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神经退行性或损伤性疾病防治的新视点——干细胞药物 被引量:8
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作者 韩梅 张文生 +3 位作者 李金凤 孙媛媛 朱友惠 王永炎 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期841-844,共4页
干细胞药物是指可以通过调节生物体内干细胞的增殖与分化,来防治由于细胞缺失或损伤而引起疾病的一类治疗和预防药物。近年来发现:运用中药、生长因子和小分子化合物均可调节生物体内干细胞的增殖与分化;而神经系统退行性或损伤性疾病:... 干细胞药物是指可以通过调节生物体内干细胞的增殖与分化,来防治由于细胞缺失或损伤而引起疾病的一类治疗和预防药物。近年来发现:运用中药、生长因子和小分子化合物均可调节生物体内干细胞的增殖与分化;而神经系统退行性或损伤性疾病:包括帕金森病(PD)、阿尔采末病(AD)、亨廷顿病(HD)、药物滥用、抑郁症以及脑卒中等,均是由于神经细胞的缺失或损伤而引发的疾病。运用药物来调节自身神经干细胞的增殖与定向分化潜能,以重建受损的功能细胞,恢复其生物学功能,既解决了成体神经干细胞的来源困难和胚胎干细胞的伦理困惑问题,也避免了细胞移植的免疫排斥和手术后遗症问题。为细胞丢失或损伤性疾病的防治提供了崭新的视点和思路。 展开更多
关键词 干细胞药物 神经干细胞 调节干细胞的增殖与分化 神经退行性或损伤性疾病
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干细胞治疗神经系统疾病现状的思考:是希望还是炒作? 被引量:5
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作者 任超 耿德勤 +1 位作者 葛巍 李金梅 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第23期4306-4312,共7页
背景:干细胞研究已50年,干细胞体外分离、培养、纯化和鉴定技术已经相对成熟,干细胞替代治疗神经系统疾病已在临床开展,但在缺少统一应用规范的情况下不免出现一些负面报道和夸大宣传,面对这些很多医生、患者出现了迷惘。目的:探讨干细... 背景:干细胞研究已50年,干细胞体外分离、培养、纯化和鉴定技术已经相对成熟,干细胞替代治疗神经系统疾病已在临床开展,但在缺少统一应用规范的情况下不免出现一些负面报道和夸大宣传,面对这些很多医生、患者出现了迷惘。目的:探讨干细胞治疗神经系统疾病到底是希望?还是炒作?方法:通过①对人民日报近期发表的两篇影响较大的干细胞临床应用相关报道的思考。②结合作者自身多年开展干细胞治疗神经系统疾病的一些经验。③参考国内外一些研究文献等多条线索进行剖析。以"干细胞"、"动物模型"、"神经"等检索词变换组合检索万方数据库和Pubmed全文数据库1999年1月至2012年4月相关资料,获得文献阅读后进一步剔除。结果与结论:在动物实验方面,神经干细胞对于神经系统损伤及退行性变有一定治疗作用。在干细胞的临床应用研究方面,受到很多限制。面对阻力,一些国家已经从国家层面展开具有一定规模的临床试验,大多已进入临床Ⅱ、Ⅲ期。美国代表性产品Prochymal成为全球首个获准用于临床治疗人体疾病的干细胞药物。产业化的干细胞成品具有巨大的研究价值和应用前景。但在疗效不确切的情况下,暂不主张在临床上大规模推广应用,更不主张以盈利为目的、夸大其词的商业化宣传。 展开更多
关键词 干细胞 干细胞学术探讨 神经干细胞 神经系统疾病 临床应用 动物实验 干细胞药物 动物模型 进展 规范 产业化
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探讨干细胞疗法在我国临床应用的管理现状 被引量:1
3
作者 刘慧 俞海燕 +1 位作者 吴文涛 张纯 《中华医学科研管理杂志》 2016年第3期165-168,172,共5页
干细胞的自我更新与多向分化的生物学特性使干细胞疗法在许多疑难性疾病的治疗中获得较好的临床疗效,甚至在某些被认定为“绝症”的疾病治疗中,也展现出良好的治疗前景,给临床医生和患者在绝望中带来了信心与希望。本文介绍了国内外... 干细胞的自我更新与多向分化的生物学特性使干细胞疗法在许多疑难性疾病的治疗中获得较好的临床疗效,甚至在某些被认定为“绝症”的疾病治疗中,也展现出良好的治疗前景,给临床医生和患者在绝望中带来了信心与希望。本文介绍了国内外干细胞治疗的政策、管理制度及现状,指出我国干细胞治疗行业主要问题,并对我国干细胞疗法在科研管理和临床应用的争议进行探讨。 展开更多
关键词 干细胞治疗 政策 管理 干细胞药物
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干细胞药物的发展现状
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作者 王刚 刁波 《华南国防医学杂志》 CAS 2017年第11期778-782,共5页
干细胞作为一类具有强大再生能力和多向分化潜能的细胞已经被广泛认知。科学家们一直致力于对其进行研究,以期能将之应用于医学领域,包括对肿瘤、糖尿病、心脏病‘引、神经系统‘引、造血系统疾病等众多疾病的治疗及再生医学领域。
关键词 干细胞 干细胞药物 干细胞研究与临床转化指南 美国血库协会认证 细胞治疗认证基金会认证
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国外实验室干细胞检测认证认可现状及对我国的启示
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作者 付岳 周亚莉 +2 位作者 吕京 肖良 徐玉兵 《中国认证认可》 2022年第4期39-39,44,共2页
近年来由于生物技术的发展,干细胞药物的研发也越来越受到重视。目前,全球已经批准了十余种干细胞药物,但新药监管水平最高的美国FDA至今未批准任何一款干细胞药物(不含孤儿药和造血干细胞产品)。在我国,目前干细胞研发可以从干细胞临... 近年来由于生物技术的发展,干细胞药物的研发也越来越受到重视。目前,全球已经批准了十余种干细胞药物,但新药监管水平最高的美国FDA至今未批准任何一款干细胞药物(不含孤儿药和造血干细胞产品)。在我国,目前干细胞研发可以从干细胞临床研究备案项目和干细胞新药临床试验两个角度出发。 展开更多
关键词 临床试验 孤儿 造血干细胞 干细胞药物 监管水平 认证认可 美国FDA 对我国的启示
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细胞移植治疗的临床应用及发展——细胞移植治疗连载之三
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作者 王佃亮 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期138-145,共8页
细胞移植治疗在临床上的应用在几百年前就有尝试,但规模化的临床应用还是近年来的事。细胞移植治疗的临床应用领域包括血液系统疾病、心血管系统疾病、消化系统疾病、神经系统疾病、免疫系统疾病、呼吸系统疾病、泌尿系统疾病、骨骼系... 细胞移植治疗在临床上的应用在几百年前就有尝试,但规模化的临床应用还是近年来的事。细胞移植治疗的临床应用领域包括血液系统疾病、心血管系统疾病、消化系统疾病、神经系统疾病、免疫系统疾病、呼吸系统疾病、泌尿系统疾病、骨骼系统疾病以及抗衰老、角膜损伤、视网膜损伤、皮肤损伤、烧伤等。加拿大、韩国、美国等国已有干细胞药物被批准临床应用。2013年,中国干细胞移植治疗管理也实现了从"技术"到"制剂(药物)"的转变。细胞移植治疗将具有良好的发展前景。 展开更多
关键词 细胞移植 细胞治疗 临床应用 干细胞制剂 干细胞药物
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抗癌药研发的新策略:纳米靶向的高分子偶联抗癌症干细胞药物 被引量:2
7
作者 谢爱云 李小华 李高全 《山东化工》 CAS 2015年第1期47-51,共5页
过去二十多年来,已有5个高分子偶联抗癌药(包括3个抗体偶联药物)被 FDA 批准进入市场,此外还有很多高分子偶联抗癌药被推向临床试验。作为肿瘤中存在的很小的细胞亚群(只占0.1%~5%),癌症干细胞是导致肿瘤耐药、复发和转移的根源... 过去二十多年来,已有5个高分子偶联抗癌药(包括3个抗体偶联药物)被 FDA 批准进入市场,此外还有很多高分子偶联抗癌药被推向临床试验。作为肿瘤中存在的很小的细胞亚群(只占0.1%~5%),癌症干细胞是导致肿瘤耐药、复发和转移的根源。过去几年来,抗癌症干细胞药物的研究获得了飞速的进展,已有近30个抗癌症干细胞药物被推向临床试验。合成高分子偶联抗癌症干细胞药物有助于解决抗癌症干细胞药物水溶性差、代谢稳定性差、毒副作用、抗药性、靶向性等问题。将高分子治疗纳米医学与抗癌症干细胞药物结合,合成高分子偶联抗癌症干细胞药物,在与传统抗癌药联用的情况下,既能清除癌症干细胞,又能杀灭癌细胞,为治愈癌症带来了新的希望,具有极其广阔的前景。 展开更多
关键词 癌症干细胞 抗癌症干细胞药物 高分子偶联抗癌症干细胞药物 抗癌 高分子偶联抗癌 cancer stem cells(cSc)
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干细胞药物制备全站系统的结构设计及分析 被引量:1
8
作者 胡杰杰 胥坤 《化工与医药工程》 2019年第6期32-35,共4页
经过多年研制,开发了一种一体化、密闭式的干细胞药物制备全站系统,设备实现全流程、无菌密闭式操作;提供密闭、洁净无菌的A级环境,配合过氧化氢蒸汽灭菌技术,实现内部环境及物料表面的低温高效灭菌;在该设备下,人员通过隔离手套操作,... 经过多年研制,开发了一种一体化、密闭式的干细胞药物制备全站系统,设备实现全流程、无菌密闭式操作;提供密闭、洁净无菌的A级环境,配合过氧化氢蒸汽灭菌技术,实现内部环境及物料表面的低温高效灭菌;在该设备下,人员通过隔离手套操作,大大降低污染风险;同时,设备高度集成化,集成细胞处理过程全部关键仪器。干细胞药物制备全站系统提供可靠的设备及环境条件,是未来干细胞技术产品生产的关键设备。 展开更多
关键词 干细胞 干细胞药物制备全站系统 过氧化氢蒸汽灭菌技术 集成化 密闭
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骨髓源性神经干细胞诱导分化及移植治疗颅脑损伤 被引量:4
9
作者 薛蓬 陈镇洲 +1 位作者 刘钊 曾郁 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1271-1273,I0004,共4页
目的:观察体外诱导成人骨髓基质细胞向骨髓源性神经干细胞的分化情况,探讨应用骨髓源性神经干细胞移植治疗脑损伤的可行性。方法:实验于2005-01/10在珠江医院神经外科实验室完成。①选取清洁级SD大鼠6只,随机数字表法分为脑损伤组、假... 目的:观察体外诱导成人骨髓基质细胞向骨髓源性神经干细胞的分化情况,探讨应用骨髓源性神经干细胞移植治疗脑损伤的可行性。方法:实验于2005-01/10在珠江医院神经外科实验室完成。①选取清洁级SD大鼠6只,随机数字表法分为脑损伤组、假手术组,3只/组。以3名健康成人自愿捐献的骨髓作为实验移植骨髓源性神经干细胞的来源。“CYTOKINE·神经干细胞培养基”由珠江医院神经外科实验室调配,专利申请号:ZL02134314.4。②抽吸骨髓,密度梯度离心法获取骨髓基质细胞,以“CYTOKINE·神经干细胞培养基”+体积分数0.1的胎牛血清诱导骨髓基质细胞向神经细胞分化,倒置相差显微镜追踪观察细胞的形态变化。免疫荧光细胞化学鉴定Nestin、神经元特异性烯醇化酶、胶质酸性纤维蛋白的表达情况。③脑损伤组大鼠以自由落体撞击法建立脑损伤模型,假手术组只作开颅手术,未进行自由落体撞击。造模24h后,两组大鼠尾静脉移植3×106以Dio标记的诱导7d的细胞,荧光显微镜检测移植细胞的存活和迁移。结果:①细胞形态变化观察:原代培养的骨髓基质细胞增殖迅速,诱导分化7~10d可发现典型的细胞团。②抗原的表达情况:成功诱导人骨髓基质细胞向神经细胞方向分化,并表达神经前体细胞特异性标志Nestin、胶质酸性纤维蛋白、神经元特异性烯醇化酶。③移植细胞的存活和迁移检测:人骨髓源性神经干细胞能够在大鼠脑内存活,并向脑损伤区定向迁移,主要分布于损伤灶周围。脑损伤区对侧及假手术组则少见移植细胞的迁移分布。结论:人骨髓基质细胞在合适的条件下能被诱导分化为骨髓源性神经干细胞,可存活并迁移至大鼠脑内并参与脑损伤的修复。 展开更多
关键词 干细胞/药物作用 神经系统 骨髓细胞 脑损伤 细胞移植
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银杏活脑胶囊对大鼠脑梗死微血管增殖和神经干细胞再生影响 被引量:4
10
作者 徐元翠 鲁启洪 《中国误诊学杂志》 CAS 2010年第16期3879-3880,共2页
关键词 银杏素/理学 胶囊 梗塞 大脑中动脉/病理生理学/中疗法 干细胞/药物作用 神经元/药物作用 人类
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N-硝基-L-精氨酸对人胚胎神经干细胞增殖的作用 被引量:1
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作者 赵璇 郑慧媛 +3 位作者 赵凌宇 吴志新 崔媛媛 王兰 《陕西医学杂志》 CAS 2011年第12期1581-1583,共3页
目的:探讨一氧化氮合酶(NOS)抑制剂N-硝基-L-精氨酸(L-NNA)对人胚胎神经干细胞的增殖作用。方法:取4月龄(120±15d)正常孕妇引产胎儿的大脑皮质组织分离细胞,用无血清的条件培养基,培养原代神经干细胞并用间接免疫荧光化学法进行鉴... 目的:探讨一氧化氮合酶(NOS)抑制剂N-硝基-L-精氨酸(L-NNA)对人胚胎神经干细胞的增殖作用。方法:取4月龄(120±15d)正常孕妇引产胎儿的大脑皮质组织分离细胞,用无血清的条件培养基,培养原代神经干细胞并用间接免疫荧光化学法进行鉴定。第5天时,在培养基中加入不同浓度的L-NNA,继续培养24h后,用Griess还原法检测培养液中一氧化氮含量;用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)测定细胞活力。结果:加入不同浓度L-NNA24h后,培养液中一氧化氮量随L-NNA浓度的增高而降低,且显著低于对照组(P<0.05)。MTT法显示经L-NNA作用后的神经干细胞活细胞数较对照组明显增加(P<0.05),并呈浓度相关性。结论:L-NNA对培养状态下的人胚胎神经干细胞增殖有促进作用。 展开更多
关键词 干细胞/药物作用 硝基精氨酸/拮抗剂和抑制剂 细胞培养 细胞计数 荧光抗体技术 间接
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人胚神经干细胞植入脑损伤大鼠的存活和分化状态(英文)
12
作者 张泽舜 万虹 +2 位作者 历俊华 翟晶 王忠诚 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第20期4044-4047,共4页
背景:神经干细胞的发现为中枢神经系统损伤修复带来希望,但脑损伤后的内部环境对神经干细胞存活和分化的影响是一个复杂多变的过程。目的:观察大鼠脑液压冲击伤后植入的人胚神经干细胞存活情况和分化状态。设计:开放性实验。单位:广东... 背景:神经干细胞的发现为中枢神经系统损伤修复带来希望,但脑损伤后的内部环境对神经干细胞存活和分化的影响是一个复杂多变的过程。目的:观察大鼠脑液压冲击伤后植入的人胚神经干细胞存活情况和分化状态。设计:开放性实验。单位:广东省中医院神经外科,北京市神经外科研究所。材料:实验于2002-09/2003-03在北京市神经外科研究所神经干细胞室完成。选取SD雌性大鼠24只(购自中国医学科学院实验动物研究所,动物质量合格证号:SCXK(京)2002-2003),7周龄,体质量(250±10)g。8周龄流产胎儿大脑(产妇及其家属均同意提供),流产过程中B超监测胎儿的存活状况。BrdU单克隆抗体(Sigma公司),兔抗巢蛋白多克隆抗体(Chemicon公司),鼠抗微管相关蛋白2单克隆抗体(Neomarkers公司),兔抗胶质纤维酸性蛋白多克隆抗体(Biogenex公司)。方法:①取8周龄流产胎儿大脑皮层细胞,体外培养获得人胚神经干细胞。②大鼠制作液压冲击伤模型。大脑皮质运动感觉区骨窗位置:以前囟为零点,向后2.5mm,中线右3.0mm。液压冲击参数:冲击压力0.3MPa,冲击时间25ms,冲击次数为1次。③伤后24h在损伤区移植标有BrdU的人胚神经干细胞,1周和4周后处死大鼠,邻片行BrdU/微管相关蛋白2和BrdU/胶质纤维酸性蛋白免疫组织化学双染。主要观察指标:①人胚神经干细胞移植后的存活及迁移。②人胚神经干细胞移植后的分化。结果:①BrdU阳性细胞为椭圆形棕褐色,移植后1,4周均可见其存活并向周围迁移,且移植后4周迁移的范围更广。②移植后1周,皮质颗粒层和皮层下均见较多的BrdU阳性细胞,且BrdU/微管相关蛋白2双阳性细胞多于BrdU/胶质纤维酸性蛋白双阳性细胞;移植后4周,BrdU阳性细胞数明显减少,脉络丛和微血管中可见BrdU阳性细胞,且BrdU/胶质纤维酸性蛋白双阳性细胞多于BrdU/微管相关蛋白2双阳性细胞。结论:人胚神经� 展开更多
关键词 干细胞/药物作用 神经系统 细胞分化 爆震伤
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细胞骨架蛋白基因转录与小分子促小鼠胚胎干细胞定向分化神经元样细胞的相关性
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作者 许敏华 吴佳莹 +3 位作者 欧丽丽 朱丹雁 俞永平 楼宜嘉 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期242-248,共7页
目的:探索细胞骨架蛋白基因转录是否涉及全反式维甲酸(RA)促胚胎干(ES)细胞早期定向分化神经元样细胞,以此构建快速评价药物对ES细胞定向分化神经元的促进或抑制作用。方法:采用悬滴培养法模拟体内胚胎发育状态,形成拟胚体,进而贴壁向... 目的:探索细胞骨架蛋白基因转录是否涉及全反式维甲酸(RA)促胚胎干(ES)细胞早期定向分化神经元样细胞,以此构建快速评价药物对ES细胞定向分化神经元的促进或抑制作用。方法:采用悬滴培养法模拟体内胚胎发育状态,形成拟胚体,进而贴壁向神经细胞分化。利用RT-PCR法评价神经元呈特征性表达的一类细胞骨架蛋白基因微管相关蛋白(Mtap2)、神经丝(Nefm)和微管蛋白(β-tubulin)转录水平,作为RA促ES细胞定向分化神经元指标,结合光镜和免疫荧光法鉴定神经细胞的形成,由此构建快速评价体系。并在此基础上进一步评价合成化合物库内6个小分子对细胞骨架蛋白基因转录的影响。结果:RA诱导ES细胞定向分化神经元过程,Mtap2和Nefm转录水平均呈上调趋势,其中以Mtap2为甚,增加了1.27倍,并与同期细胞表型改变相一致,但β-tubulin无明显变化。6个合成小分子均使Mtap2转录受到抑制,但Nefm转录水平有不同程度上调,1号和3号化合物尤甚,分别增加了1.4和1.2倍,该上调作用与同期细胞表型改变不尽一致。结论:RA诱导ES细胞定向分化神经元早期,Mtap2和Nefm转录水平均呈上调趋势,其中Mtap2的表达与否与早期细胞表型改变相一致。 展开更多
关键词 干细胞/药物作用 胚胎/细胞 微管相关蛋白质类/转录 神经元/细胞 维甲酸/理学 基因表达 中间丝蛋白质类 细胞 培养的 细胞分化
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干细胞生物药物研究进展
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作者 殷玉和 陈宇 +1 位作者 石晶 王茂祥 《生命的化学》 CAS CSCD 2003年第1期10-12,共3页
胚胎干细胞和成年干细胞经培养能产生更多干细胞也可定向分化成神经细胞、血细胞、肝细胞等特定类型的细胞。其中具有潜能的细胞可用来研究治疗帕金森病、糖尿病和脊髓损伤等疾病的生物药物。
关键词 干细胞生物药物 研究进展 多潜能成年源细胞 治疗 应用
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干细胞治疗产品发展现状及申报注意事项(续)
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作者 张爱玲 《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》 2024年第2期128-128,共1页
长期以来,临床上很多疾病如糖尿病、心血管疾病、神经退行性疾病和癌症等,缺少明确高效的治愈方法,如何医治这些发病率不断增加的重大疾病,成为医学界面临的巨大挑战。以干细胞技术为核心的再生医学逐渐发展起来,并成功应用于一些疾病... 长期以来,临床上很多疾病如糖尿病、心血管疾病、神经退行性疾病和癌症等,缺少明确高效的治愈方法,如何医治这些发病率不断增加的重大疾病,成为医学界面临的巨大挑战。以干细胞技术为核心的再生医学逐渐发展起来,并成功应用于一些疾病的治疗中,日益受到患者的青睐。多个国家为应对老龄化危机,也将再生医学确立为国家战略。自2018年国家药品审评中心开放细胞治疗产品新药受理以来,迄今为止,虽然我国尚无一款"真正的"干细胞药品获批上市,但国内干细胞药物的临床研究有了相当大的进展,并不断取得突破。越来越多的细胞产品成功获批新药临床试验申请,但同时许多已获批的细胞产品不能顺利开展临床试验,更多申报项目面临资料发补甚至被驳回的风险。 展开更多
关键词 神经退行性疾病 临床试验 再生医学 心血管疾病 重大疾病 干细胞技术 干细胞治疗 干细胞药物
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干细胞治疗产品发展现状及申报注意事项
16
作者 张爱玲 《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》 2024年第1期62-62,共1页
【视频简介】长期以来,临床上很多疾病如糖尿病、心血管疾病、神经退行性疾病和癌症等,缺少明确高效的治愈方法,如何医治这些发病率不断增加的重大疾病,成为医学界面临的巨大挑战。以干细胞技术为核心的再生医学逐渐发展起来,并成功应... 【视频简介】长期以来,临床上很多疾病如糖尿病、心血管疾病、神经退行性疾病和癌症等,缺少明确高效的治愈方法,如何医治这些发病率不断增加的重大疾病,成为医学界面临的巨大挑战。以干细胞技术为核心的再生医学逐渐发展起来,并成功应用于一些疾病的治疗中,日益受到患者的青睐。多个国家为应对老龄化危机,也将再生医学确立为国家战略。自2018年国家药品审评中心开放细胞治疗产品新药受理以来,迄今为止,虽然我国尚无一款"真正的"干细胞药品获批上市,但国内干细胞药物的临床研究有了相当大的进展,并不断取得突破。越来越多的细胞产品成功获批新药临床试验申请,但同时许多已获批的细胞产品不能顺利开展临床试验,更多申报项目面临资料发补甚至被驳回的风险。 展开更多
关键词 神经退行性疾病 临床试验 再生医学 心血管疾病 重大疾病 干细胞技术 干细胞治疗 干细胞药物
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人参总皂甙诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的实验研究 被引量:33
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作者 汪朝晖 冼绍祥 +2 位作者 杨忠奇 李南夷 赵立诚 《广州中医药大学学报》 CAS 2006年第2期100-103,共4页
【目的】观察人参总皂甙(GS)对骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为心肌样细胞的诱导作用。【方法】取成年SD大鼠骨髓细胞,采用密度梯度分离法与贴壁法结合获取MSCs,进行原代培养和克隆培养;采用流式细胞仪检测细胞表面抗原 CD34和CD44以鉴定... 【目的】观察人参总皂甙(GS)对骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为心肌样细胞的诱导作用。【方法】取成年SD大鼠骨髓细胞,采用密度梯度分离法与贴壁法结合获取MSCs,进行原代培养和克隆培养;采用流式细胞仪检测细胞表面抗原 CD34和CD44以鉴定该法所获细胞是否为MSCs;对传至第8代的MSCs进行分组诱导,分别为GS组(终末浓度为 250 mg/L)、5-氮胞苷(5-aza)组(终末浓度为10μmoL/L)、GS+5-aza组(终末浓度分别为250 mg/L、10μmol/L),每组再分 3个亚组,分别对MSCs进行24、48、72 h诱导,并设空白对照组;采用共聚焦荧光显微镜观察细胞数及阳性细胞数,计算心肌样细胞转化率;采用免疫组化法检测分化的心肌样细胞的特异性蛋白结蛋白(Desmin)和肌钙蛋白(cTnI),采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测诱导前后心肌细胞特征性基因α-心肌肌球蛋白重链(α-MHC)和β-心肌肌球蛋白重链(β- MHC)的表达。【结果】分离培养后的细胞生长密集,形态呈纺锤状,表面抗原鉴定为CD44表达阳性,表明所获细胞为 MSCs;经GS、5-aza诱导后,MSCs分化成类心肌细胞,3组的心肌样细胞转化率无显著性差异(分别为38%、35%、39%); 免疫组化和RT-PCR检测结果显示Desmin、cTnI和MHC表达均阳性,阳性细胞呈梭形和成纤维细胞样形态,表明MSCs在 GS体外诱导下已向心肌样细胞转化,并具有心肌样细胞的特性。【结论】GS可体外诱导MSCs分化为心肌样细胞,为细胞移植治疗心肌梗死提供了实验依据。 展开更多
关键词 人参总皂甙/理学 骨髓间充质干细胞/药物作用 心肌梗塞/中疗法 细胞培养 大鼠
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脑脉通联合骨髓间充质干细胞经动脉移植保护大鼠脑缺血损伤的研究 被引量:15
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作者 刘敬霞 李建生 +5 位作者 赵跃武 孔令飞 孙捷 郭晓燕 李宁 苏静 《中医研究》 2007年第6期12-16,共5页
目的:探讨脑脉通联合骨髓间充质干细胞(bone mar-row stromal stem cells,BMSCs)经动脉移植对大鼠脑缺血损伤的保护作用。方法:体外全骨髓贴壁筛选培养法纯化扩增BMSCs,移植前48 h用Brdu对BMSCs进行标记;190只大鼠随机分组;线栓阻塞大... 目的:探讨脑脉通联合骨髓间充质干细胞(bone mar-row stromal stem cells,BMSCs)经动脉移植对大鼠脑缺血损伤的保护作用。方法:体外全骨髓贴壁筛选培养法纯化扩增BMSCs,移植前48 h用Brdu对BMSCs进行标记;190只大鼠随机分组;线栓阻塞大鼠大脑中动脉制备脑缺血动物模型,术后24 h将标记的BMSCs由颈内动脉移植入大鼠脑内;分别于移植后7,14,28 d观察大鼠脑组织病理损伤,进行神经功能综合测评,测定脑组织含水量、脑梗塞面积和大鼠体重变化率。结果:模型14 d组大鼠的脑组织病理损伤、神经功能障碍、脑组织含水量和脑梗塞面积较7 d组加重,差别无统计学意义,28 d组上述指标改善明显;BMSCs移植后7 d和14 d组上述指标变化较模型组无显著差异,28 d组改善明显;脑脉通联合BMSCs移植7 d、14 d和28 d组大鼠神经功能恢复、脑组织含水量下降、神经元超微结构改善均较模型组和移植组显著,其中以28 d组的改善尤为明显。结论:脑缺血再灌注14 d大鼠脑损伤较7 d有加重趋势,28 d时有不同程度恢复;BMSCs经动脉移植后14 d未显示明显的脑保护作用,28 d时保护作用明显;脑脉通联合BMSCs移植可于7,14和28 d产生不同程度的脑保护作用,且随移植时间的延长呈增强趋势。 展开更多
关键词 脑缺血/药物作用 大鼠 脑脉通/效学 骨髓间充质干细胞/药物作用
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龟甲提取物对骨髓间充质干细胞增殖过程中核受体的影响 被引量:12
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作者 宋述财 许华 +4 位作者 周健洪 黎晖 李伊为 杜少辉 陈东风 《广州中医药大学学报》 CAS 2006年第2期95-99,111,共6页
【目的】观察龟甲(也称龟版或龟板)提取物对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)增殖过程中核受体 (nuclear receptor,NR)表达的影响。【方法】采用密度梯度法分离大鼠MSC进行培养,经5-溴脱氧尿嘧啶(Brdu)标记和 CD44免疫组... 【目的】观察龟甲(也称龟版或龟板)提取物对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)增殖过程中核受体 (nuclear receptor,NR)表达的影响。【方法】采用密度梯度法分离大鼠MSC进行培养,经5-溴脱氧尿嘧啶(Brdu)标记和 CD44免疫组化染色鉴定后,分别以高、中、低剂量的龟甲提取物(3 333、333.3、33.33μg/mL)加入到体外培养的MSC中, 与龟甲提取物作用12、24、72、120 h后,采用免疫组化法和免疫荧光细胞化学法检测MSC的视黄酸受体(retinoic acid receptor-α,RARα)、维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)、雌激素受体(estrogen reeepror,ER)、糖皮质激素受体 (glucocorticoid receptor,GR)、甲状腺激素受体(thyroid hormone receptor-α,TRα)和过氧化物酶体增殖物活化受体(peroxisome proliferator activated receptor-δ,PPARδ)的表达。【结果】高、中、低剂量龟甲提取物组的MSC的RARα、VDR表达阳性细胞均高于对照组(P<0.05或P<0.01),且呈剂量依赖性;作用24 h后RARα表达达峰值,作用72 h后VDR表达达峰值。未检测到ER、GR、PPARδ、TRα阳性反应细胞。【结论】视黄酸受体α和维生素D受体可能为龟甲提取物促MSC增殖的药理靶点。 展开更多
关键词 龟甲提取物/理学 骨髓间充质干细胞/药物作用 细胞增殖 核受体/病理学 细胞培养 大鼠
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高三尖杉酯碱对人急性髓系白血病干细胞的杀伤作用 被引量:8
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作者 沈建平 杨宏 +1 位作者 倪万茂 钱文斌 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期485-490,共6页
目的:观察高三尖杉酯碱(HHT)对人急性髓系白血病(AML)干细胞的杀伤作用,探讨其分子学机制。方法:用流式细胞仪(FACS)分析AML细胞株白细胞干细胞(LSC)的表型特征,用MTT法检测HHT对具有LSC特征的KG-1细胞的生长抑制作用,用FACS观察HHT对CD... 目的:观察高三尖杉酯碱(HHT)对人急性髓系白血病(AML)干细胞的杀伤作用,探讨其分子学机制。方法:用流式细胞仪(FACS)分析AML细胞株白细胞干细胞(LSC)的表型特征,用MTT法检测HHT对具有LSC特征的KG-1细胞的生长抑制作用,用FACS观察HHT对CD34+CD38-CD96+的KG-1细胞数量的影响,Western blot法检测药物处理后Caspase途径和凋亡相关蛋白的改变。结果:KG-1和Kasumi-1细胞CD34+CD38-CD96+分别为69%和26.7%,U937细胞不表达CD96。HHT能显著抑制KG-1细胞的生长,并呈剂量依赖性(r2=0.9971,P<0.05)。48 h的半数抑制浓度为16.9 ng/ml。HHT作用KG-1细胞后,CD34+CD38-CD96+细胞的比例从63.6%下降到17.1%。HHT能显著激活Caspase-3、Caspase-9和PARP,抑制磷酸化Akt和Bcl-2的表达。结论:HHT能显著抑制人AML细胞KG-1的增殖,减少CD34+CD38-CD96+白血病干细胞数量;对Akt活性和Bcl-2的调控可能是其重要的作用机制。 展开更多
关键词 白血病 髓样 急性/药物疗法 白血病 髓样 急性/病理学 三尖杉酯碱类/治疗应用 肿瘤干细胞/药物作用 细胞凋亡/药物作用 肿瘤细胞 培养的
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