期刊文献+
共找到6篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
无血清培养上调N2a细胞钙反应性反式激活因子的表达 被引量:2
1
作者 王巧真 金真真 +2 位作者 彭挺 管英俊 李和 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2012年第5期447-452,共6页
目的探讨钙反应性反式激活因子(calcium-responsive transactivator,CREST)是否与神经细胞的分化有关。方法选用在促分化因素作用下具有分化为神经元能力的小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞,用无血清培养(血清撤除)诱导N2a细胞分化。接种和培... 目的探讨钙反应性反式激活因子(calcium-responsive transactivator,CREST)是否与神经细胞的分化有关。方法选用在促分化因素作用下具有分化为神经元能力的小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞,用无血清培养(血清撤除)诱导N2a细胞分化。接种和培养N2a细胞12~24h后,将其分为对照组和无血清诱导组,对照组继续在含5%胎牛血清(FBS)的培养基中培养,无血清诱导组在不含FBS的培养基中培养。采用免疫印迹技术、免疫荧光技术和RT-PCR检测无血清诱导分化对N2a细胞CREST蛋白和mRNA表达的影响。结果在含5%胎牛血清(FBS)培养基培养的对照N2a细胞中,CREST蛋白水平在各时间点均无明显变化,CREST mRNA水平仅在培养48h后略有升高。而在无血清诱导分化的N2a细胞中,CREST蛋白表达水平在无血清诱导12h时无明显变化,但在诱导24h后明显升高,诱导48h后进一步升高;RT-PCR检测显示,CREST mRNA在无血清诱导12h后即开始升高,诱导24h和48h则升高更为明显。结论无血清诱导分化的N2a细胞中CREST的表达上调,提示CREST可能参与神经细胞的分化。 展开更多
关键词 钙反应性反式激活因子 小鼠神经母细胞细胞 神经元分化
下载PDF
长链非编码RNA母系印迹基因3(MEG3)通过p53促进缺血缺氧神经细胞损伤 被引量:2
2
作者 阎红琳 饶洁 +1 位作者 胡继昌 袁静萍 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2016年第4期309-314,共6页
目的通过小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a细胞)氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)研究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)母系印记基因3(maternally imprinted genes 3,MEG3)在神经细胞缺氧缺血损伤中的作用,并初步探讨其机... 目的通过小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a细胞)氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)研究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)母系印记基因3(maternally imprinted genes 3,MEG3)在神经细胞缺氧缺血损伤中的作用,并初步探讨其机制。方法采用OGD模型诱导N2a细胞凋亡模拟神经细胞缺血缺氧损伤过程,实时荧光定量PCR检测MEG3的水平;在N2a细胞中过表达MEG3,采用PI染色检测细胞凋亡,Western blot和荧光素酶报告基因检测N2a细胞中过表达MEG3后对p53蛋白表达及转录活性的影响。结果经OGD处理后,N2a细胞MEG3水平较对照组(常氧组)明显增强;在N2a细胞中过表达MEG3能够激活p53转录活性,增强p53蛋白表达,促进细胞凋亡。结论 lncRNA MEG3可能通过p53促进凋亡,加重缺血缺氧造成的神经损伤。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 系印记基因3 氧糖剥夺 凋亡 小鼠神经母细胞细胞
下载PDF
小鼠神经母细胞瘤细胞中神经型钙黏蛋白超表达对突起形成及连环蛋白表达的影响
3
作者 朱少义 管丽红 +3 位作者 杨慈清 张必超 李秋玲 林俊堂 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期598-604,共7页
目的探讨神经型钙黏蛋白(N-cadherin)调控连环蛋白(catenin)对小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a)形态的影响。方法构建鼠源的N-cadherin融合蛋白超表达载体,利用脂质体转染的方法将空载体pCAG-MCS-EGFP和超表达载体pCAG-N-Cad-EGFP分别转染至N2... 目的探讨神经型钙黏蛋白(N-cadherin)调控连环蛋白(catenin)对小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a)形态的影响。方法构建鼠源的N-cadherin融合蛋白超表达载体,利用脂质体转染的方法将空载体pCAG-MCS-EGFP和超表达载体pCAG-N-Cad-EGFP分别转染至N2a细胞,作为对照组和实验组;细胞划痕和黏附实验检测Ncadherin超表达对N2a细胞迁移和黏附的影响,免疫荧光检测N-cadherin超表达对N2a细胞形态的影响,并结合Western blotting检测连环蛋白家族的表达情况。结果与对照组相比,N-cadherin超表达促进细胞突起的形成,使得N2a细胞突起增多和伸长; N-cadherin超表达增强了黏附性而抑制了细胞的迁移能力; N-cadherin超表达使得细胞内连环蛋白家族中α-catenin、β-catenin和p120蛋白表达均显著上升(P <0. 05),而γ-catenin表达下降但差异不显著(P> 0. 05);另外,N-cadherin超表达的细胞有明显的聚集现象。结论 N-cadherin超表达促进N2a细胞突起形成,增强细胞的黏附性从而抑制细胞的迁移能力,调控连环蛋白家族成员的表达并促使细胞聚集。 展开更多
关键词 神经型钙黏蛋白 小鼠神经母细胞细胞 细胞突起 连环蛋白 细胞黏附 免疫荧光 小鼠
下载PDF
亚低温对神经母细胞瘤细胞氧糖剥夺/复氧时小泛素类修饰蛋白特异性蛋白酶3表达的影响 被引量:1
4
作者 孙贵亮 徐玉云 +2 位作者 王培 张高峰 王明山 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2021年第3期244-247,共4页
目的研究亚低温对小鼠神经母细胞瘤(mouse neuro-blastoma N2a,N2a)细胞氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤时小泛素类修饰蛋白特异性蛋白酶3(small ubiquitin-like modifier proteins specific protea... 目的研究亚低温对小鼠神经母细胞瘤(mouse neuro-blastoma N2a,N2a)细胞氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤时小泛素类修饰蛋白特异性蛋白酶3(small ubiquitin-like modifier proteins specific protease 3,SENP3)表达的影响。方法体外培养小鼠N2a细胞并予以OGD/R处理,建立模拟大脑缺血/再灌注的OGD/R模型以及亚低温模型;将N2a细胞按照随机数字表法分为3组(每组5孔):假手术组(S组)、OGD/R组和氧糖剥夺/复氧+亚低温组(OGD/R+HT组)。细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测OGD/R后N2a细胞活性,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放率检测OGD/R后N2a细胞毒性,Hoechst33258染色观察N2a细胞凋亡,实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)分析SENP3 mRNA的相对表达量,Western blot法测定SENP3的蛋白水平。结果与S组比较,OGD/R组和OGD/R+HT组细胞存活率下降、LDH释放率升高、凋亡细胞数量增多、SENP3 mRNA的相对表达量和蛋白水平升高(P<0.05);与ODG/R组比较,OGD/R+HT组细胞存活率升高、LDH释放率降低、凋亡细胞数量减少、SENP3 mRNA的相对表达量和蛋白水平降低(P<0.05)。结论亚低温减轻N2a细胞OGD/R损伤机制与抑制SENP3的表达有关。 展开更多
关键词 亚低温 小鼠神经母细胞细胞 氧糖剥夺/复氧 小泛素类修饰蛋白特异性蛋白酶3
原文传递
小鼠神经母细胞瘤N2a细胞脑啡肽酶基因的表达与启动子区甲基化和组蛋白修饰相关 被引量:1
5
作者 邓钰双 卢茜 +4 位作者 刘莉 李涛 张玉平 郭秀明 余刚 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期810-813,共4页
目的研究小鼠神经母细胞瘤Neuro-2a(N2a)细胞中脑啡肽酶(NEP)基因表达的表观调控机制,探讨DNA甲基化与组蛋白乙酰化之间的相互作用。方法体外培养N2a细胞,以3μmol/L、5μmol/L DNA甲基化酶抑制5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-dc)及(300、500、70... 目的研究小鼠神经母细胞瘤Neuro-2a(N2a)细胞中脑啡肽酶(NEP)基因表达的表观调控机制,探讨DNA甲基化与组蛋白乙酰化之间的相互作用。方法体外培养N2a细胞,以3μmol/L、5μmol/L DNA甲基化酶抑制5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-dc)及(300、500、700)nmol/L组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)分别处理N2a细胞48 h和24 h。采用逆转录PCR(RT-PCR)、Western blot法分别检测NEP的mRNA、蛋白表达;亚硫酸氢盐测序聚合酶链反应(BSP)法检测NEP基因启动子区DNA的甲基化水平;染色质免疫共沉淀(ChIP)法检测NEP基因启动子区组蛋白H3的乙酰化水平。结果 5-Aza-dc和TSA均能剂量依赖地提高NEP基因的表达(P<0.01);5-Aza-dc可诱导NEP基因去甲基化(P<0.01);TSA可增高NEP组蛋白H3乙酰化水平(P<0.05),但不能明显改变NEP基因DNA的甲基化水平(P>0.05)。结论在小鼠神经母细胞瘤N2a细胞中NEP基因的表达受DNA甲基化及组蛋白乙酰化的调控,组蛋白乙酰化水平并不影响DNA甲基化状态。 展开更多
关键词 小鼠神经母细胞细胞 脑啡肽酶 DNA甲基化 组蛋白乙酰化
下载PDF
CREST对N2a细胞突起生长的影响
6
作者 王巧真 李和 +1 位作者 金真真 彭挺 《潍坊医学院学报》 2014年第5期321-323,351,共4页
目的观察钙反应性反式激活因子(CREST)过表达对小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞突起生长的影响。方法实验分为3组,实验组用pCMV-HA-CREST转染的N2a细胞,空载体对照组用pCMV-HA转染的N2a细胞,空白对照组用未转染任何试剂的N2a细胞,分别加入70m... 目的观察钙反应性反式激活因子(CREST)过表达对小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞突起生长的影响。方法实验分为3组,实验组用pCMV-HA-CREST转染的N2a细胞,空载体对照组用pCMV-HA转染的N2a细胞,空白对照组用未转染任何试剂的N2a细胞,分别加入70mmol/L KCl孵育过夜。在转染后24h,48h采用考马斯亮蓝染色法检测N2a细胞突起生长状态。结果在转染后24h,CREST基因过表达的细胞与两对照组细胞相比较,细胞突起生长差异无显著性。在转染后48h,CREST基因过表达的细胞与两对照组细胞相比较,突起生长明显,部分突起交织成网络。两对照组间在细胞转染后各时间点突起生长状态差异无显著性(P<0.05)。结论过表达CREST可促进N2a细胞突起的生长。 展开更多
关键词 钙反应性反式激活因子 小鼠神经母细胞细胞 突起生长
下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部