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抗冻蛋白对山羊精子冷冻保护效果的分析 被引量:10
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作者 权国波 吴国权 +4 位作者 吕春荣 梁家充 陈必春 邵庆勇 洪琼花 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2017年第3期53-57,共5页
本实验系统评价了抗冻蛋白Ⅲ(AFPⅢ)对山羊精子的冷冻保护效果。采用假阴道法采集6只云南黑山羊精液,离心洗涤去除精浆后和冷冻稀释液(0、0.1、1、10、100μg/m L AFPⅢ)混合,经4℃平衡、液氮气相预冻后直接投入液氮保存。解冻后检测精... 本实验系统评价了抗冻蛋白Ⅲ(AFPⅢ)对山羊精子的冷冻保护效果。采用假阴道法采集6只云南黑山羊精液,离心洗涤去除精浆后和冷冻稀释液(0、0.1、1、10、100μg/m L AFPⅢ)混合,经4℃平衡、液氮气相预冻后直接投入液氮保存。解冻后检测精子活力、顶体、质膜以及早期凋亡等指标。同时采用透射电镜(TEM)观察冷冻对精子超微结构的影响。结果表明:与对照组相比,AFPⅢ并不能显著改善山羊解冻后精子活力、顶体完整性、质膜完整性和低渗耐受性(P>0.05)。此外,AFPⅢ并不能抑制解冻后精子的磷脂酰丝氨酸(PS)外翻。电镜实验结果进一步证实,AFPⅢ并不能有效保护冷冻精子质膜。总之,本实验证实,AFPⅢ并不能降低山羊精子的冷冻损伤,相反其可能加重冷冻对精子质膜的损伤,其损伤机制尚需要进一步研究。 展开更多
关键词 山羊精子 冷冻 抗冻蛋白 质膜
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利用双向电泳技术分析山羊精子冷冻前后蛋白组的差异 被引量:3
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作者 阮崇美 张子军 +4 位作者 任春环 陈龙 张育军 程萧 章孝荣 《中国草食动物》 CAS 2010年第4期17-20,共4页
建立稳定的山羊精子蛋白质双向电泳的技术平台,对精子上样量、蛋白质提取方法、二维电泳程序等相关技术都进行了优化,得到了相对清晰的冻精和鲜精的二维电泳图谱,并运用Image Master TM 2D Platinum软件进行了分析。结果表明:通过改进的... 建立稳定的山羊精子蛋白质双向电泳的技术平台,对精子上样量、蛋白质提取方法、二维电泳程序等相关技术都进行了优化,得到了相对清晰的冻精和鲜精的二维电泳图谱,并运用Image Master TM 2D Platinum软件进行了分析。结果表明:通过改进的热Trizol法提取山羊精子蛋白,当取精子3×107、上样量为150μL时能取得较好的电泳图谱,鲜精的蛋白位点重复性较高的有650个±10个,冻精的蛋白位点重复性较高的有600个±10个。冷冻导致精子蛋白丢失约50个,而且冻精多表现为大分子量蛋白的丢失,大部分分布于60~100kb之间,其中60~80kb之间蛋白丢失约18个,80~100kb之间蛋白丢失近20个,12~60kb之间蛋白丢失近12个。实验初步探明了山羊精子融冻前后精子的蛋白变化规律,为进一步了解精子冷冻损伤的确切机理奠定了基础。 展开更多
关键词 山羊精子 二维电泳 蛋白组学
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不同处理对山羊精子转染外源DNA效率的影响 被引量:2
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作者 范景胜 赵永聚 +2 位作者 徐恢仲 王岭斌 于明举 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期126-130,共5页
将采集的山羊精液去除精清,分为鲜精组、冻精组、反复冻融致死组3组进行处理后,与地高辛标记的线性化PCS2EGFP质粒共育转染,用免疫组化的方法检测精子转染外源DNA的效率.结果显示鲜精、冻精和反复冻融致死3种处理组的阳性转染效率分别为... 将采集的山羊精液去除精清,分为鲜精组、冻精组、反复冻融致死组3组进行处理后,与地高辛标记的线性化PCS2EGFP质粒共育转染,用免疫组化的方法检测精子转染外源DNA的效率.结果显示鲜精、冻精和反复冻融致死3种处理组的阳性转染效率分别为(36.61±7.91)%,(32.68±3.38)%,(69.36±4.79)%.反复冻融致死组转染率极显著高于鲜精组和冻精组(p<0.01),鲜精组和冻精组转染效率差异不显著(p>0.05). 展开更多
关键词 山羊精子 外源DNA 转染
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延迟交配对山羊受精的影响
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作者 谭景和 秦鹏春 +2 位作者 杨增明 孙德军 尹明福 《黑龙江动物繁殖》 1995年第2期16-20,共5页
本实验应用超数排卵,用乙烯雌酚(DES)延长发情期,并于发情后不同时间交配,光镜和电镜等方法研究了拖延交配对黑龙江地方山羊受精的影响。实验结果:(1)于排卵前6小时开始间隔12小时注射3(1+2)mg或5(2+2+1)mgDES可分别使山羊发情持续时间... 本实验应用超数排卵,用乙烯雌酚(DES)延长发情期,并于发情后不同时间交配,光镜和电镜等方法研究了拖延交配对黑龙江地方山羊受精的影响。实验结果:(1)于排卵前6小时开始间隔12小时注射3(1+2)mg或5(2+2+1)mgDES可分别使山羊发情持续时间延长14.4和24.8小时;(2)注射乙烯雌酚对山羊排卵时间、获卵率、卵子形态及受精卵的发育都没有明显影响;(3)发情30和36小时交配山羊的受精率和胚胎的发育进程与发情12小时交配山羊受精率和发育进程没有明显差异;(4)发情42小时交配山羊受精率明显下降,3只山羊中只有1只产出2枚受精卵;发情48小时交配山羊无一产出受精卵;(5)电镜和光镜下检查受精时间后48小时未卵裂卵子未见有受精迹象,也未见有精子附着在透明带上。实验结果(1)和(2)说明:应用DES可达到延长动物发情持续时间的目的;可考虑用DES这种人工合成品取代价格贵的雌二醇—17β来进行动物发悄同步和改善超排效果等方面的研究。实验结果3说明:山羊精子可在交配后6小时左右运行到输卵管受精部位并完成获能;山羊精子和绵羊精子一样也不是在输卵管峡部贮存期间获能的;于发情后期输精的精子无需在输卵管峡部贮存便可上行获能,表明于发情末期对山羊进行配种或输精是可行的,便于人们在某些情况下小范围地调整输精时间。 展开更多
关键词 乙烯雌酚 受精率 绵羊精子 受精卵 输卵管峡部 受精部位 山羊精子 交配后 精子获能 雌二醇
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肌醇类冰晶抑制剂和海藻糖对山羊精子冷冻保存效果的影响 被引量:1
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作者 权国波 吴国权 +2 位作者 吕春荣 梁家充 洪琼花 《家畜生态学报》 北大核心 2017年第5期43-48,共6页
为进一步降低冷冻解冻过程对山羊精子的理化损伤,本试验系统检验了肌醇类冰晶抑制剂(SIB)和海藻糖对山羊精子的冷冻保护效果。采用假阴道法采集6只云南黑山羊精液,离心洗涤去除精浆后和冷冻稀释液混合,经4℃平衡、液氮气相预冻后直接投... 为进一步降低冷冻解冻过程对山羊精子的理化损伤,本试验系统检验了肌醇类冰晶抑制剂(SIB)和海藻糖对山羊精子的冷冻保护效果。采用假阴道法采集6只云南黑山羊精液,离心洗涤去除精浆后和冷冻稀释液混合,经4℃平衡、液氮气相预冻后直接投入液氮保存。解冻后检测精子活力、顶体、质膜以及低渗耐受性。同时采用透射电镜(TEM)观察冷冻对精子超微结构的影响。结果表明:1,4-环己二醇(1,4-CHD)和海藻糖处理组精子活力(41.35%±8.14%和43.59%±6.23%)、顶体完整性(62.73%±7.62%和64.29%±7.81%)和低渗耐受性(40.29%±7.41%和39.79%±6.58%)均显著高于对照组(35.97%±6.21%、55.46%±8.91%和34.17%±5.68%,P<0.05),且海藻糖可以有效抑制冷冻解冻过程导致的精子凋亡。流式分析结果表明,1,4-CHD不能降低冷冻对山羊精子质膜完整性和磷脂酰丝氨酸(PS)分布的损伤,但是海藻糖可以显著降低冷冻解冻过程中对山羊精子质膜的损伤。电镜结果表明,冷冻对精子质膜和顶体等结构损伤严重,解冻后部分精子质膜发生肿胀、脱落或断裂等现象。而且,顶体外膜存在脱落现象,顶体内容物发生部分甚至完全泄漏。电镜结果进一步证实海藻糖对冷冻精子质膜的保护效果要优于1,4-环己二醇。总之,肌醇类SIB和海藻糖可以降低山羊精子的冷冻损伤,但相对于海藻糖而言,肌醇类SIB并不能降低冷冻对山羊精子质膜的损伤。 展开更多
关键词 山羊精子 冷冻保存 冰晶抑制剂 海藻糖 冷冻效果
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山羊精子形态异常的几种检测方法 被引量:1
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作者 林尔喜 许鹏 +2 位作者 覃孝杰 邓祝新 彭燕 《中国畜禽种业》 2021年第1期119-120,共2页
山羊种业是羊业发展的核心,提高母羊繁殖率对羊产业持续发展和促进农民增收具有重要意义。只有优秀种公羊的精子形态正常,精液品质优良,才能有效推进山羊的品种改良,提高良种化水平,增加农民养羊经济效益。
关键词 山羊精子 形态 异常 检测方法
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