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微囊藻胞内毒素的提取方法 被引量:11
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作者 彭亮 陈伟 宋立荣 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期708-712,共5页
随着全球淡水水体富营养化程度的不断加剧,蓝藻水华及其毒素污染问题已经逐渐威胁到人类饮用水的安全。微囊藻(Microcystis)为常见的水华蓝藻种类,其所产生的微囊藻毒素(Microcystins,MCs)不仅会严重危害水生态系统,并且可能会给人... 随着全球淡水水体富营养化程度的不断加剧,蓝藻水华及其毒素污染问题已经逐渐威胁到人类饮用水的安全。微囊藻(Microcystis)为常见的水华蓝藻种类,其所产生的微囊藻毒素(Microcystins,MCs)不仅会严重危害水生态系统,并且可能会给人类健康带来威胁[1,2]。我国云南滇池、江苏太湖和安徽巢湖等淡水湖泊均发生不同程度的蓝藻水华,并检测到了高含量MCs的存在[3,4]。 展开更多
关键词 微囊细胞 微囊毒素 提取方法 优化 定量分析
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郑州市主要生活饮用水源中微囊藻细胞的分离培养与毒性鉴定 被引量:3
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作者 杨松芹 巴月 +2 位作者 张慧珍 程学敏 崔留欣 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2008年第1期95-97,共3页
目的:对郑州市主要生活饮用水源中微囊藻细胞进行分离培养和毒性鉴定。方法:采用改进的96孔板分离技术对郑州市2个主要生活饮用水源西流湖和黄河花园口段某调蓄池中采集的浮游藻类进行分离培养;全细胞PCR测定藻青蛋白基因中间序列(PC-I... 目的:对郑州市主要生活饮用水源中微囊藻细胞进行分离培养和毒性鉴定。方法:采用改进的96孔板分离技术对郑州市2个主要生活饮用水源西流湖和黄河花园口段某调蓄池中采集的浮游藻类进行分离培养;全细胞PCR测定藻青蛋白基因中间序列(PC-IGS)和微囊藻毒素合成酶基因(mcyB);ELISA检测毒素浓度。结果:应用96孔板结合极限稀释法成功得到了所要分离微囊藻细胞的单克隆;所分离3株微囊藻细胞PC-IGS基因序列和mcyB基因序列扩增结果均为阳性;ELISA检测3株微囊藻细胞干粉的产毒量分别为1.07mg/g、4.70mg/g、4.71mg/g。结论:改进的96孔板分离技术能够简便、快速地分离各种藻细胞;所分离的3株微囊藻细胞均为蓝藻种属,且能够产毒。 展开更多
关键词 饮用水 郑州市 微囊细胞 分离 鉴定
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太湖蓝藻水华“暴发”的动态特征及其机制 被引量:97
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作者 秦伯强 杨桂军 +7 位作者 马健荣 邓建明 李未 吴挺峰 刘丽贞 高光 朱广伟 张运林 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第7期759-770,共12页
湖泊富营养化和有害藻类水华是目前全世界普遍面临的水域生态环境问题.太湖是典型的大型浅水富营养化湖泊,其富营养化导致的蓝藻水华"暴发"常常呈现时间和空间上的高度变异与不稳定性.以往的研究,无论是国际上流行的光合作用... 湖泊富营养化和有害藻类水华是目前全世界普遍面临的水域生态环境问题.太湖是典型的大型浅水富营养化湖泊,其富营养化导致的蓝藻水华"暴发"常常呈现时间和空间上的高度变异与不稳定性.以往的研究,无论是国际上流行的光合作用调节的藻类细胞上浮与下沉,还是国内流行的蓝藻水华"暴发"四阶段理论,都无法很好地解释太湖蓝藻水华"暴发"的时空动态变化特性.本文基于对太湖多次的野外观测与模拟实验,提出了关于太湖蓝藻水华"暴发"的全新概念性解释.在蓝藻细胞生长阶段,营养盐、温度、光照等环境因素影响较为显著,决定了蓝藻生物量的多少,为蓝藻水华"暴发"蓄积物质基础;在蓝藻水华暴发阶段,则主要受蓝藻细胞(团)浮力作用与水动力湍流作用的共同影响,决定了蓝藻水华出现后的规模、范围及位置.野外调查显示,在太湖这样的大型浅水湖泊,风浪作用条件下蓝藻细胞(团)在水柱中呈均匀分布;而当风浪消失后,蓝藻细胞(团)即迅速上浮形成水体表面可见的水华.蓝藻颗粒的上浮速度随着细胞团的增大而加快,适度的扰动促使蓝藻细胞团碰撞而形成更大的细胞团,更容易在水动力消失后快速上浮形成水华.湖流的辐合辐散是蓝藻水华上浮后形成可见的斑块形状、位置、漂移和聚集的决定因素.正是太湖地区风场高度多变与不稳定,才导致太湖蓝藻水华"暴发"的时空分布呈现多变的动态特征.上述研究结果澄清了长期以来一直困扰人们的太湖蓝藻水华难以监测、无法防控的问题,为蓝藻水华监测、预测预警、防控及应对措施的制定提供了科学的理论依据. 展开更多
关键词 太湖 生长 微囊细胞 水华暴发 水动力 概念性模式
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富营养化水体中微囊藻细胞碎屑对氨氮的吸附特性 被引量:12
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作者 史红星 刘会娟 +1 位作者 曲久辉 代瑞华 《环境化学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期241-244,共4页
以微囊藻细胞碎屑作为水体有机质颗粒悬浮物的代表,模拟研究了有机质颗粒悬浮物对无机氮的吸附行为及吸附特性.实验表明,细胞碎屑颗粒对氨氮的吸附在30min内即可接近吸附平衡,吸附符合Henry吸附模式,在吸附剂浓度为10mg·l-1,氨氮... 以微囊藻细胞碎屑作为水体有机质颗粒悬浮物的代表,模拟研究了有机质颗粒悬浮物对无机氮的吸附行为及吸附特性.实验表明,细胞碎屑颗粒对氨氮的吸附在30min内即可接近吸附平衡,吸附符合Henry吸附模式,在吸附剂浓度为10mg·l-1,氨氮初始浓度为1.0mg·l-1,pH7.0的实验条件下,吸附分配系数高达30426L·kg-1.碎屑浓度、pH值和盐度对吸附具有一定的影响. 展开更多
关键词 富营养化水体 微囊细胞碎屑 氨氮 吸附特性
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微囊藻细胞抽提液对小鼠血液的亚慢性毒性(英文) 被引量:2
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作者 李效宇 梁俊波 皇培培 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期811-817,共7页
本文研究了注射含微囊藻毒素的微囊藻细胞抽提液对小鼠血液以及免疫系统的亚慢性毒性作用。实验分为3个处理组和1个对照组(每组10只昆明小鼠,雌雄各半),采用腹腔注射的染毒方法对3个处理组进行暴露,剂量分别为2.4、4.8和9.6μg microcys... 本文研究了注射含微囊藻毒素的微囊藻细胞抽提液对小鼠血液以及免疫系统的亚慢性毒性作用。实验分为3个处理组和1个对照组(每组10只昆明小鼠,雌雄各半),采用腹腔注射的染毒方法对3个处理组进行暴露,剂量分别为2.4、4.8和9.6μg microcystin-LR/kg body weigh,对照组注射等量的生理盐水,连续注射14d。实验结果表明,14d染毒后,小鼠的肝体比和脾体比都明显增大(p<0.05),同时在9.6μg/kg处理组,血清丙氨酸转移酶、天冬氨酸转移酶、乳酸脱氢酶和碱性磷酸酶活性与对照相比明显升高,但血清总蛋白、白蛋白和白蛋白/球蛋白比率下降。这些指标的变化说明,含微囊藻毒素的微囊藻细胞提取液对处理组小鼠肝脏造成了损伤,肝组织学观察也印证了这个结果,在处理组小鼠肝组织有明显的水样变性。另外,9.6μg/kg处理组小鼠血液白细胞数量比对照组明显减少。组织细胞学观察发现,处理组小鼠脾脏也有明显的损伤。该实验结果说明,含微囊藻毒素的微囊藻细胞抽提液对小鼠的血液和免役系统都产生了一定程度的损伤。 展开更多
关键词 微囊细胞抽提液 微囊毒素 小鼠 血清学 组织病理学
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微囊藻细胞抽提物亚慢性暴露导致小鼠肝脏氧化应激(英文) 被引量:2
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作者 张榜军 李效宇 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1088-1094,共7页
研究了微囊藻细胞抽提物亚慢性暴露对小鼠肝脏抗氧化系统的影响。采用腹腔注射进行连续染毒28d,染毒组剂量为3.3μg microcystins/kg体重。结果显示,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶在第4周时发生显著性升高,提示微囊... 研究了微囊藻细胞抽提物亚慢性暴露对小鼠肝脏抗氧化系统的影响。采用腹腔注射进行连续染毒28d,染毒组剂量为3.3μg microcystins/kg体重。结果显示,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶在第4周时发生显著性升高,提示微囊藻细胞抽提物激活了小鼠肝脏抗氧化系统。谷胱甘肽-S-转移酶和对照组相比也显著提高,表明谷胱甘肽-S-转移酶作为解毒Ⅰ相酶加快了对肝脏微囊藻毒素的清除。脂质过氧化产物丙二醛也显著升高,说明抗氧化系统未能清除微囊藻细胞抽提物对小鼠肝脏的氧化损伤,导致了氧化应激的产生。结果表明低剂量微囊藻细胞抽提物长时间暴露能够导致小鼠肝脏氧化损伤。 展开更多
关键词 微囊细胞抽提物 抗氧化系统 脂质过氧化 氧化应激 小鼠
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分泌人内皮抑素的微囊化基因工程细胞系的构建 被引量:1
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作者 蔡善君 詹文芳 +3 位作者 刘锐 谢兵 李红 宿罡 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期367-371,共5页
目的 建立能稳定分泌人内皮抑素(hES)的基因工程细胞系,观察内皮抑素(ES)蛋白和hES的表达。方法以hES重组质粒pcDNA3.0(pcDNA3-Endo)为模板,通过聚合酶链反应(PCR)扩增获得hES基因片段,且在基因前加信号肽序列,将其定向插... 目的 建立能稳定分泌人内皮抑素(hES)的基因工程细胞系,观察内皮抑素(ES)蛋白和hES的表达。方法以hES重组质粒pcDNA3.0(pcDNA3-Endo)为模板,通过聚合酶链反应(PCR)扩增获得hES基因片段,且在基因前加信号肽序列,将其定向插入真核表达载体绿色荧光蛋白(pEGFP—N1)质粒中,获得重组质粒pEGFP—N1-ES;利用阳离子脂质体介导将其转染到人胚胎肾细胞(HeK-293)细胞中,G418筛选后得到阳性克隆hES/293,采用蛋白免疫印迹(Westernblot)法检测转染细胞上清中ES蛋白的表达;用海澡酸钠壳聚糖(ACA)微囊包裹hES/293细胞,分别收集培养3、7、21、35d的AcA微囊化hES/293细胞的培养上清液,Westernblot法检测包裹后培养液上清中hES的表达。结果重组质粒pEGFP-N1-ES经限制性核对内切酶HindⅢ和限制性核酸内切酶BamHI双酶切得到4700碱基对(bp)和600bp2条带;PCR扩增出600bp条带;测序结果与NCBI上序列比对软件(BLAST)比对,同源性达到100%。pEGFP—N1-ES转染HeK-293细胞,经G418筛选后获得阳性克隆,选取筛选的10株单克隆细胞培养上清液进行Westernblot分析,在相对分子质量为20×10。处出现蛋白条带。在ACA微囊内hES/293细胞随着培养时间的延长,细胞团逐渐长大,充满整个囊内空间。培养3、7、21、35d时,在相对分子质量为20×10^2处出现蛋白条带。结论重组pEGFP—N1-ES真核表达载体构建正确,转染HeK-293细胞后可有效的表达hES蛋白,并能分泌到细胞外;微囊化hES/293细胞产生的ES蛋白可以自由扩散出微囊膜外,并呈持续性表达。 展开更多
关键词 内皮抑素类/生理学 微囊属/细胞 细胞
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