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HIF1A与VEGF在小鼠月经样模型的表达与共定位 被引量：3
1
作者 庄太凤 陈西华 +8 位作者 贺斌 陆超 刘建兵 王树芳 周芳 郭士格 南楠 王介东 徐祥波 《生殖医学杂志》 CAS 2017年第8期808-813,共6页
目的在小鼠月经模型基础上,研究低氧诱导因子(HIF1A)与血管内皮生长因子(VEGF)蛋白及mRNA的表达与定位,探索HIF1A与VEGF在月经发生中可能的调控机制。方法建立小鼠月经样模型,假孕小鼠通过花生油子宫腔注射的方法诱导小鼠子宫内膜发生... 目的在小鼠月经模型基础上,研究低氧诱导因子(HIF1A)与血管内皮生长因子(VEGF)蛋白及mRNA的表达与定位,探索HIF1A与VEGF在月经发生中可能的调控机制。方法建立小鼠月经样模型,假孕小鼠通过花生油子宫腔注射的方法诱导小鼠子宫内膜发生蜕膜化,切除卵巢致孕酮(P4)撤退以模拟月经的发生。在P4撤退后0、8、12、16、24h分别收集小鼠子宫;利用免疫组化与Western blot方法检测HIF1A、VEGF的定位与表达量,利用Real-time PCR检测二者mRNA相对表达量;分析HIF1A与VEGF的表达变化趋势与相关性。结果 P4撤退后,小鼠子宫内膜发生崩解出血,模拟月经发生。免疫组化结果显示,HIF1A蛋白在P4撤退后12、16h,内膜基质蜕膜细胞核中的表达量逐渐升高;HIF1A表达区域与VEGF表达的区域均集中在子宫内膜蜕膜化区域外周,即崩解组织与基底层交界区域。Western blot蛋白定量结果显示,细胞核中HIF1A蛋白表达量在P4撤退后8、12、16h显著增高,VEGF在细胞质中的表达量在P4撤退后0、8、12h较高。HIF1A与VEGF mRNA的表达变化趋势非常相似,即P4撤退后,逐渐升高,在12h达到峰值,随后逐渐下降。结论结果提示月经发生子宫内膜崩解中,HIF1A转录因子功能激活并调节VEGF mRNA的表达。 展开更多
关键词 HIF1A VEGF 子宫内膜 月经发生 小鼠月经样模型
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低氧和低氧诱导因子在月经样小鼠模型中对子宫内膜崩解的作用 被引量：1
2
作者 梁敏 陈西华 +7 位作者 王树芳 张欣 鲁聪 武斌 南楠 张博男 贺斌 徐祥波 《生殖医学杂志》 CAS 2021年第6期772-779,共8页
目的探究低氧和低氧诱导因子(HIF1A)在小鼠子宫内膜崩解过程中的表达及作用。方法构建药理性小鼠月经样模型。根据月经样小鼠给药处理方式不同分为4组:(1)PW^(-)CoCl_(2)^(-)组(n=5):孕酮(P_(4))维持,不添加二氯化钴(CoCl_(2));(2)PW^(-... 目的探究低氧和低氧诱导因子(HIF1A)在小鼠子宫内膜崩解过程中的表达及作用。方法构建药理性小鼠月经样模型。根据月经样小鼠给药处理方式不同分为4组:(1)PW^(-)CoCl_(2)^(-)组(n=5):孕酮(P_(4))维持,不添加二氯化钴(CoCl_(2));(2)PW^(-)CoCl_(2)^(+)组(n=6):P_(4)维持,CoCl_(2)给药;(3)PW^(+)CoCl_(2)^(-)组(n=5):P_(4)撤退,不添加CoCl_(2);(4)PW^(+)CoCl_(2)^(+)组(n=6):P4撤退,CoCl_(2)给药。P4撤退后0 h、8 h、12 h、16 h、24 h处死小鼠并收集子宫组织,通过低氧探针和免疫组化检测P4撤退后不同时间点小鼠子宫低氧定位和HIF1A蛋白的表达情况;P4撤退后24 h,观察各组小鼠的子宫大体,HE染色法观察各组小鼠子宫组织形态,免疫组化染色法观察PW^(+)CoCl_(2)^(-)组和PW^(+)CoCl_(2)^(+)组小鼠子宫低氧定位和HIF1A蛋白的表达情况;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测P_(4)撤退后24 h子宫组织细胞质和细胞核中HIF1A的表达情况。结果免疫组化染色显示,小鼠子宫组织在P4撤退后低氧持续时间为0~24 h,P4撤退12 h和16 h时小鼠子宫低氧探针染色面积占比和HIF1A表达水平均显著高于P4撤退0 h时(P<0.05),低氧探针和HIF1A表达位置有很强的相关性。子宫大体和组织形态学观察显示,P4撤退后24 h,PW^(-)CoCl_(2)^(-)组和PW^(-)CoCl_(2)^(+)组小鼠子宫内膜保持完整,PW^(+)CoCl_(2)^(-)组和PW^(+)CoCl_(2)^(+)组子宫崩解出血。免疫组化染色结果显示,PW^(+)CoCl_(2)^(+)组子宫内膜的低氧染色面积占比和HIF1A核染色细胞百分比均显著高于PW^(+)CoCl_(2)^(-)组(P<0.05)。Western blot结果显示,P4撤退后24 h,PW^(-)CoCl_(2)^(-)组子宫组织细胞质HIF1A表达较高,在细胞核中几乎检测不到;与PW^(-)CoCl_(2)^(-)组相比,PW^(-)CoCl_(2)^(+)组细胞质HIF1A的表达显著降低而在细胞核中显著升高(P<0.05),PW^(+)CoCl_(2)^(-)组细胞质HIF1A的表达无显著变化而在细胞核中显著升高(P<0.05),PW^(+)CoCl_(2)^(+)组细胞质、细胞核HIF1A的� 展开更多
关键词 低氧诱导因子 低氧 子宫内膜 月经发生 小鼠月经样模型
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月经发生中低氧诱导因子-1A对VEGF的调节 被引量：1
3
作者 郭士格 南楠 +7 位作者 尹德东 周芳 王树芳 刘建兵 贺斌 王介东 徐祥波 陈西华 《生殖医学杂志》 CAS 2018年第5期416-421,共6页
目的在小鼠月经样模型和人蜕膜化子宫内膜基质细胞模拟月经发生基础上,探索低氧诱导因子-1A(HIF1A)对血管内皮生长因子(VEGF)的表达调控作用,以及月经发生中HIF1A对VEGF mRNA表达的调控机制。方法建立小鼠月经样模型,用ChIP方法检测HIF1... 目的在小鼠月经样模型和人蜕膜化子宫内膜基质细胞模拟月经发生基础上,探索低氧诱导因子-1A(HIF1A)对血管内皮生长因子(VEGF)的表达调控作用,以及月经发生中HIF1A对VEGF mRNA表达的调控机制。方法建立小鼠月经样模型,用ChIP方法检测HIF1A是否直接调控Vegf mRNA的表达;利用HIF1A抑制剂甲氧雌二醇(2ME)抑制HIF1A的功能,检测小鼠月经样模型中HIF1A、VEGF蛋白的表达量;人子宫内膜基质细胞体外诱导蜕膜化并模拟月经发生,检测HIF1A与VEGF mRNA的表达;用siRNA敲降的方法抑制HIF1A,检测VEGF mRNA的表达。结果小鼠月经样模型在孕酮撤退0h,HIF1A结合的Vegf promoter的相对百分比较低,随后在8h和12h逐渐上升,在12h达到峰值(P<0.05);2ME抑制HIF1A入核的同时,抑制了VEGF的表达量(P<0.05);人蜕膜化子宫内膜基质细胞中,孕酮撤退显著上调HIF1A和VEGF mRNA的表达量(P<0.01);敲降HIF1A后,VEGF mRNA的上调受到明显的抑制(P<0.01)。结论在月经发生中,孕酮撤退能够激活HIF1A转录因子的功能,HIF1A被激活后,结合于VEGF promoter区并启动VEGF mRNA的表达。 展开更多
关键词 HIF1A VEGF 小鼠月经样模型 子宫内膜基质细胞
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缺血再灌注对小鼠蜕膜化子宫内膜的作用
4
作者 陈西华 曹惠子 +3 位作者 关硕 陆超 贺斌 徐祥波 《生殖医学杂志》 CAS 2019年第5期525-530,共6页
目的以小鼠月经样模型为基础,探索缺血再灌注在月经发生中的作用。方法假孕NIH小鼠子宫诱导蜕膜化,完成蜕膜化后将小鼠分为对照组(n=8)、假手术组(n=8)与缺血再灌注组(n=10)。对照组小鼠无操作,假手术组仅实行开腹手术,而缺血再灌注组... 目的以小鼠月经样模型为基础,探索缺血再灌注在月经发生中的作用。方法假孕NIH小鼠子宫诱导蜕膜化,完成蜕膜化后将小鼠分为对照组(n=8)、假手术组(n=8)与缺血再灌注组(n=10)。对照组小鼠无操作,假手术组仅实行开腹手术,而缺血再灌注组小鼠开腹后对单侧子宫角进行血管夹持手术阻断血流,30min后恢复血流,造成单侧子宫角内发生缺血再灌注,另一侧子宫角无操作。手术后观察阴道出血状况,且术后6h与24h取材进行大体观察与组织形态学观察,统计子宫内膜崩解的小鼠数量。结果处理后24h,对照组小鼠子宫内膜全部保持完好,无一例(0/8)发生内膜崩解;假手术组仅一例(1/8)发生内膜崩解;缺血再灌注组大部分小鼠(8/10)双侧子宫角的子宫内膜均发生崩解并伴随阴道出血现象。结论缺血再灌注能够直接导致绝大部分小鼠蜕膜化子宫内膜发生完全崩解。 展开更多
关键词 月经 缺血再灌注 小鼠月经样模型 子宫内膜崩解
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