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小鼠腺病毒荧光定量PCR方法的建立及初步应用 被引量：3
1
作者 杜江涛 宋晓明 +5 位作者 周莎桑 吕宇 萨晓婴 褚晓峰 应华忠 戴方伟 《实验动物科学》 2017年第3期49-54,65,共7页
目的基于TaqMan建立小鼠腺病毒(MAdV)特异的荧光定量PCR检测方法,用于调查长爪沙鼠和小鼠等实验动物中MAdV感染情况。方法从NCBI下载小鼠腺病毒(MAdV-A和MAdV-3)基因组序列,比对分析后选择保守性较好的基因设计引物和探针。筛选最佳引... 目的基于TaqMan建立小鼠腺病毒(MAdV)特异的荧光定量PCR检测方法,用于调查长爪沙鼠和小鼠等实验动物中MAdV感染情况。方法从NCBI下载小鼠腺病毒(MAdV-A和MAdV-3)基因组序列,比对分析后选择保守性较好的基因设计引物和探针。筛选最佳引物对和探针,对其特异性、敏感性、重复性和稳定性进行验证,运用所建立的方法对长爪沙鼠和野鼠的共41份样本进行检测。结果经特异性和灵敏度鉴定,在设计的3对引物探针中确定一对最佳引物探针MAD-3,可区分小鼠腺病毒与猴腺病毒、禽腺病毒和树鼩腺病毒等24种病原,MAdV质粒DNA最低检测限为4.5 copies/reaction;MAdV纯病毒液和病毒/组织模拟样本的最低检测限均为440 copies/reaction。结论建立的Taq Man荧光定量PCR检测方法特异、灵敏和稳定,可用于大鼠、小鼠、长爪沙鼠等实验动物及鼠源性生物制品MAdV的检测。 展开更多
关键词 小鼠腺病毒 荧光定量PCR
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小鼠腺病毒PCR检测方法的建立及初步应用 被引量：1
2
作者 王吉 付瑞 +6 位作者 卫礼 李晓波 冯育芳 王淑菁 巩薇 岳秉飞 贺争鸣 《实验动物与比较医学》 CAS 2014年第1期35-41,共7页
目的 建立小鼠腺病毒（MAdV） PCR检测方法,应用于长爪沙鼠、小鼠等实验动物MAdV的检测.方法 根据已发表的小鼠腺病毒（MAdV） E1B基因序列,设计合成引物.建立RT-PCR方法,并对方法的特异性、敏感性、稳定性等进行验证.用建立的方法对65... 目的 建立小鼠腺病毒（MAdV） PCR检测方法,应用于长爪沙鼠、小鼠等实验动物MAdV的检测.方法 根据已发表的小鼠腺病毒（MAdV） E1B基因序列,设计合成引物.建立RT-PCR方法,并对方法的特异性、敏感性、稳定性等进行验证.用建立的方法对65只长爪沙鼠、12只小鼠进行检测.结果 建立的MAdV PCR检测方法与小鼠微小病毒、多瘤病毒无交叉反应;以MAdVDNA为模板,所能检测DNA最小模板浓度为1.67 pg/μl,可检测病毒最小滴度为10-7/ml; MAdVDNA在-30℃冰箱放置12个月,仍能扩增出大小约606 bp的可见目条带.经PCR检测,65只沙鼠和12只小鼠均为阴性.结论 建立的小鼠腺病毒（MAdV） PCR检测方法特异、敏感、稳定,可用于小鼠、长爪沙鼠等实验动物MAdV的检测. 展开更多
关键词 小鼠腺病毒 聚合酶链式反应 长爪沙鼠 小鼠
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广东小鼠腺病毒血清学调查及病毒和抗体在人工感染小鼠体内消长规律研究 被引量：1
3
作者 罗银珠 张钰 +7 位作者 潘金春 王静 袁文 何丽芳 吴瑞可 黄碧洪 郭鹏举 黄韧 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第1期43-48,共6页
目的了解我省小鼠腺病毒(Mad)自然感染情况及探究人工感染Mad小鼠体内各脏器组织中病毒分布规律及血清抗体变化。方法采用ELISA方法对2007年和2015年饲养于普通环境小鼠血清及2013年~2015年广东省12家监督单位和32家委托单位SPF级小鼠... 目的了解我省小鼠腺病毒(Mad)自然感染情况及探究人工感染Mad小鼠体内各脏器组织中病毒分布规律及血清抗体变化。方法采用ELISA方法对2007年和2015年饲养于普通环境小鼠血清及2013年~2015年广东省12家监督单位和32家委托单位SPF级小鼠血清进行病毒抗体检测。利用腹腔注射方法感染36只3周龄BALB/c小鼠,0.2 m L/只,浓度为4.5×106copies/μL,每天观察动物临床表现,并于攻毒前第0天和攻毒后第3、7、10、15、18、21、30、37、44、51、60天剖检小鼠(各3只),取组织标本(心、肝、脾、肺、肾、脑、胃、盲肠内容物)及血清,应用实时荧光定量PCR(QPCR)方法检测组织病毒核酸,ELISA方法检测血清抗体水平。结果普通饲养小鼠抗体阳性率为24.44%~84.15%,其中以Mad-2型K87株血清型为主。SPF级小鼠Mad血清抗体阳性率均为0%。所有攻毒小鼠均呈隐性感染,无临床表现。攻毒后第3天及7天小鼠各组织病毒核酸检测阳性率均为100%(3/3),其中以脾脏100%阳性率维持时间最长(60 d)。除肝脏外,小鼠各组织病毒含量均在攻毒后7 d达到高峰,其中以脾脏病毒含量最高(5.5×105copies/μL),其次是心脏(3.4×105copies/μL)、盲肠内容物(2.6×105copies/μL)和胃(2.6×105copies/μL),脑为0.8×105copies/μL。攻毒后15 d可测出血清抗体,在37 d达到峰值,此后至60 d一直维持高水平。结论 SPF级小鼠Mad感染率低,普通环境饲养小鼠Mad感染率高。人工感染小鼠脾脏病毒含量最高,阳性率维持时间最长,说明病毒可以在脾脏内长期复制,感染后第7天为组织病毒核酸最佳检测时间点。血清抗体在感染后15~60 d内均可以作为监测指标。 展开更多
关键词 小鼠腺病毒 血清学 调查 人工感染 体内分布
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实验小鼠腺病毒检验方法
4
作者 徐庆 顾国平 张立红 《中国卫生产业》 2011年第09Z期10-11,共2页
目的通过ELISA、EIA和IFA3种小鼠腺病毒检测方法观察实验小鼠在敏感性和特异性方面的比较。方法通过观察实验小鼠分别在ELISA、EIA和IFA3种检测方法后的血清抗体程度来检验其敏感度和特异性。结果感染1周后ELISA阳性率最高,为8/10,EIA为... 目的通过ELISA、EIA和IFA3种小鼠腺病毒检测方法观察实验小鼠在敏感性和特异性方面的比较。方法通过观察实验小鼠分别在ELISA、EIA和IFA3种检测方法后的血清抗体程度来检验其敏感度和特异性。结果感染1周后ELISA阳性率最高,为8/10,EIA为7/10,IFA为6/10,三者差异无统计学意义,P>0.05;2周后3种方法阳性率均为100%;3周以后,ELISA的抗体增长的幅度和抗体平均滴度最高。结论 3种检测病毒方法比较,ELISA敏感性最好,特异性强。 展开更多
关键词 小鼠腺病毒 ELISA EIA IFA病毒检验
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小鼠腺病毒检验方法例析
5
作者 廖冬梅 颜敏 《中国中医药咨讯》 2011年第6期266-267,共2页
目的用IFA、ELISA及EIA三种小鼠的腺病毒检测方式进行实验研究，观察其各自的特异性与敏感性。方法进行IFA、ELISA及EIA三种小鼠腺病毒检测方法，完成检测的操作及抗原的制备，并比较各自的实验数据等。结果在感染一周之后，IFA达到7／1... 目的用IFA、ELISA及EIA三种小鼠的腺病毒检测方式进行实验研究，观察其各自的特异性与敏感性。方法进行IFA、ELISA及EIA三种小鼠腺病毒检测方法，完成检测的操作及抗原的制备，并比较各自的实验数据等。结果在感染一周之后，IFA达到7／10，ELISA的阳性率为三者之最达到8／10，EIA为6／10，三种实验结果的比对没有统计学的意义，其中P〉0．05。结论对于小鼠腺病毒的检测比较，ELISA由于其高敏感性、强特异性及很好的重复性，最适宜实验进行。 展开更多
关键词 IFA ELISA EIA 小鼠腺病毒 病毒检测
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实验小鼠腺病毒检验方法
6
作者 王华洪 陈俊芝 《中国中医药咨讯》 2009年第2期237-237,共1页
目的对ELISA、EIA和IFA三种小鼠腺病毒检测方法敏感性和特异性进行比较观察。方法：分别以ELISA、EIA和IFA三种方法，进行抗原制备和检测操作，比较检测结果。结果：感染1周后ELISA阳性率最高（8／10。），EIA为7／10，IFA为6／10，3者... 目的对ELISA、EIA和IFA三种小鼠腺病毒检测方法敏感性和特异性进行比较观察。方法：分别以ELISA、EIA和IFA三种方法，进行抗原制备和检测操作，比较检测结果。结果：感染1周后ELISA阳性率最高（8／10。），EIA为7／10，IFA为6／10，3者差异无统计学意义，P〉0．05。2周后3种方法均阳性率均为100％，3周以后，抗体增长的幅度和抗体平均滴度ELISA最高。结论：3种检测MAdV方法比较，ELISA敏感性最好，且检查感染晚期抗体滴度较高，特异性强，重复性好。 展开更多
关键词 小鼠腺病毒 ELISA EIA IFA 病毒检验
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