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庆大霉素生物合成基因genD2的研究 被引量:2
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作者 阙新桥 陈泽斌 洪文荣 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期237-241,共5页
以绛红小单孢菌G1008基因组为模板,PCR扩增genD2的上下游序列作为同源交换臂,在温敏型穿梭质粒pKC1139的基础上,构建同源重组质粒pDB303;通过接合转移,将质粒pDB303导入绛红小单孢菌G1008,经影印筛选得到一株genD2框内缺失的工程菌GD23... 以绛红小单孢菌G1008基因组为模板,PCR扩增genD2的上下游序列作为同源交换臂,在温敏型穿梭质粒pKC1139的基础上,构建同源重组质粒pDB303;通过接合转移,将质粒pDB303导入绛红小单孢菌G1008,经影印筛选得到一株genD2框内缺失的工程菌GD238。发酵并提取代谢产物,质谱分析表明,工程菌GD238只积累庆大霉素A2和A2e,证明genD2参与了庆大霉素加洛糖胺上C-3″位氨甲基化,可能是编码脱氢酶基因。 展开更多
关键词 庆大霉素A2 genD2基因 生物合成 绛红小单孢菌
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庆大霉素生物合成基因genA的功能
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作者 林强 陈洲琴 +1 位作者 胡育龙 洪文荣 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期300-306,共7页
【目的】在绛红色小单孢菌G1008(Micromonospora purpurea G1008)上构建genA基因缺失工程菌,通过分析其次级代谢产物的变化,推测genA基因功能。【方法】构建用于gen A基因框内敲除的质粒pAB103,经接合转移导入绛红色小单孢菌G1008,安普... 【目的】在绛红色小单孢菌G1008(Micromonospora purpurea G1008)上构建genA基因缺失工程菌,通过分析其次级代谢产物的变化,推测genA基因功能。【方法】构建用于gen A基因框内敲除的质粒pAB103,经接合转移导入绛红色小单孢菌G1008,安普抗性及PCR扩增筛选获得genA缺失工程菌GA1048。【结果】与出发菌G1008相比,工程菌GA1048不再合成庆大霉素C族组分,主要积累中间代谢产物庆大霉素A2。【结论】genA基因失活导致庆大霉素生物合成代谢流中断,暗示gen A基因参与加洛糖胺C-3″位的氨甲基化。 展开更多
关键词 绛红色小单孢菌 genA 庆大霉素A2
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庆大霉素生物合成基因genY的研究
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作者 胡育龙 林龙镇 +1 位作者 陈洲琴 洪文荣 《宁夏大学学报(自然科学版)》 CAS 2016年第1期85-89,共5页
以绛红色小单孢菌G1008基因组为模板,构建genY基因缺失的同源重组质粒pFY103,经接合转移导入绛红色小单孢菌G1008和GK1101(△genK),筛选获得genY基因缺失工程菌GY105(△genY)和工程菌GKY205(△genK+genY),发酵、提取并经质谱检测分析代... 以绛红色小单孢菌G1008基因组为模板,构建genY基因缺失的同源重组质粒pFY103,经接合转移导入绛红色小单孢菌G1008和GK1101(△genK),筛选获得genY基因缺失工程菌GY105(△genY)和工程菌GKY205(△genK+genY),发酵、提取并经质谱检测分析代谢产物.结果表明,工程菌GY105和GKY205主要积累西索米星、庆大霉素C1a和C2b.证明genY基因缺失阻断了庆大霉素X2到G418的转化,说明genY基因参与庆大霉素生物合成过程中绛红糖胺C-6’位甲基化. 展开更多
关键词 庆大霉素生物合成 绛红色小单孢菌 基因genY 庆大霉素X2 西索米星
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一株主产庆大霉素C2a工程菌的构建
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作者 林强 陈洲琴 +1 位作者 阙新桥 洪文荣 《宁夏大学学报(自然科学版)》 CAS 2016年第1期90-93,98,共5页
为更好生产单组分庆大霉素C2a,拟构建一株主产庆大霉素C2a的工程菌.通过序列比对分析,锁定genB2为构建该工程菌的关键基因.以绛红小单孢菌G1008基因组为模板,PCR扩增genB2的上下游序列为同源交换臂,构建同源重组质粒pZB303.通过接合转移... 为更好生产单组分庆大霉素C2a,拟构建一株主产庆大霉素C2a的工程菌.通过序列比对分析,锁定genB2为构建该工程菌的关键基因.以绛红小单孢菌G1008基因组为模板,PCR扩增genB2的上下游序列为同源交换臂,构建同源重组质粒pZB303.通过接合转移,将质粒pZB303导入绛红小单孢菌G1008,安普抗性及PCR扩增筛选得到一株genB2框内缺失工程菌GB102.发酵并提取代谢产物,再经TLC,HPLC,MS分析.结果表明,工程菌GB102主要积累庆大霉素C2a.有望用于生产单组分庆大霉素C2a. 展开更多
关键词 庆大霉素C2a genB2 绛红小单孢菌
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应用H/D交换质谱法对庆大霉素C_2/C_(2a)及小诺霉素进行快速鉴别
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作者 周璟明 谢颖 +2 位作者 范建辉 林炜 方东升 《海峡药学》 2009年第10期180-182,共3页
目的快速鉴别庆大霉素C2/C2a和小诺霉素。方法采用电喷雾质谱法结合氢-氘(H/D)交换技术对庆大霉素C2/C2a和小诺霉素进行研究。结果进行氘代反应后,庆大霉素C2/C2a和小诺霉素的m/z可分别得到+13和+12的增量。结论上述方法可以简便快速地... 目的快速鉴别庆大霉素C2/C2a和小诺霉素。方法采用电喷雾质谱法结合氢-氘(H/D)交换技术对庆大霉素C2/C2a和小诺霉素进行研究。结果进行氘代反应后,庆大霉素C2/C2a和小诺霉素的m/z可分别得到+13和+12的增量。结论上述方法可以简便快速地区分出庆大霉素C2/C2a与小诺霉素这一对同分异构体,为鉴别分子内活泼氢数目不同的同分异构体提供了一种可行的方法。 展开更多
关键词 庆大霉素C2/C2a 小诺霉素 H/D交换 电喷雾离子化质谱
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地塞米松、西咪替丁在治疗急性胃肠炎中的早期应用 被引量:3
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作者 王绪阳 《工企医刊》 2012年第4期9-10,共2页
目的探讨地塞米松、西咪替丁联合庆大霉素、654-2治疗急性胃肠炎的临床疗效。方法将我院2008年4月到2011年11月就治74例急性胃肠炎患者随机分为对照组与治疗组,每组37例。对照组给予庆大霉素、654-2治疗;治疗组在对照组基础上加用地塞... 目的探讨地塞米松、西咪替丁联合庆大霉素、654-2治疗急性胃肠炎的临床疗效。方法将我院2008年4月到2011年11月就治74例急性胃肠炎患者随机分为对照组与治疗组,每组37例。对照组给予庆大霉素、654-2治疗;治疗组在对照组基础上加用地塞米松、西咪替丁治疗。比较两组患者的腹痛、呕吐以及腹泻消失时间,评定临床疗效,统计不良反应发生情况。结果治疗组患者的腹痛、呕吐以及腹泻消失时间明显短于对照组(P<0.05);治疗组的显效率和总有效率明显高于对照组(P<0.05);两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论地塞米松、西咪替丁联合庆大霉素、654-2治疗急性胃肠炎的临床疗效确切,疗程短。 展开更多
关键词 地塞米松、西咪替丁 庆大霉素、654-2 急性胃肠炎 疗效观察
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