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人骨髓基质干细胞体外培养及临床应用研究
被引量：
6
1
作者
王少山
李宝锋
+1 位作者
王楠
苗俊英
《中国矫形外科杂志》
CAS
CSCD
2004年第14期1086-1088,共3页
目的 :通过对人骨髓基质细胞的体外培养、扩增和初步回植的研究 ,探讨MSCs临床应用疗效和前瞻性。方法 :从人髂骨抽取骨髓液 ,体外培养、传代和扩增 ,细胞周期、细胞形态和细胞分裂方式观察 ,并初步对骨科疾病进行回植治疗。结果 :建立...
目的 :通过对人骨髓基质细胞的体外培养、扩增和初步回植的研究 ,探讨MSCs临床应用疗效和前瞻性。方法 :从人髂骨抽取骨髓液 ,体外培养、传代和扩增 ,细胞周期、细胞形态和细胞分裂方式观察 ,并初步对骨科疾病进行回植治疗。结果 :建立一套完整、简单、成熟的体外分离、培养、扩增MSCs的系统方法 ,获得初步良好的临床疗效。结论 :人骨髓基质细胞能在体外大量培养扩增 。
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关键词
骨髓基质
细胞
干
细胞体
外
培养
骨不连接
下载PDF
职称材料
小鼠卵巢生殖干细胞分离培养鉴定
被引量：
1
2
作者
杜寒倩
赵元
+6 位作者
李泽辉
徐盼瑜
李佳珊
李源
李庆林
林娜
徐颖
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第8期845-855,共11页
通过比较不同酶分离方法获得小鼠(Mus musculus)卵巢生殖干细胞的数量以及不同饲养层培养卵巢生殖干细胞的生长状态,筛选出最佳酶分离方法和饲养层,以期建立更优化的培养体系,并对优化培养体系长期培养的卵巢生殖干细胞进行功能鉴定。选...
通过比较不同酶分离方法获得小鼠(Mus musculus)卵巢生殖干细胞的数量以及不同饲养层培养卵巢生殖干细胞的生长状态,筛选出最佳酶分离方法和饲养层,以期建立更优化的培养体系,并对优化培养体系长期培养的卵巢生殖干细胞进行功能鉴定。选取5日龄C57BL/6雌性乳鼠卵巢,机械法制备卵巢组织碎片后,分别采用传统两步酶法(胶原酶和胰蛋白酶)和改良两步酶法(胶原酶、DNA酶、透明质酸酶、分离酶Ⅱ和胰蛋白酶)分离卵巢生殖干细胞,差速贴壁法纯化后,观察不同酶消化方法对卵巢生殖干细胞数量的影响;将分离得到的卵巢生殖干细胞分别培养于小鼠胚胎成纤维细胞STO系[sandosinbred mice(SIM)embryo-derived thioguanine and ouabain-resistant]、多聚赖氨酸以及明胶3种不同的饲养层,观察卵巢生殖干细胞的生长增殖状态;将传至第6代的卵巢生殖干细胞用碱性磷酸酶检测法和免疫荧光法对卵巢生殖干细胞标志物MVH、Oct4、C-kit和增殖标记物Brdu进行鉴定。结果发现两种酶分离方法均可从卵巢中分离得到卵巢生殖干细胞,其中传统两步酶法获得的细胞经差速贴壁法纯化后含卵巢生殖干细胞数量较多;3种不同的饲养层均可使卵巢生殖干细胞生长,其中尤以STO细胞培养的干细胞状态最佳,可在其上生长增殖长达20 d,而多聚赖氨酸和明胶为饲养层培养的卵巢生殖干细胞在培养第5天时出现凋亡。卵巢生殖干细胞碱性磷酸酶染色呈阳性表达,且卵巢生殖干细胞标志物MVH/Oct4、Oct4/Brdu及C-kit蛋白均呈阳性表达。通过传统两步酶法分离得到的卵巢生殖干细胞悬液,经差速贴壁法纯化后,以STO细胞作为饲养层,更有利于卵巢生殖干细胞的生长增殖,且稳定培养后的卵巢生殖干细胞具有正常的生物学功能。
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关键词
卵巢生殖
干
细胞
干
细胞
分离
干
细胞
鉴定
干
细胞体
外
培养
原文传递
鼠精原干细胞分离鉴定方法的应用及体外培养体系研究进展
被引量：
3
3
作者
陈琰
李兴元
+2 位作者
胡文慧
姚金玲
孔德营
《山东医药》
CAS
2021年第30期101-104,共4页
精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)是精子发生的基础。SSCs的数量减少或功能缺陷会导致雄性生殖障碍。鼠SSCs的分离主要采用两步法,通过机械分离和酶消化睾丸组织后,采用差速贴壁法、密度梯度法、免疫磁珠分选法或流式细胞分...
精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)是精子发生的基础。SSCs的数量减少或功能缺陷会导致雄性生殖障碍。鼠SSCs的分离主要采用两步法,通过机械分离和酶消化睾丸组织后,采用差速贴壁法、密度梯度法、免疫磁珠分选法或流式细胞分选法等纯化SSCs。SSCs的鉴定主要是以胶质细胞源性神经营养因子家族受体α1、死盒解旋酶4、锌指和BTB结构域包含16等特异性标志物为基础,结合荧光定量PCR法和免疫组织化学法完成。SSCs的体外培养体系中基础培养基和适宜的温度是培养的必要条件,常用的SSCs培养基主要有DMEM、MEM以及SFM等,StemPro-34SFM适用于培养大鼠SSCs。32~37℃适合小鼠SSCs的体外培养,而34℃更有利于提高SSCs的增殖及维持其细胞活性。饲养层细胞可更好地延长SSCs的体外培养时长。在体外培养体系中加入血清及生长因子有助于促进SSCs的增殖。
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关键词
精原
干
细胞
干
细胞
分离
干
细胞
鉴定
干
细胞体
外
培养
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职称材料
题名
人骨髓基质干细胞体外培养及临床应用研究
被引量：
6
1
作者
王少山
李宝锋
王楠
苗俊英
机构
山东中医药大学附属医院
出处
《中国矫形外科杂志》
CAS
CSCD
2004年第14期1086-1088,共3页
文摘
目的 :通过对人骨髓基质细胞的体外培养、扩增和初步回植的研究 ,探讨MSCs临床应用疗效和前瞻性。方法 :从人髂骨抽取骨髓液 ,体外培养、传代和扩增 ,细胞周期、细胞形态和细胞分裂方式观察 ,并初步对骨科疾病进行回植治疗。结果 :建立一套完整、简单、成熟的体外分离、培养、扩增MSCs的系统方法 ,获得初步良好的临床疗效。结论 :人骨髓基质细胞能在体外大量培养扩增 。
关键词
骨髓基质
细胞
干
细胞体
外
培养
骨不连接
Keywords
Bone marrow stromal cell
Stem cells cultured in vitro
Nonunion
分类号
R68 [医药卫生—骨科学]
下载PDF
职称材料
题名
小鼠卵巢生殖干细胞分离培养鉴定
被引量：
1
2
作者
杜寒倩
赵元
李泽辉
徐盼瑜
李佳珊
李源
李庆林
林娜
徐颖
机构
安徽中医药大学药学院
中国中医科学院中药研究所
深圳市中医院中药制剂中心
出处
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第8期845-855,共11页
基金
国家自然科学基金面上项目(8197142634)、国家自然科学基金青年基金项目(82004248)共同资助
中国中医科学院科技创新工程项目(CI2021A03802)。
文摘
通过比较不同酶分离方法获得小鼠(Mus musculus)卵巢生殖干细胞的数量以及不同饲养层培养卵巢生殖干细胞的生长状态,筛选出最佳酶分离方法和饲养层,以期建立更优化的培养体系,并对优化培养体系长期培养的卵巢生殖干细胞进行功能鉴定。选取5日龄C57BL/6雌性乳鼠卵巢,机械法制备卵巢组织碎片后,分别采用传统两步酶法(胶原酶和胰蛋白酶)和改良两步酶法(胶原酶、DNA酶、透明质酸酶、分离酶Ⅱ和胰蛋白酶)分离卵巢生殖干细胞,差速贴壁法纯化后,观察不同酶消化方法对卵巢生殖干细胞数量的影响;将分离得到的卵巢生殖干细胞分别培养于小鼠胚胎成纤维细胞STO系[sandosinbred mice(SIM)embryo-derived thioguanine and ouabain-resistant]、多聚赖氨酸以及明胶3种不同的饲养层,观察卵巢生殖干细胞的生长增殖状态;将传至第6代的卵巢生殖干细胞用碱性磷酸酶检测法和免疫荧光法对卵巢生殖干细胞标志物MVH、Oct4、C-kit和增殖标记物Brdu进行鉴定。结果发现两种酶分离方法均可从卵巢中分离得到卵巢生殖干细胞,其中传统两步酶法获得的细胞经差速贴壁法纯化后含卵巢生殖干细胞数量较多;3种不同的饲养层均可使卵巢生殖干细胞生长,其中尤以STO细胞培养的干细胞状态最佳,可在其上生长增殖长达20 d,而多聚赖氨酸和明胶为饲养层培养的卵巢生殖干细胞在培养第5天时出现凋亡。卵巢生殖干细胞碱性磷酸酶染色呈阳性表达,且卵巢生殖干细胞标志物MVH/Oct4、Oct4/Brdu及C-kit蛋白均呈阳性表达。通过传统两步酶法分离得到的卵巢生殖干细胞悬液,经差速贴壁法纯化后,以STO细胞作为饲养层,更有利于卵巢生殖干细胞的生长增殖,且稳定培养后的卵巢生殖干细胞具有正常的生物学功能。
关键词
卵巢生殖
干
细胞
干
细胞
分离
干
细胞
鉴定
干
细胞体
外
培养
Keywords
Ovarian germ stem cell
Stem cell isolation
Stem cell identification
Stem cell culture in vitro
分类号
Q95-33 [生物学—动物学]
原文传递
题名
鼠精原干细胞分离鉴定方法的应用及体外培养体系研究进展
被引量：
3
3
作者
陈琰
李兴元
胡文慧
姚金玲
孔德营
机构
遵义医科大学基础医学院生理学教研室
出处
《山东医药》
CAS
2021年第30期101-104,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(31760339)。
文摘
精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)是精子发生的基础。SSCs的数量减少或功能缺陷会导致雄性生殖障碍。鼠SSCs的分离主要采用两步法,通过机械分离和酶消化睾丸组织后,采用差速贴壁法、密度梯度法、免疫磁珠分选法或流式细胞分选法等纯化SSCs。SSCs的鉴定主要是以胶质细胞源性神经营养因子家族受体α1、死盒解旋酶4、锌指和BTB结构域包含16等特异性标志物为基础,结合荧光定量PCR法和免疫组织化学法完成。SSCs的体外培养体系中基础培养基和适宜的温度是培养的必要条件,常用的SSCs培养基主要有DMEM、MEM以及SFM等,StemPro-34SFM适用于培养大鼠SSCs。32~37℃适合小鼠SSCs的体外培养,而34℃更有利于提高SSCs的增殖及维持其细胞活性。饲养层细胞可更好地延长SSCs的体外培养时长。在体外培养体系中加入血清及生长因子有助于促进SSCs的增殖。
关键词
精原
干
细胞
干
细胞
分离
干
细胞
鉴定
干
细胞体
外
培养
分类号
S814 [农业科学—畜牧学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人骨髓基质干细胞体外培养及临床应用研究
王少山
李宝锋
王楠
苗俊英
《中国矫形外科杂志》
CAS
CSCD
2004
6
下载PDF
职称材料
2
小鼠卵巢生殖干细胞分离培养鉴定
杜寒倩
赵元
李泽辉
徐盼瑜
李佳珊
李源
李庆林
林娜
徐颖
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2023
1
原文传递
3
鼠精原干细胞分离鉴定方法的应用及体外培养体系研究进展
陈琰
李兴元
胡文慧
姚金玲
孔德营
《山东医药》
CAS
2021
3
下载PDF
职称材料
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