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多探头光纤倏逝波生物传感器及其性能研究 被引量：18
1
作者 黄惠杰 翟俊辉 +5 位作者 赵永凯 杨瑞馥 任冰强 程兆谷 杜龙龙 路敦武 《中国激光》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第6期718-722,共5页
利用光纤倏逝波原理 ,以输出波长为 6 35nm的半导体激光器为光源 ,研制成功一台具有 5个探头的光纤生物传感器。该传感器 5个光纤探头对纯净Cy5荧光染料溶液的检测灵敏度均达 0 0 1nmol/L ,在同一浓度下信噪比的相对标准偏差小于 10 %... 利用光纤倏逝波原理 ,以输出波长为 6 35nm的半导体激光器为光源 ,研制成功一台具有 5个探头的光纤生物传感器。该传感器 5个光纤探头对纯净Cy5荧光染料溶液的检测灵敏度均达 0 0 1nmol/L ,在同一浓度下信噪比的相对标准偏差小于 10 % ,5个探头的信噪比曲线几乎重合 ,且与商品化生物芯片扫描仪同时检测得到的结果一致 ;检测到了抗原抗体特异性反应的动态过程。本传感器具有较高的检测灵敏度、良好的响应一致性和生物特异性 ,可用于多重生物物质的检测。 展开更多
关键词 传感器技术 光学计量 生物传感器 倏逝波 蛋白质 实时荧光检测
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基于RPA的病原体快速诊断策略
2
作者 许淑莹 王冬梅 欧阳松应 《福建师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2024年第1期34-44,共11页
重组酶聚合酶扩增(recombinase enzyme polymerase amplification,RPA)检测技术是2006年出现的一种等温核酸扩增检测技术。RPA所需引物设计简单,反应时间短,在37~42℃下仅需15~20 min即可达到病原体检测水平,搭配便捷装置即可实现核酸检... 重组酶聚合酶扩增(recombinase enzyme polymerase amplification,RPA)检测技术是2006年出现的一种等温核酸扩增检测技术。RPA所需引物设计简单,反应时间短,在37~42℃下仅需15~20 min即可达到病原体检测水平,搭配便捷装置即可实现核酸检测,近些年得到快速发展。重点介绍了RPA反应产物检测的相关策略,并对RPA在致病菌、病毒以及寄生虫上的快速诊断应用研究进行述评。 展开更多
关键词 等温扩增 重组酶聚合酶扩增 侧向流动 实时荧光检测 病原体检测
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酶促重组等温扩增实时荧光法快速检测肺炎支原体方法的建立及应用 被引量：5
3
作者 胡海洋 应婉琴 +3 位作者 何军 吕芷贤 谢小平 邓仲良 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期264-270,共7页
利用酶促重组等温扩增(enzymatic recombinase amplification,ERA)技术建立快速检测肺炎支原体的实时荧光检测方法。针对肺炎支原体P1基因设计特异性引物和探针,优化反应条件,分析其敏感性和特异性,并对临床样本进行验证。ERA实时荧光法... 利用酶促重组等温扩增(enzymatic recombinase amplification,ERA)技术建立快速检测肺炎支原体的实时荧光检测方法。针对肺炎支原体P1基因设计特异性引物和探针,优化反应条件,分析其敏感性和特异性,并对临床样本进行验证。ERA实时荧光法在25-40℃均具有扩增能力,在35℃条件下对肺炎支原体的扩增效果最好,20 min内可完成扩增;该法对肺炎支原体的检出限为10^(3) copies/μL;并对其他6种呼吸道病原体进行检测,均无扩增曲线产生,有较好的特异性;以荧光定量PCR法检测结果为标准,ERA实时荧光法对34份临床样本的检测结果的诊断敏感度为96.15%、特异度为100%、阳性预测值为100%、阴性预测值为88.89%。本研究构建的ERA实时荧光法可以快速简单、灵敏和特异地检测出肺炎支原体,满足现场检测的需求。 展开更多
关键词 酶促重组等温扩增技术 实时荧光检测 肺炎支原体
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孔雀石绿和结晶紫在荧光检测中的比较 被引量：5
4
作者 赵永云 杜凤 +4 位作者 董娟 陈浩东 周丽 陈蓉 唐卓 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期365-369,共5页
为优选出三苯甲烷染料中的一种染料与G-四聚体结合开发为荧光定量报告体系,对孔雀石绿(Malachitegreen,MG)和结晶紫(Crystal violet,CV)与G-四聚体结合后的灵敏度和重现性进行了比较研究.首先,比较了4种不同DNA(hum21,short-hum21,doubl... 为优选出三苯甲烷染料中的一种染料与G-四聚体结合开发为荧光定量报告体系,对孔雀石绿(Malachitegreen,MG)和结晶紫(Crystal violet,CV)与G-四聚体结合后的灵敏度和重现性进行了比较研究.首先,比较了4种不同DNA(hum21,short-hum21,double-strands,single-strand)分别与孔雀石绿和结晶紫结合后的荧光光谱,结果显示,两种染料均可区分以上4种DNA,但孔雀石绿的灵敏度更高.然后,将孔雀石绿和结晶紫应用到实时荧光检测中,进一步比较验证两种染料灵敏度,并考察两种染料的重现性,结果显示,孔雀石绿的重现性和灵敏度均优于结晶紫.由此,建立了孔雀石绿与G-四聚体结合的荧光定量报告体系. 展开更多
关键词 孔雀石绿 结晶紫 G-四聚体 链置换等温扩增 实时荧光检测
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ERA实时荧光法快速检测鹦鹉热衣原体方法的建立
5
作者 蒋婷清 杨涛 +3 位作者 唐红花 王萍 何军 邓仲良 《中南医学科学杂志》 CAS 2023年第4期502-506,共5页
目的建立一种快速检测鹦鹉热衣原体(Cps)的酶促重组等温扩增(ERA)实时荧光法。方法根据鹦鹉热衣原体MOMP基因序列设计特异性引物和探针,建立ERA实时荧光法反应体系。优化体系中的引物和反应温度,再评价ERA实时荧光法的敏感性和特异性,... 目的建立一种快速检测鹦鹉热衣原体(Cps)的酶促重组等温扩增(ERA)实时荧光法。方法根据鹦鹉热衣原体MOMP基因序列设计特异性引物和探针,建立ERA实时荧光法反应体系。优化体系中的引物和反应温度,再评价ERA实时荧光法的敏感性和特异性,以及对39例鸟类肺组织样本进行验证。结果ERA实时荧光法可在40℃恒温条件下15 min内特异性扩增鹦鹉热衣原体,其检出限为10 copies/μL,特异性好。ERA实时荧光法检出39例鸟类肺组织样本中阳性样本30例,阴性样本9例,其灵敏度为96.77%,特异度为100.00%,阴性预测值为88.89%,阳性预测值为100.00%。结论成功建立用于鹦鹉热衣原体检测的ERA实时荧光法,其操作简单,且灵敏度和特异度好。 展开更多
关键词 酶促重组等温扩增 鹦鹉热衣原体 实时荧光检测
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qPCR检测分级神经胶质瘤标本中BCAR4的表达探讨
6
作者 王志峰 王龙龙 +2 位作者 李国京 都艳国 梁赞 《中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生》 2023年第7期0044-0046,共3页
分析实时荧光检测(Real-time Quantitative PCR Detecting System,qPCR)在分级神经胶质瘤标本当中BCAR4的表达。方法 将2018年1月-2021年4月所收集到的60例神经胶质瘤标本及10例正常脑组织标本,通过qPCR检测胶质瘤及正常脑组织中BCAR4... 分析实时荧光检测(Real-time Quantitative PCR Detecting System,qPCR)在分级神经胶质瘤标本当中BCAR4的表达。方法 将2018年1月-2021年4月所收集到的60例神经胶质瘤标本及10例正常脑组织标本,通过qPCR检测胶质瘤及正常脑组织中BCAR4的表达,观察是否可以将BCAR4作为胶质瘤诊断的指标。随后根据qPCR检测的结果,将胶质瘤的标本分为高表达组(n=28)及低表达组(n=32),将患者的性别、年龄、肿瘤大小、肿术后治疗时间、术前水肿、WHO分级以及当做自变量,将BCAR4的表达情况当做因变量,单因素分析采用log-rank分析,若P<0.05则建立Cox风险模型进行多因素分析,观察不同BCAR4的表达对神经胶质瘤的独立影响因素。结果 在经过qPCR检测之后,发现胶质瘤组的PVT1、GAPDH、BCAR4表达明显高于对照组(P<0.05),具有统计学意义。在单因素分析过程中,WHO分级、肿瘤较大、术后治疗时间较短的P值均<0.05,随后建立Cox风险模型,多因素分析结果中发现WHO分级、肿瘤较大、术后治疗时间较短均可以作为BCAR4高表达的独立因素(P<0.05)。结论 经过qPCR检测能够明确神经胶质瘤的BCAR4表达情况,且相较于正常对照组,胶质瘤组的PVT1、GAPDH、BCAR4细胞表达更高。WHO分级、肿瘤较大、术后治疗时间较短是神经胶质瘤标本BCAR4高表达的独立因素,在临床上需要进行重视。 展开更多
关键词 实时荧光检测 神经胶质瘤 BCAR4表达
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H7亚型禽流感病毒实时荧光RT-LAMP检测方法的建立及应用 被引量：2
7
作者 任素玲 李萌 +3 位作者 罗静 王承民 冯小宇 何宏轩 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期609-614,共6页
根据H7亚型禽流感病毒的血凝素基因中的保守区域设计特异的LAMP引物。10倍倍比稀释试验表明了此方法的高灵敏性,最低可检测到100 fg的RNA。对H1、H3、H4、H5、H6、H9亚型A型流感病毒和NDV进行H7-RT-LAMP检测,并无交叉反应,说明了此方法... 根据H7亚型禽流感病毒的血凝素基因中的保守区域设计特异的LAMP引物。10倍倍比稀释试验表明了此方法的高灵敏性,最低可检测到100 fg的RNA。对H1、H3、H4、H5、H6、H9亚型A型流感病毒和NDV进行H7-RT-LAMP检测,并无交叉反应,说明了此方法的高特异性。利用80份临床样品对所建立的H7-RT-LAMP方法进行评价,鉴定结果和病毒分离方法一致,说明此方法的可行性。建立的H7-RT-LAMP方法简单、快速、灵敏、特异,是H7亚型禽流感病毒的一种高效检测方法,适合在基层进行H7亚型禽流感病毒的早期筛检。 展开更多
关键词 H7亚型禽流感病毒 实时荧光检测 逆转录环介导等温扩增 可视化检测
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肺癌患者乙酰化代谢基因型探讨 被引量：1
8
作者 高建平 杨国宗 +3 位作者 郑家祥 梁建平 林经安 方晓霞 《检验医学与临床》 CAS 2007年第6期480-481,共2页
目的探讨N-乙酰基转移酶2(NAT2)基因多态性与肺癌易感性的关系。方法应用自动实时荧光Light-Cycler技术,分析138例肺癌患者和112例健康人NAT24个位点的基因多态性,比较肺癌患者与对照组间频率差异。结果肺癌组(吸烟者)NAT2慢乙酰化基因... 目的探讨N-乙酰基转移酶2(NAT2)基因多态性与肺癌易感性的关系。方法应用自动实时荧光Light-Cycler技术,分析138例肺癌患者和112例健康人NAT24个位点的基因多态性,比较肺癌患者与对照组间频率差异。结果肺癌组(吸烟者)NAT2慢乙酰化基因型频率与对照组比较差异有统计学意义(χ2=7.97,P<0.05),并使患肺癌的危险度提高了3.12倍(P<0.05);肺癌组(非吸烟者)NAT2慢乙酰化基因型频率与对照组比较差异无统计学意义(χ2=2.88,P>0.05)。结论携带NAT2慢乙酰化基因型的吸烟者可能是肺癌的高危人群。 展开更多
关键词 N-乙酰基转移酶基因 肺癌 实时荧光检测
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实时荧光RT-LAMP方法检测H7亚型禽流感病毒方法及意义
9
作者 高洁 严敏 +1 位作者 付婷 邵中军 《影像研究与医学应用》 2018年第11期243-244,共2页
通过H7亚型的禽流感病毒的检测能快速筛查禽流感患者,为禽流感的治疗和预防提供基础。而实时荧光RT-LAMP方法的检测主要通过病毒中的保守区域的基因为底物,通过扩增的方法设计具有特异性的LAMP引物,进而对禽流感病毒的准确检测。经过灵... 通过H7亚型的禽流感病毒的检测能快速筛查禽流感患者,为禽流感的治疗和预防提供基础。而实时荧光RT-LAMP方法的检测主要通过病毒中的保守区域的基因为底物,通过扩增的方法设计具有特异性的LAMP引物,进而对禽流感病毒的准确检测。经过灵敏度实验的测定,该方法具有极高的灵敏度,可以对100fd的核糖核酸进行准确的测定。经过特异性检测试验发现,该方法具有极高的特异性,可以对病毒进行准确检测,减少误差。且采取160例临床样品应用此法进行检测发现结果和病毒分离方法一致。由此说明RT-LAMP方法灵敏度高、特异性高、简单、准确,适合对H7亚型禽流感病毒进行筛检,确认。实时荧光RT-LAMP方法检测H7亚型禽流感病毒方法值得在实际操作中推广使用。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H7亚型病毒 实时荧光检测 RT-LAMP方法 样品检测对比
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基于恒温指数扩增反应高灵敏度检测端粒酶活性
10
作者 周晓毓 张佳玉 +1 位作者 周曼 贾红霞 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2016年第2期155-161,共7页
端粒酶延伸产物是具有(ggttag)n重复序列的DNA.设计1条与2个重复序列相匹配的特异性的DNA探针-(ctaacc)2使其与端粒酶延伸产物杂交,形成双链DNA.过量的DNA探针被磁性石墨烯吸附,通过磁分离去除.利用恒温指数扩增反应(IEXPAR)对端粒酶延... 端粒酶延伸产物是具有(ggttag)n重复序列的DNA.设计1条与2个重复序列相匹配的特异性的DNA探针-(ctaacc)2使其与端粒酶延伸产物杂交,形成双链DNA.过量的DNA探针被磁性石墨烯吸附,通过磁分离去除.利用恒温指数扩增反应(IEXPAR)对端粒酶延伸产物捕捉的DNA探针进行快速的扩增.用与双链DNA特异性结合的SYBR Green I染料对扩增产物进行实时荧光检测.在优化条件下,可以检测到低至50个癌细胞中的端粒酶活性.实现了恒温扩增条件下端粒酶活性的高灵敏度检测. 展开更多
关键词 端粒酶活性 恒温指数扩增反应 磁性石墨烯 实时荧光检测
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SAT-TB联合FQ-PCR检测在痰涂片阴性肺结核诊断中的应用价值 被引量：4
11
作者 王彦朝 《河南医学研究》 CAS 2020年第4期713-714,共2页
目的探讨RNA恒温扩增实时荧光检测技术(SAT-TB)联合荧光定量PCR(FQ-PCR)检测在痰涂片阴性肺结核诊断中的应用价值。方法选取2018年4月至2019年4月鹤壁市传染病医院收治的至少3份痰涂片镜检抗酸杆菌均显示阴性的2067例疑似肺结核患者,取... 目的探讨RNA恒温扩增实时荧光检测技术(SAT-TB)联合荧光定量PCR(FQ-PCR)检测在痰涂片阴性肺结核诊断中的应用价值。方法选取2018年4月至2019年4月鹤壁市传染病医院收治的至少3份痰涂片镜检抗酸杆菌均显示阴性的2067例疑似肺结核患者,取其肺泡灌洗液标本,分别行SAT-TB、FQ-PCR检测,以临床诊断为“金标准”,比较SAT-TB、FQ-PCR单独与联合诊断痰涂片阴性肺结核的准确率。结果SAT-TB、FQ-PCR联合诊断痰涂片阴性肺结核的准确率为94.34%(1950/2067),均高于SAT-TB和FQ-PCR单独诊断的准确率[77.07%(1593/2067)、78.62%(1625/2067)](P<0.05)。结论SAT-TB联合FQ-PCR检测诊断痰涂片阴性肺结核的准确率较高,有助于疾病早期快速诊断。 展开更多
关键词 肺结核 恒温扩增实时荧光检测技术 荧光定量聚分酶链式反应
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共表达人μ阿片受体与Gq蛋白的稳定细胞株的建立及功能鉴定
12
作者 石晶晶 张毅 +3 位作者 陈学军 朱思庆 王陈 李丽琴 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2023年第5期24-30,共7页
建立共表达人μ阿片受体(humanμ-opiatereceptor,hMOR,OPRM)与Gq蛋白的CHO-Flp In稳定细胞模型,并鉴定其药理学功能,可为体外高通量筛选靶向OPRM的药物奠定基础。该研究首先构建重组表达质粒OPRM-pcDNA5/FRT,并进行鉴定;然后通过脂质... 建立共表达人μ阿片受体(humanμ-opiatereceptor,hMOR,OPRM)与Gq蛋白的CHO-Flp In稳定细胞模型,并鉴定其药理学功能,可为体外高通量筛选靶向OPRM的药物奠定基础。该研究首先构建重组表达质粒OPRM-pcDNA5/FRT,并进行鉴定;然后通过脂质体转染法将OPRM-pcDNA5/FRT、GqG66Di5-pIRES/puro3和FLP重组酶质粒POG44共转染CHO-Flp In细胞,经抗性加压和有限稀释法挑取耐药单克隆,采用FLIPR钙信号检测方法筛选阳性克隆株;最后,通过RT-q PCR对细胞中的OPRM和GqG66Di5m RNA表达水平进行检测,并选用OPRM激动剂DAMGO和抑制剂Naloxone对稳定细胞株的药理学功能进行鉴定。结果显示:经酶切确定了重组质粒的正确构建;通过重组质粒转染、抗生素加压筛选以及钙信号测定获得22个具有活性的克隆细胞株,其中15号细胞株的荧光信号值最高,命名为Gq-OPRM1-CHO;与对照组相比,Gq-OPRM1-CHO细胞组中OPRM与GqG66Di5基因m RNA水平分别升高约400倍和120倍;在Gq-OPRM1-CHO细胞中,FLIPR钙信号检测激动剂DAMGO的EC_(50)为0.02±0.002μmol/L,抑制剂Naloxone的IC_(50)为0.04±0.003μmol/L。该研究成功建立了OPRM与GqG66Di5蛋白稳定共表达的细胞模型Gq-OPRM1-CHO,该细胞株具有对OPRM激动剂和拮抗剂特异性反应的药理学功能。 展开更多
关键词 Μ阿片受体 G蛋白耦联受体 钙离子 实时荧光检测分析系统 DAMGO
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Xpert MTB/RIF检测、T-SPOT.TB检测和SAT-TB检测在诊断涂阴肺结核中的应用价值 被引量：4
13
作者 王奕 《当代医药论丛》 2021年第23期144-145,共2页
目的:探讨Xpert结核分枝杆菌(MTB)/利福平(RIF)检测、结核感染T淋巴细胞斑点试验法(T-SPOT.TB)检测和结核分枝杆菌RNA恒温扩增实时荧光检测技术(SAT-TB)检测在诊断涂阴肺结核中的应用价值。方法:选择2021年1月至6月在太仓市疾病预防控... 目的:探讨Xpert结核分枝杆菌(MTB)/利福平(RIF)检测、结核感染T淋巴细胞斑点试验法(T-SPOT.TB)检测和结核分枝杆菌RNA恒温扩增实时荧光检测技术(SAT-TB)检测在诊断涂阴肺结核中的应用价值。方法:选择2021年1月至6月在太仓市疾病预防控制中心接受检查的171例疑似涂阴肺结核患者为研究对象。对这些患者均进行结核分枝杆菌痰培养检查,并根据检查结果对其进行分组。将其中被确诊患有肺结核的93例患者作为肺结核组,将其中未患有肺结核的78例患者作为非肺结核组。对两组患者均进行Xpert MTB/RIF检测、T-SPOT.TB检测和SAT-TB检测。然后对比用这三种检测方法诊断涂阴肺结核的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确率。结果:与采用Xpert MTB/RIF检测、SAT-TB检测相比,用T-SPOT.TB检测诊断涂阴肺结核的灵敏度、阴性预测值、准确率均较高,P<0.05。与采用T-SPOT.TB检测相比,用Xpert MTB/RIF检测、SAT-TB检测诊断涂阴肺结核的特异度、阳性预测值均较高,P<0.05。用Xpert MTB/RIF检测与SAT-TB检测诊断涂阴肺结核的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确率相比,P>0.05。结论:Xpert MTB/RIF检测、T-SPOT.TB检测和SAT-TB检测在诊断涂阴肺结核中均具有一定的应用价值,三种检测方法各有优缺点。 展开更多
关键词 涂阴肺结核 Xpert 结核分枝杆菌 利福平 结核感染T淋巴细胞斑点试验法 结核分枝杆菌RNA恒温扩增实时荧光检测技术
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SAT技术在肺结核早期筛查中的应用价值 被引量：3
14
作者 徐培 王宪伟 +2 位作者 蒋舒明 何小艳 吴宁 《广西医科大学学报》 CAS 2021年第6期1161-1165,共5页
目的:探讨RNA恒温扩增实时荧光检测技术(SAT)在肺结核辅助诊断中的临床应用价值。方法:选取2016年1月至2019年3月在德阳市人民医院初诊患者的痰液标本1 080例,其中以临床确诊的肺结核患者痰标本762例作为试验组,肺部非结核性疾病患者31... 目的:探讨RNA恒温扩增实时荧光检测技术(SAT)在肺结核辅助诊断中的临床应用价值。方法:选取2016年1月至2019年3月在德阳市人民医院初诊患者的痰液标本1 080例,其中以临床确诊的肺结核患者痰标本762例作为试验组,肺部非结核性疾病患者318例作为对照组,分别采用SAT、实时荧光聚合酶链式反应法(RT-PCR)与抗酸染色法进行检测,以临床诊断为金标准,比较3种方法的敏感度、特异性、阳性预测值、阴性预测值以及联合诊断效能。结果:试验组SAT、RT-PCR、抗酸染色法的阳性检出率分别为48.43%、41.47%、21.52%,SAT法阳性检出率高于RT-PCR法及抗酸染色法(P<0.01)。SAT法的敏感度、特异性、阳性预测值、阴性预测值与RT-PCR法有较好的一致性(P>0.05),与抗酸染色法结果一致性较差(P<0.05)。3种方法联合检测的敏感度为49.34%(376/762),特异度为98.74%(314/318),绘制3种检测方法及其联合诊断肺结核的受试者工作特征曲线(ROC曲线),SAT、RT-PCR、抗酸染色、抗酸染色+SAT、抗酸染色+PCR、SAT+PCR、抗酸染色+SAT+PCR对应的曲线下面积(AUC)分别为0.741、0.704、0.607、0.741、0.706、0.742、0.742。结论:采用SAT技术检测结核分枝杆菌,其敏感度和特异度均优于其它两种方法,SAT操作简便、快捷,经济,值得在临床推广。 展开更多
关键词 肺结核 分枝杆菌 扩增实时荧光检测技术
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不同抗结核时长对手术标本中不同病原学阳性率影响
15
作者 刘小玉 徐风 戴希勇 《中国热带医学》 CAS 2020年第6期561-564,582,共5页
目的探讨不同抗结核时长的手术病理标本5种病原学检测技术阳性率差异及临床意义。方法对2017年在武汉市肺科医院外科经规范抗结核共282例肺外结核患者按手术取材前抗结核时间不同分为0~<7 d、7~<14 d、14~<28 d、28~<60 d和... 目的探讨不同抗结核时长的手术病理标本5种病原学检测技术阳性率差异及临床意义。方法对2017年在武汉市肺科医院外科经规范抗结核共282例肺外结核患者按手术取材前抗结核时间不同分为0~<7 d、7~<14 d、14~<28 d、28~<60 d和≥60 d共5组,对各组采用抗酸染色涂片(AFB)、实时荧光定量PCR(TB-DNA)、RNA恒温扩增实时荧光检测(SAT-TB)、GeneX-pert MTB/RIF(X-pert)、结核培养(CTB)等5种方法进行病原学检查,并对结果进行分析。结果以临床诊断为标准,282例手术标本病原学总阳性率为89.36%(252/282),X-pert、TB-DNA、SAT-TB、CTB和AFB阳性率分别为89.36%、78.01%、39.72%、15.25%和14.18%;以CTB为金标准,SAT-TB的阴性预测值为92.35%(157/170);X-pert与CTB判定RFP耐药吻合率为100.00%。组间相同检查比较:CTB在0~<28 d内阳性率无明显差异,但均显著高于≥60 d患者(P<0.001),其余4种方法各时间段内比较均无明显差异。组内不同检查间比较:X-pert阳性率在各组内均显著高于AFB、SAT-TB、CTB(P<0.001),但与TB-DNA比较无统计学差异;TB-DNA各组内均显著高于AFB、CTB、SAT-TB(P<0.05);各组内CTB与AFB均无统计学差异(P>0.05);28 d后CTB阳性率均明显低于SAT-TB(P<0.001)。结论不同抗结核时长的手术病理组织标本中5种病原学检测技术阳性率差异较大,规范抗结核0~28 d内常规送检X-pert、CTB有利于结核病的诊断和治疗,X-pert、TB-DNA、SAT-TB、AFB阳性均不宜作为疗效评估的单一指标,而SAT-TB可作为CTB阴性的预测指标。 展开更多
关键词 抗结核时长 病理组织 Gene-X-pert/RIF RNA恒温扩增实时荧光检测 抗酸染色 实时荧光定量PCR 结核菌培养
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苜蓿萎蔫病菌Taq Man探针实时荧光PCR检测方法的建立 被引量：24
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作者 漆艳香 赵文军 +3 位作者 朱水芳 肖启明 廖晓兰 陈红运 《植物检疫》 北大核心 2003年第5期260-264,共5页
苜蓿萎蔫病菌是我国对外检疫性二类有害生物 ,目前国内尚无发生。在出入境检验检疫中主要是采用生物学和血清学方法进行检测 ,劳动强度大 ,耗费时间长。根据苜蓿萎蔫病菌与其它细菌菌株 1 6SrDNA序列差异 ,设计出对苜蓿萎蔫病菌具有稳... 苜蓿萎蔫病菌是我国对外检疫性二类有害生物 ,目前国内尚无发生。在出入境检验检疫中主要是采用生物学和血清学方法进行检测 ,劳动强度大 ,耗费时间长。根据苜蓿萎蔫病菌与其它细菌菌株 1 6SrDNA序列差异 ,设计出对苜蓿萎蔫病菌具有稳定点突变特异性探针 ,利用该探针对棒形杆菌属 4个种及其它属细菌进行了实时荧光PCR检测实验。结果表明 ,只有苜蓿萎蔫病菌能检测到荧光信号 ,其它细菌没有荧光产生。该方法特异性强 ,灵敏度高 ,能检测到 2 1 4fg质粒DNA ,比常规PCR灵敏 1 0 0倍 ,而且整个过程只需要 2～ 3h。该方法可有效地应用于进出境病原菌检测之中。 展开更多
关键词 中国 苜蓿萎蔫病菌 TAQMAN探针 实时荧光PCR检测 出入境捡验检疫
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免疫凝聚试纸条和TaqMan探针实时荧光PCR检测西瓜细菌性果斑病菌比较研究 被引量：30
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作者 冯建军 许勇 +1 位作者 李健强 Norm W. SCHAAD 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期102-108,共7页
以西瓜细菌性果斑病菌（Acidovorax avenae subsp．citrulli）菌悬液和田间采集的病组织为试材，研究了免疫凝聚试纸条和实时荧光PCR技术检测的灵敏度和适应性。结果表明，免疫凝聚试纸条检测灵敏度为10^6 cfu／mL，具有简便、快速、易... 以西瓜细菌性果斑病菌（Acidovorax avenae subsp．citrulli）菌悬液和田间采集的病组织为试材，研究了免疫凝聚试纸条和实时荧光PCR技术检测的灵敏度和适应性。结果表明，免疫凝聚试纸条检测灵敏度为10^6 cfu／mL，具有简便、快速、易操作特点，适用于田间快速检测和病害诊断；TaqMan探针实时荧光PCR检测灵敏度达10^3～4 cfu／mL，比传统PCR检测灵敏度（10^5 cfu／mL）提高了10～100倍，且不需要琼脂糖凝胶电泳、溴化乙锭染色和Southern杂交。但需要昂贵的仪器和试剂，适用于室内检测及相关研究。 展开更多
关键词 西瓜 细菌性果斑病菌 免疫凝聚试纸检测 TAQMAN探针 实时荧光PCR检测
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实时荧光PCR方法在A型流感病毒检测中的应用 被引量：14
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作者 王海 黄茜华 +5 位作者 彭春梅 唐妮 李川江 朱冰 陈翊 周荣 《热带医学杂志》 CAS 2006年第10期1077-1080,共4页
目的比较流感病毒实时荧光PCR检测(FQ-PCR)方法与常规细胞培养、血凝试验及分型鉴定在流感病毒鉴定中的优劣,以期建立能快速简便、特异地从临床标本中检测并鉴定流感病毒的新方法。方法对76株不同型别的流感病毒分离株进行鉴定,比较两... 目的比较流感病毒实时荧光PCR检测(FQ-PCR)方法与常规细胞培养、血凝试验及分型鉴定在流感病毒鉴定中的优劣,以期建立能快速简便、特异地从临床标本中检测并鉴定流感病毒的新方法。方法对76株不同型别的流感病毒分离株进行鉴定,比较两种检测方法的敏感性和特异性;对2倍梯度稀释的A型流感病毒(H1N1亚型、H3N2亚型,各1株)用FQ-PCR方法进行灵敏度检测,同时用常规细胞培养法进行病毒增殖,用血凝试验判断病毒滴度。另外,对临床采集的684份咽拭子样本直接检测,并同时进行常规培养、血凝试验及Quidel试剂检测,综合比较两种监测方法之间的差异。结果在76株流感病毒阳性细胞培养液中,FQ-PCR方法检出A型60份,同分型结果相吻合。FQ-PCR方法的灵敏度约高出常规培养法的25～26倍,无非特异性反应。结论流感病毒FQ-PCR方法具有简便快捷、特异、敏感的特点。 展开更多
关键词 A型流感病毒 实时荧光PCR检测 常规培养 咽拭子
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实时荧光定量检测技术及应用 被引量：6
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作者 李秉鸿 《动物医学进展》 CSCD 2003年第5期4-6,25,共4页
随着现代医学和分子生物学的飞速发展 ,近年来在病原体的鉴别诊断方面 ,不断研究和开发了一些先进的检验新技术 ,Taq Man荧光探针脱颖而出。这项新技术日臻成熟并开始大量应用于临床实践中。它实时、准确、定量和高度重现性的特点优于... 随着现代医学和分子生物学的飞速发展 ,近年来在病原体的鉴别诊断方面 ,不断研究和开发了一些先进的检验新技术 ,Taq Man荧光探针脱颖而出。这项新技术日臻成熟并开始大量应用于临床实践中。它实时、准确、定量和高度重现性的特点优于其它核酸扩增技术 ,在医学检验领域中颇受关注 ,在兽医诊断应用中也开始被采用。文章就这一新的检测技术的原理、特点、应用和研究进展进行综述并与常规 展开更多
关键词 实时荧光定量检测 医学 分子生物学 病原体 鉴别诊断 TaqMan荧光探针
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实时荧光定量检测中引物二聚体的优化 被引量：7
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作者 闻新棉 陈英剑 +2 位作者 胡成进 李云龙 刘泽军 《国外医学（临床生物化学与检验学分册）》 CAS 2005年第7期444-446,共3页
实时定量检测中引物二聚体的存在会严重影响检测结果的准确性,本文提出多方面的优化策略,以减少或消除实时定量检测中引物二聚体的集聚。
关键词 实时荧光定量检测 引物二聚体 鉴别 引物设计
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