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白术多糖调控钙离子以促进细胞迁移及E-钙黏蛋白表达的研究 被引量:38
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作者 伍婷婷 李茹柳 +4 位作者 曾丹 胡玲 时玉霞 王东旭 陈蔚文 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期145-150,共6页
目的观察白术多糖对大鼠小肠上皮细胞(IEC-6)钙离子水平、细胞迁移和E-钙黏蛋白表达的影响,探讨益气健脾中药白术促进胃肠黏膜损伤修复的作用机制。方法:流式细胞仪检测白术多糖对细胞游离钙离子水平([Ca^(2+)]cyt)的影响;划痕法复制细... 目的观察白术多糖对大鼠小肠上皮细胞(IEC-6)钙离子水平、细胞迁移和E-钙黏蛋白表达的影响,探讨益气健脾中药白术促进胃肠黏膜损伤修复的作用机制。方法:流式细胞仪检测白术多糖对细胞游离钙离子水平([Ca^(2+)]cyt)的影响;划痕法复制细胞迁移模型,观察白术多糖对细胞迁移的影响;Western blot法和免疫荧光法检测白术多糖对细胞E-钙黏蛋白表达的影响。结果白术多糖(25,50,100 mg·L^(-1))可增加细胞[Ca^(2+)]cyt、促进细胞迁移、提高E-钙黏蛋白表达,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);可逆转多胺合成抑制剂α-二氟甲基鸟氨酸(DFMO)所致的[Ca^(2+)]cyt降低、细胞迁移抑制和E-钙黏蛋白表达减少,与DFMO组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论白术多糖可通过提高细胞钙离子水平以促进细胞迁移和E-钙黏蛋白表达,为探讨益气健脾中药白术修复胃肠黏膜损伤的作用机制提供参考。 展开更多
关键词 白术多糖 小肠上皮细胞 游离钙离子水平 细胞迁移 E-钙黏蛋白
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黄芪和白术提取物对IEC-6细胞迁移的影响 被引量:30
2
作者 胡灿 李茹柳 +2 位作者 王静 徐颂芬 陈蔚文 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期60-65,共6页
目的筛选益气健脾中药黄芪和白术促进小肠上皮细胞(IEC-6)迁移的有效提取部位。方法以系统溶剂分离法从黄芪、白术药材分别得到糖复合物、正丁醇萃取物、醇沉上清液以及大孔树脂吸附后70%乙醇洗脱部位作受试药。IEC-6细胞接种于6孔板并... 目的筛选益气健脾中药黄芪和白术促进小肠上皮细胞(IEC-6)迁移的有效提取部位。方法以系统溶剂分离法从黄芪、白术药材分别得到糖复合物、正丁醇萃取物、醇沉上清液以及大孔树脂吸附后70%乙醇洗脱部位作受试药。IEC-6细胞接种于6孔板并培养24 h,划痕法造细胞迁移模型,划痕后加入各受试药,24 h后观察细胞迁移情况;并进一步观察具有促进细胞迁移的有效部位对二氟甲基鸟氨酸(DFMO)所致细胞迁移抑制的影响。结果 50 mg.L-1的黄芪糖复合物或白术糖复合物能促进细胞迁移(P<0.01);黄芪、白术的正丁醇萃取物、醇沉上清液、大孔树脂吸附后醇洗脱部位对细胞迁移均无明显影响;2.5 mmol.L-1的DFMO能抑制细胞迁移(P<0.01),加入DFMO同时加入100 mg.L-1黄芪糖复合物或200 mg.L-1白术糖复合物能使细胞迁移恢复至接近正常水平。结论黄芪糖复合物和白术糖复合物能促进IEC-6细胞迁移,还能使DFMO所致的细胞迁移抑制恢复至接近正常水平。 展开更多
关键词 小肠上皮细胞 黄芪 白术 提取物 细胞迁移
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新生大鼠小肠上皮细胞分离培养研究 被引量:14
3
作者 戴定威 吴圣楣 +2 位作者 李敏 廖贤平 刘再涌 《细胞生物学杂志》 CSCD 1997年第1期31-34,共4页
本实验比较了4种分离大鼠IEC的方法,结果显示联合应用粗胶原酶和中性蛋白酶分离效果最好,细胞贴壁生长能力强。胶原涂膜改善玻璃培养瓶或盖玻片表面的性状有利于细胞贴壁生长。细胞的增殖依赖于培养液的质量、成分及细胞间的相互作用。... 本实验比较了4种分离大鼠IEC的方法,结果显示联合应用粗胶原酶和中性蛋白酶分离效果最好,细胞贴壁生长能力强。胶原涂膜改善玻璃培养瓶或盖玻片表面的性状有利于细胞贴壁生长。细胞的增殖依赖于培养液的质量、成分及细胞间的相互作用。培养细胞一般1~2天贴壁,7~8天明显增殖,10~14天汇合成片。培养细胞细胞角质蛋白、碱性磷酸酶染色阳性,光镜和电镜检查均显示为IEC。本文所建立的新生大鼠IEC体外培养方法为研究IEC生理和病理提供了一个十分有用的实验模型。 展开更多
关键词 小肠上皮细胞 分离技术 原代培养
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临床护理路径在小儿轮状病毒肠炎患者中的应用 被引量:22
4
作者 许明芳 李红芹 《山西医药杂志》 CAS 2014年第19期2353-2354,共2页
轮状病毒肠炎是病毒感染小肠上皮细胞,造成细胞损伤,引起的腹泻病。多发生在秋、冬季,表现为发热、呕吐、腹痛及腹泻水样或蛋花汤样大便,常并发脱水、酸中毒及电解质紊乱,又称秋季腹泻。本病为自限性疾病,病程约3-8d。临床护理路径(CP... 轮状病毒肠炎是病毒感染小肠上皮细胞,造成细胞损伤,引起的腹泻病。多发生在秋、冬季,表现为发热、呕吐、腹痛及腹泻水样或蛋花汤样大便,常并发脱水、酸中毒及电解质紊乱,又称秋季腹泻。本病为自限性疾病,病程约3-8d。临床护理路径(CP)是20世纪80年代由美国开发的标准化诊疗护理模式,是一种跨学科、综合的、深化整体护理的医疗护理模式。 展开更多
关键词 小儿轮状病毒肠炎 临床护理路径 医疗护理模式 应用 患者 小肠上皮细胞 电解质紊乱 自限性疾病
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人类小肠上皮细胞原代培养方法探讨 被引量:15
5
作者 廖贤平 李敏 《武警医学》 CAS 1998年第5期251-253,共3页
介绍一种人类小肠上皮细胞原代培养方法,采用16~24周引产胎儿小肠,比较3种小肠上皮细胞分离方法,探讨最佳培养条件。结果发现应用胶原酶/中性蛋白酶消化可获满意的上皮细胞分离效果,细胞贴壁良好。培养10~12d细胞达到... 介绍一种人类小肠上皮细胞原代培养方法,采用16~24周引产胎儿小肠,比较3种小肠上皮细胞分离方法,探讨最佳培养条件。结果发现应用胶原酶/中性蛋白酶消化可获满意的上皮细胞分离效果,细胞贴壁良好。培养10~12d细胞达到融合,并保持对碱性磷酸酶的表达,提示小肠上皮细胞繁殖十分依赖于培养基和底物质量。 展开更多
关键词 人类 小肠上皮细胞 培养
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党参黄酮提取部位对小肠上皮细胞迁移及多胺的影响 被引量:19
6
作者 李茹柳 曾丹 +4 位作者 温鹏 陶玉珠 赵世清 陈炜璇 陈蔚文 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期523-526,共4页
目的观察党参黄酮提取部位对小肠上皮细胞(IEC-6)迁移及迁移过程细胞内多胺(精脒)含量的影响。方法划痕法复制细胞迁移模型,观察在多胺合成抑制剂二氟甲基鸟氨酸(DFMO)及钾通道抑制剂4-氨基吡啶(4-AP)负荷下,党参黄酮提取部位对细胞迁... 目的观察党参黄酮提取部位对小肠上皮细胞(IEC-6)迁移及迁移过程细胞内多胺(精脒)含量的影响。方法划痕法复制细胞迁移模型,观察在多胺合成抑制剂二氟甲基鸟氨酸(DFMO)及钾通道抑制剂4-氨基吡啶(4-AP)负荷下,党参黄酮提取部位对细胞迁移的影响;柱前衍生-高效液相色谱法检测给予党参黄酮提取部位12 h和24 h后细胞内精脒的含量。结果党参黄酮提取部位可促进IEC-6细胞迁移,逆转DFMO或4-AP所致细胞迁移抑制;党参黄酮提取部位给药12 h和24 h后可提高细胞内精脒含量。结论党参黄酮提取部位促进细胞迁移的作用与影响多胺调控信号通路有关。 展开更多
关键词 党参黄酮 多胺 小肠上皮细胞 细胞迁移
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大豆异黄酮对大鼠小肠上皮细胞生长及葡萄糖和氨基酸吸收的影响 被引量:16
7
作者 林成招 马海田 +2 位作者 邹思湘 陈伟华 王国杰 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期71-75,共5页
分离培养了SD大鼠的小肠上皮细胞, 用3H TdR掺入法分别检测了 0、0 1、1、10、100和 1 000ng·mL-1 2种大豆异黄酮 (大豆黄酮和染料木素) 对该细胞生长的影响, 并测定了细胞碱性磷酸酶活性的变化。同时, 利用翻转的离体小肠囊研究... 分离培养了SD大鼠的小肠上皮细胞, 用3H TdR掺入法分别检测了 0、0 1、1、10、100和 1 000ng·mL-1 2种大豆异黄酮 (大豆黄酮和染料木素) 对该细胞生长的影响, 并测定了细胞碱性磷酸酶活性的变化。同时, 利用翻转的离体小肠囊研究了 0、0 1、0 5、1和 5μg·mL-1大豆异黄酮对小肠葡萄糖与氨基酸吸收的影响, 并检测了小肠黏膜总ATP酶活性的变化。结果显示: 100ng·mL-1的大豆异黄酮 (大豆黄酮、染料木素 ) 能够提高该细胞3H TdR的掺入量和碱性磷酸酶的活性, 提示大豆异黄酮可能有促小肠细胞生长的活性; 0 1和 0 5ng·mL-1的大豆黄酮和 0 5和 1 0ng·mL-1的染料木素对离体小肠葡萄糖的吸收具有促进作用, 而对赖氨酸与色氨酸的吸收以及小肠黏膜总ATP酶的活性没有明显影响。 展开更多
关键词 大豆异黄酮 大鼠 小肠上皮细胞 葡萄糖 氨基酸 小肠吸收
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甘草糖提取物对小肠上皮细胞迁移及多胺含量影响的研究 被引量:17
8
作者 温鹏 随晶晶 +3 位作者 李茹柳 赵世清 卢文彪 陈蔚文 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1112-1116,共5页
目的:观察甘草糖提取物对小肠上皮细胞(IEC-6)迁移及细胞内多胺(腐胺、精脒和精胺)含量的影响。方法:划痕法造细胞损伤后迁移模型,柱前衍生-高效液相色谱法测定细胞内多胺含量。观察甘草糖复合物对细胞迁移及细胞内多胺含量的影响;观察... 目的:观察甘草糖提取物对小肠上皮细胞(IEC-6)迁移及细胞内多胺(腐胺、精脒和精胺)含量的影响。方法:划痕法造细胞损伤后迁移模型,柱前衍生-高效液相色谱法测定细胞内多胺含量。观察甘草糖复合物对细胞迁移及细胞内多胺含量的影响;观察甘草糖复合物对二氟甲基鸟氨酸(DFMO)致细胞迁移抑制和多胺合成抑制的影响。结果:甘草糖提取物(50、100 mg/L)能促进细胞迁移;可逆转由DFMO所致的细胞迁移抑制;可提高细胞迁移过程中细胞内多胺含量;可逆转由DFMO所致的多胺含量降低。结论:甘草对胃肠黏膜损伤的修复作用可能与其提高细胞多胺含量、促进细胞迁移有关。 展开更多
关键词 甘草 糖复合物 多胺 小肠上皮细胞 细胞迁移
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新生儿乳糖不耐受 被引量:17
9
作者 姜毅 《中国新生儿科杂志》 CAS 2014年第6期414-417,共4页
新生儿乳糖不耐受症是由于乳糖酶缺乏,不能完全消化分解母乳或牛乳中的乳糖所引起的一系列消化系统症状。乳糖是主要存在于哺乳动物乳汁中的一种双糖,母乳中乳糖含量为7.2 g/100 ml,牛乳中乳糖含量为4.7 g/100 ml。乳制品是新生儿主要... 新生儿乳糖不耐受症是由于乳糖酶缺乏,不能完全消化分解母乳或牛乳中的乳糖所引起的一系列消化系统症状。乳糖是主要存在于哺乳动物乳汁中的一种双糖,母乳中乳糖含量为7.2 g/100 ml,牛乳中乳糖含量为4.7 g/100 ml。乳制品是新生儿主要的能量来源,乳糖为新生儿提供约20%的能量。在生长发育过程中,乳糖不仅在能量供给方面起重要作用,亦参与大脑的发育进程。 展开更多
关键词 乳糖不耐受 乳糖酶缺乏 乳糖含量 乳糖酶基因 配方奶 肠吸收 半乳糖血症 消化系统症状 小肠上皮细胞 短链脂肪酸
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党参、甘草皂苷和黄酮部位对IEC-6细胞迁移的影响 被引量:14
10
作者 赵世清 温鹏 +2 位作者 李茹柳 卢文彪 陈蔚文 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期78-81,共4页
目的:观察党参、甘草的皂苷和黄酮提取部位对小肠上皮细胞(IEC-6)迁移的影响。方法:以回流提取法分别提取党参和甘草的皂苷、黄酮部位,并用D101大孔吸附树脂对各部位进行分离纯化,以分光光度法检测含量。IEC-6细胞种植于6孔板并培养24小... 目的:观察党参、甘草的皂苷和黄酮提取部位对小肠上皮细胞(IEC-6)迁移的影响。方法:以回流提取法分别提取党参和甘草的皂苷、黄酮部位,并用D101大孔吸附树脂对各部位进行分离纯化,以分光光度法检测含量。IEC-6细胞种植于6孔板并培养24小时,划痕法造细胞迁移模型,划痕后加入各种受试药,24小时后观察细胞迁移情况。结果:党参和甘草黄酮含量(以芦丁计)分别为41.73%和50.98%;党参皂苷含量(以人参皂苷Re计)为40.57%;甘草皂苷含量(以甘草酸计)为57.01%。50mg/L的党参黄酮部位和甘草黄酮部位能促进细胞迁移(P<0.05);党参和甘草的皂苷部位对细胞迁移无明显影响。结论:党参、甘草黄酮部位有促进IEC-6细胞迁移作用,党参、甘草皂苷部位对IEC-6细胞迁移无明显影响。 展开更多
关键词 党参 甘草 黄酮 皂苷 小肠上皮细胞 细胞迁移
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党参、甘草糖提取物对小肠上皮细胞迁移多胺信号通路的影响 被引量:14
11
作者 李茹柳 陶玉珠 +3 位作者 曾丹 赵世清 林传权 陈蔚文 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期245-251,共7页
目的观察益气健脾中药党参、甘草的糖提取物对小肠上皮细胞(IEC-6)迁移过程多胺介导钾通道激活信号通路的影响,探讨党参、甘草促进胃肠黏膜损伤修复的作用机制。方法在IEC-6细胞迁移模型上,于正常或抑制多胺(加入DFMO)时,观察党参、甘... 目的观察益气健脾中药党参、甘草的糖提取物对小肠上皮细胞(IEC-6)迁移过程多胺介导钾通道激活信号通路的影响,探讨党参、甘草促进胃肠黏膜损伤修复的作用机制。方法在IEC-6细胞迁移模型上,于正常或抑制多胺(加入DFMO)时,观察党参、甘草糖提取物对该信号通路的作用:(1)Western blot检测钾通道蛋白Kv1.1蛋白表达;(2)流式细胞仪检测细胞膜电位;(3)激光共聚焦显微镜检测细胞内Ca^(2+)水平;(4)Western blot检测Ca^(2+)下游指标RhoA蛋白表达。结果党参、甘草糖提取物在细胞迁移过程可以:(1)提高Kv1.1蛋白表达水平,改善DFMO所致Kv1.1蛋白表达下降;(2)提高细胞膜电位超极化水平,逆转DFMO所致细胞膜电位去极化;(3)提高细胞内Ca^(2+)水平,党参糖提取物可逆转DFMO所致Ca^(2+)水平降低;(4)提高RhoA蛋白表达水平,改善DFMO所致RhoA蛋白表达降低。结论党参、甘草糖提取物促进IEC-6细胞迁移的作用机制与其影响多胺介导钾通道激活信号通路有关。 展开更多
关键词 党参 甘草 糖提取物 小肠上皮细胞 迁移 作用机制
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黄芪注射液对失血性休克兔小肠上皮细胞超微结构的影响 被引量:11
12
作者 林世清 黑子清 +3 位作者 陈秉学 刘卫锋 莫利求 黄文起 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期443-446,共4页
目的 观察黄芪注射液对兔失血性休克小肠超微结构的影响。方法24只大白兔随机分为3组,每组平均8只,分别是H1组:20g/kg黄芪注射液治疗组;H2组:10g/kg黄芪注射液治疗组;C组:生理盐水对照组。复制兔重度失血性休克及复苏的动物模型,实验时... 目的 观察黄芪注射液对兔失血性休克小肠超微结构的影响。方法24只大白兔随机分为3组,每组平均8只,分别是H1组:20g/kg黄芪注射液治疗组;H2组:10g/kg黄芪注射液治疗组;C组:生理盐水对照组。复制兔重度失血性休克及复苏的动物模型,实验时取回肠末端组织一份行电子显微镜检查,并测量线粒体二维形态计量学参数和三维形态计量学参数。结果 电镜下可见H1组上皮细胞柱状排列紧密,微绒毛整齐,线粒体丰富,无肿胀;H2组上皮细胞核缩小,微绒毛细、短、肿胀、排列不整,线粒体轻度肿胀,嵴不清,内质网扩张;C组细胞间隙增宽,可见大量的凋亡细胞,微绒毛短、粗、肿胀,部分脱落,线粒体肿胀,嵴断裂,内质网显著扩张,部分呈币状。小肠上皮细胞线粒体体视学参数显示C组上皮细胞单位胞浆内线粒体少,肿胀;H2组的线粒体数目减少,有较明显肿胀;H1组线粒体丰富,肿胀轻微。结论 黄芪注射液对失血性休克损伤兔小肠上皮细胞超微结构有保护作用,并呈一定的量效关系。 展开更多
关键词 失血性休克 黄芪注射液 中药制剂 小肠上皮细胞 超微结构
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牛初乳酶解物对离体犊牛小肠上皮细胞增殖和吸收功能的影响 被引量:8
13
作者 马玉敏 王恬 许若军 《动物营养学报》 CAS CSCD 2002年第2期9-13,共5页
初乳经胃蛋白酶水解处理90分钟后所产生的水解物对离体犊牛小肠上皮细胞有明显的促增殖作用(P<0.01) ,而初乳经胰蛋白酶处理则不表现促增殖活性。初乳酶解物对促进细胞吸收葡萄糖的作用随着酶解处理时间的延长而逐渐增强 ,初乳经胰... 初乳经胃蛋白酶水解处理90分钟后所产生的水解物对离体犊牛小肠上皮细胞有明显的促增殖作用(P<0.01) ,而初乳经胰蛋白酶处理则不表现促增殖活性。初乳酶解物对促进细胞吸收葡萄糖的作用随着酶解处理时间的延长而逐渐增强 ,初乳经胰蛋白酶水解处理90分钟或经胃蛋白酶水解处理150分钟时的产物对细胞吸收葡萄糖的促进作用分别达到最强(P<0.01)。试验结果表明 ,初乳酶解物即小分子蛋白质(肽)具有刺激离体小肠上皮细胞增殖和功能发育的活性。 展开更多
关键词 牛初乳 酶解物 离体犊牛 细胞增殖 吸收功能 小肠上皮细胞
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Effects of hydrogen peroxide on mitochondrial gene expression of intestinal epithelial cells 被引量:13
14
作者 Jian-Ming Li Qian Cai Hong Zhou Guang-Xia Xiao,Institute of Burn Research,Southwest Hospital,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2002年第6期1117-1122,共6页
AIM: To study the effects of hydrogen peroxide on mitochondrial gene expression of intestinal epithelial cells in in vitro model of hydrogen peroxide-stimulated SW-480 cells.METHODS: RNA of hydrogen peroxide-induced S... AIM: To study the effects of hydrogen peroxide on mitochondrial gene expression of intestinal epithelial cells in in vitro model of hydrogen peroxide-stimulated SW-480 cells.METHODS: RNA of hydrogen peroxide-induced SW-480 cells was isolated, and reverse-transcriptional polymerase chain reaction was performed to study gene expression of ATPase subunit 6, ATPase subunit 8, cytochrome c oxidase subunit Ⅰ (COⅠ), cytochrome coxidase subuit Ⅱ (COⅡ) and cytochrome c oxidase subunit Ⅲ (COⅢ). Mitochondria were isolated and activities of mitochondrial cytochrome c oxidase and ATPase were also measured simultaneously.RESULTS: Hydrogen peroxide led to differential expression of mitochondrial genes with some genes up-regulated or down-regulated in a dose dependent manner. Differences were very obvious in expressions of mitochondrial genes of cells treated with hydrogen peroxide in a concentration of 400 μmol/L or 4 mmol/L. In general, differential expression of mitochondrial genes was characterized by up-regulation of mitochondrial genes in the concentration of 400 μmol/L and down-regulation in the concentration of 4 mmol/L. In consistence with changes in mitochondrial gene expressions, hydrogen peroxide resulted in decreased activities of cytochrome c oxidase and ATPase.CONCLUSIONS: The differential expression of mitochondrial genes encoding cytochrome c oxidase and ATPase is involved in apoptosis of intestinal epithelial cells by affecting activities of cytochorme c oxidase and ATPase. 展开更多
关键词 过氧化氢 小肠上皮细胞 线粒体 基因表达 烧伤
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药物从人小肠上皮细胞模型排放的动力学模型 被引量:8
15
作者 陈纪岳 胡明 朱彦平 《上海医科大学学报》 CSCD 1996年第4期247-251,共5页
一种体外培养的人小肠上皮细胞模型(Caco-2)已应用于药物在小肠细胞中的摄入、排放和过细胞输运等过程的研究。本工作旨在对排放过程的动力学模型进行探讨。实验测定多种药物在Caco-2细胞模型的排放,分别用动力学一级、... 一种体外培养的人小肠上皮细胞模型(Caco-2)已应用于药物在小肠细胞中的摄入、排放和过细胞输运等过程的研究。本工作旨在对排放过程的动力学模型进行探讨。实验测定多种药物在Caco-2细胞模型的排放,分别用动力学一级、二级及多项式方程对排放进行数据拟合,用AIC(Akaike’sinformationcriterion)值评判拟合的优劣,并将拟合结果与实际排放作比较。结果:动力学二级模型的拟合度最好,由拟合得到的排放初速和最大排放量等数据与实验量相符合。结论:药物从Caco-2细胞的排放是表观二级的。由此可以计算药物排放的初速、最大排放量及半衰期等重要的动力学参数。 展开更多
关键词 CACO-2 曲线拟合 小肠上皮细胞 模型 药物排放
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丙氨酰-谷氨酰胺二肽对仔猪小肠上皮细胞间紧密连接蛋白occludin定位与表达的影响 被引量:12
16
作者 邓宸玺 王自蕊 +4 位作者 游金明 瞿明仁 叶亚玲 辛向荣 潘珂 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期694-700,共7页
本试验以分离自仔猪空肠上皮的IPEC-1细胞为模型,探讨丙氨酰-谷氨酰胺二肽(Ala-Gln)对仔猪小肠上皮细胞间紧密连接蛋白occludin定位与表达的影响。试验选取同代IPEC-1细胞接种至6块6孔细胞培养板上,分别用含0(对照组)、0.25、0.50、1.00... 本试验以分离自仔猪空肠上皮的IPEC-1细胞为模型,探讨丙氨酰-谷氨酰胺二肽(Ala-Gln)对仔猪小肠上皮细胞间紧密连接蛋白occludin定位与表达的影响。试验选取同代IPEC-1细胞接种至6块6孔细胞培养板上,分别用含0(对照组)、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00 mmol/L Ala-Gln的DM EM高糖培养基进行培养,待细胞生长融合达70%以上时,对occludin进行免疫荧光定位和蛋白质印迹(Western Blot)检测。结果表明:1)对照组细胞可见其胞质内存在团状的阳性荧光染色,而细胞间连接处阳性荧光染色不明显;随着Ala-Gln浓度的升高,细胞间连接处荧光信号逐渐增强,细胞轮廓更加清晰,而胞质内荧光信号逐渐减弱。2)各添加组IPEC-1细胞间occludin的相对表达量均极显著高于对照组(P<0.01)。随着Ala-Gln浓度的升高,occludin的相对表达量呈先增后减的趋势,添加量为2.00 mmol/L时达到峰值,且极显著高于其他添加量(P<0.01)。由此可知,Ala-Gln可以上调仔猪小肠上皮细胞间紧密连接蛋白occludin的表达,促进细胞间紧密连接结构的形成,进而增强仔猪小肠黏膜的屏障功能。 展开更多
关键词 仔猪 小肠上皮细胞 紧密连接 丙氨酰-谷氨酰胺二肽
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兔小肠上皮细胞体外分离培养 被引量:12
17
作者 刘飞飞 车东升 +4 位作者 穆成龙 张海全 王波 孙泽威 秦贵信 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期429-432,共4页
选用新生未哺乳仔兔,应用胶原酶Ⅳ消化法对小肠上皮进行分离培养,得到兔小肠上皮细胞后,联合应用相差消化法和相差贴壁法对兔小肠上皮细胞进行纯化。通过形态学观察及细胞免疫组织化学方法对所得到的纯化兔小肠上皮细胞进行鉴定。结果表... 选用新生未哺乳仔兔,应用胶原酶Ⅳ消化法对小肠上皮进行分离培养,得到兔小肠上皮细胞后,联合应用相差消化法和相差贴壁法对兔小肠上皮细胞进行纯化。通过形态学观察及细胞免疫组织化学方法对所得到的纯化兔小肠上皮细胞进行鉴定。结果表明:应用胶原酶Ⅳ消化法得到的兔小肠上皮细胞生长状况良好,纯化后得到95%以上纯度的兔小肠上皮细胞,纯化所得的兔小肠上皮细胞经形态学观察及细胞角蛋白8单克隆抗体鉴定为阳性。 展开更多
关键词 小肠上皮细胞 原代培养 鉴定
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延迟复苏对烫伤大鼠小肠上皮细胞凋亡及相关基因表达的影响 被引量:9
18
作者 张诚 盛志勇 +5 位作者 于晟 刘毅 吕艺 胡森 高建川 张世范 《西北国防医学杂志》 CAS 2002年第2期87-89,共3页
目的 :探讨延迟复苏对烫伤大鼠肠粘膜上皮细胞凋亡百分率 (ap % )及凋亡相关基因表达的影响。方法 :Wistar大鼠 30只 ,随机分为立即复苏组 (ER)和延迟复苏组 (DR) ;30 %体表面积Ш度烫伤 ,采用DNA片段百分率测定、电泳和RT -PCR法观察... 目的 :探讨延迟复苏对烫伤大鼠肠粘膜上皮细胞凋亡百分率 (ap % )及凋亡相关基因表达的影响。方法 :Wistar大鼠 30只 ,随机分为立即复苏组 (ER)和延迟复苏组 (DR) ;30 %体表面积Ш度烫伤 ,采用DNA片段百分率测定、电泳和RT -PCR法观察伤后小肠粘膜上皮细胞ap %和ICE、bcl- 2基因表达。结果 :大鼠烫伤后小肠上皮ap %显著高于伤前 (P <0 .0 1) ;DR组肠上皮ap %显著高于ER组 (P <0 .0 5~ 0 .0 1)。DNA电泳可见明确梯形条带。烫伤后肠上皮ICE基因表达明显增强 ,DR组ICE基因表达显著高于ER组 (P <0 .0 1)。Bcl- 2基因伤前在肠粘膜不表达 ,伤后极弱表达 ,两组比较无显著性差异。结论 :烫伤延迟复苏后小肠上皮凋亡显著增加 ;促凋亡基因ICE和抑凋亡基因bcl- 展开更多
关键词 烧伤 延迟复苏 细胞凋亡 基因表达 小肠上皮细胞 大鼠
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外源核苷酸对异育银鲫幼鱼消化酶活性的影响 被引量:10
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作者 王锐 王春维 +1 位作者 李星燕 李琴 《中国水产》 北大核心 2008年第3期70-72,共3页
核苷酸是动物体内一种重要的低分子化合物,对动物体的胃肠道功能、机体免疫系统、机体抗氧化功能以及动物的生产性能等很多方面有着重要影响,已经被认为是一种新型的饲料添加剂。在畜禽中体外试验发现,添加核苷酸后小肠上皮细胞中碱性... 核苷酸是动物体内一种重要的低分子化合物,对动物体的胃肠道功能、机体免疫系统、机体抗氧化功能以及动物的生产性能等很多方面有着重要影响,已经被认为是一种新型的饲料添加剂。在畜禽中体外试验发现,添加核苷酸后小肠上皮细胞中碱性磷酸酶、 展开更多
关键词 外源核苷酸 消化酶活性 异育银鲫 机体免疫系统 幼鱼 低分子化合物 动物体内 小肠上皮细胞
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谷氨酰胺对体外培养人小肠上皮细胞缺氧复氧损伤的保护作用 被引量:6
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作者 戴定威 吴圣楣 +2 位作者 李敏 陈惠金 蔡威 《氨基酸和生物资源》 CAS 1997年第3期1-3,共3页
应用原代培养人胎小肠上皮细胞(IEC),观察了谷氨酰胺(GLN)对缺氧复氧(A/R)损伤人IEC的影响。结果:缺氧60min复氧30min后,细胞内乳酸脱氢酶(LDH)漏出量显著上升,细胞存活率显著下降。预先应用1~... 应用原代培养人胎小肠上皮细胞(IEC),观察了谷氨酰胺(GLN)对缺氧复氧(A/R)损伤人IEC的影响。结果:缺氧60min复氧30min后,细胞内乳酸脱氢酶(LDH)漏出量显著上升,细胞存活率显著下降。预先应用1~5mmol/LGLN可使A/R损伤IEC细胞存活率升高和细胞内LDH漏出量减少,GLN作用的最佳剂量为2mmol/L。提示GLN对人IEC具有直接的保护作用,这可能是其整体保护作用机制之一。 展开更多
关键词 谷氨酰胺 小肠上皮细胞 缺氧 复氧损伤
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