小剂量X射线致小鼠海马组织细胞损伤及ATM表达改变 被引量：3

1

作者 姜声扬 徐华 +4 位作者 季斌 汤乐民 陈玉均 韩毓 顾晓松 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期369-372,共4页

目的研究小剂量电离辐射对小鼠海马组织细胞超微结构损伤、DNA损伤及毛细血管扩张性共济失调症突变基因(ataxia telangietisa mutant,ATM)蛋白表达变化。方法 32只ICR小鼠随机分为实验组和对照组,分别行X射线照射(0.4 Gy)和假照射(0 Gy... 目的研究小剂量电离辐射对小鼠海马组织细胞超微结构损伤、DNA损伤及毛细血管扩张性共济失调症突变基因(ataxia telangietisa mutant,ATM)蛋白表达变化。方法 32只ICR小鼠随机分为实验组和对照组,分别行X射线照射(0.4 Gy)和假照射(0 Gy)后于4、12、24、48 h进行取材。电镜观察海马组织细胞超微结构损伤;单细胞凝胶电泳检测DNA损伤;蛋白免疫印迹法检测海马组织中ATM蛋白的表达情况。结果电镜结果显示,X射线照射后,海马组织细胞的超微结构损伤随时间的延长而加重;单细胞凝胶电泳结果显示DNA损伤由4 h开始上升,12 h到达高峰,24 h开始有回落趋势,48 h持续下降;Western blot结果显示ATM蛋白表达随时间的延长而增加。结论小剂量电离辐射致小鼠海马细胞不同程度的超微结构损伤并呈现时间-效应关系;小鼠海马组织中DNA损伤和ATM蛋白表达有明显的时间依赖关系。 展开更多

关键词 电离辐射 小鼠海马 超微结构损伤 DNA损伤 ATM

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高效液相色谱-荧光法或超高效液相色谱-四极杆/轨道阱质谱法测定抑郁症小鼠海马中5-羟色胺和相关的2种物质含量的比较 被引量：3

2

作者 王丽 朱军 +2 位作者 环飞 程洁 吴倩 《理化检验（化学分册）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1384-1388,共5页

为测定抑郁症小鼠海马中5-羟色胺(5-HT)、色氨酸(TRP)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA),比较了两种测定方法的应用,即带荧光检测器的高效液相色谱法(HPLC-FLD)和超高效液相色谱-四极杆/轨道阱质谱法(UHPLC-Q-Obitrap-MS)的比较。样品的前处理选用... 为测定抑郁症小鼠海马中5-羟色胺(5-HT)、色氨酸(TRP)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA),比较了两种测定方法的应用,即带荧光检测器的高效液相色谱法(HPLC-FLD)和超高效液相色谱-四极杆/轨道阱质谱法(UHPLC-Q-Obitrap-MS)的比较。样品的前处理选用0.4 mol·L-1高氯酸溶液以1∶5(g∶mL)比例加入于小鼠海马组织的匀浆液中沉淀其中的蛋白,经涡旋和离心后取上清液,分别按上述两种方法进行测定。在两种方法中均采用C18柱分离。试验结果表明:Q-Obitrap-MS测定显示较强的基质干扰,而HPLC-FLD测得的5-HT、TRP和5-HIAA的色谱峰形对称,峰宽窄,基质无明显干扰。3种目标物的质量浓度在500.0μg·L-1以内呈线性。不同浓度水平的加标回收率为86.2%,92.1%,91.0%。上述3项测定目标物的检出限(3S/N)依次为1.0,1.0,0.5μg·L-1。 展开更多

关键词 高效液相色谱附荧光检测法 5-羟色胺 色氨酸 5-羟吲哚乙酸 抑郁症 小鼠海马

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附子多糖对小鼠海马糖原合成酶激酶-3β蛋白表达的影响 被引量：3

3

作者 肖晓霞 赵学千 +2 位作者 卢小龙 曲宏达 李树基 《湖南中医杂志》 2017年第10期165-167,共3页

目的:探讨附子多糖对小鼠海马糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)蛋白表达的影响。方法:健康雄性C57BL/6J小鼠12只,分为对照组(n=3)和实验组(n=9),实验组分为附子多糖低、中、高3个剂量组,每组各3只,用药剂量分别为50mg/kg、100mg/kg、200mg/... 目的:探讨附子多糖对小鼠海马糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)蛋白表达的影响。方法:健康雄性C57BL/6J小鼠12只,分为对照组(n=3)和实验组(n=9),实验组分为附子多糖低、中、高3个剂量组,每组各3只,用药剂量分别为50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg,对照组腹腔注射等量0.9%氯化钠注射液。6h后断头取脑,剥离海马组织,并用westren blot检测海马神经元中GSK-3β及p-GSK-3β的表达。结果:附子多糖各剂量组GSK-3β表达水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),p-GSK-3β-Ser9/内参蛋白比值高于对照组(P<0.05)。结论:附子多糖影响GSK-3β活性可能是其增加神经细胞发生的作用机制之一。 展开更多

关键词 附子多糖 糖原合成酶激酶-3Β 小鼠海马 实验研究

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电离辐射致小鼠海马神经细胞凋亡及p53与PUMA表达改变 被引量：2

4

作者 韩颖颖 陈玉均 +4 位作者 季斌 汤乐民 王海健 韩毓 姜声扬 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期359-362,共4页

目的研究电离辐射对小鼠海马神经细胞凋亡及p53、p53 up-regulated modulator of apoptosis(PUMA)蛋白表达的变化。方法 60只ICR小鼠随机分为0.4、4、10和18 Gy 4个照射剂量组及对照组。处理后在4 h时间点取小鼠全脑,原位末端标记(TUNEL... 目的研究电离辐射对小鼠海马神经细胞凋亡及p53、p53 up-regulated modulator of apoptosis(PUMA)蛋白表达的变化。方法 60只ICR小鼠随机分为0.4、4、10和18 Gy 4个照射剂量组及对照组。处理后在4 h时间点取小鼠全脑,原位末端标记(TUNEL)法检测海马神经细胞凋亡;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测海马组织中p53与PUMA蛋白的表达情况。结果 TUNEL结果显示细胞凋亡率随照射剂量增加而增加;Western blot结果显示X射线照射后4 h点p53、PUMA表达随剂量增高而增加,二者的表达呈平行状态。结论在本试验条件下,电离辐射致小鼠海马神经细胞出现不同程度的凋亡并呈现剂量-效应关系;小鼠海马组织中p53和PUMA蛋白表达有明显的剂量依赖性,且和细胞凋亡的改变有一定关联。 展开更多

关键词 电离辐射 小鼠海马 细胞凋亡 P53 PUMA

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慢性间歇性低压低氧改善全脑照射造成的小鼠记忆认知功能障碍的研究

5

作者 王媛 刘宜先 +5 位作者 王帅 张伟 王祎 武亚晶 王升 王军 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期487-492,共6页

目的观察全脑照射后小鼠海马(CA)1区损伤的表现,探讨慢性间歇性低压低氧(CIHH)预处理对全脑照射后小鼠记忆认知功能的影响。方法采用完全随机法将48只成年雄性C57BL/6小鼠分为健康对照组、CIHH组、单纯照射组(IR)和CIHH+IR组。IR组采用6... 目的观察全脑照射后小鼠海马(CA)1区损伤的表现,探讨慢性间歇性低压低氧(CIHH)预处理对全脑照射后小鼠记忆认知功能的影响。方法采用完全随机法将48只成年雄性C57BL/6小鼠分为健康对照组、CIHH组、单纯照射组(IR)和CIHH+IR组。IR组采用6 MV X射线单次10 Gy全脑照射构建脑损伤模型。CIHH处理为小鼠在接受照射前置于低压氧舱预处理。Mirrors水迷宫实验观察小鼠逃避潜伏期、穿越平台次数以及目标象限停留时间,应用尼氏染色法观察海马CA1区神经元细胞的变化,应用免疫荧光法检测小鼠神经元前体细胞的微管相关蛋白(DCX)在海马齿状回(DG)颗粒下区(SGZ)的表达来评价神经发生情况。结果全脑照射后30 d,IR组与健康对照组相比,小鼠逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少(P<0.001),目标象限内探索时间减少(P<0.001)。X射线引起小鼠CA1区神经元细胞排列紊乱、神经元细胞变性、坏死,小鼠CA1区DCX表达量明显减少。与IR组比较,CIHH+IR组可使小鼠逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增加[(2.08±0.26)次vs.(0.83±0.24)次,P<0.001],目标象限内探索时间增加[(14.12±0.82)s vs.(7.42±0.73)s],P<0.001]。小鼠CA1区神经元变形、坏死减少,排列紊乱改善,CA1区DCX表达量增加。结论CIHH预处理对放射性海马损伤起到一定保护作用。 展开更多

关键词 慢性间歇性低压低氧 全脑照射 小鼠海马 逃避潜伏期 神经发生

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成年摇晃小鼠海马组织中小清蛋白的表达

6

作者 范艳乐 陈炯 +6 位作者 黄映雪 李国红 马菊红 殷玉鹏 张艳 赵善廷 陈树林 《动物医学进展》 北大核心 2019年第5期37-42,共6页

为探讨小清蛋白(PV)在成年摇晃小鼠海马中的表达情况,用免疫荧光组织化学法对野生型小鼠(R^(+/+))、杂合子摇晃小鼠(R^(+/-))、纯合子摇晃小鼠(R^(-/-))海马CA1区、CA3区、齿状回中PV的分布和表达进行研究。结果表明,PV在摇晃小鼠海马CA... 为探讨小清蛋白(PV)在成年摇晃小鼠海马中的表达情况,用免疫荧光组织化学法对野生型小鼠(R^(+/+))、杂合子摇晃小鼠(R^(+/-))、纯合子摇晃小鼠(R^(-/-))海马CA1区、CA3区、齿状回中PV的分布和表达进行研究。结果表明,PV在摇晃小鼠海马CA1区、CA3区和齿状回中均有分布,主要表达于CA1区和CA3区的锥体细胞层及齿状回的颗粒细胞层。与野生型相比,杂合子摇晃小鼠CA1区PV阳性细胞数显著降低(P<0.01),而纯合子摇晃小鼠增加;CA3区和齿状回中的PV阳性细胞数均降低,但纯合子摇晃小鼠高于杂合子摇晃小鼠。提示摇晃蛋白(Reelin)影响PV的表达,且PV的表达异常可能与摇晃小鼠的表现型有关。 展开更多

关键词 小清蛋白 摇晃蛋白 小鼠海马

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花椒中的异丁基酰胺化合物及其对HT22海马神经元铁死亡的抑制作用研究 被引量：14

7

作者 张凯峰 贺鹏杨 何达海 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期18-22,56,共6页

对四川泸定县花椒的化学成分进行研究,以期寻找新的先导化合物。采用硅胶柱色谱、高效液相色谱等方法从花椒的70%盐酸水提取物中分离并鉴定了8个异丁基酰胺类化合物。通过高分辨质谱、核磁共振谱与文献对照,它们被鉴定为花椒素A(1)、hyd... 对四川泸定县花椒的化学成分进行研究,以期寻找新的先导化合物。采用硅胶柱色谱、高效液相色谱等方法从花椒的70%盐酸水提取物中分离并鉴定了8个异丁基酰胺类化合物。通过高分辨质谱、核磁共振谱与文献对照,它们被鉴定为花椒素A(1)、hydroxy-α-sanshool(2)、tetrahydrobungeanool(3)、hydroxy-γ-isosanshool(4)、hydroxy-γ-sanshool(5)、bungeanool(6)、γ-sanshool(7)、isobungeanool(8)和β-谷甾醇(9)。化合物1为首次从该植物中分离得到。化合物3对erastin诱导的小鼠海马神经元细胞系HT22细胞铁死亡具有明显的抑制作用,IC 50为4.08μM。 展开更多

关键词 花椒 异丁基酰胺 小鼠海马神经元细胞系 铁死亡

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肉苁蓉总苷对Aβ_(1-42)寡聚体诱导的HT22细胞突触可塑性的影响

8

作者 郭鹏程 赵婧 +6 位作者 张士滨 王储 徐晗 霍东升 闫旭升 杨占君 贾建新 《包头医学院学报》 CAS 2024年第9期6-12,共7页

目的:探究肉苁蓉总苷(GCs)对Aβ_(1-42)寡聚体诱导小鼠海马神经元细胞系(HT22)细胞构建的阿尔茨海默病(AD)细胞模型突触可塑性的影响。方法:将HT22细胞分为对照组、模型组、空白大鼠血清组和GCs给药组。分别给予相应处理后记录各组细胞... 目的:探究肉苁蓉总苷(GCs)对Aβ_(1-42)寡聚体诱导小鼠海马神经元细胞系(HT22)细胞构建的阿尔茨海默病(AD)细胞模型突触可塑性的影响。方法:将HT22细胞分为对照组、模型组、空白大鼠血清组和GCs给药组。分别给予相应处理后记录各组细胞形态、活力以及突触相关mRNA和蛋白的表达水平情况。结果:与对照组相比,模型组细胞突触长度明显缩短、胞体较小、形态较差、凋亡细胞增多,细胞活力有所下降,脑源性神经营养因子(BDNF)、突触后致密蛋白(PSD-95)和N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)的mRNA水平明显下降(P<0.05),PSD-95和NMDAR1的蛋白表达水平均显著下降(P<0.05);与模型组和空白大鼠血清组相比,GCs给药组的细胞突触长度、密度和细胞活力(P<0.05)均有所恢复,凋亡细胞的数量减少,BDNF、突触素(SYN)、PSD-95和NMDAR1的mRNA表达水平显著升高(P<0.05),NMDAR1和PSD-95蛋白的表达水平明显提高(P<0.05)。结论:GCs含药血清可明显提高AD细胞模型的突触可塑性,改善AD模型细胞病理进程。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 小鼠海马神经元 肉苁蓉总苷 突触可塑性

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卡马西平减轻HT22细胞炎性损伤及机制研究

9

作者 杨凌凯 戴伯坚 +5 位作者 李响 黄国永 陈鑫亮 蔡子耀 程朗朗 赵飞飞 《现代实用医学》 2024年第6期746-750,共5页

目的探究卡马西平减轻脂多糖(LPS)诱导小鼠海马神经元(HT22)细胞炎性损伤的作用效果及机制。方法以HT22细胞为研究对象,体外传代培养,以10、20、50μg/ml LPS进行试验,确定LPS对HT22细胞作用最佳浓度;将HT22细胞分为对照组(NC组,正常培... 目的探究卡马西平减轻脂多糖(LPS)诱导小鼠海马神经元(HT22)细胞炎性损伤的作用效果及机制。方法以HT22细胞为研究对象,体外传代培养,以10、20、50μg/ml LPS进行试验,确定LPS对HT22细胞作用最佳浓度;将HT22细胞分为对照组(NC组,正常培养),LPS组(加入20μg/ml LPS进行培养),LPS+卡马西平组(加入20μg/ml LPS和50μg/ml卡马西平进培养)3组,以CCK-8实验、DAPI染色法检测HT22增殖抑制率及凋亡率;采用H2DCFH-DA试剂盒检测细胞内活性氧(ROS)含量,酶联免疫吸附(ELISA)法检测HT22细胞上清液白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)及白细胞介素-17(IL-17)水平,Western blot法检测HT22细胞NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路相关蛋白表达。结果20μg/ml LPS作用于HT22细胞48h,细胞增殖抑制率接近于50%。LPS组、LPS+卡马西平组细胞活性均低于NC组(均P<0.05),LPS+卡马西平组细胞活性高于LPS组(P<0.05)。LPS组、LPS+卡马西平组细胞凋亡率均高于NC组(均P<0.05),LPS+卡马西平组细胞凋亡率低于LPS组(P<0.05)。3组ROS差异有统计学意义(P<0.05),LPS组>LPS+卡马西平组>NC组(均P<0.05)。LPS组、LPS+卡马西平组HT22细胞上清液IL-1β、TNF-α、IL-8及IL-17水平均高于NC组(均P<0.05),而LPS+卡马西平组上述因子水平均低于LPS组(均P<0.05)。Western blot结果显示:与NC组相比,LPS组、LPS+卡马西平组HT22细胞中NLRP3、IL-1β、凋亡相关微粒蛋白(ASC)及pro-caspase1表达均显著上调(均P<0.05),而与LPS组相比,LPS+卡马西平组上述因子的表达均显著下调(均P<0.05)。结论卡马西平可通过介导NLRP3信号通路来调节细胞活性和细胞凋亡的平衡,进而减轻LPS诱导的HT22细胞的炎性损伤。 展开更多

关键词 卡马西平 脂多糖 小鼠海马神经元细胞 炎性损伤 NLRP3信号通路

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基于网络药理学和实验研究槲皮素治疗阿尔兹海默病的机制

10

作者 巴音桑 吉米丽汗·司马依 +1 位作者 艾尼瓦尔·吾买尔 周文婷 《西北药学杂志》 CAS 2024年第2期53-60,共8页

目的通过网络药理学和实验验证和探究槲皮素(quercetin)治疗阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease,AD)的作用机制。方法通过TCMSP、Swiss Target Prediction和Uniprot数据库筛选槲皮素对应的作用靶点。通过TCMIP V2.0、TCMSP、TTD、DrugB... 目的通过网络药理学和实验验证和探究槲皮素(quercetin)治疗阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease,AD)的作用机制。方法通过TCMSP、Swiss Target Prediction和Uniprot数据库筛选槲皮素对应的作用靶点。通过TCMIP V2.0、TCMSP、TTD、DrugBank、CTD和DisGeNET数据库得到与AD发病机制相关的靶点,并与槲皮素作用靶点进行映射,将得到的交集靶点作为槲皮素治疗AD的靶点。通过String数据库、CytoNCA和MCODE插件对槲皮素治疗AD的靶点进行各蛋白之间的相互作用研究,作用强的靶点为槲皮素治疗AD的关键靶点。将槲皮素治疗AD的靶点通过Cytoscape 3.8.2软件的ClueGO插件和DAVID数据库进行GO和KEGG信号通路富集分析。用蛋白印迹法(Western blotting)和实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)对预测的通路进行初步验证。结果筛选出与槲皮素作用的靶点有230个,与442个AD疾病靶点重合的靶点有43个,该靶点涉及多个生物学过程和54条信号通路。通过聚类分析和网络拓扑参数,得到槲皮素治疗AD的6个关键靶点,包括糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK3β)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、淀粉样βA4蛋白(amyloidβA4 protein,APP)、磷脂酰肌醇3-激酶调节亚单位α(phosphatidylinositol 3-kinase regulatory subunitα,PIK3R1)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、胰岛素样生长因子Ⅱ(insulinlike growth factorⅡ,IGF2)和转化生长因子β1(transforming growth factor beta-1,TGFβ1);细胞实验结果表明,槲皮素可提高AD细胞模型中的蛋白激酶B(protein kinase B,AKT),GSK-3βmRNA水平,与调控AKT/GSK-3β通路的磷酸化有关。结论槲皮素可增强损伤神经细胞的稳定性、改善细胞膜的通透性,从而稳定细胞内环境。该作用可能与槲皮素提高AD细胞模型中的AKT、GSK-3β等mRNA水平,调控AKT/GSK-3β通路的磷酸化有关。 展开更多

关键词 槲皮素 网络药理学 阿尔兹海默病 β淀粉样蛋白25-35(Aβ_(25-35)) 小鼠海马神经元细胞

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苦参碱对缺氧/复氧小鼠海马神经元HT22细胞活力、凋亡的影响及机制研究 被引量：1

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作者 张富慧 张自艳 +2 位作者 郝静峰 罗玲 王志海 《国际检验医学杂志》 CAS 2023年第2期187-191,共5页

目的探讨苦参碱对缺氧/复氧(H/R)小鼠海马神经元HT22细胞活力、凋亡及脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶受体B(TrkB)信号通路的影响。方法将处于对数生长期的HT22细胞分为对照组、H/R组及苦参碱低、中、高浓度组。对照组HT22细胞用... 目的探讨苦参碱对缺氧/复氧(H/R)小鼠海马神经元HT22细胞活力、凋亡及脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶受体B(TrkB)信号通路的影响。方法将处于对数生长期的HT22细胞分为对照组、H/R组及苦参碱低、中、高浓度组。对照组HT22细胞用无血清DMEM培养基在正常环境下培养28 h;H/R组HT22细胞在缺氧培养箱中维持4 h后在常氧条件下培养24 h;苦参碱低、中、高浓度组的H/R处理同H/R组,同时给予浓度分别为10、20、30μmol/L的苦参碱进行干预,培养24 h。检测HT22细胞活力、凋亡情况及凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)]和BDNF/TrkB信号通路蛋白水平。结果与对照组比较,H/R组HT22细胞吸光度值、存活率、Bcl-2、BDNF、TrkB蛋白水平降低,细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与H/R组比较,苦参碱低、中、高浓度组HT22细胞吸光度值、存活率、Bcl-2、BDNF、TrkB蛋白水平依次升高,细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白水平依次降低,差异有统计学意义(P<0.05),呈浓度依赖性。结论苦参碱能减轻H/R导致的神经元HT22细胞活力的降低,抑制HT22细胞凋亡,其机制可能与激活BDNF/TrkB信号通路有关。 展开更多

关键词 苦参碱 缺氧/复氧 小鼠海马神经元HT22细胞 脑源性神经营养因子/酪氨酸激酶受体B信号通路

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CircKat6b重组腺相关病毒制备及其在小鼠海马中的表达

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作者 胡娜 刘行 +3 位作者 王敏睿 冯建国 贾静 王晓斌 《西南医科大学学报》 2023年第2期141-146,共6页

目的获得表达circKat6b的重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus expressing circKat6b,rAVV-circKat6b),检测其在小鼠海马组织中的感染效率和表达水平。方法将mmu-circKat6b基因片段插入腺相关病毒(adeno-associated viru... 目的获得表达circKat6b的重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus expressing circKat6b,rAVV-circKat6b),检测其在小鼠海马组织中的感染效率和表达水平。方法将mmu-circKat6b基因片段插入腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)穿梭质粒中构建重组AAV质粒,将重组AAV质粒、包装质粒和辅助质粒通过脂质体LipoFiter^(TM)共同转染293T细胞包装rAAV-circKat6b。从转染的293T细胞中收集并通过柱纯化rAAV-circKat6b,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定rAAV-circKat6b滴度。最后通过小鼠脑立体定位仪注射rAAV-circKat6b至小鼠海马组织中,1个月后免疫荧光显微镜观察rAAV-circKat6b的感染效率,qRT-PCR检测rAAV-circKat6b表达水平。结果包装成功的rAAV-circKat6b经过纯化后获得了高滴度的rAAV-circKat6b,qRT-PCR检测rAAV-circKat6b的病毒滴度达到1.2×10^(12) vg/mL。感染1个月后,脑组织海马区域绿色荧光表达明显,circKat6b表达水平明显增加。结论成功构建的rAAV-circKat6b可使小鼠海马组织中circKat6b高表达,这一研究结果为进一步研究circKat6b的生物学功能提供了实验基础。 展开更多

关键词 腺相关病毒 circKat6b 小鼠海马组织 抑郁症

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基于P38/JNK通路探讨七福饮保护高糖诱导HT22细胞损伤的作用机制

13

作者 史磊磊 张静文 +6 位作者 王欣 李溪 张雪航 韩朝军 王斌 卫昊 刘继平 《中药药理与临床》 CSCD 北大核心 2023年第10期48-53,共6页

目的:研究七福饮含药血清对高糖诱导作用下小鼠海马神经元细胞(HT22细胞)的损伤保护作用。方法:确定高糖培养液最适造模浓度;将雄性大鼠预留10只作为正常对照组,其余20只灌胃七福饮8.6 g/kg。灌胃7 d后大鼠腹主动脉采血,制备浓度为5%、... 目的:研究七福饮含药血清对高糖诱导作用下小鼠海马神经元细胞(HT22细胞)的损伤保护作用。方法:确定高糖培养液最适造模浓度;将雄性大鼠预留10只作为正常对照组,其余20只灌胃七福饮8.6 g/kg。灌胃7 d后大鼠腹主动脉采血,制备浓度为5%、10%、15%七福饮含药血清;将各浓度含药血清作用于HT22细胞48 h后以细胞计数试剂(CCK-8)法检测细胞活力;以CCK-8法检测七福饮含药血清对高糖诱导下HT22细胞的活力;以流式细胞术Annexin-V PI细胞双染法检测HT22细胞凋亡率;提取HT22细胞蛋白,聚氰基丙烯酸正丁酯(BCA)试剂盒测定蛋白浓度;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测高糖诱导下HT22细胞相关蛋白表达。结果:选择75 mmol/L高糖干预细胞48 h作为最适造模浓度。与正常对照组相比,模型对照组细胞活力显著降低,细胞密度显著降低,细胞凋亡率显著升高,磷酸化JNK、P38蛋白、BAX、Caspase-3蛋白表达显著上调,BCL2蛋白表达显著下调(P<0.01);与模型对照组相比,5%、10%七福饮含药血清组细胞活力均显著升高,细胞密度显著升高,细胞凋亡率显著下降(P<0.01);半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、BCL-2相关X蛋白(BAX)、磷酸化P38蛋白(p-P38)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)的表达明显下调(P<0.05或P<0.01),B淋巴细胞瘤-2基因(BCL-2)蛋白表达显著上调(P<0.01)。结论:七福饮可通过调节P38/c-Jun氨基末端激酶通路(JNK)信号通路,从而改善高糖诱导的HT22细胞损伤和凋亡。 展开更多

关键词 七福饮 2型糖尿病认知障碍 小鼠海马神经元细胞 细胞凋亡 P38/c-Jun氨基末端激酶通路

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蛋白磷酸酶2A在氯化镉致小鼠海马神经元细胞tau蛋白过度磷酸化及β淀粉样蛋白沉积中的作用

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作者 岑育芳 杨玲玲 +5 位作者 李文学 漆光紫 王一涵 韦俊宏 唐玉航 庞雅琴 《广西医学》 CAS 2023年第4期423-428,共6页

目的探讨蛋白磷酸酶2A(PP2A)在氯化镉致小鼠海马神经元HT-22细胞tau蛋白过度磷酸化及β淀粉样蛋白(Aβ)沉积中的作用。方法采用不同浓度(0μmol/L、1.25μmol/L、2.50μmol/L、5.00μmol/L、10.00μmol/L、20.00μmol/L)氯化镉对HT-22... 目的探讨蛋白磷酸酶2A(PP2A)在氯化镉致小鼠海马神经元HT-22细胞tau蛋白过度磷酸化及β淀粉样蛋白(Aβ)沉积中的作用。方法采用不同浓度(0μmol/L、1.25μmol/L、2.50μmol/L、5.00μmol/L、10.00μmol/L、20.00μmol/L)氯化镉对HT-22细胞进行染毒72 h,采用CCK-8法测定细胞活力,以筛选后续实验的染毒浓度。将HT-22细胞分为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,分别给予0μmol/L、1.25μmol/L、2.50μmol/L、5.00μmol/L氯化镉染毒,72 h后在倒置显微镜下观察细胞形态,并采用Western blot检测细胞中β淀粉样蛋白前体(APP)、tau蛋白、磷酸化tau蛋白181(Thr181)、PP2A-Aα蛋白、PP2A-Aβ蛋白、PP2A-C蛋白表达水平。结果(1)染毒72 h后,与经0μmol/L氯化镉染毒后的细胞相比,经不同浓度氯化镉染毒后的细胞活力均下降(均P<0.05)。选择细胞存活率为80%左右的氯化镉浓度作为后续实验最高染毒浓度。(2)染毒72 h后,镜下观察发现对照组细胞呈梭形,不同剂量组细胞呈梭形及多边形;与对照组相比,不同剂量组细胞间隙逐渐增宽,且在高剂量组中可见少量漂浮细胞。与对照组相比,低剂量组、中剂量组HT-22细胞的tau蛋白表达水平升高,中剂量组、高剂量组HT-22细胞的Thr181和APP蛋白表达水平升高,各剂量组PP2A-C蛋白表达水平均降低,高剂量组PP2A-Aα、PP2A-Aβ蛋白表达水平下降(均P<0.05)。结论镉可能通过下调PP2A亚基的表达,以诱导小鼠海马神经元细胞tau蛋白过度磷酸化和Aβ生成,进而产生神经毒性。 展开更多

关键词 镉暴露 神经毒性 氯化镉 蛋白磷酸酶2A TAU蛋白 β淀粉样蛋白 小鼠海马神经元细胞

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7,8-二羟-9,10-环氧苯并[a]芘诱发小鼠海马神经元HT22细胞铁死亡及其机制

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作者 李晓卉 徐昭梦 +5 位作者 孙宏宇 吕懿 佟晓敏 冀婷玉 何慧 郑金平 《环境与职业医学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期433-440,共8页

[背景]苯并[a]芘(BaP)具有神经毒性,可诱发人和动物海马神经元死亡从而导致空间学习记忆功能障碍,但其机制尚不清楚。[目的]观察BaP活性代谢物7,8-二羟-9,10-环氧苯并[a]芘(BPDE)诱发小鼠海马神经元HT22细胞铁死亡的发生规律,初步探讨... [背景]苯并[a]芘(BaP)具有神经毒性,可诱发人和动物海马神经元死亡从而导致空间学习记忆功能障碍,但其机制尚不清楚。[目的]观察BaP活性代谢物7,8-二羟-9,10-环氧苯并[a]芘(BPDE)诱发小鼠海马神经元HT22细胞铁死亡的发生规律,初步探讨其潜在机制,为BaP神经毒性机制研究提供依据。[方法]选用小鼠海马神经元HT22细胞,分为溶剂对照组和低、中、高浓度BPDE染毒组(0.25、0.50、0.75μmol·L^(-1))。CCK8法测定细胞存活率。光镜和电镜观察细胞形态及超微结构。荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)水平和Fe^(2+)水平。试剂盒检测细胞内铁、4-羟基壬烯酸(4-HNE)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)水平。Western blotting法检测铁死亡特征蛋白酰基辅酶A合成长链家族成员4(ACSL4)、环氧合酶2(COX2)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白表达水平。用铁死亡抑制剂20μmol·L^(-1)去铁胺(DFO)和10μmol·L^(-1)3-氨基-4-环己基氨基苯甲酸乙酯(Fer-1)进行干预,观察对各浓度BPDE染毒组细胞存活率和相关铁死亡特征指标和蛋白表达水平的影响。[结果]随着BPDE染毒浓度的增加,HT22细胞存活率逐渐下降,各BPDE染毒组细胞存活率均明显低于溶剂对照组(P<0.01)。光镜下可见高浓度BPDE组细胞数量明显减少,形态萎缩变形,突触减少;电镜下可见高浓度BPDE组HT22细胞表现出线粒体皱缩,嵴减少,线粒体膜密度增加。与溶剂对照组相比,高浓度染毒组细胞内脂质ROS、Fe^(2+)、4-HNE及MDA水平明显增加(P<0.01);GSH、GSH-PX水平明显降低(P<0.01),ASCL4、COX2蛋白表达水平明显增加(P<0.01),SLC7A11、GPX4蛋白表达水平明显下降(P<0.01)。铁死亡抑制剂DFO、Fer-1可明显逆转高浓度BPDE组细胞的存活率(P<0.01)、铁死亡特征指标(ROS、Fe^(2+)、4-HNE、MDA、GSH、GSH-PX水平)(P<0.01)以及铁死亡相关蛋白水平的表达(ACSL4 展开更多

关键词 7 8-二羟-9 10-环氧苯并[a]芘 小鼠海马神经元细胞系 HT22细胞 铁死亡

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蔷薇红景天总黄酮对Aβ_(25-35)诱导HT22细胞损伤的保护作用 被引量：3

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作者 马俊杰 阿孜古丽·阿里木 +4 位作者 王启文 穆巴热科·吾普尔 王晓梅 胡君萍 王新玲 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2021年第23期9211-9219,共9页

目的探讨蔷薇红景天总黄酮提取物(total flavonoids extract,TFE)、纯化物(total flavonoids purification,TFP)及其活性成分草质素对β-淀粉样蛋白25-35(amyloid β-protein 25-35,Aβ_(25-35))诱导的小鼠海马神经元(hippocampal neuro... 目的探讨蔷薇红景天总黄酮提取物(total flavonoids extract,TFE)、纯化物(total flavonoids purification,TFP)及其活性成分草质素对β-淀粉样蛋白25-35(amyloid β-protein 25-35,Aβ_(25-35))诱导的小鼠海马神经元(hippocampal neuronal cell line,HT22)细胞损伤的保护作用。方法采用Aβ_(25-35)诱导HT22细胞损伤,建立阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)炎症细胞模型,然后将HT22细胞分为空白组、炎症模型组(15μmol/L Aβ_(25-35))、阳性对照盐酸多奈哌齐组(12.5μmol/L)、不同质量浓度TFE(12.5、25、50μg/mL)和TFP(6.25、12.5、25μg/mL)干预组、草质素(5、10、20μmol/L)干预组,采用倒置显微镜观察细胞形态;MTT法测定HT22细胞存活率;采用2,4-二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的活性;采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的含量;膜联蛋白U-异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染色法检测细胞凋亡;酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞培养液上清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的水平。结果与空白组比较,模型组神经元细胞变圆,细胞核皱缩,数量减少,细胞间隙增大,存活率显著下降(P<0.05),细胞凋亡率显著提高(P<0.05);与模型组比较,蔷薇红景天TFE、TFP和草质素组的高、中、低剂量组均能改善细胞形态,减少细胞受损,提高细胞存活率,显著降低细胞培养液上清中TNF-α、IL-1β、IL-6和COX-2的水平(P<0.05),且成剂量依赖性。结论蔷薇红景天TFE和TFP及其活性成分草质素对Aβ_(25-35)诱导HT22细胞损伤具有较好保护作用,其机制可能与拮抗Aβ_(25-35)的细胞毒性、保护神经元、抑制HT22细胞炎症的发生有关。 展开更多

关键词 蔷薇红景天 总黄酮 Β-淀粉样蛋白25-35 小鼠海马神经元细胞 抗炎作用

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越鞠甘麦大枣汤对皮质酮诱导损伤的HT22细胞的神经保护作用 被引量：3

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作者 葛渴敏 薛文达 王薇 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期2334-2337,共4页

目的探讨越鞠甘麦大枣汤对皮质酮诱导的小鼠海马神经元HT22细胞损伤的神经保护作用。方法利用高浓度皮质酮(CORT)构建HT22细胞的损伤模型后,给予不同浓度的越鞠甘麦大枣汤含药血清,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测HT22细胞的存活率,以及E... 目的探讨越鞠甘麦大枣汤对皮质酮诱导的小鼠海马神经元HT22细胞损伤的神经保护作用。方法利用高浓度皮质酮(CORT)构建HT22细胞的损伤模型后,给予不同浓度的越鞠甘麦大枣汤含药血清,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测HT22细胞的存活率,以及ELISA法测定乳酸脱氢酶(LDH)浓度并分析LDH漏出量。结果高浓度的CORT使HT22细胞存活率明显下降、LDH漏出量显著增加。1%,5%,10%的越鞠甘麦大枣汤含药血清均能显著提高高浓度CORT条件下HT22细胞的存活率,并减少LDH的漏出量,从而减少细胞损伤。结论越鞠甘麦大枣汤对CORT诱导的HT22细胞损伤具有显著的保护作用。 展开更多

关键词 越鞠甘麦大枣汤 皮质酮 小鼠海马神经元细胞 神经保护

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小鼠海马神经元细胞系HT22微环境诱导BMSCs神经分化 被引量：2

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作者 侯伟健 王昕 +4 位作者 郝世宇 佟浩 敖强 王佐周 柏树令 《解剖科学进展》 2016年第4期411-415,共5页

目的探讨小鼠海马神经元细胞系HT22的微环境对骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化的定向诱导作用。方法分别培养HT22细胞和GFP转基因荧光小鼠的BMSCs;直接接触法和间接接触法共培养,荧光显微比较GFP标记的干细胞形态变化;收集间接接触共培养的... 目的探讨小鼠海马神经元细胞系HT22的微环境对骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化的定向诱导作用。方法分别培养HT22细胞和GFP转基因荧光小鼠的BMSCs;直接接触法和间接接触法共培养,荧光显微比较GFP标记的干细胞形态变化;收集间接接触共培养的BMSCs行Western blot检测神经相关的蛋白(GFAP,NSE)的表达和变化;利用免疫荧光法检查GFAP和NSE抗原在细胞内的表达。结果培养的骨髓贴壁细胞为CD11b、CD45阴性,CD90阳性。与HT22细胞直接接触共培养及间接接触共培养的BMSCs细胞长轴增长,轴突样突起明显;经HT22细胞培养液诱导的BMSCs内GFAP、NSE表达水平随时间增加而增强;与HT22细胞直接接触共培养诱导的BMSCs表达GFAP和NSE。结论小鼠海马神经元细胞系HT22的微环境可诱导BMSCs向神经元样细胞分化。 展开更多

关键词 小鼠海马神经元 HT22细胞 骨髓间充质干细胞 神经分化 微环境

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UCP2在HT22细胞构建的脑出血模型中的表达及意义 被引量：2

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作者 程鹏 王大同 +5 位作者 张忠文 陆海波 杨龙 陆军 耿德勤 程言博 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1101-1107,共7页

目的:探讨解偶联蛋白2(UCP2)在小鼠海马神经元HT22细胞构建的脑出血模型中的表达规律及其与细胞凋亡、氧化应激反应及线粒体分裂/融合动态平衡之间的关系。方法:将体外培养的HT22细胞分为对照组、造模后3 h组、造模后6 h组、造模后12 h... 目的:探讨解偶联蛋白2(UCP2)在小鼠海马神经元HT22细胞构建的脑出血模型中的表达规律及其与细胞凋亡、氧化应激反应及线粒体分裂/融合动态平衡之间的关系。方法:将体外培养的HT22细胞分为对照组、造模后3 h组、造模后6 h组、造模后12 h组、造模后24 h组,后4组细胞加入终浓度为10μmol/L的氯化血红素分别处理3 h、6 h、12 h、24 h,对照组加入等量溶剂处理24 h。采用磷脂结合蛋白(Annexin V)-FITC/碘化丙啶(PI)细胞凋亡检测试剂盒检测5组细胞凋亡率。采用荧光探针法检测5组细胞的活性氧(ROS)水平。采用Western blotting检测5组细胞UCP2,凋亡相关蛋白活化的半胱天冬酶3(cleaved caspase3)、抗凋亡蛋白β细胞淋巴瘤/白血病基因2(bcl2),线粒体分裂/融合蛋白Fis1、Drp1、Opa1、Mfn2的表达。结果:与对照组比较,造模后3 h组、造模后6 h组、造模后12 h组、造模后24 h组细胞凋亡率、ROS水平、UCP2的表达、凋亡相关蛋白cleaved caspase3的表达及线粒体分裂蛋白Drp1、Fis1的表达均增高,抗凋亡相关蛋白bcl2的表达及线粒体融合蛋白Opa1、Mfn2的表达均减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。并且造模后3 h组、造模后6 h组、造模后12 h组、造模后24 h组细胞凋亡率、ROS水平、UCP2、cleaved caspase3、Drp1和Fis1的表达均依次增高,bcl2、Opa1和Mfn2的表达均依次减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:UCP2在HT22细胞构建的脑出血模型中表达量的增加具有时间依赖性,且与细胞凋亡程度、氧化应激反应水平、线粒体分裂/融合动态平衡具有密切关系。 展开更多

关键词 脑出血 解偶联蛋白2 小鼠海马神经元 氧化应激反应 线粒体分裂/融合动态平衡

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乌头碱致HT22细胞凋亡的研究 被引量：1

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作者 刘奕伶 唐丽辉 +7 位作者 赵文星 王辉 郭梓豫 吴可欣 张云昊 莫重辉 赵宝玉 路浩 《动物医学进展》 北大核心 2022年第8期69-72,共4页

为探讨乌头碱对小鼠海马神经细胞(hippocampal neuronal cell line,HT22)凋亡的影响,用不同浓度乌头碱处理体外培养的HT22细胞不同时间后,用MTT法检测HT22细胞的存活率,荧光显微镜观察HT22细胞核的形态学变化,流式细胞术检测HT22细胞凋... 为探讨乌头碱对小鼠海马神经细胞(hippocampal neuronal cell line,HT22)凋亡的影响,用不同浓度乌头碱处理体外培养的HT22细胞不同时间后,用MTT法检测HT22细胞的存活率,荧光显微镜观察HT22细胞核的形态学变化,流式细胞术检测HT22细胞凋亡率。结果显示,与对照组相比,乌头碱可以极显著降低HT22细胞的存活率(P<0.01);Hoechst 33258荧光染色后,HT22细胞核呈现浓缩、碎裂及新月形,呈现明显细胞凋亡变化;各试验组HT22细胞凋亡率呈明显上升趋势,组间差异显著(P<0.05),且具有明显剂量-效应关系。表明乌头碱能诱导HT22细胞发生凋亡,为后续深入研究乌头碱毒性作用奠定基础。 展开更多

关键词 乌头碱 小鼠海马神经细胞 细胞存活率 荧光染色 细胞凋亡率

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