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可视化蛋白芯片法同时检测牛奶中喹诺酮类抗生素残留的含量 被引量：11
1
作者 李周敏 李心爱 +3 位作者 姚开安 雷青 许丹科 姜金斗 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1139-1147,共9页
目的:利用可视化蛋白芯片分析技术实现对牛奶中9个喹诺酮类抗生素残留含量的同时检测。方法:采用直接竞争法反应原理,将9个喹诺酮类药物的单克隆抗体以微阵列形式固定于微孔板底部,制备成微孔板生物芯片,并依次与纳米材料标记的喹诺酮... 目的:利用可视化蛋白芯片分析技术实现对牛奶中9个喹诺酮类抗生素残留含量的同时检测。方法:采用直接竞争法反应原理,将9个喹诺酮类药物的单克隆抗体以微阵列形式固定于微孔板底部,制备成微孔板生物芯片,并依次与纳米材料标记的喹诺酮类人工抗原、喹诺酮类药物反应,最后用银增强显色产生肉眼可见的阵列点。显色结果用可视化芯片分析仪快速扫描成像,图像采用芯片分析软件处理并提取信号,实现定量检测。结果:本法测定牛奶中9个喹诺酮类药物的加标回收率分别在70%~130%之间,且RSD均在15%以内。同时对超市购得的16个品牌牛奶样品中喹诺酮类抗生素的含量进行了检测,含量均小于1 ng·mL-1,符合国家规定的最大允许残留量。结论:本法能够用于牛奶样本中9个喹诺酮类药物的残留的同时快速初筛。 展开更多
关键词 微阵列 蛋白芯片 微孔板芯片 喹诺酮类抗生素 可视化检测 残留
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可视化微孔板芯片检测结核分枝杆菌利福平及异烟肼耐药性研究 被引量：3
2
作者 李永进 欧青叶 +5 位作者 刘春晓 史蕾 赵纯中 古莉冰 徐云庆 顾大勇 《检验医学》 CAS 2013年第8期693-697,共5页
目的构建基于可视化微孔板芯片技术的结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药性检测方法。方法将针对结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药性相关基因设计的探针按预设模式固定于芯片表面构建基因芯片,并用其检测结核分枝杆菌的基因突变以判断其耐药... 目的构建基于可视化微孔板芯片技术的结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药性检测方法。方法将针对结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药性相关基因设计的探针按预设模式固定于芯片表面构建基因芯片,并用其检测结核分枝杆菌的基因突变以判断其耐药性,阳性结果在芯片表面形成裸眼可见的色点。结果可视化微孔板芯片展示了稳定的试验结果,在50株异烟肼耐药株中检出40株(80%),主要为katG基因315位突变;在20株利福平耐药株中检出15株(75%),主要为rpoB基因531及526位突变。芯片鉴定阳性样本经聚合酶链反应(PCR)测序比对,其结果与芯片结果完全相符。结论可视化微孔板芯片用于检测结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药性具有较高的特异性和敏感性,该方法可以快速、准确、方便地应用于结核分枝杆菌耐药性的检测。 展开更多
关键词 微孔板芯片 结核分枝杆菌 耐药性 利福平 异烟肼
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深低温保存单采血小板凋亡相关miRNA的差异表达 被引量：3
3
作者 陈倩 张志亮 +5 位作者 屈璐 饶彩霞 赵文荣 陈奋 杨剑芬 冯娜 《中国输血杂志》 北大核心 2017年第11期1235-1238,共4页
目的了解单采血小板在深低温保存过程中凋亡相关microRNA(miRNA)的表达改变。方法应用miRNA微孔板芯片技术分析-80℃保存不同时间单采血小板凋亡相关miRNA表达谱的差异,同时利用qRT-PCR技术验证该结果的准确性;采用生物信息学软件预测... 目的了解单采血小板在深低温保存过程中凋亡相关microRNA(miRNA)的表达改变。方法应用miRNA微孔板芯片技术分析-80℃保存不同时间单采血小板凋亡相关miRNA表达谱的差异,同时利用qRT-PCR技术验证该结果的准确性;采用生物信息学软件预测差异表达miRNA可能的靶基因。结果与新鲜单采血小板相比,凋亡相关miRNA表达谱在血小板-80℃保存5 d时无明显变化、保存7 d时仅有2种明显上调变化的miRNA:miR-216和miR-296。选择表达谱中miR-216 miR-296 miR-7和miR-16共4种miRNA做qRT-PCR验证:以新鲜血小板表达水平为基准值1,-80℃保存5、7 d后miR-216的相对表达量分别为1.81±0.21和2.88±0.23,miR-296的相对表达量分别为2.27±0.20和3.85±0.17,miR-7的相对表达量分别为0.89±0.06和0.76±0.03,miR-16的相对表达量分别为1.12±0.35和1.40±0.32,miR-216和miR-296在<7 d保存过程中表达上调(P<0.05),miR-7和miR-16的表达未发生明显变化(P>0.05)。结论短期(<7 d)深低温保存单采血小板凋亡相关miRNA的表达谱接近新鲜单采血小板。 展开更多
关键词 单采血小板 深低温保存 凋亡 MIRNA 微孔板芯片 QRT-PCR 保存时间
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食源致病菌96微孔板DNA诊断芯片的研制及在一起食物中毒突发事件中的应用 被引量：9
4
作者 莫秋华 李强 +9 位作者 林继灿 谭华 涂承宁 叶立青 刘志明 杜坚 孙虹 李书香 王献煌 杨泽 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期417-421,共5页
目的研制能同时检测9种常见食源致病菌的96微孔板DNA诊断芯片。方法针对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7(Stx1和Stx2)、志贺氏菌、产单核细胞李斯特菌、蜡样芽胞杆菌、小肠结肠炎耶尔森菌、副溶血弧菌、霍乱弧菌等9种最常见... 目的研制能同时检测9种常见食源致病菌的96微孔板DNA诊断芯片。方法针对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7(Stx1和Stx2)、志贺氏菌、产单核细胞李斯特菌、蜡样芽胞杆菌、小肠结肠炎耶尔森菌、副溶血弧菌、霍乱弧菌等9种最常见的食源性致病菌,首先选择合适的保守基因,设计种特异性的PCR引物(5'端标记生物素)和检测探针,通过参数优化建立一管多重PCR扩增体系;然后按5×5的阵列格式将探针点制到96微孔板的微孔内,通过条件优化建立稳定的PCR产物与固化探针的微孔杂交体系;采用链霉抗生物素蛋白碱性磷酸酶和化学显色底物NBT/BCIP来检测特异性的PCR杂交产物。结果20株标准菌株验证已建立的食源致病菌微孔板DNA诊断芯片,获得比较特异和稳定的实验结果。在一起食物中毒事件中,该芯片在采样后12h内检出金黄色葡萄球菌,与传统的细菌分离培养和生化鉴定的结果相符。结论本研究建立的新型食源致病菌96微孔板DNA诊断芯片具有快速、准确、自动化和高通量等特点,为快速应对食物中毒等突发公共卫生事件提供了非常有价值的检测技术。 展开更多
关键词 食源致病菌 96微孔板芯片 DNA检测 食物中毒
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应用微孔板芯片分析机采血小板常温保存过程中凋亡相关miRNA的表达改变 被引量：4
5
作者 陈倩 李朝红 +4 位作者 谭琳 张志亮 唐秋萍 许开宁 符策瑛 《中国输血杂志》 北大核心 2017年第8期893-896,共4页
目的分析机采血小板在常温保存过程中凋亡相关miRNA的表达改变。方法应用miRNA微孔板芯片技术研究常温保存机采血小板在不同保存时间凋亡相关miRNA的差异表达谱,采用生物信息学软件预测发生差异表达的miRNA可能的靶基因及相关生物学功... 目的分析机采血小板在常温保存过程中凋亡相关miRNA的表达改变。方法应用miRNA微孔板芯片技术研究常温保存机采血小板在不同保存时间凋亡相关miRNA的差异表达谱,采用生物信息学软件预测发生差异表达的miRNA可能的靶基因及相关生物学功能。结果与新鲜血小板相比,常温保存7 d的血小板,有7种miRNA发生了显著变化。其中miR-16、Let-7b、miR-26和Let-7c的表达上调,miR-7、miR-145和miR-197的表达下调。结论筛选出的差异表达miRNA可能参与了血小板的保存损伤过程。 展开更多
关键词 miRNA微孔板芯片 机采血小板 凋亡 MIRNA
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食源性致病菌96微孔板DNA诊断芯片的研制 被引量：1
6
作者 张丽荣 魏泉德 +4 位作者 林毅雄 谭爱军 郑予柯 方艳梅 肖慧洁 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2013年第1期87-91,共5页
目的:建立一种能同时检测12种常见食源性致病菌的基于微孔板阵列技术的检测平台,以满足食物中毒处置中能快速、准确提供实验室结果的要求。方法:针对12种最常见的食源性致病菌,设计种特异性的PCR引物和寡核苷酸探针,按照5×5的阵列... 目的:建立一种能同时检测12种常见食源性致病菌的基于微孔板阵列技术的检测平台,以满足食物中毒处置中能快速、准确提供实验室结果的要求。方法:针对12种最常见的食源性致病菌,设计种特异性的PCR引物和寡核苷酸探针,按照5×5的阵列格式将探针点制到96微孔板的微孔内,建立稳定的微孔杂交体系,采用链霉亲和素碱性磷酸酶和化学显色底物NBT/BCIP来检测特异性的PCR杂交产物。结果:经标准菌株验证已建立的食源性致病菌微孔板DNA诊断芯片,获得比较敏感、特异和稳定的实验结果;同时经食物中毒样品检测应用,与传统的细菌分离培养和生化鉴定的结果相符。结论:本研究建立的能同时检测12种常见食源性致病菌的基于微孔板阵列技术的检测平台具有快速、准确、自动化和高通量等特点,作为应对食物中毒等突发公共卫生事件的实用检测技术具有重要意义。 展开更多
关键词 96微孔板芯片 DNA微阵列 食源性致病菌 食物中毒
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食源性致病菌96微孔板芯片在一起食物中毒检测中的应用 被引量：1
7
作者 张丽荣 林毅雄 +4 位作者 莫韵韶 黄辉涛 郑予柯 方艳梅 魏泉德 《实用预防医学》 CAS 2013年第2期224-226,共3页
目的利用微孔板芯片技术对一起食物中毒进行检测,评价其在食物中毒事件中的应用效果。方法用食源性致病菌96微孔板芯片对一起食物中毒样品进行检测,同时采用传统的病原分离方法和细菌生化鉴定仪对分离菌株进行鉴定。结果食源性致病菌96... 目的利用微孔板芯片技术对一起食物中毒进行检测,评价其在食物中毒事件中的应用效果。方法用食源性致病菌96微孔板芯片对一起食物中毒样品进行检测,同时采用传统的病原分离方法和细菌生化鉴定仪对分离菌株进行鉴定。结果食源性致病菌96微孔板芯片对食物中毒样品的检测结果与病原分离培养结果完全一致。结论食源性致病菌96微孔板芯片具有快速、准确、自动化和高通量等特点,作为应对食物中毒等突发公共卫生事件的快速检测具有重要意义。 展开更多
关键词 食源性致病菌 96微孔板芯片 食物中毒
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微孔板生物芯片测定蜂蜜中四环素残留方法的研究及应用 被引量：5
8
作者 王兴如 钟文英 +1 位作者 李周敏 许丹科 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1240-1244,共5页
目的：采用微孔板生物芯片可视化分析技术建立一种内标法蛋白免疫分析新方法,实现单孔内测定蜂蜜中四环素的残留定量。方法：研究中根据间接竞争法反应原理,将四环素人工抗原和纳米银标记的羊抗兔Ig G以微阵列形式固定于微孔板底部,制... 目的：采用微孔板生物芯片可视化分析技术建立一种内标法蛋白免疫分析新方法,实现单孔内测定蜂蜜中四环素的残留定量。方法：研究中根据间接竞争法反应原理,将四环素人工抗原和纳米银标记的羊抗兔Ig G以微阵列形式固定于微孔板底部,制备成微孔板生物芯片阵列,并依次与四环素单克隆抗体、纳米银标记羊抗鼠Ig G反应,最后用纳米增强法显色,并采用可视化芯片扫描仪对微孔板显色结果进行快速扫描成像,图像采用相关软件处理。结果：该法的检测限可达0.8 ng·m L-1,线性范围为0.8∽19.2 ng·m L-1,R2=0.971,回收率达80%∽120%,RSD〈10%。结论：本法简便快速,易操作,高通量,能满足日常大规模样品的初筛。 展开更多
关键词 微孔板生物芯片 间接竞争法 内标法 外标法 可视化检测 四环素
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