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弓形虫抗体免疫印迹试剂盒的研制 被引量：4
1
作者 蒋守富 张述义 +2 位作者 曹琳 潘彩娥 魏梅雄 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期449-452,共4页
目的研制敏感、特异的检测弓形虫IgM和IgG抗体免疫印迹试剂盒。方法收集人工感染RH株弓形虫速殖子昆明系小鼠的腹腔液,提取弓形虫胞质蛋白,采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离弓形虫可溶性抗原,并经电泳转印至硝酸纤... 目的研制敏感、特异的检测弓形虫IgM和IgG抗体免疫印迹试剂盒。方法收集人工感染RH株弓形虫速殖子昆明系小鼠的腹腔液,提取弓形虫胞质蛋白,采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离弓形虫可溶性抗原,并经电泳转印至硝酸纤维膜,以无毒灵敏的四甲基联苯胺(TMB)为底物分别检测30份弓形虫IgM和28份IgG阳性血清,40份健康人血清。通过比较抗原制备方法和使用剂量、封闭剂、洗涤和稀释剂、工作浓度、作用时间以及反应带出现率,选择最佳实验条件,以敏感性、特异性、Youden指数以及稳定性作为试剂盒评价标准。结果用免疫印迹试剂盒检测30份弓形虫IgM和28份IgG阳性血清,敏感性分别为90.0%(27/30)和85.7%(24/28),40份健康对照者血清的弓形虫IgM和IgG抗体均为阴性,特异性均为100%,Youden指数分别为0.9和0.86。试剂盒于4℃保存约6个月的检测结果一致。结论该免疫印迹试剂盒敏感性和特异性均较高,且操作简便、快速。 展开更多
关键词 弓肜虫 免疫印迹 试剂盒 敏感性 特异性
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