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腾冲菌脂肪酶的表达纯化及酶学性质的表征
被引量：
2
1
作者
李迅
仲惠
+3 位作者
王亮亮
邓若冰
高红
王飞
《化工进展》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2014年第12期3337-3341,共5页
将来自腾冲菌的脂肪酶（LipA）基因（lipA）克隆到大肠杆菌表达载体pET28a（含T7启动子）和pTrc99A （含Trc启动子）中，转入大肠杆菌表达，发现Trc启动子更适合LipA的表达。通过热处理和DEAE-Sepharose阴离子柱纯化过程，重组LipA得到...
将来自腾冲菌的脂肪酶（LipA）基因（lipA）克隆到大肠杆菌表达载体pET28a（含T7启动子）和pTrc99A （含Trc启动子）中，转入大肠杆菌表达，发现Trc启动子更适合LipA的表达。通过热处理和DEAE-Sepharose阴离子柱纯化过程，重组LipA得到纯化，比酶活达到1.9U/mg，重组LipA分子量为42kDa。重组LipA在80℃、pH 4.5时酶活最高，经85℃保温2h，酶活保持60%以上；在pH值4.0～6.0之间，LipA具有较好的稳定性；Cu^2＋和Zn^2＋对酶活力分别有38.9%和69.2%的抑制作用，Mn^2＋、Co^2＋和Tween-20对该酶有较大的激活作用；以p-nitrophenyl-laurate （p-NP-C12）为底物时，该酶的Km值为1.5mmol/L，kcat为34.5s-1。
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关键词
腾冲菌
脂肪酶
酶学性质
对
硝基苯
十二
酸
酯
下载PDF
职称材料
题名
腾冲菌脂肪酶的表达纯化及酶学性质的表征
被引量：
2
1
作者
李迅
仲惠
王亮亮
邓若冰
高红
王飞
机构
南京林业大学化学工程学院、江苏省生物质绿色燃料与化学品重点实验室
出处
《化工进展》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2014年第12期3337-3341,共5页
基金
国家自然科学基金面上项目(31270612,31170537)
江苏省高校自然科学研究重大项目(11KJA480001)
江苏高校优势学科建设工程项目(PAPD)
文摘
将来自腾冲菌的脂肪酶（LipA）基因（lipA）克隆到大肠杆菌表达载体pET28a（含T7启动子）和pTrc99A （含Trc启动子）中，转入大肠杆菌表达，发现Trc启动子更适合LipA的表达。通过热处理和DEAE-Sepharose阴离子柱纯化过程，重组LipA得到纯化，比酶活达到1.9U/mg，重组LipA分子量为42kDa。重组LipA在80℃、pH 4.5时酶活最高，经85℃保温2h，酶活保持60%以上；在pH值4.0～6.0之间，LipA具有较好的稳定性；Cu^2＋和Zn^2＋对酶活力分别有38.9%和69.2%的抑制作用，Mn^2＋、Co^2＋和Tween-20对该酶有较大的激活作用；以p-nitrophenyl-laurate （p-NP-C12）为底物时，该酶的Km值为1.5mmol/L，kcat为34.5s-1。
关键词
腾冲菌
脂肪酶
酶学性质
对
硝基苯
十二
酸
酯
Keywords
Thermoanaerobacter tengcongensis
lipase
enzymatic properties
p-nitrophenyl-laurate
分类号
Q556.1 [生物学—生物化学]
Q786
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
腾冲菌脂肪酶的表达纯化及酶学性质的表征
李迅
仲惠
王亮亮
邓若冰
高红
王飞
《化工进展》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2014
2
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职称材料
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