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小麦NBS-LRR类抗病基因同源cDNA序列的克隆与表达分析 被引量：8
1
作者 任晓娣 刘彦慧 +4 位作者 李建嫄 张娜 彭巧慧 杨文香 刘大群 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期69-74,79,共7页
为获得小麦抗叶锈病相关基因,以小麦近等基因系TcLr19所构建的非亲和cDNA文库中获得的EST序列(Contig 914)为靶序列,用RT-PCR方法和cDNA末端快速扩增技术,分离克隆到片段为3 042bp的全长cDNA序列。序列分析表明该序列符合典型单子叶植物... 为获得小麦抗叶锈病相关基因,以小麦近等基因系TcLr19所构建的非亲和cDNA文库中获得的EST序列(Contig 914)为靶序列,用RT-PCR方法和cDNA末端快速扩增技术,分离克隆到片段为3 042bp的全长cDNA序列。序列分析表明该序列符合典型单子叶植物的CC-NBS-LRR结构模式,命名为TaNLR。该基因包含一个完整的2 739bp的开放阅读框(ORF),具有连续的Poly A尾和典型的加尾信号AATTAA。ProtParam程序预测表明该基因编码912个氨基酸。发育树分析显示该氨基酸序列与大麦的NBS-LRR类抗病基因蛋白同源性最高达89%。荧光定量PCR分析表明,在小麦与叶锈菌互作中,TaNLR基因受叶锈菌诱导下调表达。本研究在TcLr19小麦中成功获得了抗病同源基因,这为明确NBS-LRR在小麦抗叶锈病中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 小麦 核苷酸结合位点(NBS) 富含亮氨酸重复(LRR) 抗病基因同源序列(RGAs) cDNA末端快速扩增技术(RACE) 实时定量pcr(real-time pcr)
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肿瘤干细胞标记物CD133在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义 被引量：5
2
作者 龙金华 宝莹娜 +4 位作者 金风 吴伟莉 陈海霞 李媛媛 龚修云 《现代肿瘤医学》 CAS 2012年第8期1585-1588,共4页
目的:研究干细胞标记物CD133在鼻咽癌及其声带息肉中的表达及其临床意义。方法:纤维鼻咽镜取30例鼻咽癌组织和10例声带息肉。Trizol法提取的总RNA进行逆转录,实时荧光定量PCR检测组织中CD133的表达。并对鼻咽癌病人予诱导时间调节化疗+... 目的:研究干细胞标记物CD133在鼻咽癌及其声带息肉中的表达及其临床意义。方法:纤维鼻咽镜取30例鼻咽癌组织和10例声带息肉。Trizol法提取的总RNA进行逆转录,实时荧光定量PCR检测组织中CD133的表达。并对鼻咽癌病人予诱导时间调节化疗+同步放、化疗进行治疗。用SPSS 13.0医学统计学软件对结果和疗效进行分析。结果:鼻咽癌组织中CD133表达高于声带息肉组织(P<0.05),CD133在鼻咽癌组织中的表达与年龄、性别、病理分型以及疗效之间均无统计学关联。结论:CD133在鼻咽癌组织中明显阳性表达,与年龄、性别、病理学类型及疗效之间的联系,还需进一步扩大病例数加以研究。 展开更多
关键词 鼻咽癌 CD133 实时荧光定量pcr(real—time pcr) 诱导时间调节化疗 三维适形放疗
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进境动物源性饲料中沙门菌荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量：3
3
作者 阮靖华 张宁 +2 位作者 黄翠琴 王武军 俞道进 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期167-174,共8页
为建立快速鉴别诊断进境动物源性饲料中沙门菌的实时荧光定量PCR方法,以inv A基因为靶基因,通过构建p UCm-inv A重组质粒建立的标准曲线确定了检测体系的灵敏度,并利用特异性试验和稳定性试验评价体系的检测性能。结果显示,该检测体系... 为建立快速鉴别诊断进境动物源性饲料中沙门菌的实时荧光定量PCR方法,以inv A基因为靶基因,通过构建p UCm-inv A重组质粒建立的标准曲线确定了检测体系的灵敏度,并利用特异性试验和稳定性试验评价体系的检测性能。结果显示,该检测体系对基因组DNA的检测灵敏度为17 copies/L;由标准曲线的相关系数可知,初始拷贝数的对数值与Ct值之间具有良好的重现性（R2=0.988）;进境动物源性饲料样品的检出率与国标法一致;30份模拟污染样品的检出率达100%。结果表明,建立的快速鉴别诊断方法具有检测限低、重复性好、定量准确、数小时内即可得出检测结果的优点,极大地提高了进境动物源性饲料中沙门菌检测的工作效率和口岸通关速度。 展开更多
关键词 沙门菌 肠道菌 进境动物源性饲料 实时荧光定量pcr(real-time qpcr)
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白砂糖DNA提取方法的比较
4
作者 齐玲倩 刘秀 +3 位作者 丁梦璇 李静媛 刘远远 尹建军 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期244-248,共5页
为了得到高效的白砂糖DNA提取方法,以5种白砂糖为研究对象,从前处理方法、裂解液成分及DNA纯化方法等方面对传统CTAB法进行改良,并比较了CTAB法和改良CTAB法的提取效果,结果表明:改良CTAB法提取的白砂糖DNA浓度都在2.60μg/m L以上,纯度... 为了得到高效的白砂糖DNA提取方法,以5种白砂糖为研究对象,从前处理方法、裂解液成分及DNA纯化方法等方面对传统CTAB法进行改良,并比较了CTAB法和改良CTAB法的提取效果,结果表明:改良CTAB法提取的白砂糖DNA浓度都在2.60μg/m L以上,纯度在1.8左右,且通过实时荧光定量PCR能扩增出18Sr DNA基因的对应荧光信号。因此,改良CTAB法能够高效地提取白砂糖的DNA,可为后续的分子检测奠定基础。 展开更多
关键词 白砂糖 DNA提取 改良CTAB法 实时荧光定量pcr(real-time FLUORESCENCE quantification pcr qpcr)
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