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结缔组织生长因子特异性小分子干扰RNA的筛选及其在抗肝纤维化中的作用
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作者 毛小荣 岳伟 +2 位作者 袁宏 陈红 薛苗 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期603-608,共6页
目的:设计和合成针对抗肝纤维化关键基因结缔组织生长因子(connective tissue growthfactor,CTGF)的特异性小干扰RNA(siRNA),并筛选高效的CTGFsiRNA抗肝纤维化序列,探讨其通过尾静脉注射是否具有抗大鼠肝纤维化作用。方法:①筛选高效的C... 目的:设计和合成针对抗肝纤维化关键基因结缔组织生长因子(connective tissue growthfactor,CTGF)的特异性小干扰RNA(siRNA),并筛选高效的CTGFsiRNA抗肝纤维化序列,探讨其通过尾静脉注射是否具有抗大鼠肝纤维化作用。方法:①筛选高效的CTGF siRNA序列。②干预肝纤维化模型大鼠。选取雄性SD大鼠30只,随机分成5组,分别为空白对照组尾静脉注射生理盐水8周;模型组腹腔注射40%CCl4(3 ml/kg)及尾静脉注射生理盐水,1次/3d,连续8周;预防组腹腔注射40%CCl4及尾静脉注射CTGF siRNA(0.1 mg/kg),1次/3 d,连续8周;2周治疗组腹腔注射40%CCl42周,后给予CTGF siRNA及CCl4 6周;4周治疗组腹腔注射40%CCl4 4周,后给予CTGFsiRNA及CCl4 4周。于最后一次CCl4注射3天后取血及组织标本,检测肝纤维化指标,应用Real-Time PCR及Western印迹法检测CTGF mRNA及蛋白质在大鼠肝组织表达,应用Masson染色检测肝组织纤维化。结果:与模型组(0.544±0.019)相比,预防组(0.105±0.003)及治疗组(0.190±0.006)大鼠肝组织CTGF mRNA和蛋白质表达显著下调(P<0.05),肝组织炎症和坏死及纤维化明显减轻,肝纤维化指标显著降低(P<0.05)。4周治疗组与模型组相比各指标降低,与预防组及2周治疗组相比各指标相对升高(P<0.05)。结论:成功筛选出高效的CTGF siRNA,且经尾静脉注射CTGF siRNA能显著抑制大鼠体内肝脏CTGF基因表达,并能有效防治大鼠肝纤维化,对于病程较长的肝纤维化也有一定的治疗作用,提示CTGF siRNA在抗肝纤维化治疗中有重要作用。 展开更多
关键词 RNA 小分子干扰/药理学 胞间信号肽类和蛋白质类/生物合成 肝硬化/病理学 疾病模型 动物 结缔组织生长因子 小分子干扰RNA 肝纤维化
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