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原子转移自由基聚合法制备强阴离子交换色谱填料及其在蛋白质分离中的应用 被引量：12
1
作者 王婀娜 段淑静 +3 位作者 何锡文 陈朗星 李文友 张玉奎 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第23期2421-2428,共8页
在大孔硅胶表面引入原子转移自由基聚合的引发基团,通过该技术将甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵聚合于硅胶表面,制得了强阴离子交换色谱填料.详细考察了该填料对标准蛋白质的分离性能及流动相pH、流速、有机溶剂对蛋白质保留的影响.实验... 在大孔硅胶表面引入原子转移自由基聚合的引发基团,通过该技术将甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵聚合于硅胶表面,制得了强阴离子交换色谱填料.详细考察了该填料对标准蛋白质的分离性能及流动相pH、流速、有机溶剂对蛋白质保留的影响.实验结果表明,在流速为0.75 mL/min时,采用线性梯度洗脱,20 min内可快速分离不同体系的三种标准蛋白;并将该填料用于鸡蛋中卵清蛋白的快速分离纯化,取得了很好的效果. 展开更多
关键词 硅胶 强阴离子交换色谱 原子转移自由基聚合 蛋白质分离
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蛋白质组学中磷酸化肽的常用富集方法 被引量：4
2
作者 李鹏章 王粤博 《化学进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1785-1793,共9页
磷酸化作用是最重要的蛋白质翻译后修饰方式之一,它是蛋白质组学的一个重要分支,在细胞识别、细胞信息传递、基因表达和新陈代谢等方面发挥着重要作用。采用适当方法对磷酸化肽进行分析有助于我们更好地了解生理病理机制。但是直接进行... 磷酸化作用是最重要的蛋白质翻译后修饰方式之一,它是蛋白质组学的一个重要分支,在细胞识别、细胞信息传递、基因表达和新陈代谢等方面发挥着重要作用。采用适当方法对磷酸化肽进行分析有助于我们更好地了解生理病理机制。但是直接进行质谱分析时磷酸化肽的信号强度会受到无机盐以及大量非磷酸化肽的抑制,选择性差。为解决这一难题,在质谱分析前要对磷酸化肽进行选择性富集。本文回顾了几种常用的磷酸化肽富集方法,介绍了每种方法的发展状况和常用材料,其中包括固定金属离子亲和色谱法、金属氧化物富集法、强阴阳离子交换色谱法和MALDI靶板富集法。最后总结了各种富集方法的优缺点,对有效的磷酸化肽富集策略进行了前景展望。 展开更多
关键词 磷酸化肽 固定金属离子亲和色谱 金属氧化物富集法 强阳离子交换色谱 强阴离子交换色谱 MALDI靶板富集法
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Q Sepharose^(TM) XL强阴离子交换色谱快速纯化猪心中肌红蛋白和细胞色素C 被引量：1
3
作者 李琳子 徐朋朋 李任强 《化学与生物工程》 CAS 2009年第10期56-59,共4页
以Q SepharoseTM XL强阴离子交换色谱结合Sephadex G-75分子排阻色谱快速提取纯化猪心中肌红蛋白(Myoglobin,Mb)和细胞色素C(Cyt C)。在pH值为7.6~8.5范围内,Cyt C吸附在Q SepharoseTMXL强阴离子交换柱上,而Mb会缓慢通过。所以选择QSeph... 以Q SepharoseTM XL强阴离子交换色谱结合Sephadex G-75分子排阻色谱快速提取纯化猪心中肌红蛋白(Myoglobin,Mb)和细胞色素C(Cyt C)。在pH值为7.6~8.5范围内,Cyt C吸附在Q SepharoseTMXL强阴离子交换柱上,而Mb会缓慢通过。所以选择QSepharoseTMXL强阴离子交换柱的上样pH值为7.9,洗脱pH值为7.2。电泳检测证明,经过QSepharoseTMXL柱初步纯化所得Mb和Cyt C的产率分别为89.7%和93.2%;再经过Sephadex G-75分子排阻色谱可得到纯的Mb和Cyt C,其产量分别为77.43mg.(kg猪心)-1和86.42mg.(kg猪心)-1。使用QSepha-roseTMXL强阴离子交换色谱能从猪心中快速制备纯的Mb和Cyt C。 展开更多
关键词 蛋白纯化 Q SepharoseTM XL强阴离子交换色谱 肌红蛋白 细胞色素C 猪心
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Q Sepharose^(TM)-XL强阴离子交换色谱快速纯化精氨酸激酶及其多克隆抗体的研究 被引量：1
4
作者 陈婷 吴继美 李任强 《化学与生物工程》 CAS 2013年第3期67-70,81,共5页
利用Q SepharoseTM-XL强阴离子交换色谱从虾的精氨酸激酶粗提液中纯化出精氨酸激酶,以其免疫大白兔,然后利用Q SepharoseTM-XL强阴离子交换色谱从高免疫兔血清中纯化精氨酸激酶的多克隆抗体。采用SDS-PAGE检测精氨酸激酶及其抗体的纯度... 利用Q SepharoseTM-XL强阴离子交换色谱从虾的精氨酸激酶粗提液中纯化出精氨酸激酶,以其免疫大白兔,然后利用Q SepharoseTM-XL强阴离子交换色谱从高免疫兔血清中纯化精氨酸激酶的多克隆抗体。采用SDS-PAGE检测精氨酸激酶及其抗体的纯度,并进行了活性测定。结果表明,利用Q SepharoseTM-XL强阴离子交换色谱纯化出的精氨酸激酶及其多克隆抗体纯度高、活性强。建立了快速高效、操作方便而又适合实际应用的制备精氨酸激酶及其多克隆抗体的方法,可为精氨酸激酶及食品过敏的相关研究提供帮助。 展开更多
关键词 Q SepharoseTM-XL强阴离子交换色谱 精氨酸激酶 多克隆抗体 纯化
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硫酸软骨素钠含量测定用国家对照品的研制 被引量：1
5
作者 任丽萍 于海洲 +2 位作者 宋玉娟 韩春霞 范慧红 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期236-238,共3页
目的建立硫酸软骨素钠含量测定用国家对照品。方法以红外光谱法(IR)和高效液相色谱法(HPLC)进行鉴别,采用尺寸排阻色谱和多角度激光光散射联用方法(SEC-MALLS)测定绝对分子质量和分子量分布,采用质量平衡法计算硫酸软骨素钠待标对照品... 目的建立硫酸软骨素钠含量测定用国家对照品。方法以红外光谱法(IR)和高效液相色谱法(HPLC)进行鉴别,采用尺寸排阻色谱和多角度激光光散射联用方法(SEC-MALLS)测定绝对分子质量和分子量分布,采用质量平衡法计算硫酸软骨素钠待标对照品的含量。结果用药典新增订的含量测定方法对硫酸软骨素钠的原料进行测定,最终确定首批硫酸软骨素钠对照品的含量为99.1%。结论硫酸软骨素钠含量测定用国家对照品的建立可有效的控制产品质量。 展开更多
关键词 硫酸软骨素钠 国家对照品 强阴离子交换高效液相色谱法
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