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在Hep G2细胞中利用siRNA沉默GFP基因的实验探讨
1
作者
陈旷
《江汉大学学报（自然科学版）》
2007年第3期73-76,共4页
目的:通过探讨小分子双链RNA(siRNA)通过RNA干扰(RNAi)机制沉默肝癌细胞株Hep G2荧光素报告基因GFP的各项生物学指标,为进一步实验和临床研究提供依据.方法:通过体外实验,对siRNA和siRNA脂质体的稳定性和细胞毒性进行评估;通过荧光标记...
目的:通过探讨小分子双链RNA(siRNA)通过RNA干扰(RNAi)机制沉默肝癌细胞株Hep G2荧光素报告基因GFP的各项生物学指标,为进一步实验和临床研究提供依据.方法:通过体外实验,对siRNA和siRNA脂质体的稳定性和细胞毒性进行评估;通过荧光标记技术,研究不同时间siRNA脂质体的转染效率;通过荧光显微镜下观察转染细胞和RT-PCR检测靶基因mRNA表达,确定不同种类、形式、剂量的siRNA对靶基因的沉默效能.结果:在空白培养液中,siRNA和siRNA脂质体可稳定至4h,在5%血清中2～4h后明显降解;100nM的siRNA和siRNA脂质体无明显细胞毒性;siRNA脂质体转染细胞株的效率随时间不同而不同,4h可达90%;非特异性siRNA/脂质体无沉默靶基因表达作用,特异性siRNA/脂质体对靶基因的沉默作用在一定范围内随剂量升高(20nM、50nM、100nM)而升高.结论:siRNA的稳定性可满足实验需要,且无明显细胞毒性,特异性siRNA转染肝癌细胞株能有效抑制靶基因表达,用脂质体转染可提高转染效率.siRNA通过RNAi机制沉默靶基因表达,为肿瘤的治疗和基础研究提供了新的工具和思路.
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关键词
小
分子
双链
rna
rna
干扰
HEP
G2
绿色荧光蛋白基因
肝癌细胞株
下载PDF
职称材料
RNAa基因表达调控模式
2
作者
张萍
王伟
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期117-121,共5页
RNA干扰（RNA interference,RNAi）是生物体内普遍存在的一种基因表达调控机制。1998年,Fire等[1]以秀丽隐杆线虫为研究对象,第一次在实验室中揭示了基因沉默现象,并指出诱导这种作用的是一种含有21～25个核苷酸的小干扰RNA（short inte...
RNA干扰（RNA interference,RNAi）是生物体内普遍存在的一种基因表达调控机制。1998年,Fire等[1]以秀丽隐杆线虫为研究对象,第一次在实验室中揭示了基因沉默现象,并指出诱导这种作用的是一种含有21～25个核苷酸的小干扰RNA（short interfering RNAs，siRNAs）。因这一发现，Fire等被授予了2006年诺贝尔生理学或医学奖。
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关键词
rna
激活
基因表达调控
小
分子
双链
rna
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职称材料
题名
在Hep G2细胞中利用siRNA沉默GFP基因的实验探讨
1
作者
陈旷
机构
华中科技大学同济医学院基础医学院
江汉大学学报编辑部
出处
《江汉大学学报（自然科学版）》
2007年第3期73-76,共4页
文摘
目的:通过探讨小分子双链RNA(siRNA)通过RNA干扰(RNAi)机制沉默肝癌细胞株Hep G2荧光素报告基因GFP的各项生物学指标,为进一步实验和临床研究提供依据.方法:通过体外实验,对siRNA和siRNA脂质体的稳定性和细胞毒性进行评估;通过荧光标记技术,研究不同时间siRNA脂质体的转染效率;通过荧光显微镜下观察转染细胞和RT-PCR检测靶基因mRNA表达,确定不同种类、形式、剂量的siRNA对靶基因的沉默效能.结果:在空白培养液中,siRNA和siRNA脂质体可稳定至4h,在5%血清中2～4h后明显降解;100nM的siRNA和siRNA脂质体无明显细胞毒性;siRNA脂质体转染细胞株的效率随时间不同而不同,4h可达90%;非特异性siRNA/脂质体无沉默靶基因表达作用,特异性siRNA/脂质体对靶基因的沉默作用在一定范围内随剂量升高(20nM、50nM、100nM)而升高.结论:siRNA的稳定性可满足实验需要,且无明显细胞毒性,特异性siRNA转染肝癌细胞株能有效抑制靶基因表达,用脂质体转染可提高转染效率.siRNA通过RNAi机制沉默靶基因表达,为肿瘤的治疗和基础研究提供了新的工具和思路.
关键词
小
分子
双链
rna
rna
干扰
HEP
G2
绿色荧光蛋白基因
肝癌细胞株
Keywords
si
rna
rna
i
HepG2
GFP
hepatocarcinomacell
分类号
Q74 [生物学—分子生物学]
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
RNAa基因表达调控模式
2
作者
张萍
王伟
机构
华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科
出处
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期117-121,共5页
文摘
RNA干扰（RNA interference,RNAi）是生物体内普遍存在的一种基因表达调控机制。1998年,Fire等[1]以秀丽隐杆线虫为研究对象,第一次在实验室中揭示了基因沉默现象,并指出诱导这种作用的是一种含有21～25个核苷酸的小干扰RNA（short interfering RNAs，siRNAs）。因这一发现，Fire等被授予了2006年诺贝尔生理学或医学奖。
关键词
rna
激活
基因表达调控
小
分子
双链
rna
分类号
Q343.1 [生物学—遗传学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
在Hep G2细胞中利用siRNA沉默GFP基因的实验探讨
陈旷
《江汉大学学报（自然科学版）》
2007
0
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职称材料
2
RNAa基因表达调控模式
张萍
王伟
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
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职称材料
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