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以寡聚组氨酸为配基的高效亲和色谱研究 被引量:3
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作者 余晓 赵睿 +3 位作者 方梅 熊少祥 苏天升 刘国诠 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第4期532-534,共3页
A series of affinity media were synthesized by using the oligohistines, His Gly, (His) 3 Gly and (His) 5 Gly as the ligands and the home made monosized, non porous copolymer(CL PGMA) beads containing active epoxide gr... A series of affinity media were synthesized by using the oligohistines, His Gly, (His) 3 Gly and (His) 5 Gly as the ligands and the home made monosized, non porous copolymer(CL PGMA) beads containing active epoxide groups as the support. The affinity chromatographic behavior between IgG and the oligohistines was investigated at pH 3 0, 4 5, 7 0 and 10 0. It showed the specific interaction at pH 4 5. The dissociation constants of IgG and oligohistine media(1H, 3H, 5H) were 3 037×10 -6 , 2 459×10 -6 and 1 905×10 -6 L/mol, respectively. The dissociation constants decreased with increasing the number of histine residue in oligopeptide chains. [WT5HZ] 展开更多
关键词 寡聚组氨酸 高效亲和色谱 解离常数 固相肽合成
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hTNFα寡聚组氨酸融合蛋白的表达 被引量:1
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作者 李彪 朱承谟 吴祥甫 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2000年第4期348-351,共4页
目的利用大肠杆菌表达系统对人肿瘤坏死因子 (hTNFα)的寡聚组氨酸 (6×His)融合蛋白进行表达和纯化研究。 方法采用大肠杆菌表达系统的表达载体 pET - 2 8a(+)和 pET - 2 2b(+)表达了hTNFα 的 6×His融合蛋白 ,其 6×Hi... 目的利用大肠杆菌表达系统对人肿瘤坏死因子 (hTNFα)的寡聚组氨酸 (6×His)融合蛋白进行表达和纯化研究。 方法采用大肠杆菌表达系统的表达载体 pET - 2 8a(+)和 pET - 2 2b(+)表达了hTNFα 的 6×His融合蛋白 ,其 6×His分别位于融合蛋白的N和C端 ,并利用寡聚组氨酸与过渡态金属离子的高亲和力性质 ,经Ni2 +-IDASepharose 6B亲和柱对表达产物进行了纯化。 结果其表达量分别为菌体总蛋白的 45 %和 8%。前者在胞内以不溶性包涵体存在 ,未对表达产物作进一步纯化 ;后者在胞质空间以可溶性存在 ,经亲和纯化的hTNFα- 6×His纯度可达 90 %以上 ,得率为 0 .4mg/ 10 0ml,并对L92 9细胞具有杀伤的功能 ,其活力为 5 .42× 10 4 U/mg。  结论表达产物经纯化后具有细胞毒的活性。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子 寡聚组氨酸 纯化 融合蛋白 表达
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