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枸杞多糖通过MGL/TLR信号通路调控巨噬细胞RAW264.7的活化
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作者 刘亚楠 杨皓凯 +3 位作者 闫亚娟 杨小娟 段相国 苏春霞 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期106-112,共7页
目的:探讨枸杞多糖(LBP)促进巨噬细胞RAW264.7活化的机制。方法:采用不同浓度(50、100、200 mg·L^(-1))的LBP刺激巨噬细胞RAW264.7,以100μg·L^(-1)的脂多糖(LPS)和100 mg·L^(-1)半乳糖(Gal)作为阳性药。LBP刺激24 h后,... 目的:探讨枸杞多糖(LBP)促进巨噬细胞RAW264.7活化的机制。方法:采用不同浓度(50、100、200 mg·L^(-1))的LBP刺激巨噬细胞RAW264.7,以100μg·L^(-1)的脂多糖(LPS)和100 mg·L^(-1)半乳糖(Gal)作为阳性药。LBP刺激24 h后,采用细胞增殖与活性检测试剂盒(CCK-8)检测不同给药浓度的LBP(0、50、100、200、400、800 mg·L^(-1))对巨噬细胞RAW264.7的毒性影响;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞培养上清中白细胞介素(IL)-6、IL-12的水平;分别通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测巨噬细胞RAW264.7 Toll样受体4(TLR4)/Toll样受体2(TLR2)/巨噬细胞半乳糖型凝集素(MGL)通路中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和核转录因子-κB(NF-κB) mRNA及蛋白表达水平;结果:CCK-8结果显示,与空白组比较,400、800 mg·L^(-1)LBP组干预巨噬细胞RAW264.7时,细胞存活率下降(P<0.05)。ELISA结果显示,与空白组比较,50 mg·L^(-1)LBP能够促进巨噬细胞RAW264.7分泌IL-12水平(P<0.01);与空白组比较,100、200 mg·L^(-1)LBP能够促进巨噬细胞RAW264.7分泌IL-6水平(P<0.05,P<0.01)。Western blot结果显示,与空白组比较,不同质量浓度的LBP组(50、100、200 mg·L^(-1))作用于巨噬细胞RAW264.7能够增强TLR4、TLR2和MGL通路中MAPK关键分子(p-p38 MAPK、p-ERK、p-NF-κB、p-JNK)的蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,200 mg·L^(-1)LBP组能够促进巨噬细胞RAW264.7p-NF-κB蛋白表达水平(P<0.01)。Real-time PCR结果显示,与空白组比较,不同质量浓度的LBP组(50、100、200 mg·L^(-1))作用于巨噬细胞RAW264.7能够增强TLR4、TLR2信号通路中MAPK关键分子p38 MAPK、ERK、NF-κB、JNK的mRNA表达水平(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,50、200 mg·L^(-1)LBP组能够促进巨噬细胞RAW264.7 JNK、ERK2 mRNA的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论:LBP能够通过TLR2/TLR4//MGL通路调控巨� 展开更多
关键词 枸杞多糖 巨噬细胞RAW264.7 Toll样受体2(TLR2) Toll样受体4(TLR4) 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK) 巨噬细胞半乳糖型凝集素(mgl)
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