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用玉米浆培养MM_3工程菌的研究 被引量：1
1
作者 张群伟 王叙甫 于公义 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 1994年第4期276-278,共3页
对不同来源玉米浆的固形物、氮含量等自身性状进行了检测，通过以各玉米浆为主要成分配制培养基的摇瓶试验，探讨了玉米浆用于ＭＭ＿３工程菌培养的可行性与影响因素，证明了工程菌在该培养基中生长良好，并具有较高的抗原表达水平，在... 对不同来源玉米浆的固形物、氮含量等自身性状进行了检测，通过以各玉米浆为主要成分配制培养基的摇瓶试验，探讨了玉米浆用于ＭＭ＿３工程菌培养的可行性与影响因素，证明了工程菌在该培养基中生长良好，并具有较高的抗原表达水平，在培养周期、活菌终产量及成本上均优于常用的ＬＢ培养基． 展开更多
关键词 玉米浆培养基 工程菌培养
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CNTF工程菌培养及产物纯化
2
作者 马红雨 朱美才 +1 位作者 蔡庆 占志 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2001年第3期154-156,共3页
目的 建立ＣＮＩＦ生产工艺，获得高产量的ＣＮＴＦ活性蛋白质。方法 通过摇瓶和发酵罐培养研究 了培养基成分、ｐＨ、诱导时间对工程菌 ｐＢＶ２２０－ＣＮＴＦ／ＤＨ５Ａα生成和表达的影响，并对表达产物进行纯化和生物学活 性检测... 目的 建立ＣＮＩＦ生产工艺，获得高产量的ＣＮＴＦ活性蛋白质。方法 通过摇瓶和发酵罐培养研究 了培养基成分、ｐＨ、诱导时间对工程菌 ｐＢＶ２２０－ＣＮＴＦ／ＤＨ５Ａα生成和表达的影响，并对表达产物进行纯化和生物学活 性检测。结果 应用正交试验确定了培养基成分配比为酵母粉１０ｇ／Ｌ，葡萄糖８ｇ／Ｌ，ＭｇＳＯ４０．５ｇ／Ｌ，磷酸盐０．０５ｍｏｌ／Ｌ， ｐＨ７．４时最有利于工程菌的生长及ＣＮＩＴ的表达。ＣＮＴＴ纯化后纯度达９５％以上，并具有较高的生物学活性。结论 为ＣＮＴＦ的结构和功能的研究及临床应用打下基础。 展开更多
关键词 睫状神经营养因子 工程菌培养 纯化 生物学活性
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重组别藻蓝蛋白(rAPC)的纯化与鉴定
3
作者 唐志红 李富超 +4 位作者 吴少杰 葛保胜 林凡 任育红 秦松 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期56-59,共4页
报道了重组大肠杆菌表达的别藻蓝蛋白的下游生产工艺研究,并对产物进行了分析鉴定。工程菌株P1先在NBSBioFlo3000型5L自动发酵罐进行高密度发酵,融合蛋白获得了高效表达,且主要在细胞内以可溶形式存在。纯化前先将获得的菌体超声破碎,... 报道了重组大肠杆菌表达的别藻蓝蛋白的下游生产工艺研究,并对产物进行了分析鉴定。工程菌株P1先在NBSBioFlo3000型5L自动发酵罐进行高密度发酵,融合蛋白获得了高效表达,且主要在细胞内以可溶形式存在。纯化前先将获得的菌体超声破碎,然后经硫酸铵沉淀、疏水层析和离子交换层析三步纯化,接着对纯化的重组别藻蓝蛋白(rAPC)进行SDS-PAGE、PAGE、Westernblot等电点分析。证明已获得纯度为96.4%的rAPC,其等电点为6.0,并且具有与天然APC相似的抗原性。 展开更多
关键词 工程菌培养 重组别藻蓝蛋白(rAPC) 纯化
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人B7.2(CD86)胞外区原核表达及其工程菌发酵培养的实验研究 被引量：1
4
作者 闫晓彩 来宝长 +4 位作者 郑瑾 马军 韩俊宏 王一理 司履生 《西安医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期4-7,共4页
目的　利用原核系统表达人B7.2 (IgV +C)并对工程菌发酵培养条件进行优化。方法　用聚合酶链反应 (PCR)技术从B7.2cDNA全长中克隆B7.2 (IgV +C) ,将PCR产物克隆入表达载体 pGEX 4T 3从而得到重组体 pGEX 4T 3 /hB7.2 (IgV +C) ,SDS PAGE... 目的　利用原核系统表达人B7.2 (IgV +C)并对工程菌发酵培养条件进行优化。方法　用聚合酶链反应 (PCR)技术从B7.2cDNA全长中克隆B7.2 (IgV +C) ,将PCR产物克隆入表达载体 pGEX 4T 3从而得到重组体 pGEX 4T 3 /hB7.2 (IgV +C) ,SDS PAGE及Westernblot用于检测目的蛋白的表达 ,同时对目的蛋白诱导表达时间及诱导剂浓度进行优化 ,对重组质粒的遗传稳定性进行鉴定。结果　Westernblot结果显示相应分子质量 5 5kD处有hB7.2 (IgV+C)与GST融合蛋白的高效表达 ,表达量占菌体总蛋白的 3 0 %左右。对工程菌进行发酵培养研究的结果表明 ,所构建的重组质粒在工程菌DH5α中传代稳定 ,未见质粒丢失 ,目的蛋白的表达不受影响 ,且在 3 7℃诱导 5h、IPTG终浓度为 4mmol·L- 1 时其表达量最多。结论　证明了利用原核系统表达人B7.2 (IgV +C)的可行性。 展开更多
关键词 B7.2(CD86) 共刺激 融合蛋白 GST 工程菌发酵培养 实验研究 抗原 原核表达
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