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不同浓度胺碘酮对肺成纤维细胞增殖及表面活性蛋白D表达的影响 被引量：5
1
作者 王瑶函 吴蕊 《毒理学杂志》 CAS CSCD 2018年第1期71-74,75,共5页
目的观察不同浓度胺碘酮对小鼠肺成纤维细胞增殖及表面活性蛋白D(SP-D)表达的影响。方法取生长状态良好的3~5代小鼠肺成纤维细胞,用10%小牛血清培养制成细胞悬液加入96孔板中培养。分别给予不同浓度(0.5、1.0、2.0和4.0μmol/L)胺碘酮处... 目的观察不同浓度胺碘酮对小鼠肺成纤维细胞增殖及表面活性蛋白D(SP-D)表达的影响。方法取生长状态良好的3~5代小鼠肺成纤维细胞,用10%小牛血清培养制成细胞悬液加入96孔板中培养。分别给予不同浓度(0.5、1.0、2.0和4.0μmol/L)胺碘酮处理,于给药12、24和48 h后采用MTT法检测细胞增殖;蛋白免疫印迹法检测SP-D蛋白的表达。结果 0.5~4.0μmol/L胺碘酮作用于肺成纤维细胞12、24和48 h后对细胞增殖有明显促进作用,且增殖率与浓度和时间成正相关(r=0.834,r=0.881,P<0.05)。与对照组相比,胺碘酮能明显增加细胞SP-D蛋白的表达(P<0.05)。胺碘酮A^D组细胞SP-D、a-SMA、I和III型胶原蛋白表达高于对照组细胞(P<0.05),胺碘酮A^D组细胞SP-D、a-SMA、I和III型胶原蛋白表达水平随胺碘酮浓度增加升高(F=10.215,P<0.01),细胞SP-D、a-SMA、I和III型胶原蛋白表达量与胺碘酮的浓度呈正相关(r=0.786,P<0.01)。结论胺碘酮可刺激小鼠肺成纤维细胞增殖,并且增加肺成纤维细胞SP-D蛋白的表达。 展开更多
关键词 胺碘酮 小鼠肺成纤维细胞 细胞增殖 SP-D蛋白
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竹虫蛋白肽的制备及其活性研究
2
作者 朱静静 王艳萍 +1 位作者 唐川惠 早春娟 《食品工业》 CAS 2023年第7期97-102,共6页
以竹虫为研究对象、肽得率为指标,研究碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶4种不同的酶对竹虫蛋白肽得率的影响,并确定胰蛋白酶为最佳提取酶;利用单因素试验和响应面优化工艺,最终得出竹虫蛋白肽的最佳制备工艺:加酶量80 mg/g... 以竹虫为研究对象、肽得率为指标,研究碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶4种不同的酶对竹虫蛋白肽得率的影响,并确定胰蛋白酶为最佳提取酶;利用单因素试验和响应面优化工艺,最终得出竹虫蛋白肽的最佳制备工艺:加酶量80 mg/g、温度45℃、时间120 min、pH 10.0。在此优化试验条件下,竹虫蛋白多肽得率的预测值为326.277 mg/g,实际值则为320.215 mg/g,与模型预测值吻合。根据竹虫蛋白肽的抗氧化活性研究发现,不同分子量段的竹虫多肽都具有抗氧化活性,其中MW<5 kDa的竹虫蛋白肽的抗氧化活性最强,并且竹虫蛋白肽能促进小鼠肺成纤维细胞的增殖。因此,此工艺不仅可推广应用于竹虫蛋白肽产业化生产的备选工艺,也能提高竹虫的利用价值。 展开更多
关键词 竹虫蛋白肽 工艺 抗氧化 小鼠肺成纤维细胞 增殖
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MTT法检测博莱霉素对小鼠肺成纤维细胞增殖的影响 被引量：3
3
作者 孙婧 汉建忠 +5 位作者 刘伟 曹生田 陈玉 汪沛 李湘 罗自强 《长治医学院学报》 2011年第2期91-93,共3页
目的：观察不同浓度和时间的博莱霉素对小鼠肺成纤维细胞（NIH3T3细胞）增殖的影响。方法：取对数生长期的NIH3T3细胞,用10%胎牛血清培养制成的细胞悬液加入96孔培养板中培养。以NIH3T3细胞为观察对象,分别给予不同浓度（0.1~10 000 mU... 目的：观察不同浓度和时间的博莱霉素对小鼠肺成纤维细胞（NIH3T3细胞）增殖的影响。方法：取对数生长期的NIH3T3细胞,用10%胎牛血清培养制成的细胞悬液加入96孔培养板中培养。以NIH3T3细胞为观察对象,分别给予不同浓度（0.1~10 000 mU/mL）博莱霉素处理,于给药后12 h、36 h、48 h后采用4-甲偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖。结果：与空白对照组比较,1~10 mU/mL浓度的博莱霉素,可促进NIH3T3细胞增殖（P〈0.05）。其余浓度博莱霉素对细胞增殖无影响。结论：1~10mU/mL浓度的博莱霉素能够促进NIH3T3细胞的增殖。 展开更多
关键词 博莱霉素 MTT法 小鼠肺成纤维细胞
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口腔临床常用烤瓷合金对小鼠肺成纤维细胞体外毒性研究 被引量：2
4
作者 江磊 林泓磊 +3 位作者 张长源 郑明 林东红 程辉 《中国实用口腔科杂志》 CAS 2012年第10期600-603,共4页
目的比较镍铬、钴铬、纯钛、钯基、金铂等5种常用烤瓷合金的细胞毒性。方法本研究于2011年7—10月在福建医科大学附属口腔医院中心实验室进行。按照ISO10993标准,采用CCK-8法测定第1、3、5、7天时烤瓷合金浸提液培养的小鼠肺成纤维细胞(... 目的比较镍铬、钴铬、纯钛、钯基、金铂等5种常用烤瓷合金的细胞毒性。方法本研究于2011年7—10月在福建医科大学附属口腔医院中心实验室进行。按照ISO10993标准,采用CCK-8法测定第1、3、5、7天时烤瓷合金浸提液培养的小鼠肺成纤维细胞(L929细胞)的OD值,同时观察L929细胞形态,并且计算细胞相对增殖率(RGR),评价5种烤瓷合金对L929的细胞毒性。结果第7天时,除金铂合金外,其他4组烤瓷合金的OD值与阴性对照组的差别均有统计学意义(P<0.05);L929细胞的RGR由高到低分别为金铂合金(98.4%)、钯基合金(95.2%)、纯钛合金(83.0%)、镍铬合金(74.0%)、钴铬合金(72.6%)。细胞形态学观察发现:金铂合金组、钯基合金组以及纯钛合金组的细胞形态与阴性对照组相比无明显差别;而钴铬合金组和镍铬合金组的细胞排列稀疏,少量细胞皱缩变圆。结论金铂合金、钯基合金以及纯钛合金的细胞毒性为1级,具有较好的生物相容性;钴铬合金、镍铬合金的细胞毒性为2级,结合细胞形态观察认为生物相容性仍然合格。 展开更多
关键词 烤瓷合金 体外细胞毒性实验 小鼠肺成纤维细胞
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ADAMTS-1对小鼠成纤维细胞转化生长因子及其下游信号通路PI3K/AKT的影响 被引量：2
5
作者 董素素 张平 +2 位作者 肖华 阳洁 邓湘 《临床肺科杂志》 2014年第2期202-205,共4页
目的探索含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)对体外小鼠成纤维细胞(NIH3T3)转化生子因子(TGF-β1)及其下游信号通路磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)的影响。方法体外培养小鼠成纤维细胞,以ADAMTS-1为处理... 目的探索含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)对体外小鼠成纤维细胞(NIH3T3)转化生子因子(TGF-β1)及其下游信号通路磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)的影响。方法体外培养小鼠成纤维细胞,以ADAMTS-1为处理因素,按照不同浓度,将NIH3T3分为空白组、低浓度组(1 nM)、中浓度组(10 nM)、高浓度组(20 nM),通过RT-PCR检测细胞TGF-β1mRNA的表达情况,利用Western-blot观察细胞TGF-β1及磷酸化蛋白激酶B(pAKT)的蛋白表达情况。结果根据RTPCR图像显示,与空白组相比,其他各组TGF-β1mRNA的表达均下降,且随着浓度的增高,呈逐渐降低趋势(P<0.05)。根据Western-blot图像显示,与对照组相比,其他各组TGF-β1、pAKT的蛋白表达均下降,且随着浓度的增高,呈逐渐降低趋势(P<0.05)。结论 ADAMTS-1可能下调TGF-β1及其下游PI3K/AKT信号通路。 展开更多
关键词 含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶 转化生子因子 磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白激酶B 小鼠肺成纤维细胞
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二氧化硅刺激小鼠肺成纤维细胞对Toll样受体2表达的影响 被引量：2
6
作者 万文娟 张建斌 +1 位作者 王晓云 吕俊桥 《长治医学院学报》 2019年第2期85-88,共4页
目的:探讨二氧化硅(SiO2)刺激培养小鼠肺成纤维细胞对Toll样受体2(TLR2)表达的影响。方法:组织块法培养原代小鼠肺成纤维细胞,传至3~4代细胞系稳定后用100μg/mLSiO2刺激培养,分别观察4h、12h、24h、48h,同时设空白对照组;荧光免疫细胞... 目的:探讨二氧化硅(SiO2)刺激培养小鼠肺成纤维细胞对Toll样受体2(TLR2)表达的影响。方法:组织块法培养原代小鼠肺成纤维细胞,传至3~4代细胞系稳定后用100μg/mLSiO2刺激培养,分别观察4h、12h、24h、48h,同时设空白对照组;荧光免疫细胞化学法和Westernblot法检测TLR2蛋白的表达。结果:(1)荧光免疫细胞化学结果显示,TLR2在空白对照组、4h组、12h组、24h组、48h组的平均光密度值分别为(0.121±0.005)、(0.125±0.004)、(0.136±0.002)、(0.153±0.004)、(0.168±0.006)。其中,空白对照组和4h组差别无统计学意义(P>0.05),12h组、24h组、48h组平均光密度值逐渐增加且差别有统计学意义(P<0.05)。(2)Westernblot结果显示,TLR2蛋白在空白对照组、4h组、12h组、24h组、48h组的表达量分别为(0.111±0.030)、(0.171±0.038)、(0.175±0.049)、(0.544±0.058)、(0.657±0.055)。其中,4h组明显高于空白对照组(P<0.05);4h和12h组表达量差异无统计学意义(P>0.05),24h组、48h组表达量升高(P<0.05)。结论:TLR2可能参与SiO2引起的肺纤维化的发生发展。 展开更多
关键词 二氧化硅 小鼠肺成纤维细胞 TOLL样受体2
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小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞类器官三维培养体系的建立 被引量：1
7
作者 韦娟 徐楚帆 +1 位作者 朱晓燕 刘宇健 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期585-595,共11页
本研究旨在建立小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(type 2 alveolar epithelial cells,AT2)类器官三维(three-dimensional,3D)培养体系的方法。采用酶消化与磁珠分选分离和纯化ICR小鼠肺AT2细胞,proSPC免疫荧光染色鉴定AT2细胞纯度;2维(two-dimensio... 本研究旨在建立小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(type 2 alveolar epithelial cells,AT2)类器官三维(three-dimensional,3D)培养体系的方法。采用酶消化与磁珠分选分离和纯化ICR小鼠肺AT2细胞,proSPC免疫荧光染色鉴定AT2细胞纯度;2维(two-dimensional,2D)培养8 d,5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,EdU)掺入和荧光染色法观察AT2细胞的增殖与分化;将AT2细胞与小鼠肺成纤维细胞(mouse lung fibroblasts,Mlg)3D共培养,光学显微镜下观察类器官生长情况,收集生长13d的类器官,2%多聚甲醛固定后行HE染色,荧光染色观察类器官内部形态结构。结果显示,提取AT2细胞纯度超过95%;在体外培养1~8 d期间,AT2细胞EdU荧光染色阴性,未见增殖;AT2细胞形状逐渐趋向扁平鳞状、细胞表面积显著增大;在体外培养3 d后,有部分AT2细胞特异性标志物proSPC阳性细胞开始出现I型肺泡上皮细胞(type 1 alveolar epithelial cells,AT1)标志物T1α和HopX表达,培养5 d和8 d后T1α和HopX表达量进一步增加,proSPC的表达量和proSPC阳性细胞比例逐渐减小。AT2细胞与Mlg 3D共培养4 d时形成圆球样细胞团块,生长至13 d时形成肺泡类器官。组织学分析显示:肺泡类器官呈一空心小体;表达proSPC的AT2细胞主要分布于类器官的外侧;表达HopX、由AT2细胞转分化形成的AT1细胞则主要位于类器官小体的内部。proSPC/EdU双荧光染色显示:位于肺泡类器官外侧圈层的proSPC阳性AT2细胞中,有部分细胞表现为proSPC/EdU双阳性,表明类器官内的AT2细胞是具有增殖能力的细胞。以上结果显示,本研究成功建立了小鼠AT2类器官3D培养体系。 展开更多
关键词 Ⅱ型肺泡上皮细胞 Ⅰ型肺泡上皮细胞 小鼠肺成纤维细胞 分化 增殖 类器官
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改良组织法高效分离纯化成年小鼠肺成纤维细胞 被引量：2
8
作者 王志超 武琦 +2 位作者 冯凡超 金译涵 周贤梅 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2018年第12期2842-2844,3090,3091,共5页
目的:从C57BL/6成年雄性小鼠肺组织中高效分离、纯化肺成纤维细胞。方法:用改良的组织法分离小鼠肺成纤维细胞,并用差时贴壁法进行纯化。结果:改良的组织法可以在第8天获得原代小鼠肺成纤维细胞,差时贴壁法纯化后获得的第一代小鼠肺成... 目的:从C57BL/6成年雄性小鼠肺组织中高效分离、纯化肺成纤维细胞。方法:用改良的组织法分离小鼠肺成纤维细胞,并用差时贴壁法进行纯化。结果:改良的组织法可以在第8天获得原代小鼠肺成纤维细胞,差时贴壁法纯化后获得的第一代小鼠肺成纤维细胞3d可长满单层,继续传代后2d可长满单层,培养5~7代后成纤维细胞保持较好的细胞活性。结论:改良的组织法能够高效获得数量可观、活性较好的小鼠肺成纤维细胞。 展开更多
关键词 小鼠肺成纤维细胞 改良组织法 原代培养
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