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旋毛虫5日龄成虫期特异性基因片段的克隆及鉴定 被引量：5
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作者 付宝权 刘明远 +5 位作者 王锋 吴秀萍 卢强 黎诚耀 窦兰清 P.Boireau 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2001年第11期9-11,共3页
利用差减抑制杂交 (SSH)技术 ,以旋毛虫 5日龄成虫的cDNA为试验方 (tester) ,以肌幼虫 + 3日龄成虫的cDNA为驱动方 (driver) ,制备 5日龄成虫差减cDNA ,并与 pT Adv载体相连接 ,转入大肠埃希氏菌TOP 10F。以试验方的差减cDNAPCR产物 +... 利用差减抑制杂交 (SSH)技术 ,以旋毛虫 5日龄成虫的cDNA为试验方 (tester) ,以肌幼虫 + 3日龄成虫的cDNA为驱动方 (driver) ,制备 5日龄成虫差减cDNA ,并与 pT Adv载体相连接 ,转入大肠埃希氏菌TOP 10F。以试验方的差减cDNAPCR产物 +未差减cDNA为试验方探针 ,以驱动方的差减cDNAPCR产物 +未差减cDNA为驱动方探针 ,对 5日龄成虫差减cDNA克隆进行初步筛选 ,对筛选到的阳性克隆进一步用southernblot进行鉴定 ,并对其测序 ,进行序列分析。结果表明 ,获得 1个大小为 464bp的旋毛虫 5日龄成虫期特异性cDNA片段 ,经BLAST软件分析表明 ,该序列是 1个未见报道的旋毛虫基因序列片段 ,可能编码 1种表皮胶原蛋白。这为旋毛虫 5日龄成虫期特异性基因全长序列的钓取、分析及鉴定奠定了基础。 展开更多
关键词 旋毛虫 成虫期 特异性基因片段 克隆 鉴定 差减抑制杂交技术
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