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亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因文库的构建及分析
被引量：
8
1
作者
程天印
周金林
+2 位作者
周勇志
施启顺
林矫矫
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第3期261-266,共6页
从单雌蜱克隆群中挑选未吸血雌蜱60只,随机分成两组。未吸血组直接剖取唾液腺。半饱血组于蜱吸血第5d采集,分离唾液腺。Trizol法提取总RNA,经第一链合成、LD-PCR、RasⅠ酶切、接头连接和抑制消减杂交(SSH)等步骤,获得差异表达基因的cDN...
从单雌蜱克隆群中挑选未吸血雌蜱60只,随机分成两组。未吸血组直接剖取唾液腺。半饱血组于蜱吸血第5d采集,分离唾液腺。Trizol法提取总RNA,经第一链合成、LD-PCR、RasⅠ酶切、接头连接和抑制消减杂交(SSH)等步骤,获得差异表达基因的cDNA片段。将纯化的cDNA片段与pGEMT-Easy载体连接,转化DH5a,获得204个白色菌落。扩增检查表明,136个克隆含有插入片段,片段大小为250bp～850bp。测出有效序列120个。由10个cDNA片段的RT-PCR检查结果初步断定,本研究消减效果良好。由网上资源分析得:21个片段与其他蜱的基因,19个片段与按蚊、库蚊、钩虫、奥斯特线虫等其他吸血寄生虫的基因,9个与果蝇的基因具有同源性。
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关键词
亚洲璃眼蜱
唾液腺
差异
表达
基因文库
同源性
下载PDF
职称材料
利用消减抑制杂交技术构建MPTP诱导的C57BL小鼠全脑差异表达基因文库
2
作者
徐磊
吕立夏
+4 位作者
姚劲松
杨翠香
金珠
李学礼
王尧
《中国神经科学杂志》
CSCD
2002年第1期442-445,共4页
本研究旨在构建 1 甲基 4 苯基 1,2 ,3,6 四氢吡啶 (MPTP)诱导的C5 7BL小鼠全脑差异表达基因文库 ,并获取差异表达的表达序列标签。通过MPTP腹腔注射建立C5 7BL小鼠帕金森病模型。利用消减抑制杂交技术建立对照组与实验组差异表达基...
本研究旨在构建 1 甲基 4 苯基 1,2 ,3,6 四氢吡啶 (MPTP)诱导的C5 7BL小鼠全脑差异表达基因文库 ,并获取差异表达的表达序列标签。通过MPTP腹腔注射建立C5 7BL小鼠帕金森病模型。利用消减抑制杂交技术建立对照组与实验组差异表达基因文库。自两文库中各随机挑选 2 0个克隆 ,经反Northern杂交证实其中 7个克隆为阳性。同时对上述 4 0个克隆进行序列测定 ,并与已知序列基因库进行同源性比较 ,其中 2 6个新基因片段向Genbank申请了序列号。
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关键词
帕金森病
MPTP
消减抑制杂交
C57BL小鼠
MPTP
全脑
差异
表达
基因文库
下载PDF
职称材料
题名
亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因文库的构建及分析
被引量：
8
1
作者
程天印
周金林
周勇志
施启顺
林矫矫
机构
中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所
湖南农业大学动物科技学院
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第3期261-266,共6页
基金
国家基础研究重大项目前期研究专项(2001CCA00900)
上海市自然科学基金
文摘
从单雌蜱克隆群中挑选未吸血雌蜱60只,随机分成两组。未吸血组直接剖取唾液腺。半饱血组于蜱吸血第5d采集,分离唾液腺。Trizol法提取总RNA,经第一链合成、LD-PCR、RasⅠ酶切、接头连接和抑制消减杂交(SSH)等步骤,获得差异表达基因的cDNA片段。将纯化的cDNA片段与pGEMT-Easy载体连接,转化DH5a,获得204个白色菌落。扩增检查表明,136个克隆含有插入片段,片段大小为250bp～850bp。测出有效序列120个。由10个cDNA片段的RT-PCR检查结果初步断定,本研究消减效果良好。由网上资源分析得:21个片段与其他蜱的基因,19个片段与按蚊、库蚊、钩虫、奥斯特线虫等其他吸血寄生虫的基因,9个与果蝇的基因具有同源性。
关键词
亚洲璃眼蜱
唾液腺
差异
表达
基因文库
同源性
Keywords
Hyalomma asiaticum
the salivary gland
the libraries of differentially expressed genes
分类号
S852.746 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
利用消减抑制杂交技术构建MPTP诱导的C57BL小鼠全脑差异表达基因文库
2
作者
徐磊
吕立夏
姚劲松
杨翠香
金珠
李学礼
王尧
机构
同济大学医学院生物化学教研室
出处
《中国神经科学杂志》
CSCD
2002年第1期442-445,共4页
基金
国家自然科学基金项目 (3 9770 2 44 )
文摘
本研究旨在构建 1 甲基 4 苯基 1,2 ,3,6 四氢吡啶 (MPTP)诱导的C5 7BL小鼠全脑差异表达基因文库 ,并获取差异表达的表达序列标签。通过MPTP腹腔注射建立C5 7BL小鼠帕金森病模型。利用消减抑制杂交技术建立对照组与实验组差异表达基因文库。自两文库中各随机挑选 2 0个克隆 ,经反Northern杂交证实其中 7个克隆为阳性。同时对上述 4 0个克隆进行序列测定 ,并与已知序列基因库进行同源性比较 ,其中 2 6个新基因片段向Genbank申请了序列号。
关键词
帕金森病
MPTP
消减抑制杂交
C57BL小鼠
MPTP
全脑
差异
表达
基因文库
Keywords
Parkinson's disease
MPTP
suppression subtractive hybridization
C57BL mice
分类号
R742.5 [医药卫生—神经病学与精神病学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因文库的构建及分析
程天印
周金林
周勇志
施启顺
林矫矫
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
8
下载PDF
职称材料
2
利用消减抑制杂交技术构建MPTP诱导的C57BL小鼠全脑差异表达基因文库
徐磊
吕立夏
姚劲松
杨翠香
金珠
李学礼
王尧
《中国神经科学杂志》
CSCD
2002
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
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参考文献
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