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小鼠双微体扩增基因反义寡核苷酸在血管平滑肌细胞中的摄取动力学研究 被引量：1
1
作者 付鹏 韩巍 +2 位作者 姜廷军 赵长久 尹雪松 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第5期405-408,共4页
目的研究小鼠双微体扩增基因(mouse double minute 2,mdm2)反义寡核苷酸(antisense oli-gonucleotide,ASON)在血管平滑肌细胞中的摄取动力学,探讨mdm2反义寡核苷酸包埋支架防治支架内再狭窄的可行性。方法人工合成一段针对mdm2 mRNA的... 目的研究小鼠双微体扩增基因(mouse double minute 2,mdm2)反义寡核苷酸(antisense oli-gonucleotide,ASON)在血管平滑肌细胞中的摄取动力学,探讨mdm2反义寡核苷酸包埋支架防治支架内再狭窄的可行性。方法人工合成一段针对mdm2 mRNA的反义寡核苷酸,以肼基尼古酰胺(HYNIC)作为双功能螯合剂进行99 Tcm标记,以脂质体包裹99 Tcm标记的ASON,不同时间检测脂质体包裹的ASON在血管平滑肌细胞中的摄取和清除情况,并与未经脂质体包裹的ASON在平滑肌细胞中的摄取及清除情况比较。结果 ASON的标记率为(52.30±2.03)%,经纯化后放化纯达95%以上。平滑肌细胞对脂质体包裹的ASON的摄取峰值为(48.22±2.39)%,且明显高于未经脂质体包裹的ASON,脂质体包裹的ASON的清除率在各时间点均低于未经脂质体包裹的ASON。结论 mdm2的反义寡核苷酸经脂质体包裹后,平滑肌细胞对反义寡核苷酸能达到较大的摄取比率,清除较缓慢。mdm2反义寡核苷酸有望被进一步应用于药洗脱支架研究。 展开更多
关键词 小鼠双微体扩增基因 平滑肌细胞 寡核苷酸 脂质体
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MDM2反义寡核苷酸对血管平滑肌细胞MDM2和p53表达的影响
2
作者 尹雪松 付鹏 +4 位作者 姜廷军 赵长久 彭城海 任仲侨 赵侃 《现代生物医学进展》 CAS 2012年第31期6051-6054,共4页
目的:研究小鼠双微体扩增基因(mouse double minute 2;MDM2)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide;ASON)对血管平滑肌细胞MDM2和p53表达的影响,探讨MDM2反义寡核苷酸包埋支架防治支架内再狭窄的可行性。方法:人工合成一段针对MDM2 m... 目的:研究小鼠双微体扩增基因(mouse double minute 2;MDM2)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide;ASON)对血管平滑肌细胞MDM2和p53表达的影响,探讨MDM2反义寡核苷酸包埋支架防治支架内再狭窄的可行性。方法:人工合成一段针对MDM2 mRNA的反义寡核苷酸,脂质体包裹不同浓度ASON转染兔血管平滑肌细胞,RT-PCR和Western-blotting检测MDM2反义寡核苷酸对兔血管平滑肌细胞MDM2和p53表达的影响。结果:不同浓度MDM2反义寡核苷酸作用于兔血管平滑肌细胞后,MDM2和p53 mRNA表达量各浓度组之间有显著性差异(P<0.01),MDM2和p53蛋白表达量各浓度组之间有显著性差异(P<0.01)。结论:MDM2反义寡核苷酸体外能够特异性抑制兔血管平滑肌细胞MDM2表达,提高细胞内p53基因表达量,MDM2反义寡核苷酸有望被进一步应用于药洗脱支架研究。 展开更多
关键词 小鼠双微体扩增基因 平滑肌细胞 寡核苷酸 脂质体
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^99Tc^m标记MDM2反义寡核苷酸对人前列腺癌细胞目的基因表达的影响 被引量：3
3
作者 吴琼 张月红 +2 位作者 付鹏 田国梅 赵长久 《中华核医学与分子影像杂志》 CSCD 北大核心 2014年第2期125-129,共5页
目的探讨99Tcm标记的小鼠双微体扩增基因2（MDM2）mRNA的ASON和错义寡核苷酸（ASONM）对前列腺癌细胞株LNCaP目的基因表达的影响，为后续的前列腺癌基因显像奠定基础。方法人工合成一段针对MDM2mRNA的ASON和ASONM，以HYNIC为螯合剂，对A... 目的探讨99Tcm标记的小鼠双微体扩增基因2（MDM2）mRNA的ASON和错义寡核苷酸（ASONM）对前列腺癌细胞株LNCaP目的基因表达的影响，为后续的前列腺癌基因显像奠定基础。方法人工合成一段针对MDM2mRNA的ASON和ASONM，以HYNIC为螯合剂，对ASON和ASONM进行99Tcm标记，检测标记率、放化纯、稳定性及分子杂交活性。用脂质体包裹驰TcTM-HYNIC．ASON（0、100和500nmol／L）和99Tcm-HYNIC-ASONM（500nmol／L），于LNCaP细胞中培养24h，再行RT-PCR和Westernblot实验，观察探针对MDM2、p53mRNA和相应蛋白质表达的影响。各组间计量资料比较采用单因素方差分析和g检验。结果ASON的标记率为（65．15±2．05）％（n=5），ASONM的标记率为（64．93±2．18）％（n=5），两者放化纯均达90％以上。99Tcm-HYNIC-ASON稳定性好，保留了与互补链结合的能力。0、100、500nmo]／L99Tcm-HYNIC-ASON组和500nmol／LTcmHYNIC-ASONM组MDM2mRNA含量分别为0．458±0．035、0．250±0．026、0．174±0．032、0．463±0．033。除0nmol／L99Tcm．HYNIC-ASON组与500nmol／L99Tcm-HYNIC-ASONM组间外，余差异均有统计学意义（F=33．69，q=24．32-91．45，均P〈0．01）；各组MDM2蛋白的平均密度分别为90．712±3．042、71．2184-2．915、32．775±3．062、88．121±2．710，同样除0nmol／L99Tcm．HYNIC．ASON组与500nmol／L99Tcm-HYNIC-ASONM组间外，余差异均有统计学意义（F=235．93，g：6．43～19．14，均P〈0．01）。4组p53mRNA含量分别为0．185±0．046、0．203±0．040、0．213±0．027、0．163±0．049，差异无统计学意义（F=2．18，P〉0．05）；各组p53蛋白平均密度分别为33．865±2．213、70．445±2．180、99．025±3．012、38．351±3．271，除0nmol／L99Tcm-HYNIC-ASON组与500nmol／L99Tcm-HYNIC-ASONM组间外，余差异均有统计学意义（F=53．98，g=3．32-6．74，均P〈0．01）。结论MDM2反义探针能与MDM2mRNA链上的目的序列特异结合，并抑制 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 基因表达 寡核苷酸类 反义 锝 小鼠双微体扩增基因2
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