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扩增结核分枝杆菌DNA的微孔杂交比色检测
1
作者 郭露 杨正林 +2 位作者 杜琼 罗涛 杨明 《四川医学》 CAS 2000年第4期299-301,共3页
目的　建立简单的杂交方法特异地检测聚合酶链反应 (PCR)扩增的结核杆菌 DNA。方法　用玻璃粉提纯结核分枝杆菌 DNA,d UTP-脲 DNA糖基化酶 (UDG)防污染 ,用 5′端标记生物素的引物进行 PCR扩增 ,5′端带标记的扩增产物与固定在微孔板上... 目的　建立简单的杂交方法特异地检测聚合酶链反应 (PCR)扩增的结核杆菌 DNA。方法　用玻璃粉提纯结核分枝杆菌 DNA,d UTP-脲 DNA糖基化酶 (UDG)防污染 ,用 5′端标记生物素的引物进行 PCR扩增 ,5′端带标记的扩增产物与固定在微孔板上特异探针杂交 ,然后用酶标链霉亲和素进行酶联免疫法检测。结果　对 10 0份来自结核病人高度怀疑有结核分枝杆菌的痰标本检测 ,扩增杂交法检出 40份阳性 ,比抗酸染色法 (15 / 10 0 ) ,培养法 (2 8/ 10 0 )和 PCR电泳法 (35 / 10 0 )检出率高 ,而 5 0份来自无结核感染者的痰标本 ,几种方法检查均为阴性。结论　该方法可灵敏、特异、客观地检测临床标本中的结核分枝杆菌 ,比传统 PCR—电泳法优越。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 DNA 微孔杂交 比色检测
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饮服行业人群乙型肝炎病毒感染状况及其传染性研究 被引量：4
2
作者 韩方岸 陈新 +4 位作者 龚玉华 仲志鸿 陈娟 石笑笑 徐岚 《江苏预防医学》 CAS 2003年第3期13-15,共3页
目的:了解镇江市饮服从业人员乙型肝炎病毒的感染状况及其传染性,为制订控制措施提供依据。方法:用聚合酶链反应-微孔杂交法和实时荧光定量法对HBsAg阳性并HBeAg阴性的饮服从业人员跟踪检测HBV-DNA。结果:1999年～2001年镇江市饮服从业... 目的:了解镇江市饮服从业人员乙型肝炎病毒的感染状况及其传染性,为制订控制措施提供依据。方法:用聚合酶链反应-微孔杂交法和实时荧光定量法对HBsAg阳性并HBeAg阴性的饮服从业人员跟踪检测HBV-DNA。结果:1999年～2001年镇江市饮服从业人员HBsAg平均阳性率为3.61％。HBsAg阳性人员中,HBeAg阳性者占15.81％。HBsAg<1:512且HBeAg阴性者900例中,HBV-DNA阳性312例,阳性率为34.67％。结论:HBsAg<1:512且HBeAg阴性的饮服从业人员仍有一部分是HBV的传染源。 展开更多
关键词 饮服行业 乙型肝炎病毒感染 传染性 从业人员 聚合酶链反应-微孔杂交法 实时荧光定量法
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基因扩增产物微孔杂交法检测新城疫病毒致病毒株
3
作者 夏梦岩 张卓然 +1 位作者 秦成 赵静 《中国动物检疫》 CAS 2002年第5期22-25,共4页
目的建立一种快速、简便、敏感、实用的方法以检测新城疫病毒致病性毒株。方法在F蛋白裂解位点的两侧设计引物 ,引物1的5'端用生物素标记 ;按Aus/32强毒株F基因裂解区域设计24个碱基的寡核苷酸探针 ,并对之进行5'端地高辛标记... 目的建立一种快速、简便、敏感、实用的方法以检测新城疫病毒致病性毒株。方法在F蛋白裂解位点的两侧设计引物 ,引物1的5'端用生物素标记 ;按Aus/32强毒株F基因裂解区域设计24个碱基的寡核苷酸探针 ,并对之进行5'端地高辛标记。生物素化的双链扩增产物被固相的链霉亲和素捕获后经变性成为生物素化单链。然后微孔中加入地高辛标记的探针进行杂交 ,并用抗 -地高辛 -碱性磷酸酶显色。结果所建立的方法快速、简便、特异 ,敏感性比琼脂糖电泳法高约3～4倍 ,批内CV为9.88 % ,批间CV为18.31%。结论所建立的方法优化PCR条件后可作为新城疫病毒感染诊断。 展开更多
关键词 基因扩增产物微孔杂交法 检测 新城疫病毒 致病毒株 免疫酶技术 固相杂交
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TRAP-微孔杂交法测定胸腹水端粒酶活性 被引量：1
4
作者 施健 茅国兴 +1 位作者 王惠民 卢美红 《交通医学》 1999年第4期440-441,共2页
目的:探讨TRAP-微孔杂交法应用于胸腹水中脱落细胞端粒酶活性研究的可行性及其应用价值.方法:利用以PCR为基础结合捕获探针技术的TRAP-微孔杂交法对43例浆膜腔积液进行了端粒酶活性的测定.结果:29例恶性肿瘤病人浆膜腔积液端粒酶阳性率... 目的:探讨TRAP-微孔杂交法应用于胸腹水中脱落细胞端粒酶活性研究的可行性及其应用价值.方法:利用以PCR为基础结合捕获探针技术的TRAP-微孔杂交法对43例浆膜腔积液进行了端粒酶活性的测定.结果:29例恶性肿瘤病人浆膜腔积液端粒酶阳性率为82.8%(24/29),对照组良性病人浆膜腔积液端粒酶阳性率为14.3%(2/14).结论:TRAP-微孔杂交法是一种敏感、简便、可靠的测定端粒酶活性的方法,端粒酶活性的测定对于恶性肿瘤有无胸腹腔转移有重要应用价值. 展开更多
关键词 端粒 端粒酶 TRAP 微孔杂交法 胸腹水 肿瘤
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免疫捕获-核酸扩增-微孔杂交检测贝类中甲型肝炎病毒的方法研究
5
作者 俞晓进 李显 汪华 《中国卫生检验杂志》 CAS 2005年第1期15-16,45,共3页
目的 :建立贝类中甲型肝炎病毒新的检测方法。方法 :先用IgG抗体吸附标本中的HAV ,然后将HAV中的RNA逆转录成cDNA ,用PCR方法扩增。PCR产物与标记特异基因探针孔中分子杂交 ,最后加入与标记物对应的酶配体 ,酶联免疫检测。结果 :采用的... 目的 :建立贝类中甲型肝炎病毒新的检测方法。方法 :先用IgG抗体吸附标本中的HAV ,然后将HAV中的RNA逆转录成cDNA ,用PCR方法扩增。PCR产物与标记特异基因探针孔中分子杂交 ,最后加入与标记物对应的酶配体 ,酶联免疫检测。结果 :采用的两对引物和探针均可用于检测。仅加入HAV的可测出阳性 ,其余病毒测不出。寡核苷酸探针 3 75nmol/L、7 5nmol/L、15nmol/L比较理想 ,杂交时间为 12 0min ,显色 3 0min最佳。免疫捕获 -核酸扩增 -微孔杂交方法比原方法提高 2 5倍以上。推测方法的检测限达到 8pfu/g贝组织。 结论 :免疫捕获 -核酸扩增 -微孔杂交方法灵敏度高、特异性强 ,且可以定量。 展开更多
关键词 贝类 甲型肝炎病毒 免疫捕获-核酸扩增-微孔杂交 寡核苷酸探针
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微孔杂交快速检测主要黄病毒方法的建立 被引量：2
6
作者 徐晓立 任瑞文 +2 位作者 方美玉 刘建伟 洪文艳 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期854-854,共1页
登革病毒1～4型（dengue virus type 1-4，DV1-4）、流行性乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus，JEV）及黄热病病毒（yellow fever virus，YFV）均为黄病毒属的重要传染病病原，其流行季节及临床症状都极为相似，且暴发日益频... 登革病毒1～4型（dengue virus type 1-4，DV1-4）、流行性乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus，JEV）及黄热病病毒（yellow fever virus，YFV）均为黄病毒属的重要传染病病原，其流行季节及临床症状都极为相似，且暴发日益频繁，发展特异、敏感的快速诊断及鉴别诊断方法，对这类疾病的预防及控制具有重要意义。本研究在对其基因组序列系统分析的基础上，建立了快速检测及鉴别诊断上述病毒的微孔杂交（PCR-ELISA）方法。 展开更多
关键词 病毒方法 快速检测 微孔杂交 ENCEPHALITIS 流行性乙型脑炎病毒 鉴别诊断 黄热病病毒 FEVER
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4种方法联合检测在菌阴肺结核临床诊断价值的研究 被引量：24
7
作者 姜秀峰 王嘉祺 +1 位作者 董惠芳 蔡曦光 《中国防痨杂志》 CAS 北大核心 2004年第2期84-88,共5页
目的　探讨痰聚合酶链反应———微孔板杂交技术 (PCR ELISA)、抗脂阿拉伯甘露糖(LAM IgG)抗体、结核菌素 (PPD) 1TU皮试以及血清可溶性白细胞介素 2受体 (sIL 2R)水平 ,4种方法联合检测对初治菌阴肺结核患者临床诊断的意义。方法　以上... 目的　探讨痰聚合酶链反应———微孔板杂交技术 (PCR ELISA)、抗脂阿拉伯甘露糖(LAM IgG)抗体、结核菌素 (PPD) 1TU皮试以及血清可溶性白细胞介素 2受体 (sIL 2R)水平 ,4种方法联合检测对初治菌阴肺结核患者临床诊断的意义。方法　以上述 4种方法检测初治菌阳肺结核57例 ,初治菌阴肺结核 58例 ,非结核肺疾病 41例 ,健康对照 36例。分别进行单项与联合检测 ,观察初治菌阴肺结核的特异性与敏感性。结果　PCR ELISA、LAM IgG、TB PPD及sIL 2R单项检测对菌阴肺结核的阳性检出率依次分别为 43 .1 % ,37.9% ,31 .0 % ,50 .0 %。联合检测对菌阴肺结核的阳性检出率 2联、3联及 4联依次分别为 56 .9% ,70 .7% ,84.5 % ,与单项检测的最高阳性检出率相比由50 .0 %提高到 84.5 % ;联合检测的特异性分别为 92 .2 % ,88.3 %和 84.4%。结论　通过 4种方法联合检测能显著提高菌阴肺结核的阳性检出率 ,同时也保持了相对高的特异性。联合检测对于菌阴肺结核的诊断 。 展开更多
关键词 联合检测 肺结核 诊断 聚合酶链反应 微孔板杂交 结核菌素 可溶性白细胞介素2受体
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端粒重复扩增-微孔板杂交法用于端粒酶活性测定的研究 被引量：23
8
作者 王惠民 施健 +3 位作者 刘俊华 瞿晓慈 张冬雷 杨振华 《中华医学检验杂志》 CSCD 1999年第1期24-26,共3页
目的探讨用端粒重复扩增（ＴＲＡＰ）微孔板杂交法，检测人端粒酶方法学研究及临床应用。方法利用Ｋｉｍ法处理组织与胸腹水细胞及扩增端粒酶产物，引物ＴＳ含生物素，扩增产物与包被有亲和素的微孔板结合，并与含荧光素特异探针杂交... 目的探讨用端粒重复扩增（ＴＲＡＰ）微孔板杂交法，检测人端粒酶方法学研究及临床应用。方法利用Ｋｉｍ法处理组织与胸腹水细胞及扩增端粒酶产物，引物ＴＳ含生物素，扩增产物与包被有亲和素的微孔板结合，并与含荧光素特异探针杂交，酶标记抗荧光素抗体与之结合而呈色。结果该方法ＮａＯＨ的最佳变性浓度为０６ｍｏｌ／Ｌ，最佳杂交时间为１小时，批内变异系数（ＣＶ）为９６％。在９４例各种恶性肿瘤组织与恶性胸腹水端粒酶活性总检出率８９４％，其中５例胸腹膜转移癌的胸腹水检出率为８０％，５８例肿瘤远端组织与良性胸腹水为８６％。结论该法有较好的测定敏感度与重复性，较银染色法更为简便快速，无同位素污染，检测成本低。 展开更多
关键词 端粒酶 端粒 TRAP-微孔板杂交 肿瘤
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核酸诊断技术规范化的研究 被引量：12
9
作者 杨瑞馥 郭兆彪 +3 位作者 张敏丽 汪晓辉 宋亚军 王津 《生物技术通讯》 CAS 1999年第2期81-88,91,共9页
针对 PCR技术应用中的一些问题 ,从下述几方面开展了核酸诊断技术标准化的研究 :1探讨了设计引物的影响因素 ,发现根据同一基因设计的不同引物对 PCR敏感性影响较大 ,可相差 2 0倍 ,进一步研究表明 ,引物的自由能 ,尤其是引物 3′端 6... 针对 PCR技术应用中的一些问题 ,从下述几方面开展了核酸诊断技术标准化的研究 :1探讨了设计引物的影响因素 ,发现根据同一基因设计的不同引物对 PCR敏感性影响较大 ,可相差 2 0倍 ,进一步研究表明 ,引物的自由能 ,尤其是引物 3′端 6个碱基的自由能可能决定着 PCR的敏感性 ;2研制成功室温稳定的 PCR试剂 ,将所有 PCR成分 (加入一种酶保护剂 )配制并分装于微量离心管中 ,并干燥 ,试剂室温放置 8个月 ,37℃破坏 2周对检测结果无任何影响 ;3因尿嘧啶糖基化酶( UDG)可特异降解 DNA双链中的尿密啶核苷 ,PCR体系中以 d UTP代替 d TTP,并在 PCR扩增前用 UDG消化 1 5 min,就可以特异防止 PCR产物的污染。对炭疽杆菌、鼠疫杆菌、土拉杆菌和布鲁氏菌扩增结果表明 ,0 .1 U的 UDG可完全消化 1 0 3～ 1 0 8个产物分子的污染 ;4建立了微孔板杂交技术代替电泳方法检测扩增产物 ,将 PCR产物克隆作为捕获探针包被聚乙烯微孔板 ,PCR引物5′末端生物素标记 ,扩增后作为待检测探针杂交 ,通过比较影响微孔板杂交的包被、杂交和显色等因素 ,建立了 PCR- EIA技术。通过比较包被缓冲液发现镁离子及其离子强度是影响 DNA包被的重要因素 ,包被的 DNA以线型质粒最佳 ,每孔包被 30 0 ng左右的 DNA杂交效果最好 ;杂交液中加和不加甲? 展开更多
关键词 聚合酶链反应 微孔板杂交 防污染 酶免疫测定 规范化
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多重PCR-核酸探针杂交法同时检测沙眼衣原体、解脲支原体和淋病奈瑟菌 被引量：12
10
作者 杨国翠 李智涛 +7 位作者 李振勇 冯艳铭 邵大晓 赵大鹏 崔天星 范家明 刘兆江 蔡铁华 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期21-23,共3页
目的　建立一种同时检测沙眼衣原体、解脲支原体、淋病奈瑟菌三种病原体DNA的方法并用于临床标本检测。方法　采用多重PCR 核酸探针杂交技术 ,结果与常规PCR法比较。结果　本法特异性良好 ,敏感度达到 0 1fg。经过对 166例性传播疾病... 目的　建立一种同时检测沙眼衣原体、解脲支原体、淋病奈瑟菌三种病原体DNA的方法并用于临床标本检测。方法　采用多重PCR 核酸探针杂交技术 ,结果与常规PCR法比较。结果　本法特异性良好 ,敏感度达到 0 1fg。经过对 166例性传播疾病门诊患者标本测定证实 ,沙眼衣原体、解脲支原体、淋病奈瑟菌检出率分别为 2 2 9% ,5 4 8%和 3 4 3 % ,并有 2 2 2 %的双重复合感染和 4 8%的三重复合感染。并与常规PCR法具有很好的一致性。结论　本法快速、简便、特异性好、能指示多重感染。 展开更多
关键词 多重聚合酶链反应 沙眼衣原体 解脲支原体 淋病奈瑟菌 微孔板核酸杂交 混合感染
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云南汉族HLA-DRB1多态性分析及与9个汉族群体的比较 被引量：9
11
作者 许绍斌 陶玉芬 +6 位作者 黄小琴 初正韬 班贵宏 钱亚屏 OHASHI Jun TOKUNAGA Katsushi 褚嘉祐 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期787-792,共6页
应用聚合酶链反应—微孔板杂交 (PolymeraseChainReactionandMicrotitrePlateHybridization ,PCR MPH)的方法对云南 12 9个无亲缘关系的汉族样品进行了HLA DRB1的遗传多态性分析 ,对MPH初分出的DRB1 15组的样品进行了单链构象多态 (Sing... 应用聚合酶链反应—微孔板杂交 (PolymeraseChainReactionandMicrotitrePlateHybridization ,PCR MPH)的方法对云南 12 9个无亲缘关系的汉族样品进行了HLA DRB1的遗传多态性分析 ,对MPH初分出的DRB1 15组的样品进行了单链构象多态 (Single StrandConformationPolymorphism ,SSCP)检测。共发现 36种等位基因 ,其中等位基因频率大于 0 0 5的有DRB1 15 0 1(0 12 4 0 ) ,DRB1 0 90 12 (0 0 96 9) ,DRB1 0 80 32 (0 0 930 ) ,DRB1 12 0 2(0 0 891) ,DRB1 12 0 1(0 0 814 ) ,DRB1 14 0 1(0 0 775 ) ,DRB1 0 70 1(0 0 6 2 0 )。云南汉族HLA DRB1等位基因频率与中国其他 9个汉族群体进行 χ2 检验 ,结果显示与云南汉族比较 χ2 >10的有西安汉族 (DR8,χ2 =13 9712 )、上海汉族 (DR4 ,χ2 =10 16 32 )、广东汉族 (DR9,χ2 =12 6 12 1)和南京汉族 (DR4 ,χ2 =10 5 796 )。从遗传距离分析发现 ,在 9个国内汉族群体中云南汉族与辽宁汉族有最近的距离 (0 0 5 4 1) ,而与广东汉族最远 (0 185 1)。云南汉族在构成上可能与辽宁汉族更为接近 ,尽管地处南方 ,但已不属典型的南方汉族。这也可能因云南汉族与当地的少数民族存在基因交流 。 展开更多
关键词 云南汉族 HLA-DRBI基因多态 聚合酶链反应-微孔板杂交 单链构象多态 遗传距离
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聚合酶链反应-微孔板杂交作人乳头瘤病毒新亚型分子流行病学研究 被引量：10
12
作者 董学君 张国荣 +3 位作者 蔡红光 徐国强 叶飞 詹乾钢 《中国实验诊断学》 2003年第4期301-303,共3页
目的　了解人乳头瘤病毒 (HPV)新亚型 (注册号 :AF2 76 910 )的分子流行病学特点。方法　PCR 微孔板杂交检测泌尿生殖道标本、宫颈癌石蜡包埋组织、胃癌组织中HPV新亚型 ,结合临床特征了解其致病特点。结果　 2 0 2例经HPV通用引物筛查... 目的　了解人乳头瘤病毒 (HPV)新亚型 (注册号 :AF2 76 910 )的分子流行病学特点。方法　PCR 微孔板杂交检测泌尿生殖道标本、宫颈癌石蜡包埋组织、胃癌组织中HPV新亚型 ,结合临床特征了解其致病特点。结果　 2 0 2例经HPV通用引物筛查阳性的泌尿生殖道标本中 ,2例HPV新亚型阳性 ,占 0 .1% ;5 1例宫颈癌石蜡包埋组织中 ,3例HPV新亚型阳性 ,占 5 .9% ;15例胃癌组织 ,未测到HPV新亚型。结论　早在 5年前本地区HPV新亚型就已存在 ;HPV新亚型在宫颈癌组织中被测到 ,可能提示其有致癌作用 ,值得进一步研究。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 微孔板杂交 人乳头瘤病毒 分子流行病学 研究 宫颈癌 胃癌
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生殖器溃疡中单纯疱疹病毒的检测和分型 被引量：9
13
作者 赖伟红 冯莲凤 +2 位作者 韩国柱 钟铭英 叶顺章 《中国麻风皮肤病杂志》 北大核心 2003年第1期4-5,共2页
目的 :　了解性病门诊生殖器溃疡患者中单纯疱疹病毒 (HSV)感染情况 ,并评价聚合酶链反应 (PCR) 微孔板反向杂交检测和分型方法在生殖器疱疹诊断中的意义。方法 :　采用病毒分离培养、普通PCR和PCR 微孔板反向杂交法同时对 2 0 0份生... 目的 :　了解性病门诊生殖器溃疡患者中单纯疱疹病毒 (HSV)感染情况 ,并评价聚合酶链反应 (PCR) 微孔板反向杂交检测和分型方法在生殖器疱疹诊断中的意义。方法 :　采用病毒分离培养、普通PCR和PCR 微孔板反向杂交法同时对 2 0 0份生殖器溃疡标本作了HSV检测与分型。结果 :　PCR 微孔板反向杂交法的敏感性和特异性分别为 98.1%和 95 .9% ,PCR 微孔板杂交法分型结果与病毒分离培养法和普遍PCR的分型结果完全相符。生殖器溃疡中HSV检出率为 3 0 % (60 / 2 0 0 ) ,其中HSV 2感染占 96.7% (5 8/ 60 )。结论 :　HSV 2是性病门诊患者生殖器溃疡的主要病因之一 ,PCR 微孔板反向杂交法是一种适用生殖器溃疡标本中HSV的检测与分型的快速。 展开更多
关键词 生殖器溃疡 单纯疱疹病毒 检测 聚合酶链反应 微孔板反向杂交 分型
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大蒜素对结肠癌Lovo细胞端粒酶活性、环氧化酶-2及核因子-κB的影响 被引量：5
14
作者 关文明 范钰 +3 位作者 林庚金 钱立平 许祖德 黄富春 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第6期597-599,共3页
目的　探讨大蒜素对结肠癌细胞的作用机制。方法　采用不同浓度的大蒜素处理结肠癌Lovo细胞后 ,分别应用四唑盐比色试验、端粒重复扩增微孔板杂交法、RT PCR和Westernblot方法检测环氧化酶 2mRNA和蛋白水平的表达 ,采用凝胶迁移率法检... 目的　探讨大蒜素对结肠癌细胞的作用机制。方法　采用不同浓度的大蒜素处理结肠癌Lovo细胞后 ,分别应用四唑盐比色试验、端粒重复扩增微孔板杂交法、RT PCR和Westernblot方法检测环氧化酶 2mRNA和蛋白水平的表达 ,采用凝胶迁移率法检测核因子 κB活性。结果　大蒜素对结肠癌Lovo细胞增殖具有较强的抑制作用。大蒜素能够抑制端粒酶活性 ,且这种作用呈浓度及时间依赖。同时发现 ,大蒜素能抑制环氧化酶 2mRNA和蛋白水平的表达及抑制核因子 κB活性。结论　大蒜素能够抑制结肠癌细胞的恶性增殖 ,其机制与抑制端粒酶活性、抑制环氧化酶 2基因的表达及抑制核因子 展开更多
关键词 核因子-KB LOVO细胞 环氧化酶-2 端粒酶活性 结肠癌 抑制 表达 RNA 基因 微孔板杂交
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样品不同处理方法对PCR微孔板杂交法检测TTVDNA的影响 被引量：8
15
作者 郭乃洲 马达 +2 位作者 王万相 王惠民 张冬雷 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期36-37,共2页
关键词 肝炎 TTV-DNA PCR-微孔板杂交
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聚合酶链反应产物微孔板杂交技术 被引量：9
16
作者 魏军 张正 《中华医学检验杂志》 CSCD 1997年第4期252-254,共3页
聚合酶链反应产物微孔板杂交技术魏军张正聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测方法自１９８４年创建以来［１］，已经成为分子生物学领域的核心技术，广泛应用于遗传病诊断、微生物检测，法医学鉴定及人类学、考古学研究诸方面。ＰＣＲ产物的鉴... 聚合酶链反应产物微孔板杂交技术魏军张正聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测方法自１９８４年创建以来［１］，已经成为分子生物学领域的核心技术，广泛应用于遗传病诊断、微生物检测，法医学鉴定及人类学、考古学研究诸方面。ＰＣＲ产物的鉴定以及进一步分型主要是通过凝胶电泳... 展开更多
关键词 聚合酶链反应 微孔板杂交法 PCR产物
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单纯疱疹病毒的聚合酶链反应——微孔板反向杂交检测和分型 被引量：6
17
作者 赖伟红 韩国柱 +1 位作者 钟铭英 叶顺章 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期191-192,共2页
关键词 单纯疱疹病毒 聚合酶链反应 微孔板反向杂交
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进口肉骨粉及动物饲料中牛源性成分的PCR-微孔板杂交检测方法 被引量：3
18
作者 王静 徐宝梁 +3 位作者 王丙武 王曙光 杨瑞馥 张敏丽 《饲料研究》 CAS 2001年第10期16-19,共4页
关键词 进口肉骨粉 牛源性成分 PCR-微孔板杂交 检测方法 饲料
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愈肝颗粒治疗慢性乙型肝炎基本核心区启动子变异患者的疗效观察 被引量：5
19
作者 谢朝良 邵泽勇 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第7期502-504,共3页
目的:观察中药制剂愈肝颗粒治疗慢性乙型肝炎（CHB）基本核心区启动子（BCP）变异患者的疗效。方法:用微孔板杂交法和酶联免疫吸附试验联合检测乙型肝炎病毒（HBV）BCP变异,变异阳性组（简称P组,46例）和变异阴性组（简称N组,69例）。... 目的:观察中药制剂愈肝颗粒治疗慢性乙型肝炎（CHB）基本核心区启动子（BCP）变异患者的疗效。方法:用微孔板杂交法和酶联免疫吸附试验联合检测乙型肝炎病毒（HBV）BCP变异,变异阳性组（简称P组,46例）和变异阴性组（简称N组,69例）。所有患者均给予愈肝颗粒治疗,观察患者治疗前后临床表现及实验室有关指标。结果:治疗结束后,两组患者症状积分显著减低,血清ALT、TBiL水平明显下降。P组HBeAg阴转率（60％）显著高于N组（30％,P<0.05）,而HBV-DNA阴转两组比较差异无显著性,两组综合疗效相似。结论:愈肝颗粒能够显著改善CHB患者的症状,降低血清ALT和TBiL水平,同时具有抗HBV作用,且对于BCP变异株感染与野生株感染同等有效。 展开更多
关键词 愈肝颗粒 慢性乙型肝炎 基本核心区启动子 变异 疗效观察 中医药疗法 微孔板杂交法 ELISA
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猪附红细胞体PCR-微孔板杂交-酶免疫检测方法的研究 被引量：2
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作者 张浩吉 谢明权 +5 位作者 张健騑 蒲文珺 覃宗华 蔡建平 王政富 顾万军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期184-189,共6页
以猪附红细胞体和多种血营养菌16S rRNA基因的保守区设计合成引物HM-f/HM-r,在反向引物的5′端用生物素标记,以猪附红细胞体广东株16S rRNA基因的可变区序列设计种特异性寡核苷酸探针,探针的5′端用地高辛标记,成功地建立了猪附红细胞体... 以猪附红细胞体和多种血营养菌16S rRNA基因的保守区设计合成引物HM-f/HM-r,在反向引物的5′端用生物素标记,以猪附红细胞体广东株16S rRNA基因的可变区序列设计种特异性寡核苷酸探针,探针的5′端用地高辛标记,成功地建立了猪附红细胞体PCR-微孔板杂交-酶免疫检测方法。通过测定不同浓度PCR产物对应的微孔板杂交-酶反应显色OD值,用SPSS统计软件进行回归分析,得到回归方程为y=2.1012-0.4492×logx,其相关系数R为0.977,显示对未知样品可进行定量检测。该方法与猪的多种细菌性病原、猫血巴尔通氏体CA株和E.wenyonii无交叉反应,其敏感性比常规PCR琼脂糖电泳检测提高了近100倍。用建立的方法对38份临床样品进行检测,结果有12份检测结果为阳性。 展开更多
关键词 猪附红细胞体 PCR 微孔板杂交 检测
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