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基于网络药理学结合UHPLC-MS/MS探讨清感童饮的抗炎作用
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作者 呼延皓冉 王丽雯 +2 位作者 张孝莹 张玥 周昆 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期368-375,共8页
目的 基于血清药理学和网络药理学探究清感童饮的体外抗炎作用。方法 采用血清药理学评价方法,验证清感童饮含药血清对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞(RAW264.7)释放一氧化氮(NO)、细胞坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的影响。... 目的 基于血清药理学和网络药理学探究清感童饮的体外抗炎作用。方法 采用血清药理学评价方法,验证清感童饮含药血清对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞(RAW264.7)释放一氧化氮(NO)、细胞坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的影响。利用液质联用(UHPLC-MS/MS)技术对清感童饮指标性成分进行含量测定,并根据这些成分进行网络药理学分析,对清感童饮有效成分发挥抗炎作用的潜在靶点及作用通路进行预测。结果 细胞实验证明清感童饮可明显降低NO、TNF-α、IL-6水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。清感童饮中含量较高的成分为连翘酯苷A、牛蒡苷、绿原酸、野黄芩苷、没食子酸、迷迭香酸、芍药内酯苷、连翘苷。清感童饮中17个活性成分与炎症的交集靶点共215个,主要涉及ALB、VEGFA、IL-6、TNF-α等31个核心靶点,调节AGE-RAGE、PI3K-Akt、MAPK信号通路等多种通路发挥抗炎作用。结论 清感童饮具有多成分-多靶点发挥抗炎作用的特点。 展开更多
关键词 清感童饮 抗炎作用 血清药理学 网络药理学 UHPLC-MS/MS 小鼠巨噬细胞(raw264.7) 小鼠
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泰国伯克霍尔德菌感染RAW264.7细胞模型的建立及感染机制的初步探讨 被引量:1
2
作者 李进 黎敏 鲁卫平 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第14期1520-1525,共6页
目的建立泰国伯克霍尔德菌(Burkholderia thailandensis,B.thailandensis)感染小鼠巨噬细胞RAW264.7的细胞模型,为进一步研究泰国伯克霍尔德菌致病机制奠定基础。方法配制相同浓度的泰国伯克霍尔德菌菌液,感染不同稀释浓度的RAW264.7细... 目的建立泰国伯克霍尔德菌(Burkholderia thailandensis,B.thailandensis)感染小鼠巨噬细胞RAW264.7的细胞模型,为进一步研究泰国伯克霍尔德菌致病机制奠定基础。方法配制相同浓度的泰国伯克霍尔德菌菌液,感染不同稀释浓度的RAW264.7细胞,通过细菌侵袭实验分析不同时相点的泰国伯克霍尔德菌入胞率和胞内生存状态,通过透射电镜和Giemsa染色动态观察胞内感染和宿主细胞的超微病理变化,通过流式检测不同时相点诱导细胞凋亡情况,采用LEGENDplexTM试剂检测细胞上清炎症因子的表达情况。结果透射电镜结果显示感染12 h后部分细菌侵入细胞内;通过Giemsa染色形态观察,泰国伯克霍尔德菌感染后最早8 h可观察到典型多核巨细胞(multinucleate giant cells,MNGC)的形成;随着感染时间的延长,MNGC形成率和炎症因子表达逐渐升高。结论成功构建了泰国伯克霍尔德菌感染RAW264.7细胞模型,明确了泰国伯克霍尔德菌对宿主细胞产生的炎性反应,为深入研究泰国伯克霍尔德菌感染宿主细胞的机制奠定了实验基础。 展开更多
关键词 泰国伯克霍尔德菌 小鼠巨噬细胞(raw264.7) 细胞模型 炎症因子 感染机制
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牛磺鹅去氧胆酸对小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞凋亡的影响 被引量:4
3
作者 张文 王建光 +4 位作者 李金莲 赵孝民 陈正涛 周川 石有斐 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第7期1674-1680,共7页
为了探讨牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)对小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7的抗凋亡作用,试验采用二苯胺法及实时荧光定量PCR技术分别检测了针对RAW264.7细胞凋亡百分率及凋亡抑制蛋白CIAP-1、CIAP-2和XIAP的mRNA表达影响。结果显示,剂量为0.05、0.1... 为了探讨牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)对小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7的抗凋亡作用,试验采用二苯胺法及实时荧光定量PCR技术分别检测了针对RAW264.7细胞凋亡百分率及凋亡抑制蛋白CIAP-1、CIAP-2和XIAP的mRNA表达影响。结果显示,剂量为0.05、0.10和10μg/mL TCDCA可以极显著地对抗地塞米松(DEX)诱导的RAW264.7细胞系凋亡(P<0.01)。1μg/mL TCDCA对正常RAW264.7细胞系CIAP-1和XIAP表达有显著的促进作用(P<0.05);10μg/mL TCDCA对正常RAW264.7细胞系CIAP-1、CIAP-2和XIAP表达均具有显著的促进作用(P<0.05)。TCDCA给药后对DEX诱导的RAW264.7细胞系CIAP-1、CIAP-2和XIAP表达均具有极显著的促进作用(P<0.01),但不同给药剂量的TCDCA作用有所差异。以上研究结果表明,TCDCA具有对抗DEX诱导的小鼠巨噬细胞系RAW264.7凋亡作用,且与上调凋亡抑制蛋白mRNA表达有关。 展开更多
关键词 牛磺鹅去氧胆酸 小鼠巨噬细胞raw264.7 细胞凋亡 凋亡抑制蛋白
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大黄酚对LPS诱导的小鼠巨噬细胞株RAW264.7模型的保护作用研究
4
作者 王晓岩 李玉春 《中文科技期刊数据库(全文版)医药卫生》 2024年第10期0209-0213,共5页
利用LPS诱导的小鼠巨噬细胞株RAW264.7,对大黄酚进行模型细胞的保护作用及机制研究,以期发现具有抗溃疡性结肠炎的药物。结果表明,在形态学评估中,相较于对照组,LPS处理的RAW264.7小鼠巨噬细胞株在损伤组中,细胞的形态发生了圆形的变化... 利用LPS诱导的小鼠巨噬细胞株RAW264.7,对大黄酚进行模型细胞的保护作用及机制研究,以期发现具有抗溃疡性结肠炎的药物。结果表明,在形态学评估中,相较于对照组,LPS处理的RAW264.7小鼠巨噬细胞株在损伤组中,细胞的形态发生了圆形的变化;而在经过大黄酚处理后的细胞中,细胞的形态维持了正常的梭形或多角形,仅有个别细胞出现了圆形损伤。这一发现揭示了大黄酚对LPS诱导的PC12细胞损伤具有保护作用,进一步证实了其具有神经保护功能,其保护作用可能通过促进细胞增殖/减少LDH的漏出、降低胞内Ca2+超载、ROS浓度,降低Csapase-3活性,降低Bax/Bcl-2比值,通过PI3K/AKT信号通路实现的。 展开更多
关键词 大黄酚 小鼠巨噬细胞raw264.7 保护作用 作用机制
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球毛壳菌素F对Poly(I∶C)诱导的RAW264.7细胞TNF-α水平的影响
5
作者 赵俊丽 《南京晓庄学院学报》 2011年第6期69-72,共4页
该实验主要研究球毛壳菌素F对聚肌苷酸胞苷酸Poly(I∶C)诱导的小鼠巨噬细胞系RAW264.7 TNF-α表达水平的影响.采用不同浓度的Poly(I∶C)(50μg.mL-1、100μg.mL-1和200μg.mL-1)和球毛壳菌素F(2μg.mL-1)对RAW264.7进行处理,运用流式细... 该实验主要研究球毛壳菌素F对聚肌苷酸胞苷酸Poly(I∶C)诱导的小鼠巨噬细胞系RAW264.7 TNF-α表达水平的影响.采用不同浓度的Poly(I∶C)(50μg.mL-1、100μg.mL-1和200μg.mL-1)和球毛壳菌素F(2μg.mL-1)对RAW264.7进行处理,运用流式细胞术检测细胞内TNF-α的表达水平.结果表明,各浓度的Poly(I∶C)与对照组相比均能极显著提高RAW264.7的TNF-α水平(P<0.001),并且具有浓度依赖性;球毛壳菌素F能够极显著地降低Poly(I∶C)诱导的细胞TNF-α水平(P<0.01).结论,球毛壳菌素F可能是通过降低炎症因子TNF-α的分泌而达到抗炎作用的. 展开更多
关键词 球毛壳菌素F 聚肌苷酸胞苷酸 肿瘤坏死因子Α 小鼠巨噬细胞raw264.7
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芦荟大黄素对LPS诱导的RAW264.7细胞NO生成及iNOS表达的影响 被引量:51
6
作者 李晓红 齐云 +3 位作者 蔡润兰 李蒙 王翔岩 彭成 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期488-492,共5页
目的观察芦荟大黄素(aloe-emodin)对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞一氧化氮(NO)生成及诱生型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达的作用。方法采用LPS诱导的RAW264.7细胞株建立细胞炎症反应模型。采用Griess试剂法测定NO释放量;采用硝普钠释放N... 目的观察芦荟大黄素(aloe-emodin)对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞一氧化氮(NO)生成及诱生型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达的作用。方法采用LPS诱导的RAW264.7细胞株建立细胞炎症反应模型。采用Griess试剂法测定NO释放量;采用硝普钠释放NO法测定NO自由基含量的变化;采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析iNOS mRNA表达改变。结果芦荟大黄素在0.69~2.50mg·L-1剂量范围内可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞NO的释放,并呈剂量和时间依赖关系;芦荟大黄素在0.63~5.00mg·L-1剂量范围内可下调LPS诱导的RAW264.7细胞iNOS mRNA含量;而此范围内芦荟大黄素无直接清除NO自由基作用,不影响iNOS活性。结论芦荟大黄素可明显降低LPS诱导的RAW264.7细胞NO释放,呈时间和剂量依赖关系,此作用并非通过捕捉NO或抑制iNOS活性来实现,而是通过抑制iNOS mRNA表达发挥作用的。 展开更多
关键词 炎症 芦荟大黄素 脂多糖 小鼠巨噬细胞raw264.7细胞 一氧化氮 诱生型一氧化氮合酶
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广枣黄酮清除自由基能力及抗氧化性能的细胞模型法评价 被引量:27
7
作者 杨云舒 姜子涛 李荣 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第9期92-97,共6页
利用制备色谱将广枣黄酮分离成F1和F2两个组分。分别测定广枣黄酮、F1和F2的总抗氧化能力、清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、羟自由基(·OH)以及超氧阴离子自由基(O2-·)的能力,并与... 利用制备色谱将广枣黄酮分离成F1和F2两个组分。分别测定广枣黄酮、F1和F2的总抗氧化能力、清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、羟自由基(·OH)以及超氧阴离子自由基(O2-·)的能力,并与常见的抗氧化剂VC进行对比。结果表明:广枣黄酮具有良好的抗氧化效果,总黄酮的抗氧化能力介于F1和F2之间;F1对DPPH自由基的清除能力以及F1和F2对·OH的清除能力均高于VC,而在总抗氧化能力以及清除O2-·方面F1和F2的效果均弱于VC。另外,细胞模型法评价结果显示,广枣黄酮可清除小鼠巨噬细胞RAW264.7内的活性氧,表现出明显的抗氧化活性。 展开更多
关键词 广枣黄酮 总抗氧化能力 自由基清除活性 细胞抗氧化活性 小鼠巨噬细胞raw264.7
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甜叶菊废渣提取物及其主要成分异绿原酸的抗炎作用 被引量:22
8
作者 赵磊 张会敏 +5 位作者 徐美利 鲍玺 艾欣 陈艳麟 王成涛 连运河 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第5期117-124,共8页
目的:研究甜叶菊废渣提取物及其主要成分异绿原酸的抗炎作用。方法:通过建立LPS诱导小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)炎症模型和角叉菜胶致小鼠足部肿胀模型,以一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)等为检测指... 目的:研究甜叶菊废渣提取物及其主要成分异绿原酸的抗炎作用。方法:通过建立LPS诱导小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)炎症模型和角叉菜胶致小鼠足部肿胀模型,以一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)等为检测指标,检测甜叶菊废渣提取物及其主要成分异绿原酸的体内外抗炎作用。结果:体外RAW264.7细胞炎症模型结果显示,甜叶菊废渣提取物及其主要成分异绿原酸均能抑制RAW264.7细胞产生NO,抗炎效果为异绿原酸C≈甜叶菊废渣提取物>异绿原酸A。3种样品对小鼠足肿胀有显著的抑制作用,抑制效果为异绿原酸C>异绿原酸A≈甜叶菊废渣提取物。高剂量的甜叶菊废渣提取物及其主要成分异绿原酸能抑制小鼠肝脏NO的生成,甜叶菊废渣提取物和异绿原酸C可显著降低小鼠血清NO和PGE2含量,且异绿原酸A与异绿原酸C能显著提高小鼠SOD活性并降低MDA含量,减轻机体自由基损伤。3种样品对小鼠肝脏PGE2生成无显著影响。结论:甜叶菊废渣提取物中的异绿原酸类物质具有很好的抗炎效果。 展开更多
关键词 甜叶菊废渣提取物 异绿原酸 小鼠单核巨噬细胞(raw264.7) 角叉菜胶 抗炎
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大粒车前子多糖对RAW264.7细胞一氧化氮生成的影响 被引量:20
9
作者 陈一晴 聂少平 +2 位作者 黄丹菲 韩澄 谢明勇 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1119-1120,共2页
关键词 大粒车前子 多糖 小鼠巨噬细胞raw264.7 一氧化氮 MTT 免疫活性
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小鼠巨噬细胞RAW264.7的培养技巧及经验总结 被引量:18
10
作者 方瑶 毛旭虎 《现代生物医学进展》 CAS 2012年第22期4358-4359,共2页
RAW264.7细胞具有很强的黏附和吞噬抗原的能力,是研究微生物学、免疫学的常用细胞株。很多研究者发现这种细胞形态极不稳定,细胞状态的评价也很困难。本文作者结合RAW264.7培养经历及文献资料探讨RAW264.7细胞培养的经验教训和评价细胞... RAW264.7细胞具有很强的黏附和吞噬抗原的能力,是研究微生物学、免疫学的常用细胞株。很多研究者发现这种细胞形态极不稳定,细胞状态的评价也很困难。本文作者结合RAW264.7培养经历及文献资料探讨RAW264.7细胞培养的经验教训和评价细胞状态的方法,旨在为培养该细胞的科研工作者提供一定的借鉴。 展开更多
关键词 小鼠巨噬细胞raw264.7(TIB-71) 细胞培养 细胞形态
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响应面法优化日本黄姑鱼鱼肉免疫活性肽的提取工艺 被引量:11
11
作者 胡旭阳 李维 +5 位作者 孔祥东 韩行标 唐云平 余方苗 杨最素 丁国芳 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第17期173-178,共6页
为探讨日本黄姑鱼鱼肉免疫活性肽的提取工艺,本研究以日本黄姑鱼鱼肉为原料,采用5种不同的蛋白酶进行酶解,以酶解多肽对小鼠巨噬细胞RAW264.7的相对增殖率为指标,在单因素实验的基础上,以料液比、pH、酶解温度和酶解时间为考察因素,采用... 为探讨日本黄姑鱼鱼肉免疫活性肽的提取工艺,本研究以日本黄姑鱼鱼肉为原料,采用5种不同的蛋白酶进行酶解,以酶解多肽对小鼠巨噬细胞RAW264.7的相对增殖率为指标,在单因素实验的基础上,以料液比、pH、酶解温度和酶解时间为考察因素,采用Box-Behnken法进行四因素三水平试验设计,确定日本黄姑鱼鱼肉免疫活性肽的最佳提取工艺。结果表明,木瓜蛋白酶为最佳用酶;响应面优化得到的最佳提取工艺参数为:料液比1∶11 g/mL、pH6、酶解温度59℃、酶解时间5.4 h,在此条件下,酶解多肽对RAW 264.7细胞的相对增殖率为61.8%。本研究为日本黄姑鱼鱼肉提取免疫活性肽奠定基础,为进一步研究日本黄姑鱼鱼肉免疫肽的制备工艺提供参考。 展开更多
关键词 日本黄姑鱼 免疫活性肽 响应面 小鼠巨噬细胞raw264.7
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青蒿乙素对脂多糖诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7炎症反应的抑制及机制 被引量:7
12
作者 王晶 徐颖 张庆 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2021年第1期39-43,共5页
目的探讨青蒿乙素的抗炎活性及其作用机制。方法采用细菌脂多糖(LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7建立炎症反应模型,经青蒿乙素处理后,采用Griess试剂检测NO的含量;采用酶联免疫法(ELISA)检测促炎症因子的水平;采用Western Blot检测炎... 目的探讨青蒿乙素的抗炎活性及其作用机制。方法采用细菌脂多糖(LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7建立炎症反应模型,经青蒿乙素处理后,采用Griess试剂检测NO的含量;采用酶联免疫法(ELISA)检测促炎症因子的水平;采用Western Blot检测炎症相关蛋白及激酶的表达水平。结果青蒿乙素能明显抑制RAW264.7细胞中LPS诱导的NO生成,且呈现剂量依赖性,半数抑制浓度(IC50)为4.72μmol·L^(-1)。同时,青蒿乙素也能明显抑制LPS刺激的RAW264.7细胞中诱导性一氧化氮合酶和环氧化酶2的蛋白表达,并降低肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的释放。青蒿乙素还能明显抑制LPS所致的IκBα蛋白降解,但是对LPS诱导的ERK、JNK、p38 MAPK活化无明显抑制作用。结论青蒿乙素对LPS所致的RAW264.7细胞炎症反应具有明显的抑制作用,其抗炎机制可能与减少IκBα蛋白降解,进而抑制核转录因子κB炎症信号通路有关。 展开更多
关键词 青蒿乙素 小鼠单核巨噬细胞raw264.7 脂多糖 抗炎作用 核转录因子-κB信号通路
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日本黄姑鱼鱼皮免疫活性肽的酶解制备工艺研究 被引量:6
13
作者 董晓泽 徐书敏 +5 位作者 王丽君 赵越 王世光 唐云平 余方苗 丁国芳 《浙江海洋大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2020年第2期110-116,共7页
为研究日本黄姑鱼鱼皮免疫活性肽酶解工艺,以日本黄姑鱼鱼皮为原料,以小鼠单核巨噬细胞RAW264.7的相对增殖率为评价指标,筛选最优酶种并考察pH、温度、时间、加酶量、液料比对小鼠巨噬细胞RAW264.7相对增殖率的影响。再经单因素实验,响... 为研究日本黄姑鱼鱼皮免疫活性肽酶解工艺,以日本黄姑鱼鱼皮为原料,以小鼠单核巨噬细胞RAW264.7的相对增殖率为评价指标,筛选最优酶种并考察pH、温度、时间、加酶量、液料比对小鼠巨噬细胞RAW264.7相对增殖率的影响。再经单因素实验,响应面分析法对其酶解工艺进行优化。结果表明,最优酶种和酶解条件为中性蛋白酶,pH 7.0,温度45.5℃,时间5.5 h,加酶量1500 U·g^-1,液料比10:1(mL·g^-1),所得酶解产物作用于RAW 264.7的相对增殖率为57.47%。本研究为日本黄姑鱼鱼皮的高附加值利用提供依据。 展开更多
关键词 日本黄姑鱼鱼皮 免疫活性肽 小鼠巨噬细胞raw264.7 响应面实验
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黄酒多肽的多级分离纯化及其对小鼠巨噬细胞免疫调节的影响 被引量:5
14
作者 冯瑞雪 史瑛 +4 位作者 姬中伟 钱肖华 徐岳正 毛健 许正宏 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第13期289-295,共7页
本研究以黄酒为原料,通过大孔树脂吸附、凝胶色谱等方法多级分离纯化黄酒中活性肽组分,并探究各级分离肽组分对小鼠巨噬细胞RAW264.7免疫调节作用的影响。通过脂多糖LPS(1μg/mL)刺激RAW264.7细胞建立体外炎症模型,以不同浓度的各级分... 本研究以黄酒为原料,通过大孔树脂吸附、凝胶色谱等方法多级分离纯化黄酒中活性肽组分,并探究各级分离肽组分对小鼠巨噬细胞RAW264.7免疫调节作用的影响。通过脂多糖LPS(1μg/mL)刺激RAW264.7细胞建立体外炎症模型,以不同浓度的各级分离纯化的黄酒多肽样品进行干预,对NO释放抑制率最高的黄酒多肽组分进行结构分析。结果表明,可通过大孔树脂初步分离纯化黄酒活性多肽。对3种不同型号大孔树脂的吸附解析性能进行比较,最终选择DA201-C大孔吸附树脂富集黄酒多肽,收集洗脱液旋蒸冻干后获得黄酒多肽SJ组分。采用MTT法检测细胞活力,黄酒多肽SJ作用RAW264.7细胞的安全范围为≤2.5 mg/mL。采用Griess Reagent法检测细胞培养液中一氧化氮(NO)含量,与LPS模型组相比,黄酒多肽SJ浓度为0.3、0.6、1.2、2.5 mg/mL时能明显抑制NO释放(抑制率分别为20.85%、36.42%、68.58%、95.01%)。黄酒多肽SJ经Sephadex G-15凝胶色谱柱分离得到3个组分即G1、G2、G3,分别收集这三组洗脱峰并测定其对RAW264.7细胞NO分泌量的影响。研究发现G1组分活性高于其他2种组分,G1、G2、G3的NO释放半抑制浓度分别是0.68、0.86、0.75 mg/mL。对G1组分进行氨基酸组成分析得知其疏水氨基酸占比32.63%,必需氨基酸占比28.46%。研究结果证明黄酒多肽能显著抑制LPS诱导的RAW264.7分泌NO,对LPS刺激的RAW264.7细胞炎症具有保护作用,从而促使巨噬细胞发挥免疫作用。 展开更多
关键词 黄酒多肽 结构鉴定 小鼠巨噬细胞raw264.7 免疫调节活性
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TMAO通过CD147/MMPs通路诱导巨噬细胞活化 被引量:5
15
作者 刘奇林 薛毅 +4 位作者 赖晓辉 杜大勇 柳杨 张涛 李运田 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期91-96,共6页
肠道菌群代谢产物氧化三甲胺(trimethylamine N-oxide,TMAO)可通过多种途径促进动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的进展,现研究发现,在临床上其与斑块稳定性存在密切联系,但其分子机制目前尚不明确。金属蛋白酶诱导因子(extracellular ... 肠道菌群代谢产物氧化三甲胺(trimethylamine N-oxide,TMAO)可通过多种途径促进动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的进展,现研究发现,在临床上其与斑块稳定性存在密切联系,但其分子机制目前尚不明确。金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,CD147)/基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是目前研究认为与斑块稳定性高度相关的信号通路,能通过削弱纤维帽的厚度等方式促进斑块不稳定性,导致心血管不良事件的发生。因此,本研究通过TMAO刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7建立细胞模型,观察对CD147、MMP2以及MMP9的影响,并进一步使用siRNA转染的方法构建CD 147基因沉默模型,探讨CD147与MMP2、MMP9的相互作用关系。RT-qPCR和Western印迹结果发现,CD147在小鼠巨噬细胞RAW264.7中基因表达水平上无明显变化,但在蛋白质水平上表达明显增加(P<0.05),而MMP2、MMP9在mRNA和蛋白质水平上均出现表达增加(P<0.05);进一步在经CD 147 siRNA转染的细胞为对象的实验中发现,CD147、MMP2、MMP9的表达均受到明显抑制(P<0.05)。综上可得出结论,TMAO可以显著增加小鼠巨噬细胞RAW264.7中MMP2、MMP9的表达,且这一作用可能部分通过CD147/MMPs通路实现。 展开更多
关键词 氧化三甲胺 斑块稳定性 基质金属蛋白酶 动脉粥样硬化 小鼠巨噬细胞raw264.7 金属蛋白酶诱导因子CD147
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银杏叶多糖对炎症小鼠TNF-α表达的影响 被引量:6
16
作者 张丽娇 高立宏 费瑞 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第16期172-173,共2页
为了研究银杏叶多糖(PGBL)的抗炎作用,试验制备了动物抗炎模型,用ELISA法检测血清中TNF-α的表达量;并采用脂多糖(LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞),再用ELISA法检测培养上清液中TNF-α的表达量。结果表明:PGBL能明显抑... 为了研究银杏叶多糖(PGBL)的抗炎作用,试验制备了动物抗炎模型,用ELISA法检测血清中TNF-α的表达量;并采用脂多糖(LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞),再用ELISA法检测培养上清液中TNF-α的表达量。结果表明:PGBL能明显抑制炎症小鼠TNF-α的表达;0.050 g/mL和0.500 g/mL的PGBL能显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞TNF-α的表达。说明PGBL的抗炎作用是通过抑制TNF-α表达量实现的。 展开更多
关键词 银杏叶多糖(PGBL) TNF-Α 小鼠单核巨噬细胞(raw264.7) 炎症 脂多糖(LPS)
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STAT5通路抑制剂匹莫齐特对RAW264.7细胞炎症模型NO和iNOS表达的影响 被引量:4
17
作者 喻鹏久 万利梅 谢慧 《中国药房》 CAS 北大核心 2015年第22期3043-3045,共3页
目的:研究STAT5通路抑制剂匹莫齐特对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症模型一氧化氮(NO)和一氧化氮合成酶(i NOS)表达的影响。方法:取对数生长期RAW264.7细胞,分为空白对照组、药物对照(匹莫齐特10μmol/L)组、模型(LPS 1μg/... 目的:研究STAT5通路抑制剂匹莫齐特对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症模型一氧化氮(NO)和一氧化氮合成酶(i NOS)表达的影响。方法:取对数生长期RAW264.7细胞,分为空白对照组、药物对照(匹莫齐特10μmol/L)组、模型(LPS 1μg/ml)组和匹莫齐特低、中、高浓度(2.5、5、10μmol/L)组,给予LPS前30 min给予匹莫齐特,继续培养24 h。采用Griess法检测各组细胞培养液上清中NO的含量;实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测i NOS m RNA表达;Western blot法检测i NOS和磷酸化STAT5(p-STAT5)的蛋白表达。结果:与空白对照组比较,模型组细胞中NO含量、i NOS m RNA和蛋白表达、p-STAT5/STAT5均增加,差异具有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,匹莫齐特中、高浓度组细胞中NO含量、i NOS m RNA和蛋白表达、p-STAT5/STAT5均降低,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:STAT5通路抑制剂匹莫齐特可通过抑制细胞中i NOS m RNA和蛋白的表达而抑制NO的释放。 展开更多
关键词 匹莫齐特 脂多糖 小鼠巨噬细胞raw264.7 STAT5通路 一氧化氮 一氧化氮合成酶
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新疆疏花蔷薇花的体外抗氧化活性
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作者 冯倩倩 赵文惠 +2 位作者 李安林 郭瑛 田莉 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2024年第9期153-159,共7页
研究新疆特色植物资源疏花蔷薇花不同极性部位的体外抗氧化活性,为该药材的后续研究提供参考。制备疏花蔷薇花的石油醚(E1)、二氯甲烷(E2)、乙酸乙酯(E3)、正丁醇(E4)等不同极性部位提取物,考察其+对DPPH、ABTS和羟基自由基的清除能力... 研究新疆特色植物资源疏花蔷薇花不同极性部位的体外抗氧化活性,为该药材的后续研究提供参考。制备疏花蔷薇花的石油醚(E1)、二氯甲烷(E2)、乙酸乙酯(E3)、正丁醇(E4)等不同极性部位提取物,考察其+对DPPH、ABTS和羟基自由基的清除能力评价体外抗氧化活性;以抗氧化活性最高的E4为研究对象,以D-半乳糖诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7建立体外氧化损伤模型,设立对照组、模型组、Vc组、E4(低、中、高剂量)组,CCK-8法测定细胞存活率,测定细胞中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、乳酸脱氢酶、过氧化氢酶的活力及丙二醛含量。疏花蔷薇花不同极性部位抗氧化活性大小为E4>E3>E2>E1,其中E3、E4清除自由基能力较强,并且呈明显剂量依赖效应。当E4质量浓度为3.13~12.50μg/mL时,RAW264.7细胞的存活率均≥80%,无明显毒性;各剂量组可显著促进RAW264.7细胞存活率(P<0.05),并呈剂量依赖性提高细胞中SOD、GSH-PX、LDH、CAT活力,降低MDA含量。结果表明疏花蔷薇花具有良好的体外抗氧化能力。 展开更多
关键词 疏花蔷薇花 不同极性提取部位 体外抗氧化 小鼠巨噬细胞raw264.7
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无乳链球菌与小鼠巨噬细胞互作转录组测序分析
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作者 杨岚 张永安 周洋 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期307-315,共9页
巨噬细胞是先天性免疫系统的重要组成部分,但无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)却能在巨噬细胞内存活并以巨噬细胞为载体入侵中枢神经系统。为解析无乳链球菌在巨噬细胞内的存活机制,将无乳链球菌HN016与RAW264.7共孵育,提取胞内细... 巨噬细胞是先天性免疫系统的重要组成部分,但无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)却能在巨噬细胞内存活并以巨噬细胞为载体入侵中枢神经系统。为解析无乳链球菌在巨噬细胞内的存活机制,将无乳链球菌HN016与RAW264.7共孵育,提取胞内细菌RNA后进行转录组测序(RNA-seq)、Gene Ontology(GO)及Kyoto encyclopedia of genes and genomes(KEGG)富集分析;于体外将HN016与罗非鱼原代巨噬细胞孵育,提取胞内细菌RNA,并利用quantitative real-time PCR(qPCR)验证目标基因(包括:sip、fbsA、cylB、cylD、cylE、neuA、cpsB和cfb)表达情况。结果显示,与无处理组相比,共筛选到1 215个差异表达基因(DEG),其中896个上调基因,319个下调基因。GO富集结果显示,DEG在分子功能、生物学过程和细胞组分3大类中均显著富集。KEGG富集结果显示,显著富集通路主要为ABC转运体、核糖体和群体感应等代谢途径。在DEG中,筛选到无乳链球菌毒力相关基因27个,包括fbsA(+8.65)、sip(+6.28)、cylD(+4.93)和cfb(-4.65)等,并利用qPCR验证RNA-seq结果,二者数据一致。而检测罗非鱼原代巨噬细胞内存活细菌的转录水平发现其目标基因的表达水平与小鼠巨噬细胞的相似。因此推测,无乳链球菌在被巨噬细胞吞入后,巨噬细胞内的有害环境增强了无乳链球菌的信号传导机制,刺激了无乳链球菌的能量运输和对巨噬细胞所产生的次生代谢物代谢的能力,并且提高了毒力相关基因的表达水平。 展开更多
关键词 无乳链球菌 小鼠巨噬细胞raw264.7 胞内存活 次生代谢物
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木犀草素·4,4′-联吡啶药物共晶对小鼠巨噬细胞RAW264.7的抗炎作用研究 被引量:4
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作者 刘立新 邹冬玉 +2 位作者 张羽男 张强 张楠楠 《中国药房》 CAS 北大核心 2018年第5期602-606,共5页
目的:研究木犀草素·4,4′-联吡啶药物共晶的抗炎作用及机制。方法:以正常小鼠巨噬细胞RAW264.7为对照,以脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞为炎症模型,采用MTT法检测不同浓度(10、20、40、80μmol/L)的木犀草素、4,4′-联吡啶和木犀草... 目的:研究木犀草素·4,4′-联吡啶药物共晶的抗炎作用及机制。方法:以正常小鼠巨噬细胞RAW264.7为对照,以脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞为炎症模型,采用MTT法检测不同浓度(10、20、40、80μmol/L)的木犀草素、4,4′-联吡啶和木犀草素·4,4′-联吡啶药物共晶作用细胞2 h后的细胞活性;荧光定量聚合酶链式反应法测定40μmol/L浓度时细胞中诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、环氧合酶2(COX-2)m RNA的表达,酶联免疫吸附法测定40μmol/L浓度时细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)蛋白表达,Western blot法测定40μmol/L浓度时细胞中核转录因子p65(NF-κB p65)蛋白表达。结果:与正常细胞比较,LPS诱导后RAW264.7细胞活性明显降低(P<0.01),i NOS和COX-2 m RNA表达水平及TNF-α、IL-6、NF-κB p65蛋白表达水平均明显升高(P<0.01)。木犀草素和木犀草素·4,4′-联吡啶药物共晶均能增强LPS诱导后RAW264.7细胞活性(P<0.05或P<0.01),且呈浓度依赖性;4,4′-联吡啶对LPS诱导后RAW264.7细胞活性无明显影响;40μmol/L浓度下,木犀草素和木犀草素·4,4′-联吡啶药物共晶可使LPS诱导后细胞中i NOS和COX-2 m RNA表达水平及TNF-α、IL-6、NF-κB p65蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),其中木犀草素·4,4′-联吡啶药物共晶降低效果强于木犀草素(P<0.05或P<0.01)。结论:木犀草素·4,4′-联吡啶药物共晶可能通过下调NF-κB信号来抑制炎症相关因子产生,其抗炎作用优于木犀草素。 展开更多
关键词 木犀草素 4 4′-联吡啶 药物共晶 小鼠巨噬细胞raw264.7 抗炎作用
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