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家蚕蛹表达的重组Vp28疫苗对克氏原螯虾的抗病毒保护效应 被引量:14
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作者 魏克强 许梓荣 《实验生物学报》 CSCD 北大核心 2005年第3期190-198,共9页
对虾白斑综合症病毒(WSSV)的致病性强、危害性大、地域分布和宿主范围广泛,目前还不能有效地控制疫情。将含有WSSV囊膜蛋白Vp28基因的重组杆状病毒HyNPV-Vp28感染家蚕(Bombyx mori)蛹,对发病蚕血淋巴进行SDS-PAGE和Western blotting分析... 对虾白斑综合症病毒(WSSV)的致病性强、危害性大、地域分布和宿主范围广泛,目前还不能有效地控制疫情。将含有WSSV囊膜蛋白Vp28基因的重组杆状病毒HyNPV-Vp28感染家蚕(Bombyx mori)蛹,对发病蚕血淋巴进行SDS-PAGE和Western blotting分析,结果表明Vp28在家蚕体内得到了表达。将重组病毒囊膜蛋白rVp28疫苗配制成药饵,持续口服免疫75天,对克氏原螯虾进行预防WSSV,实验虾分为2%重组Vp28疫苗、2%普通蚕蛹组织匀浆(阳性对照)和普通饵料(阴性对照)3个处理组。免疫35天后进行口服攻毒,20天内rVp28疫苗组的累积存活率为63.33%,与阳性和阴性对照比差异显著(P<0.05),PRP分别达54.16%和59.26%;注射攻毒后20 天内rVp28疫苗组的累积存活率与阳性和阴性对照组比差异不显著(P>0.05),PRP分别为46.12% 和49.99%。第55天对存活虾再口服攻毒,20天内rVp28疫苗组与阳性和阴性对照组比累积存活率差异显著(P<0.05),PRP分别为55.80%和63.16%;二次注射攻毒后,rVp28疫苗组的PRP均为31.25%。对vVp28疫苗组存活虾的胃、肠和肝胰腺组织进行病毒的原位杂交检测均呈阴性反应,而对照组死亡虾组织都呈阳性反应。本研究表明,口服免疫家蚕蛹表达的病毒囊膜蛋白Vp28能诱导螯虾产生抗病毒保护作用,对应用疫苗预防对虾的病毒性疾病具有重要意义。 展开更多
关键词 VP28 克氏原螯虾 病毒 家蚕蛹 保护效应 表达 对虾白斑综合症病毒 累积存活率 Western 阴性对照 重组杆状病毒 囊膜蛋白 WSSV 口服免疫 差异显著 病毒性疾病 PRP 宿主范围 地域分布 控制疫情 PAGE 重组病毒 阳性对照
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浙江省南美白对虾苗种五种流行病病原检测与分析 被引量:14
2
作者 郑晓叶 许俊榆 +2 位作者 郑天伦 朱凝瑜 曹飞飞 《中国动物检疫》 CAS 2018年第8期17-22,共6页
为了解浙江省南美白对虾主产区苗种主要病原的携带情况,对杭州、宁波、嘉兴和绍兴4个地区的苗种场开展了病原检测。129批次样品的检测结果显示:有4种病原检出阳性,阳性检出率分别为南美白对虾白斑综合症病毒(WSSV)1.55%、传染性皮下及... 为了解浙江省南美白对虾主产区苗种主要病原的携带情况,对杭州、宁波、嘉兴和绍兴4个地区的苗种场开展了病原检测。129批次样品的检测结果显示:有4种病原检出阳性,阳性检出率分别为南美白对虾白斑综合症病毒(WSSV)1.55%、传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)20.93%、虾肝肠胞虫(EHP)31.78%、虾血细胞虹彩病毒(SHIV)37.21%,而桃拉综合症病毒(TSV)未有阳性检出。结果表明,SHIV、EHP、IHHNV是浙江省对虾苗种携带的主要病原,需要重点加以防范。从整体分布看,宁波市南美白对虾苗中携带的病原种类最多,且携带率较高,提示宁波市需要加强防控。从苗种来源看,来自福建省虾苗的IHHNV携带率最高,为38.10%;来自海南省和广东省虾苗中存在WSSV感染,检出率分别为2.17%和2.27%;来自广东省虾苗的EHP和SHIV携带率最高,分别为43.48%和41.30%。由于浙江省南美白对虾苗种主要依靠外地输入,而这些输出地区的苗种病原感染率较高,因此浙江省需要加强从这些地区引入苗种的检疫工作。 展开更多
关键词 南美白对虾 虾苗 对虾白斑综合症病毒 传染性皮下及造血组织坏死病毒 虾肝肠胞虫 虾血细胞虹彩病毒 桃拉综合症病毒 浙江省
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三种对虾病毒在浙江省凡纳滨对虾中的流行性调查研究 被引量:11
3
作者 林开 侯崇林 +2 位作者 谢荣辉 吴晓果 杜华华 《水产科学》 CAS 北大核心 2013年第3期161-164,共4页
对虾白斑综合症病毒、桃拉综合症病毒及传染性皮下与造血组织坏死病病毒是目前威胁对虾养殖业较为严重的3种病毒。分别从浙江省6个凡纳滨对虾的主养殖区随机采样对虾699尾,通过PCR检测对虾的病毒携带情况。检测结果显示,6个养殖地区传... 对虾白斑综合症病毒、桃拉综合症病毒及传染性皮下与造血组织坏死病病毒是目前威胁对虾养殖业较为严重的3种病毒。分别从浙江省6个凡纳滨对虾的主养殖区随机采样对虾699尾,通过PCR检测对虾的病毒携带情况。检测结果显示,6个养殖地区传染性皮下造血组织坏死病病毒检测结果均呈阳性,总阳性率达100%;萧山、舟山、象山养殖场的对虾白斑综合症病毒检测结果有阳性,总阳性率为5.58%;6个养殖场均未检测出桃拉综合症病毒。表明浙江省凡纳滨对虾养殖区域的桃拉综合症病毒得到了有效控制,传染性皮下造血组织坏死病病毒和对虾白班综合症病毒有较高的感染率,而且存在混合感染的情况。 展开更多
关键词 对虾白斑综合症病毒 桃拉综合症病毒 传染性皮下与造血组织坏死病病毒 凡纳滨对虾
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对虾白斑综合症病毒与虾鳃细胞膜特异性结合关系的确立 被引量:8
4
作者 易志刚 黄倢 +2 位作者 解飞霞 贾佩侨 李筠 《中国病毒学》 CSCD 2003年第3期295-297,共3页
对虾白斑综合症病素养(White spot syndrome virus,WSSV)是养殖对虾的一个主要病原,也是目前发现的基因组最大的动物病素养(基因组约290kDa,双链环状).
关键词 对虾白斑综合症病毒 虾鳃 细胞膜 特异性结合
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抗对虾白斑综合症病毒(WSSV)中草药的筛选及番石榴叶水提取物对WSSV致病性的影响 被引量:10
5
作者 郭志勋 李卓佳 +2 位作者 管淑玉 冯娟 文国樑 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第21期129-131,共3页
通过人工感染试验,比较了11种中草药水提取物对对虾白斑综合症病毒(WSSV)致病性的影响,在此基础上,研究了番石榴叶水提取物的浓度和处理时间对WSSV的消毒效果。结果表明,在11种中草药提取液中,仅有番石榴叶水提取物对WSSV有显著的杀灭作... 通过人工感染试验,比较了11种中草药水提取物对对虾白斑综合症病毒(WSSV)致病性的影响,在此基础上,研究了番石榴叶水提取物的浓度和处理时间对WSSV的消毒效果。结果表明,在11种中草药提取液中,仅有番石榴叶水提取物对WSSV有显著的杀灭作用,处理时间超过12 h可使WSSV失活,消毒效果与药物和病毒的相对浓度相关。 展开更多
关键词 番石榴 水提取物 对虾白斑综合症病毒 致病性
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对虾白斑综合症病毒的诊断和检测 被引量:6
6
作者 郑天伦 王国良 《海洋湖沼通报》 CSCD 2002年第3期65-70,共6页
关键词 对虾白斑综合症病毒 诊断 检测 目视观察法 电子显微技术 生化检验法 免疫学方法
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对虾白斑综合症病毒结构蛋白质VP24的定位研究 被引量:6
7
作者 谢希贤 杨丰 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期415-418,共4页
对虾白斑综合症病毒是一种新型的DNA病毒.VP24蛋白质是该病毒粒子的一个主要的结构蛋白质.当纯化的病毒粒子经去污剂处理后,VP24蛋白质被发现完全存在于囊膜部分,Western杂交实验也证实该结果,以上实验结果表明VP24蛋白质是病毒的一个... 对虾白斑综合症病毒是一种新型的DNA病毒.VP24蛋白质是该病毒粒子的一个主要的结构蛋白质.当纯化的病毒粒子经去污剂处理后,VP24蛋白质被发现完全存在于囊膜部分,Western杂交实验也证实该结果,以上实验结果表明VP24蛋白质是病毒的一个囊膜蛋白质.利用免疫胶体金定位技术对该蛋白质的进一步研究中发现,核衣壳上未见标记的金颗粒,完整的病毒粒子上标记的金颗粒也很少,而囊膜部分破损的病毒粒子上却可观察到大量的金颗粒.我们认为VP24蛋白质是一个囊膜蛋白质,但是它的主体可能存在于病毒的囊膜和核衣壳之间.VP24蛋白质的定位研究将加速阐明病毒感染和包装的机制,并将有助于病毒的诊断和控制. 展开更多
关键词 对虾白斑综合症病毒 VP24蛋白质 囊膜蛋白质
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温度影响对虾白斑综合症病毒增殖机制的研究 被引量:9
8
作者 李侃 罗淑娅 徐丽美 《应用海洋学学报》 CAS CSCD 2013年第1期61-66,共6页
已有文献报道温度是影响虾类感染对虾白斑综合症病毒(WSSV)的重要因素但并不清楚其机制.在本实验中我们通过定量检测病毒拷贝数后发现环境温度与病毒增殖速度有相关性.当温度在21~30℃之间时病毒增殖速度最快,病虾于感染后6~8 d全部... 已有文献报道温度是影响虾类感染对虾白斑综合症病毒(WSSV)的重要因素但并不清楚其机制.在本实验中我们通过定量检测病毒拷贝数后发现环境温度与病毒增殖速度有相关性.当温度在21~30℃之间时病毒增殖速度最快,病虾于感染后6~8 d全部死亡而高温(33℃)及较低温度(15~18℃)对病毒的增殖均具有一定的抑制作用,虾存活时间超过了14 d;当温度降至12℃或8℃时病毒增殖受到明显抑制,虾存活时间长达40 d.通过激光共聚焦显微镜观察进一步发现病毒进入宿主细胞的能力与温度密切相关,高温(33℃)和低温(12℃)下病毒进入细胞的数量明显比27℃时少;而通过对病毒ie1和vp28基因的转录分析发现与27℃相比,高温(33℃)和低温(12℃)明显改变了病毒基因的转录.本实验结果表明温度影响WSSV基因组的复制、转录及病毒入侵细胞的能力从而导致了病虾死亡时间上的差异. 展开更多
关键词 海洋生物学 对虾白斑综合症病毒 温度 ie1 VP28
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虾池中桡足类及其休眠卵携带对虾白斑综合症病毒的初步调查研究 被引量:5
9
作者 张家松 董双林 +3 位作者 董云伟 闫冬春 田相利 刘相义 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期405-408,412,共5页
探讨对虾白斑综合症(White Spot Syndrome WSS)与虾池中桡足类之间的关系,于2003年5~10月份,在暴发过对虾白斑综合症的池塘中采集桡足类样品共128个,并从冬季底泥样品分离出桡足类休眠卵样品20个,以及此种休眠卵孵化得来的桡足... 探讨对虾白斑综合症(White Spot Syndrome WSS)与虾池中桡足类之间的关系,于2003年5~10月份,在暴发过对虾白斑综合症的池塘中采集桡足类样品共128个,并从冬季底泥样品分离出桡足类休眠卵样品20个,以及此种休眠卵孵化得来的桡足类幼体样品5个。利用PCR斑点杂交法以及巢式PCR法检测样品中对虾白斑综合症病毒(White Spot Syndrome Virus WSSV)携带情况。结果表明,5~10月份桡足类样品中均能检测到阳性样品,总的阳性率为56.3%;其中,5月份样品阳性率为37.5%,6,8,9,10月份各取样1次,每次样品中的阳性率均在60%以上。在20例桡足类休眠卵样品中有1例为阳性,阳性率为5%;并且实验室中孵化此种休眠卵得来的桡足类幼体样品中检测到阳性,阳性率为40%。本研究初步表明,桡足类是WSSV的携带者或传播媒介之一,且冬季池塘底泥中携带WSSV的桡足类休眠卵可萌发出带病毒的桡足类。 展开更多
关键词 对虾白斑综合症病毒 桡足类 休眠卵 PCR斑点杂交法
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对虾白斑综合症病毒结构蛋白VP28的原核表达和性质研究 被引量:8
10
作者 赵新颜 魏聪 +2 位作者 戴玲芬 高宏 戴和平 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期234-239,共6页
VP2 8是对虾白斑综合症病毒 (Whitespotsyndromevirus ,WSSV)的一个重要的囊膜蛋白。为了便于研究VP2 8在和宿主细胞相互作用过程中扮演的角色 ,将VP2 8基因克隆到一个原核表达系统 ,对原核表达的VP2 8的特性进行了研究 ,并制备了抗VP2 ... VP2 8是对虾白斑综合症病毒 (Whitespotsyndromevirus ,WSSV)的一个重要的囊膜蛋白。为了便于研究VP2 8在和宿主细胞相互作用过程中扮演的角色 ,将VP2 8基因克隆到一个原核表达系统 ,对原核表达的VP2 8的特性进行了研究 ,并制备了抗VP2 8的多克隆抗体和单链抗体 ,对原核表达的和天然病毒的VP2 8蛋白免疫原性进行了比较。结果表示 ,原核表达的VP2 8与天然蛋白具有相似的免疫原性。 展开更多
关键词 对虾白斑综合症病毒 结构蛋白 VP28 原核表达 噬菌体抗体 免疫原性
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Genotyping of White Spot Syndrome Virus in Chinese Cultured Shrimp during 1998-1999 被引量:7
11
作者 Yan-wei Tan Zheng-li Shi 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2011年第2期123-130,共8页
Recent studies showed that white spot syndrome virus(WSSV) isolates from different geographic locations share a high genetic similarity except the variable regions in ORF23/24 and ORF14/15,and variable number of tande... Recent studies showed that white spot syndrome virus(WSSV) isolates from different geographic locations share a high genetic similarity except the variable regions in ORF23/24 and ORF14/15,and variable number of tandem repeats(VNTR) within ORF94.In this study,genotyping was performed according to these three variable regions among WSSV isolates collected during 1998/1999 from Southern China.These WSSV isolates contain a deletion of 1168,5657,5898,9316 and 11093 bp,respectively in the variable region ORF23/24 compared with WSSV-TW,and a deletion of 4749 or 5622 bp in the variable region ORF14/15 relative to TH-96-II.Four types of repeat units(RUs)(6,8,9 and 13 RUs) in ORF94 were detected in these isolates,with the shortest 6 RUs as the most prevalent type.Our results provide important information for a better understanding of the spatio-temporal transmission mode and the WSSV genetic evolution lineage. 展开更多
关键词 WSSV GENOTYPING Variable region ORF23/24 ORF 14/15 ORF94 China
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对虾白斑综合症病毒基因组同源重复区结合蛋白的筛选 被引量:4
12
作者 朱艳冰 杨丰 《台湾海峡》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期318-323,共6页
对对虾白斑综合症病毒(WSSV)基因组序列分析发现,基因组3%的区域均匀分布有与昆虫杆状病毒类似的9个同源重复区,很可能具有昆虫杆状病毒同源重复区参与病毒复制起始或转录调控的功能.以WSSV基因组同源重复区中一个包含高度保守结构域的... 对对虾白斑综合症病毒(WSSV)基因组序列分析发现,基因组3%的区域均匀分布有与昆虫杆状病毒类似的9个同源重复区,很可能具有昆虫杆状病毒同源重复区参与病毒复制起始或转录调控的功能.以WSSV基因组同源重复区中一个包含高度保守结构域的小重复片断DNA(210bp)作为配体,利用WSSV基因组噬菌体展示库,经过5轮淘选出一个可与DNA特异结合的重组噬菌体克隆,包含的外源DNA片断长度为306bp.通过与WSSV基因组序列对比,发现该序列为WSSV的ORFs中wsv021的5′端部分.推测wsv021是一个可能与病毒复制或调控相关的重要功能基因. 展开更多
关键词 分子生物学 对虾白斑综合症病毒 基因组噬菌体展示库 同源重复区 wsv 021基因
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对虾白斑综合症病毒双抗体夹心ELISA方法的建立 被引量:4
13
作者 郑晓聪 刘荭 +4 位作者 张朋 何俊强 史秀杰 贾鹏 兰文升 《中国动物检疫》 CAS 2012年第4期41-43,共3页
用将纯化的对虾白斑综合症病毒VP28蛋白免疫BALB/c小鼠,分离免疫鼠脾细胞,与SP2/0细胞融合,经间接ELISA筛选,得到了2株(2G9,3E5)可以稳定分泌抗对虾白斑综合症病毒特异性单抗的杂交瘤细胞株。用纯化的VP28蛋白免疫家兔,按常规方法制备... 用将纯化的对虾白斑综合症病毒VP28蛋白免疫BALB/c小鼠,分离免疫鼠脾细胞,与SP2/0细胞融合,经间接ELISA筛选,得到了2株(2G9,3E5)可以稳定分泌抗对虾白斑综合症病毒特异性单抗的杂交瘤细胞株。用纯化的VP28蛋白免疫家兔,按常规方法制备多抗。选用单抗(3E5)包被ELISA板,用兔多抗作为捕获抗体,建立了对虾白斑综合症病毒的双抗体夹心ELISA检测方法。该方法具有良好的特异性和敏感性,为对虾白斑综合症病毒的检测提供了有效工具。 展开更多
关键词 对虾白斑综合症病毒 VP28蛋白 单克隆抗体 ELISA
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对虾白斑综合征病毒亚单位疫苗研究进展 被引量:4
14
作者 陈文博 侯林 刘庆慧 《动物医学进展》 CSCD 2008年第12期73-76,共4页
对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)是一种可以引起养殖对虾暴发性死亡的传染性病原,由于其强烈的传染性和极高的致死率,使得人们在应对它时,必须侧重于早期的防控。近年的研究表明,对虾存在类免疫(quasi-immune)机制,... 对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)是一种可以引起养殖对虾暴发性死亡的传染性病原,由于其强烈的传染性和极高的致死率,使得人们在应对它时,必须侧重于早期的防控。近年的研究表明,对虾存在类免疫(quasi-immune)机制,而WSSV的重组蛋白可以诱导对虾产生抗病保护效应。目前有关对虾白斑综合征病毒亚单位疫苗的研究大多围绕诱导产生高效免疫应答能力的囊膜蛋白进行免疫接种方式来展开。文章对该领域研究成果做一综述,旨在为今后WSSV的防控提供参考。 展开更多
关键词 对虾白斑综合症病毒 囊膜蛋白 亚单位疫苗
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对虾白斑综合症病毒的分子生物学研究进展 被引量:1
15
作者 程伟 刘志昕 《水产科学》 CAS 北大核心 2005年第5期41-45,共5页
关键词 对虾白斑综合症病毒 基因组 蛋白 分子检测
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对虾白斑综合症病毒VP28基因在家蚕体内的表达 被引量:3
16
作者 许雅香 许梓荣 +2 位作者 沈卫德 吴小锋 贡成良 《蚕业科学》 CAS CSCD 2003年第4期365-368,共4页
VP2 8是对虾白斑综合症病毒 (Whitespotsyndromevirus,简称WSSV)的囊膜蛋白。在克隆了VP2 8基因的基础上 ,成功构建了重组转移载体pBlueBacHisC vp2 8和重组杆状病毒HyNPV VP2 8。用重组病毒的细胞培养液注射接种 5龄饷食后的家蚕 ,剪... VP2 8是对虾白斑综合症病毒 (Whitespotsyndromevirus,简称WSSV)的囊膜蛋白。在克隆了VP2 8基因的基础上 ,成功构建了重组转移载体pBlueBacHisC vp2 8和重组杆状病毒HyNPV VP2 8。用重组病毒的细胞培养液注射接种 5龄饷食后的家蚕 ,剪病蚕腹足采血淋巴 ,进行SDS PAGE和Westernblotting分析 ,结果表明 ,WSSV VP2 8基因在家蚕体内得到了表达 ,特异性条带大小约为 31kD。研究结果为探讨WSSV感染对虾的分子机制打下了基础。 展开更多
关键词 对虾白斑综合症病毒 VP28 WSSV 囊膜蛋白 克隆 基因 重组转移栽体 家蚕 表达 分子机制
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抗对虾白斑综合症病毒单链抗体A1基因在酵母中表达及其与抗原结合活性 被引量:3
17
作者 曹宏 周亚凤 +2 位作者 张晓华 张先恩 戴和平 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期531-534,共4页
通过PCR从噬菌粒载体上扩增一种抗对虾白斑综合症病毒 (WSSV)的单链抗体A1(ScFvA1)基因 ,并构建于大肠杆菌 酵母穿梭质粒载体pPIC9K上。经PCR ,酶切 ,测序鉴定重组克隆 ,发现重组成功。将重组质粒pPIC9K ScF vA1转化毕赤酵母 (Pichiapas... 通过PCR从噬菌粒载体上扩增一种抗对虾白斑综合症病毒 (WSSV)的单链抗体A1(ScFvA1)基因 ,并构建于大肠杆菌 酵母穿梭质粒载体pPIC9K上。经PCR ,酶切 ,测序鉴定重组克隆 ,发现重组成功。将重组质粒pPIC9K ScF vA1转化毕赤酵母 (Pichiapastoris)GS115中 ,利用甲醇诱导 ,将单链抗体A1在酵母中进行了初步表达。经SDS PAGE电泳 ,发现其大小约为 32KD ,通过ELISA实验 ,证明表达上清液中的单链抗体具有很高的WSSV结合活性。 展开更多
关键词 毕赤酵母 对虾白斑综合症病毒 单链抗体 克隆 表达 抗原
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对虾白斑综合症病毒结构蛋白质VP41的研究 被引量:3
18
作者 丁琦 杨丰 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期549-552,共4页
VP41蛋白质是对虾白斑综合症病毒的一种结构蛋白,该蛋白质由病毒基因组上的wsv242开放阅读框(ORF)所编码,分子量为41 ku.根据vp41基因的序列,通过PCR扩增获得了该全长基因,将其克隆在载体pET-His上,以E.coliBL21为宿主菌,成功表达并纯... VP41蛋白质是对虾白斑综合症病毒的一种结构蛋白,该蛋白质由病毒基因组上的wsv242开放阅读框(ORF)所编码,分子量为41 ku.根据vp41基因的序列,通过PCR扩增获得了该全长基因,将其克隆在载体pET-His上,以E.coliBL21为宿主菌,成功表达并纯化了含His标记的目的蛋白VP41,并制备了特异性鼠抗血清.当纯化的病毒粒子经去污剂处理后,VP41蛋白质被发现完全存在于病毒WSSV囊膜部分,Western blot杂交实验也证实该结果,表明VP41蛋白质是该病毒的一个囊膜蛋白质.通过Far-Western方法还发现VP41具有蛋白聚合作用. 展开更多
关键词 对虾白斑综合症病毒 VP41蛋白质 囊膜蛋白质 far-western杂交
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对虾白斑综合症病毒P9蛋白转录水平的微阵列分析及其免疫荧光标记 被引量:1
19
作者 吴常嵩 谢希贤 杨丰 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期268-271,共4页
从构建的对虾白斑综合症病毒cDNA文库中,我们筛选到一个拷贝数最高,编码82个氨基酸的基因(命名为p9,wsv230).该基因被克隆到pGEX-2T载体中进行GST融合蛋白的原核表达,纯化的融合蛋白GST-P9用于制备特异的多克隆抗体.利用微阵列技术和免... 从构建的对虾白斑综合症病毒cDNA文库中,我们筛选到一个拷贝数最高,编码82个氨基酸的基因(命名为p9,wsv230).该基因被克隆到pGEX-2T载体中进行GST融合蛋白的原核表达,纯化的融合蛋白GST-P9用于制备特异的多克隆抗体.利用微阵列技术和免疫荧光标记技术,对该蛋白的转录水平及其在感染细胞内的分布进行了初步研究,表明该基因为高丰度表达,推测是对虾白斑综合症病毒的一个重要基因. 展开更多
关键词 对虾白斑综合症病毒 p9基因 微阵列 免疫荧光标记
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对虾白斑综合症病毒核衣壳蛋白WSV308的鉴定 被引量:3
20
作者 吴成林 杨丰 《台湾海峡》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期53-60,共8页
结合SDS-PAGE电泳和质谱分析,发现了一分子量为51kDa的蛋白,它是对虾白斑综合症病毒基因ORFwsv308的表达产物.将wsv308克隆到pET-His表达载体,以E.coliBL21为宿主菌,成功表达并纯化目的蛋白后制备抗体.Western blot实验中蛋白特异抗体... 结合SDS-PAGE电泳和质谱分析,发现了一分子量为51kDa的蛋白,它是对虾白斑综合症病毒基因ORFwsv308的表达产物.将wsv308克隆到pET-His表达载体,以E.coliBL21为宿主菌,成功表达并纯化目的蛋白后制备抗体.Western blot实验中蛋白特异抗体只与完整的病毒和核衣壳裂解蛋白中的WSV308反应,而不和膜蛋白反应,证明wsv308所编码的蛋白在完整病毒颗粒上定位于核衣壳.免疫电镜定位中金颗粒只特异地标记在核衣壳表面上,不存在于完整病毒表面上. 展开更多
关键词 分子生物学 对虾白斑综合症病毒 wsv308基因 WESTERN BLOT 免疫电镜定位 核衣壳蛋白
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