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广叶绣球菌多糖对免疫低下小鼠肠道免疫功能的调节作用 被引量：20
1
作者 郝晨阳 程艳芬 +3 位作者 徐丽婧 耿雪冉 程菲儿 冯翠萍 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1380-1390,共11页
通过研究广叶绣球菌多糖对免疫低下小鼠肠道菌群、细胞因子表达量及短链脂肪酸的影响,探究广叶绣球菌多糖的免疫作用机制。腹腔注射环磷酰胺构建免疫低下小鼠模型,将小鼠分为6组:正常对照组、模型组、广叶绣球菌多糖低、中、高剂量组以... 通过研究广叶绣球菌多糖对免疫低下小鼠肠道菌群、细胞因子表达量及短链脂肪酸的影响,探究广叶绣球菌多糖的免疫作用机制。腹腔注射环磷酰胺构建免疫低下小鼠模型,将小鼠分为6组:正常对照组、模型组、广叶绣球菌多糖低、中、高剂量组以及阳性对照组,连续饲养30d后处死取样,HE染色观察小肠组织结构,酶联免疫吸附法测定小肠白细胞介素-6(IL-6)、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)的表达水平,高通量测序技术分析小鼠肠道菌群的变化,气-质联用(GC-MS)技术分析盲肠内容物短链脂肪酸(SCFAs)的含量。结果表明,广叶绣球菌多糖高剂量组可显著改善绒毛肿胀和变短现象,提高绒毛长度/隐窝深度的比值(V/C值)和小肠IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ细胞因子含量(P<0.05或P<0.01),提高拟杆菌属Bacteroides、拟普雷沃菌属Alloprevotella、丁酸弧菌属Butyrivibrio、Intestinimonas、链球菌属Streptococcus的相对丰度(P<0.05或P<0.01);各剂量组均可提高盲肠内6种主要短链脂肪酸含量,差异达显著或极显著水平(P<0.05或P<0.01)。试验组与阳性对照组趋势一致。广叶绣球菌多糖可通过改善免疫低下小鼠的肠道粘膜形态,提高小肠细胞因子水平,调节肠道菌群结构,增加SCFAs产生菌的相对丰度,提高短链脂肪酸含量,调节免疫低下小鼠的肠道免疫功能。 展开更多
关键词 广叶绣球菌多糖 免疫低下 肠道菌群 短链脂肪酸 细胞因子
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广叶绣球菌多糖对小鼠CD8^(+)T细胞介导的免疫应答调控机制 被引量：2
2
作者 贺楷雄 程艳芬 +3 位作者 云少君 程菲儿 曹谨玲 冯翠萍 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1163-1174,共12页
研究广叶绣球菌多糖(polysaccharides,SLPs)对小鼠CD8^(+)T细胞活化、增殖分化以及效应阶段的影响,探索广叶绣球菌多糖对CD8^(+)T细胞的免疫应答调控机制。通过腹腔注射环磷酰胺溶液(80mg/kg)构建免疫低下小鼠模型,灌胃广叶绣球菌多糖(... 研究广叶绣球菌多糖(polysaccharides,SLPs)对小鼠CD8^(+)T细胞活化、增殖分化以及效应阶段的影响,探索广叶绣球菌多糖对CD8^(+)T细胞的免疫应答调控机制。通过腹腔注射环磷酰胺溶液(80mg/kg)构建免疫低下小鼠模型,灌胃广叶绣球菌多糖(低、中和高剂量分别为100、200和400 mg/kg),连续饲养20 d后处死,取脾脏和胸腺。血细胞分析仪测定血常规;MTT检测脾T淋巴细胞的扩增能力;流式细胞术分析脾脏CD8^(+)T细胞表面CD28、CTLA-4和PD1以及树突状细胞表面MHCⅠ、CD80和PD-L1的表达量;ELISA测定外周血中TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-10、穿孔素及颗粒酶B的含量;RT-PCR测定脾脏Psmb9、Psmd9、TAP1、TAP2、IFN-γ、IL-2、JAK1、JAK2、STAT1、STAT3、SOCS-3和Blimp-1的mRNA表达量;Westernblot测定pJAK2/JAK2、pSTAT3/STAT3和Blimp-1的蛋白表达量。试验表明广叶绣球菌多糖高剂量组脾脏指数显著升高,外周血中红细胞、白细胞、淋巴细胞、单核细胞和血小板的含量显著升高(P<0.05或P<0.01);多糖中、高剂量组脾T淋巴细胞的扩增能力显著增强(P<0.05);中、高剂量组CD8^(+)T细胞含量显著降低,CD8^(+)T细胞表面PD-1分子含量显著降低,树突状细胞表面PD-L1分子含量显著降低、MHCⅠ细胞含量显著升高(P<0.05或P<0.01);多糖高剂量组TNF-α、IFN-γ、IL-2、穿孔素和颗粒酶B的含量显著升高(P<0.05或P<0.01),IL-10的含量显著降低(P<0.05);中、高剂量组Psmb9、Pmsd9、TAP1、TAP2和Blimp-1的mRNA含量显著升高(P<0.05或P<0.01),JAK1、JAK2、STAT1和STAT3的mRNA和蛋白表达量显著降低(P<0.05或P<0.01)。多糖中高剂量组Blimp-1蛋白表达量显著升高(P<0.05),多糖组与阳性对照组趋势一致。因此,认为广叶绣球菌多糖能够调节MHCⅠ类抗原加工呈递分子,并通过JAK2/STAT3信号通路促进CD8^(+)T细胞的活化、增殖分化和效应杀伤过程,从而调控CD8^(+)T细胞的免疫应答,起到改善小鼠免疫低下的作用。 展开更多
关键词 广叶绣球菌多糖 免疫调控 CD8^(+)T细胞 树突状细胞 JAK2/STAT3
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口腔加工对广叶绣球菌多糖剪切流变特性的影响
3
作者 贾丰荧 吴佳蔓 +3 位作者 靳雯 郭静 云少君 冯翠萍 《山西农业科学》 2024年第5期152-158,共7页
为了探讨口腔加工对广叶绣球菌多糖(SLPs)流变性的影响,为SLPs作为一种新型功能性原料提供理论依据,试验将制备得到的SLPs与人工唾液以1∶1(V/V)制备0.125%、0.25%、0.5%、1%、2%、4%混合液,采用流变仪测定其静态及动态流变特性,使用纳... 为了探讨口腔加工对广叶绣球菌多糖(SLPs)流变性的影响,为SLPs作为一种新型功能性原料提供理论依据,试验将制备得到的SLPs与人工唾液以1∶1(V/V)制备0.125%、0.25%、0.5%、1%、2%、4%混合液,采用流变仪测定其静态及动态流变特性,使用纳米粒度及电位分析仪测定0.5%、1%、2%、4%的SLPs溶液及混合液的粒径分布及平均粒径,并分析其粒径分布。结果表明,随着角频率的增加,SLPs溶液与混合液在0.25%~4.00%下表观黏度降低,在0.125%时增加,混合液的表观黏度大于SLPs溶液;SLPs溶液与混合液的剪切应力随剪切速率的增加而增大,混合液的剪切应力大于SLPs溶液,随着多糖浓度增加,剪切应力增大;SLPs溶液为0.125%~2.000%时tanδ值大于1,在4%时低频率扫描下tanδ值小于1,高频率扫描下大于1,混合液为0.125%~4.000%时tanδ值大于1。SLPs溶液为0.5%~4.0%时粒径分布主要集中在10~100 nm,极少部分分布在100~1000 nm。混合液相比于SLPs溶液,不同浓度混合液粒径分布更均匀,少量粒径集中在100~1000 nm,大部分均匀集中在10~100 nm。由此可见,口腔加工能够影响SLPs的流变学特性与粒径分布,且SLPs与人工唾液之间具有一定的协同作用。 展开更多
关键词 广叶绣球菌多糖 口腔加工 剪切流变特性
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广叶绣球菌多糖磷酸化修饰及体外抗氧化和降糖活性
4
作者 崔芳铭 毕书瑜 +5 位作者 侯江燕 曹谨玲 程艳芬 程菲儿 云少君 冯翠萍 《食用菌学报》 CSCD 北大核心 2024年第3期51-58,共8页
对广叶绣球菌(Sparassis latifolia)多糖(SLPs)进行磷酸化修饰,表征磷酸化SLPs(P-SLPs)结构,分析其体外抗氧化、降糖活性。结果表明:与SLPs比较,P-SLPs的磷酸根质量分数较高,为(8.02±0.48)%;在相同质量浓度时,P-SLPs对DPPH、超氧... 对广叶绣球菌(Sparassis latifolia)多糖(SLPs)进行磷酸化修饰,表征磷酸化SLPs(P-SLPs)结构,分析其体外抗氧化、降糖活性。结果表明:与SLPs比较,P-SLPs的磷酸根质量分数较高,为(8.02±0.48)%;在相同质量浓度时,P-SLPs对DPPH、超氧阴离子、羟基自由基和H_(2)O_(2)的清除率均较高,对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制率均较高。研究结果可为广叶绣球菌多糖进一步开发应用提供参考。 展开更多
关键词 广叶绣球菌多糖 磷酸化修饰 抗氧化 降糖活性
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广叶绣球菌多糖-白藜芦醇纳米粒子的制备、表征及其体外抑制α-葡萄糖苷酶活性
5
作者 毕书瑜 崔芳铭 +6 位作者 侯江燕 董鹏飞 曹谨玲 程艳芬 程菲儿 云少君 冯翠萍 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期90-100,共11页
本研究采用反溶剂沉淀法制备广叶绣球菌多糖(Sparassis latifolia polysaccharides,SLPs)-白藜芦醇(resveratrol,Res)纳米粒子(SLPs-Res NPs),对其表征后分析其体外抑制α-葡萄糖苷酶活性。试验采用水提醇沉法提取SLPs并经HZ830大孔树... 本研究采用反溶剂沉淀法制备广叶绣球菌多糖(Sparassis latifolia polysaccharides,SLPs)-白藜芦醇(resveratrol,Res)纳米粒子(SLPs-Res NPs),对其表征后分析其体外抑制α-葡萄糖苷酶活性。试验采用水提醇沉法提取SLPs并经HZ830大孔树脂脱色除杂后,以包封率、载药量为指标优化纳米粒子制备工艺,对其表征后分析其缓释特性及对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。结果表明,当Res与SLPs的质量比为1:32时,SLPs-Res NPs的包封率最高,为(53.73±0.76)%,载药量为(1.68±0.01)%。扫描电镜显示SLPs-Res NPs表面较为粗糙。SLPs-Res NPs平均粒径为(223.51±3.02)nm,PDI值为0.51±0.04,Zeta电位为(–21.6±1.1)mV,紫外/可见及红外光谱显示SLPs与Res发生了相互作用。SLPs-Res NPs的光热稳定性均强于游离白藜芦醇,其在模拟胃液中消化2 h后Res释放率为(9.13±0.54)%,继续在模拟肠液中消化3 h后Res释放率为(31.71±0.05)%,显著低于游离Res(P<0.05)。SLPs-Res NPs对α-葡萄糖苷酶的抑制活性显著高于Res和SLPs(P<0.05)。本研究制备得到SLPs-Res NPs,其具有较好的光热稳定性、缓释特性及抑制α-葡萄糖苷酶作用,可为SLPs和Res的进一步开发利用提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 广叶绣球菌多糖 白藜芦醇 纳米粒子 表征 Α-葡萄糖苷酶
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绣球菌多糖对免疫低下小鼠盲肠短链脂肪酸、G蛋白偶联受体及免疫因子的调节 被引量：3
6
作者 赵越 程艳芬 +5 位作者 郝晨阳 冯滢璇 曹谨玲 云少君 程菲儿 冯翠萍 《食品科技》 CAS 北大核心 2022年第4期231-238,共8页
为探究广叶绣球菌多糖对免疫低下小鼠盲肠中短链脂肪酸、G蛋白偶联受体及免疫因子的调节作用,用腹腔注射环磷酰胺构建免疫低下小鼠模型,将小鼠分为6组:正常对照组,模型组,广叶绣球菌多糖低、中、高剂量组以及阳性对照组。连续饲养30 d... 为探究广叶绣球菌多糖对免疫低下小鼠盲肠中短链脂肪酸、G蛋白偶联受体及免疫因子的调节作用,用腹腔注射环磷酰胺构建免疫低下小鼠模型,将小鼠分为6组:正常对照组,模型组,广叶绣球菌多糖低、中、高剂量组以及阳性对照组。连续饲养30 d后处死取样,检测免疫器官指数,高效液相色谱(HPLC)技术分析盲肠内容物短链脂肪酸(SCFAs)的含量,实时荧光定量PCR(qRTPCR)及蛋白免疫印迹技术(Western blot)分析小肠中下游相关因子的基因表达与G蛋白偶联受体蛋白的表达,分析SCFAs与GPCR蛋白表达的相关性。结果表明:广叶绣球菌多糖中、高剂量组均可显著提高3种短链脂肪酸的含量(P<0.05或P<0.01),绣球菌多糖高剂量组GPR41、GPR43、GPR109A、FOXP-3、IL-6、IL-8和L-10的mRNA表达水平与GPR41、GPR43和GPR109A蛋白表达量均显著增加(P<0.01),SCFAs与GPCR蛋白的表达显著相关。广叶绣球菌多糖可通过提高免疫低下小鼠盲肠内乙酸、丙酸和丁酸含量,诱导GPR41、GPR43和GPR109A表达,上调FOXP-3、IL-6、IL-8和L-10的mRNA表达,参与调节小鼠肠道的免疫反应,发挥抗炎作用。 展开更多
关键词 广叶绣球菌多糖 免疫低下 G蛋白偶联受体 炎症因子
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广叶绣球菌多糖对免疫低下小鼠海马组织cAMP-PKA-CREB-BDNF信号通路的影响 被引量：3
7
作者 阮进基 谢添 +4 位作者 云少君 程艳芬 曹谨玲 程菲儿 冯翠萍 《食用菌学报》 CSCD 北大核心 2022年第1期66-72,共7页
分别灌胃环磷酰胺所致免疫低下小鼠广叶绣球菌(Sparassis latifolia)多糖(SCPs,低、中、高剂量分别为100、200、400 mg·kg;),观察小鼠海马组织形态变化,检测5-羟色胺(5-hydroxytryptamine, 5-HT)、色氨酸羟化酶(tryptophan hydroxy... 分别灌胃环磷酰胺所致免疫低下小鼠广叶绣球菌(Sparassis latifolia)多糖(SCPs,低、中、高剂量分别为100、200、400 mg·kg;),观察小鼠海马组织形态变化,检测5-羟色胺(5-hydroxytryptamine, 5-HT)、色氨酸羟化酶(tryptophan hydroxylase 2,TPH2)和环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate, cAMP)含量,测定细胞因子和cAMP-PKA-CREB-BDNF信号通路基因mRNA表达量、cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein, CREB)和磷酸化CREB(phosphorylated CREB, p-CREB)蛋白表达量,探讨SCPs对海马组织损伤的干预作用。结果表明:SCPs使免疫低下小鼠海马组织神经细胞数量增多,细胞间隙缩小,结构更为完整。与模型组相比,SCPs各剂量组5-HT和TPH2含量、中和高剂量组cAMP含量极显著增加;SCPs各剂量组TNF-α、中和高剂量组IL-1β mRNA表达量显著降低,SCPs中和高剂量组5-HT;受体、高剂量组蛋白激酶A和脑源性神经营养因子基因mRNA表达量显著增加;SCPs高剂量组CREB蛋白、各剂量组p-CREB蛋白表达量显著提高。研究结果为揭示广叶绣球菌多糖对海马组织保护作用的机制提供参考。 展开更多
关键词 广叶绣球菌多糖 免疫低下 5-羟色胺 cAMP-PKA-CREB-BDNF信号通路
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基于体外模型研究广叶绣球菌多糖的酵解特性 被引量：3
8
作者 高渊 刘孟洋 +3 位作者 曹谨玲 云少君 程菲儿 冯翠萍 《食品科技》 CAS 北大核心 2021年第1期15-20,共6页
目的:通过人体新鲜粪便酵解模型研究广叶绣球菌多糖在体外的酵解特性,以便为其体内的消化特性研究提供理论支持。方法:制备广叶绣球菌多糖和人体粪便菌群混合液,在无氧环境下发酵0、1、2、6、12、24、48 h后,检测酵解液中的OD600值、pH... 目的:通过人体新鲜粪便酵解模型研究广叶绣球菌多糖在体外的酵解特性,以便为其体内的消化特性研究提供理论支持。方法:制备广叶绣球菌多糖和人体粪便菌群混合液,在无氧环境下发酵0、1、2、6、12、24、48 h后,检测酵解液中的OD600值、pH值,总糖、还原糖、短链脂肪酸(乙酸、丙酸、丁酸)含量,乳酸杆菌、双歧杆菌和大肠杆菌数量。结果:在发酵过程中,酵解液的总糖含量显著下降(P<0.05),双歧杆菌数量显著上升(P<0.05);OD600值、还原糖含量、短链脂肪酸含量以及乳酸杆菌和大肠杆菌数量都在不同的时间点出现显著升高(P<0.05),pH值则出现显著下降(P<0.05),而随着时间延长,这些指标又呈现相反的变化。结论:广叶绣球菌多糖不仅能够被粪便菌群酵解利用,而且可以促进乳酸杆菌和双歧杆菌的生长,产生大量乙酸、丙酸和丁酸,并抑制大肠杆菌的生长。 展开更多
关键词 广叶绣球菌多糖 体外酵解 人体粪便
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广叶绣球菌多糖对免疫低下小鼠大脑皮质损伤的调节作用 被引量：1
9
作者 贺楷雄 谢添 +4 位作者 云少君 程艳芬 曹谨玲 程菲儿 冯翠萍 《食用菌学报》 CSCD 北大核心 2022年第1期55-65,共11页
通过腹腔注射环磷酰胺溶液(80 mg·kg^(-1))构建免疫低下小鼠模型,灌胃广叶绣球菌(Sparassis latifolia)多糖(SCPs)(低、中、高剂量分别为100、200、400 mg·kg^(-1)),通过制备苏木精-伊红(HE)染色切片观察小鼠大脑皮质形态变化... 通过腹腔注射环磷酰胺溶液(80 mg·kg^(-1))构建免疫低下小鼠模型,灌胃广叶绣球菌(Sparassis latifolia)多糖(SCPs)(低、中、高剂量分别为100、200、400 mg·kg^(-1)),通过制备苏木精-伊红(HE)染色切片观察小鼠大脑皮质形态变化;测定小鼠大脑皮质中丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、过氧化氢酶(catalase, CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)活性;ELISA法检测小鼠大脑皮质中5-羟色胺(5-hydroxytryptamine, 5-HT)、色氨酸羟化酶-2(tryptophan hydroxylase-2,TPH2)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)和白介素-10(interleukin-10,IL-10)含量。利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time, PCR)测定小鼠大脑皮质中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、5-羟色胺2C受体基因(5-hydroxy tryptamine 2C receptor,5-HT_(2C)R)、钙调蛋白基因(calmodulin,CaM)和脑源性神经营养因子基因(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)mRNA表达量;采用蛋白免疫印迹(Western blot, WB)和免疫组化(immunohistochemistry, IHC)方法测定环磷腺苷反应元件结合蛋白(cyclic AMP responsive element-binding protein, CREB)、p-CREB、钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(calmodulin dependent kinaseⅡ, CaMKⅡ)和p-CaMKⅡ蛋白的表达量。结果表明:与模型组相比,SCPs各剂量组小鼠大脑皮质神经细胞数量增多,细胞间隙缩小,结构更为完整;SCPs各剂量组SOD和CAT活性显著升高,SCPs中、高剂量组GSH-Px的活性显著升高;SCPs高剂量组5-HT和TPH2含量显著升高;SCPs中、高剂量组TNF-α和IL-10的含量显著降低,SCPs各剂量组IL-1β含量显著降低;SCPs各剂量组TNF-α、IL-1β和IL-10的mRNA表达量均显著降低,SCPs高剂量组IL-6的mRNA表达量显著降低;SCPs中、高剂量组5-HT_(2C)R和BDNF的mRNA表达量显著升高,SCPs高剂量组CaM的mRNA表达量显著升高;SCPs高剂量组p-CREB表� 展开更多
关键词 广叶绣球菌多糖 免疫低下小鼠 皮质 5-羟色胺及其受体 炎性细胞因子
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广叶绣球菌中性多糖对巨噬细胞RAW 264.7细胞因子及TLR2受体的影响 被引量：2
10
作者 魏欣 王萌皓 +4 位作者 云少君 程艳芬 曹谨玲 常明昌 冯翠萍 《山西农业科学》 2022年第4期447-454,共8页
真菌多糖主要通过TLRs受体介导吞噬细胞分泌细胞因子而进行免疫调节作用,为探究广叶绣球菌中性多糖(SNP)对巨噬细胞RAW 264.7细胞因子的分泌及TLR2受体是否介导此作用,首先采用传统水提法,经HZ-830大孔树脂、DEAE-52和Sepharose CL-6B... 真菌多糖主要通过TLRs受体介导吞噬细胞分泌细胞因子而进行免疫调节作用,为探究广叶绣球菌中性多糖(SNP)对巨噬细胞RAW 264.7细胞因子的分泌及TLR2受体是否介导此作用,首先采用传统水提法,经HZ-830大孔树脂、DEAE-52和Sepharose CL-6B柱分离纯化后得到SNP,利用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)测定SNP分子质量,利用离子色谱法(IC)和傅里叶红外色谱法(FT-IR)分析单糖组成和结构表征;然后通过MTT比色法分析SNP对巨噬细胞RAW 264.7增殖活力的影响,以SNP最佳浓度作用,通过酶联免疫吸附测定法检测巨噬细胞RAW 264.7分泌的细胞因子含量;最后通过SNP处理TLR2抗体作用的吞噬细胞,分析TLR2受体是否对SNP调节巨噬细胞RAW 264.7细胞因子的分泌具有介导作用。结果表明,SNP分子质量为3.2×10;u,由摩尔比为6∶12∶63∶10∶5的阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖组成,不含呋喃糖;一定浓度范围内的SNP能显著促进RAW 264.7的增殖,其最佳作用质量浓度为250μg/mL;此浓度下,RAW 264.7的NO、IL-6、TNF-α、IFN-β细胞因子的分泌量最高,与空白对照差异极显著,但均低于脂多糖(LPS)的作用;而加入TLR2抗体后,SNP组巨噬细胞RAW 264.7的上述各细胞因子的分泌量相较未加TLR2抗体组均降低,但除IL-6细胞因子外差异均不显著。由此可见,SNP可促进巨噬细胞RAW 264.7的增殖及细胞因子的分泌,但不是通过TLR2受体介导。 展开更多
关键词 广叶绣球菌中性多糖 巨噬细胞RAW 264.7 高效凝胶渗透色谱法 细胞因子 TLR2受体
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