和靶向治疗提供依据。方法:将人鼻咽癌HONE-1细胞分为对照组(转染对照质粒)和miR-491-5p组(转染miR-491-5p质粒)。采用荧光显... 目的:探讨微小RNA-491-5p (miR-491-5p)过表达对人鼻咽癌HONE-1细胞增殖和迁移的影响,为研究鼻咽癌的发病机制和靶向治疗提供依据。方法:将人鼻咽癌HONE-1细胞分为对照组(转染对照质粒)和miR-491-5p组(转染miR-491-5p质粒)。采用荧光显微镜观察2组鼻咽癌HONE-1细胞转染效率,CCK-8法检测2组鼻咽癌HONE-1细胞增殖活性,Transwell小室实验检测2组鼻咽癌HONE-1细胞的迁移细胞数,实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测2组鼻咽癌HONE-1细胞中波形蛋白和上皮钙黏素mRNA表达水平,Western blotting法检测2组鼻咽癌HONE-1细胞中波形蛋白和上皮钙黏素蛋白表达水平。结果:与对照组比较,作用24、48和72 h时miR-491-5p组鼻咽癌HONE-1细胞增殖活性(t=2.832,P=0.047 3;t=4.522,P=0.001 4;t=9.308,P<0.01)和迁移细胞数(t=9.639, P<0.01)明显降低;与对照组比较,miR-491-5p组鼻咽癌HONE-1细胞中波形蛋白mRNA (t=7.535,P=0.001 7)和蛋白(t=7.219,P=0.018 7)表达水平明显降低,上皮钙黏素mRNA (t=4.88, P=0.0395)和蛋白(t=5.754, P=0.0289)表达水平明显升高。结论:MiR-491-5p过表达可以抑制人鼻咽癌细胞的增殖、迁移和上皮-间质转化(EMT)。 展开更多
关键词 微小rna-491-5p 鼻咽肿瘤 细胞增殖 细胞迁移 上皮-间质转化
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长链非编码RNA LBX2-AS1调控微小RNA-491-5p影响骨肉瘤细胞增殖及凋亡的机制 被引量：1
5
作者 曹亚伟 肖鹏 +3 位作者 孙金鹏 宋晓东 郑飞 吴学建 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期504-508,共5页
目的探讨长链非编码RNA((lncRNA)LBX2-AS1靶向调控微小RNA(miRNA,miR)-491-5p影响骨肉瘤细胞增殖及凋亡的分子机制。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测2017年10月至2018年12月郑州大学第一附属医院收集的骨肉瘤组织与瘤... 目的探讨长链非编码RNA((lncRNA)LBX2-AS1靶向调控微小RNA(miRNA,miR)-491-5p影响骨肉瘤细胞增殖及凋亡的分子机制。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测2017年10月至2018年12月郑州大学第一附属医院收集的骨肉瘤组织与瘤旁组织中LBX2-AS1、miR-491-5p的表达量。选取人骨肉瘤细胞U2OS为研究对象,按照数字表法随机分为4组:si-NC组(转染si-NC)、si-LBX2-AS1组(转染si-LBX2-AS1)、si-LBX2-AS1+anti-miR-NC组(共转染si-LBX2-AS1与anti-miR-NC)、si-LBX2-AS1+anti-miR-491-5p组(共转染si-LBX2-AS1与anti-miR-491-5p),分别将si-NC、si-LBX2-AS1、si-LBX2-AS1与anti-miR-NC、si-LBX2-AS1与anti-miR-491-5p转染至U2OS细胞。噻唑蓝(MTT)检测细胞存活率;应用流式细胞仪检测细胞周期;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验验证LBX2-AS1与miR-491-5p的靶向关系;蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞周期蛋白1(Cyclin D1)、p21、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)蛋白表达量。两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果瘤旁组织与骨肉瘤组织组织中LBX2-AS1的表达量分别为(1.01±0.10)、(3.56±0.35),miR-491-5p的表达量分别为(1.02±0.10)、(0.16±0.02),与瘤旁组织比较,骨肉瘤组织中LBX2-AS1的表达水平显著升高(t=35.027,P<0.05),miR-491-5p的表达水平显著降低(t=42.165,P<0.05),差异均有统计学意义;si-NC组与si-LBX2-AS1组细胞存活率分别为(100.02±10.00)%、(55.67±5.54)%,G1期比例分别为(38.51±2.55)%、(52.27±4.68)%,S期比例分别为(30.10±2.14)%、(15.36±1.26)%,细胞凋亡率分别为(8.28±0.92)%、(24.11±2.37)%,与si-NC组比较,si-LBX2-AS1组细胞存活率显著降低(t=11.638,P<0.05),细胞周期G1期比例明显升高(t=7.745,P<0.05),S期比例明显降低(t=17.806,P<0.05),细胞凋亡率显著升高(t=18.680,P<0.05),Cyclin D1表达量显著降低(t=20.871,P<0.05),p21、Caspase-3表达量显著升高(t=22.687,P<0.05;t=20.871,P<0.05),差 展开更多
关键词 长链非编码rna LBX2-AS1 微小rna-491-5p 骨肉瘤 增殖 脱噬作用
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