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脊柱外科手术后切口感染患者血清中miR-182和miR-199b表达及意义 被引量：3
1
作者 郑礼鹏 何沛峰 +7 位作者 周庆忠 叶飞 康建平 袁浩 陈赞 罗国兴 宁文杰 冯大雄 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2023年第11期1346-1349,1354,共5页
目的 探究脊柱外科手术后切口感染患者血清中微小RNA-182(miR-182)和微小RNA-199b(miR-199b)表达及意义。方法 选取2017年3月~2022年12月在本院进行脊柱外科手术后切口感染患者116例为感染组,另选取同期术后切口未感染者116例为非感染组... 目的 探究脊柱外科手术后切口感染患者血清中微小RNA-182(miR-182)和微小RNA-199b(miR-199b)表达及意义。方法 选取2017年3月~2022年12月在本院进行脊柱外科手术后切口感染患者116例为感染组,另选取同期术后切口未感染者116例为非感染组;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定血清miR-182、miR-199b水平;采用微生物全自动鉴定仪鉴定病原菌菌种;采用pearson分析血清miR-182、miR-199b水平与炎症因子TNF-α、IL-10、IL-8水平相关性;采用多因素Logistic回归分析脊柱患者外科手术后切口感染的影响因素。结果 感染组患者中共检验出病原菌178株,其中革兰阳性菌56株(31.46%),革兰阴性菌117株(65.73%),真菌5株(2.81%);感染组患者血清炎症因子TNF-α[(15.56±2.84)ng/L]、IL-10[(4.17±0.81)pg/mL]、IL-8水平[(14.93±3.79)μg/L]较非感染组[(12.31±2.57)ng/L、(2.59±0.37)pg/mL、(7.24±2.18)μg/L]均显著升高(P<0.05);与非感染组[(1.28±0.37)、(1.35±0.35)]相比较,感染组血清miR-182水平(2.04±0.56)显著上调,血清miR-199b水平(0.76±0.32)显著下调(P<0.05);pearson相关分析显示,脊柱外科手术后切口感染患者血清miR-182水平与炎症因子TNF-α、IL-10、IL-8水平均呈正相关(P<0.05),miR-199b水平与炎症因子TNF-α、IL-10、IL-8水平均呈负相关(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,高水平miR-182、TNF-α、IL-10、IL-8均为脊柱疾病患者外科手术后切口发生感染的独立危险因素,高水平miR-199b为脊柱疾病患者外科手术后切口发生感染的独立保护因素(P<0.05)。结论 脊柱外科手术后切口感染患者血清miR-182水平显著上调,血清miR-199b水平显著下调,两者与脊柱疾病患者外科手术后切口感染相关。 展开更多
关键词 脊柱外科手术 切口感染 微小rna-182 微小rna-199b
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晚期结直肠癌患者血清微小RNA-199b和微小RNA-203水平检测及其预后预测价值分析
2
作者 王玮 王伟 李婷婷 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第6期832-837,共6页
目的:检测晚期结直肠癌患者血清微小RNA(miR)-199b和miR-203水平,分析其对患者预后的预测价值。方法:选择Ⅳ期结直肠癌患者92例为结直肠癌组,选择结直肠炎患者92例为对照组。采用逆转录聚合酶链式反应检测两组血清miR-199b及miR-203水... 目的:检测晚期结直肠癌患者血清微小RNA(miR)-199b和miR-203水平,分析其对患者预后的预测价值。方法:选择Ⅳ期结直肠癌患者92例为结直肠癌组,选择结直肠炎患者92例为对照组。采用逆转录聚合酶链式反应检测两组血清miR-199b及miR-203水平并进行比较。根据结直肠癌患者12个月随访结果分为病死组和生存组,分析晚期结直肠癌患者预后的影响因素,评价血清miR-199b及miR-203对晚期结直肠癌患者预后的预测价值,并进行生存分析。结果:结直肠癌组血清miR-199b、miR-203低于对照组(均P<0.05)。92例Ⅳ期结直肠癌患者中病死36例,纳入病死组,其余患者纳入生存组。病死组血清基质金属蛋白酶-14(MMP-14)、趋化因子受体4(CXCR4)水平高于生存组,血清miR-199b、miR-203低于生存组(均P<0.05)。MMP-14和CXCR4是晚期结直肠癌患者病死的风险因素,miR-199b和miR-203是晚期结直肠癌患者病死的保护因素(均P<0.05)。miR-199b与MMP-14、CXCR4呈负相关(r=-0.403、-0.458,均P<0.05),miR-203与MMP-14、CXCR4呈负相关(r=-0.461、-0.479,均P<0.05)。血清miR-199b、miR-203对晚期结直肠癌患者病死均有一定预测价值,且两项联合优于单项(均P<0.05)。血清miR-199b和miR-203高表达组生存率高于低表达组(均P<0.05)。结论:晚期结直肠癌患者血清miR-199b、miR-203水平降低,对患者预后具有良好的预测价值,且两项联合预测价值更高。 展开更多
关键词 结直肠癌 晚期 微小rna-199b 微小rna-203 预后 生存曲线
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子痫前期患者胎盘miR-199b、Klotho表达与低出生体重的关系 被引量：1
3
作者 叶思萍 陈月秋 吴陈华 《临床和实验医学杂志》 2021年第22期2431-2435,共5页
目的研究子痫前期(PE)患者胎盘微小RNA-199b(miR-199b)、Klotho表达情况,并分析二者与低出生体重的相关性。方法回顾性选取2019年1月至2020年12月在宁德师范学院附属宁德市医院行产前检查和住院分娩的122例中重度PE患者为研究对象,按照... 目的研究子痫前期(PE)患者胎盘微小RNA-199b(miR-199b)、Klotho表达情况,并分析二者与低出生体重的相关性。方法回顾性选取2019年1月至2020年12月在宁德师范学院附属宁德市医院行产前检查和住院分娩的122例中重度PE患者为研究对象,按照发病时的孕周,将PE患者分为早发型PE组71例(发病时妊娠<34周)和晚发型PE组51例(发病时妊娠≥34周);同期选择分娩的健康孕妇80例为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测胎盘中miR-199b、Klotho mRNA的水平;采用Pearson法分析miR-199b、Klotho mRNA水平与新生儿体重的相关性。结果与对照组相比,早发型PE组、晚发型PE组舒张压、收缩压较高,新生儿出生体重、分娩孕周较低,胎盘中miR-199b水平、Klotho mRNA水平较低,差异均有统计学意义(P<0.05);与晚发型PE组相比,早发型PE组舒张压、收缩压较高,新生儿出生体重、分娩孕周较低,胎盘中miR-199b水平、Klotho mRNA水平较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。PE患者胎盘miR-199b水平、Klotho mRNA水平与新生儿体重呈正相关(r=0.594、0.669,P<0.05)。二元Logistic回归分析,miR-199b低表达、Klotho低表达是PE患者低出生体重儿的独立危险因素(OR=2.149,95%CI:1.651~2.798;OR=2.151,95%CI:1.527~3.029,P<0.05)。结论miR-199b、Klotho在PE患者胎盘组织中呈低表达,miR-199b低表达、Klotho低表达是影响PE患者低出生体重儿的独立危险因素。 展开更多
关键词 子痫前期 微小rna-199b KLOTHO 低出生体重
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过表达微小RNA-199b维持人诱导多能干细胞分化的内皮细胞表型的研究
4
作者 钱昕 倪其泓 +6 位作者 邓昊昱 杨硕菲 王韦仑 陈佳佺 路灿 王晗 张岚 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期997-1000,共4页
目的过表达人诱导多能干细胞分化的内皮细胞(hiPSC-EC)中微小RNA(miRNA,miR)-199b-5p,探讨miR-199b-5p对hiPSC-EC传代过程中hiPSC-EC表型转换的影响。方法利用流式细胞术鉴定hiPSC-EC第1代(P1)、第5代(P5)和第10代(P10)内皮细胞表面标志... 目的过表达人诱导多能干细胞分化的内皮细胞(hiPSC-EC)中微小RNA(miRNA,miR)-199b-5p,探讨miR-199b-5p对hiPSC-EC传代过程中hiPSC-EC表型转换的影响。方法利用流式细胞术鉴定hiPSC-EC第1代(P1)、第5代(P5)和第10代(P10)内皮细胞表面标志CD31和CD34,将hiPSC-EC分为两组,利用慢病毒分别将过表达miR-199b-5p质粒和空白对照质粒转染hiPSC-EC,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测过表达miR-199b-5p组和空白对照组中miR-199b-5p的表达水平,流式细胞技术鉴定hiPSC-EC过表达组和空白对照组P10细胞表面标志CD31和CD34。应用GraphPadPrism7统计软件分析,数据以均值±标准差(Mean±SD)表示,采用t检验分析过表达组和对照组miR-199b-5p的转录水平和成管数目。结果流式细胞技术检测发现hiPSC-EC在P1~P10传代过程中内皮细胞表面标志CD31和CD34逐渐下降,P188.69%CD31^+/69.57%CD34^+,P568.84%CD31^+/36.90%CD34^+,P1041.66%CD31^+/19.29%CD34^+,FQ-PCR显示miR-199b-5p在hiPSC-ECP1~P10传代过程中显著下降(F=18.190,P<0.01),差异有统计学意义。利用慢病毒载体实现hiPSC-EC过表达miR-199b-5p后,hiPSC-EC在传代过程中内皮细胞表型转换显著被抑制,miR-199b-5p过表达组P1074.33%CD31^+/58.56%CD34^+,对照组P1046.30%CD31^+/38.07%CD34^+。结论miR-199b-5p在hiPSC-EC传代过程中显著下降,miR-199b-5p过表达能够维持传代过程中hiPSC-EC的表型。 展开更多
关键词 微小rna-199b 诱导多能干细胞 内皮细胞 表型转换
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MIR-199b-3p对癫痫小鼠海马神经元的保护作用及对mTOR信号通路的影响 被引量：1
5
作者 王跃鸣 胡慧娜 张璐 《卒中与神经疾病》 2023年第2期124-136,共13页
目的探究微小RNA-199b-3p(MicroRNA-199b-3p,MIR-199b-3p)对癫痫小鼠海马神经元的保护作用及对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(Mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的影响。方法将120只小鼠随机分为假手术(Sham)组、癫痫持续状态(Stat... 目的探究微小RNA-199b-3p(MicroRNA-199b-3p,MIR-199b-3p)对癫痫小鼠海马神经元的保护作用及对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(Mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的影响。方法将120只小鼠随机分为假手术(Sham)组、癫痫持续状态(Status epilepticus,SE)组、MIR-199b-3p模拟物(MIR-199b-3p mimic)组及其阴性对照(Negative control for MIR-199b-3p mimic,mimic NC)组、MIR-199b-3p mimic+pcDNA-NC组和MIR-199b-3p mimic+pc-mTOR组,后5组采用腹腔注射毛果芸香碱阻断外周胆碱能反应以建立SE小鼠模型,后4组造模前于前囟后1 mm、旁开1.5 mm钻孔处分别注射MIR-199b-3p mimic,mimic NC,MIR-199b-3p mimic+pcDNA-NC,MIR-199b-3p mimic+pc-mTOR,Sham组和SE组给予等体积生理盐水;采用谷氨酸诱导建立海马神经元HT22细胞损伤模型并分为6组:Control组、Model组、mimic NC组、MIR-199b-3p mimic组、MIR-199b-3p mimic+pcDNA-NC组、MIR-199b-3p mimic+pc-mTOR,后4组分别转染mimic NC,MIR-199b-3p mimic,MIR-199b-3p mimic+pcDNA-NC,MIR-199b-3p mimic+pc-mTOR,Control组和Model组不进行干预;miRNA芯片检测Sham组和SE组小鼠海马组织中的差异表达miRNA;Target Scan Human数据库和荧光素酶实验分析MIR-199b-3p与mTOR的靶向关系;Morris水迷宫实验检测小鼠的空间学习记忆能力;脑电图检查小鼠的癫痫放电情况;苏木素-伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色观察小鼠海马组织病理学形态;脱氧核苷酸末端转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记(Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine triphosphate nick end labeling,TUNEL)实验检测海马神经元及HT22细胞的凋亡率;细胞计数试剂盒-8(Cell counting Kit-8,CCK-8)法、5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromo-2-deoxyuridine,BrdU)掺入实验、流式细胞术、5,5′,6,6′-四氯-1,1′,3,3′-四乙基苯丙咪唑羰花青碘化物(5,5′,6,6′-Tetrachlorr-1,1′,3,3′-Tetraethyl-imidacarbocyanine iodide,JC-1)染色检测HT22细胞的活力、增殖能力、线粒体膜电位;测定� 展开更多
关键词 微小rna-199b-3p 癫痫 海马 神经元 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 凋亡
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miR-199b-5p对阿霉素诱导足细胞凋亡的影响及机制
6
作者 吴静漪 《山东医药》 CAS 2023年第7期25-29,共5页
目的 探讨miR-199b-5p对阿霉素诱导足细胞凋亡的影响及机制。方法 体外培养小鼠足细胞,用阿霉素构建足细胞凋亡模型。将足细胞随机分成对照组、阿霉素组、阿霉素+miR-199b-5p mimic组、阿霉素+NC mimic组、阿霉素+miR-199b-5p inhibito... 目的 探讨miR-199b-5p对阿霉素诱导足细胞凋亡的影响及机制。方法 体外培养小鼠足细胞,用阿霉素构建足细胞凋亡模型。将足细胞随机分成对照组、阿霉素组、阿霉素+miR-199b-5p mimic组、阿霉素+NC mimic组、阿霉素+miR-199b-5p inhibitor组、阿霉素+NC inhibitor组、阿霉素+miR-199b-5p mimic+Ad-脂肪细胞质膜相关蛋白(APMAP)组、阿霉素+miR-199b-5p mimic+Ad-NC组、阿霉素+miR-199b-5p inhibitor+Ad-APMAP RNAi组和阿霉素+miR-199b-5p inhibitor+Ad-NC RNAi组,分别给予miR-199b-5p mimic/inhibitor、过表达/敲低APMAP腺病毒转染,使miR-199b-5p过表达/沉默表达以及APMAP过表达/沉默表达。用实时荧光定量PCR检测细胞内miR-199b-5p及足细胞标志蛋白(Podocin)、凋亡相关基因(Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3)、APMAP mRNA表达,用Western blotting法检测细胞内Podocin、Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3、APMAP及NF-κB信号通路相关蛋白(NIK、TRAF3)表达。用生物信息学分析miR-199b-5p的特异性下游靶基因;将细胞随机分为NC mimic+WT-APMAP组、miR-199b-5p+WT-APMAP组、NC mimic+MUT-APMAP组、miR-199b-5p+MUT-APMAP组,用双荧光素酶报告基因实验验证miR-199b-5p的直接靶基因。结果 与对照组比较,阿霉素组miR-199b-5p、Bax、Cleaved caspase-3、NIK相对表达量高(P均<0.05),Podocin、Bcl-2、APMAP、TRAF3相对表达量低(P均<0.05)。与阿霉素+NC mimic组比较,阿霉素+miR-199b-5p mimic组Podocin、Bcl-2、APMAP、TRAF3相对表达量低,Bax、Cleaved caspase-3、NIK相对表达量高(P均<0.05)。与阿霉素+NC inhibitor组比较,阿霉素+miR-199b-5p inhibitor组Podocin、Bcl-2、APMAP、TRAF3相对表达量高,Bax、Cleaved caspase-3、NIK相对表达量低(P均<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实,与NC mimic+MUT-APMAP组比较,miR-199b-5p+WT-APMAP组APMAP荧光素酶活性低(P<0.05)。与阿霉素+miR-199b-5p mimic+Ad-NC组比较,阿霉素+miR-199b-5p mimic+Ad-APMAP组TRAF3相对表达量高,NIK相对表达量低(P均<0.05)。与� 展开更多
关键词 慢性肾脏病 足细胞凋亡 微小rna-199b-5p 阿霉素 脂肪细胞质膜相关蛋白
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核内miR-199b-5p通过上调CDK9表达促进心肌细胞肥大 被引量：4
7
作者 易芷瑶 赵安职 +6 位作者 张铭 曾妮 朱杰宁 杨莹 严钰敏 郭惠明 单志新 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期193-201,共9页
目的:研究核内微小RNA-199b-5p(miR-199b-5p)对心肌细胞肥大的调控作用及其机制。方法:利用RT-qPCR检测健康人与心衰患者心肌组织中miR-199b-5p的表达水平。通过核质分离及RT-qPCR技术确定miR-199b-5p在人心肌AC16细胞中的核质分布。原... 目的:研究核内微小RNA-199b-5p(miR-199b-5p)对心肌细胞肥大的调控作用及其机制。方法:利用RT-qPCR检测健康人与心衰患者心肌组织中miR-199b-5p的表达水平。通过核质分离及RT-qPCR技术确定miR-199b-5p在人心肌AC16细胞中的核质分布。原代分离培养C57BL/6乳小鼠心室肌细胞(NMVCs),转染miR-199b-5p mimic,利用RT-qPCR和Western blot检测心房钠尿肽(ANP)、MYH7/β-肌球蛋白重链(β-MHC)和细胞周期蛋白依赖性激酶9(CDK9)表达。敲减NMVCs中CDK9基因表达,检测其对miR-199b-5p诱导的心肌细胞肥大相关基因表达的影响。双萤光素酶报告基因实验确定miR-199b-5p对CDK9基因的转录激活作用及与其启动子区的结合作用。通过ChIP-PCR实验验证miR-199b-5p通过募集RNA聚合酶Ⅱ(PolⅡ)和p300参与CDK9基因的转录激活。结果:RT-qPCR结果显示心衰患者心肌中miR-199b-5p表达增加。核质分离和RT-qPCR结果显示人心肌AC16细胞中miR-199b-5p在胞核中富集存在。转染miR-199b-5p mimic能显著提高NMVCs中ANP、MYH7/β-MHC和CDK9表达。抑制CDK9表达可逆转miR-199b-5p的促心肌细胞肥大作用。双萤光素酶报告基因实验显示miR-199b-5p可增加CDK9基因的转录激活,miR-199b-5p与CDK9基因启动子区存在特异的结合位点。ChIP-PCR实验显示miR-199b-5p能募集PolⅡ和p300到CDK9基因启动子区,参与CDK9基因的转录激活。结论:核内miR-199b-5p通过转录激活CDK9基因发挥促进心肌细胞肥大作用。 展开更多
关键词 微小rna-199b-5p 细胞周期蛋白依赖性激酶9 心肌细胞肥大
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微小RNA-199b-5p在甲状腺乳头状癌中的表达及意义 被引量：3
8
作者 彭友 李琛 +3 位作者 罗定存 丁金旺 张卧 潘钢 《中华内分泌外科杂志》 CAS 2014年第4期268-271,281,共5页
目的探讨微小RNA-199b-5p（ microRNA-199b-5p，miR-199b-5p）在甲状腺乳头状癌（ papil-lary thyroid carcinoma ，PTC）中的表达及与临床特征之间的关系。方法提取36例PTC及其癌旁正常甲状腺组织标本的总RNA，采用逆转录实时定量聚合... 目的探讨微小RNA-199b-5p（ microRNA-199b-5p，miR-199b-5p）在甲状腺乳头状癌（ papil-lary thyroid carcinoma ，PTC）中的表达及与临床特征之间的关系。方法提取36例PTC及其癌旁正常甲状腺组织标本的总RNA，采用逆转录实时定量聚合酶链反应（ quantitative real-time polymerase chain reac-tion，qRT-PCR）方法检测miR-199b-5p的表达情况，并分析其与包膜侵犯、淋巴结转移等临床特征之间的关系。结果 miR-199b-5p的表达与PTC的淋巴结转移状态（χ2＝9.20，P＝0.01）、包膜侵犯（U＝36.00， P＝0.047）相关，而与其他临床特征之间均无相关性（年龄、性别、肿瘤直径、癌灶数量， U 值分别为151.00、87.00、64.00、87.00，P＞0.05）；ROC曲线分析显示，miR-199b-5p诊断PTC患者的特异性和敏感性分别为82.1％和72.7％。结论 miR-199b-5p在PTC中的异常表达可能与PTC的发生、发展及侵袭性有关。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 微小核糖核酸 微小rna-199b-5p
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miR-199b-3p对肾癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响及其机制探讨 被引量：2
9
作者 刘晨溪 赵红娟 +5 位作者 田伟 刘超 徐洋涛 潘岩 尤校雷 周洪月 《山东医药》 CAS 2022年第4期26-30,35,共6页
目的探讨微小RNA-199b-3p(miR-199b-3p)对肾癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响,并分析其调控机制。方法应用RT-qPCR检测人正常肾小管上皮细胞株HK-2细胞、肾癌细胞株786-O中的miR-199b-3p。取肾癌细胞株786-O,分别转染孔质粒、miR-199b-3p m... 目的探讨微小RNA-199b-3p(miR-199b-3p)对肾癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响,并分析其调控机制。方法应用RT-qPCR检测人正常肾小管上皮细胞株HK-2细胞、肾癌细胞株786-O中的miR-199b-3p。取肾癌细胞株786-O,分别转染孔质粒、miR-199b-3p mimics建立miR-NC组和miR-199b-3p mimics组,分别应用CCK-8增殖实验、克隆形成实验、细胞流式实验、Transwell实验观察各组细胞增殖、凋亡、侵袭能力。应用生物信息学方法分析miR-199b-3p可能作用的靶基因。取肾癌细胞株786-O,分别转染孔质粒、miR-199b-3p mimics(10 nmol/L)、miR-199b-3p mimics(50 nmol/L)、成纤维细胞生长因子2(FGF2)-siRNA,建立miR-NC组、miR-199b-3p mimics 10 nmol/L组、miR-199b-3p mimics 50 nmol/L组、FGF2-siRNA组,应用Western blotting法检测FGF2及PI3K/AKT信号通路关键分子表达蛋白。结果786-O细胞中miR-199b-3p表达低于HK-2细胞(P<0.05)。CCK-8增殖实验、克隆形成实验验显示miR-199b-3p mimics组细胞增殖能力低于miR-NC组(P均<0.05)。细胞流式实验显示,miR-199b-3p mimics组细胞凋亡率高于miR-NC组(P<0.05)。Transwell实验结果显示,miR-199b-3p mimics组786-O细胞侵袭能力低于miR-NC组(P<0.05)。TargetScan7.2软件在线预测显示FGF23′非编码区与miR-199b-3p具有结合位点。Western boltting法实验结果显示,miR-NC组、miR-199b-3p mimics 10 nmol/L组、miR-199b-3p mimics 50 nmol/L组FGF2蛋白表达分别为0.87±0.11、0.42±0.06、0.23±0.04,三组两两比较P均<0.05。miR-199b-3p mimics组、FGF2-siRNA组细胞中FGF2、p-AKT、p-ERK蛋白表达低于miR-NC组,AKT、ERK蛋白表达高于miR-NC组(P均<0.05)。结论miR-199b-3p在肾癌细胞中低表达,可以抑制肾癌细胞增殖、侵袭并促进其凋亡,其作用机制可能与miR-199b-3p负靶向调控FGF2、PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 微小rna-199b-3p 肾癌 细胞增殖 细胞凋亡 细胞侵袭能力 成纤维细胞生长因子2 PI3K/AKT信号通路
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