雷帕霉素对衰老细胞生物节律关键基因的调控作用观察

1

作者 刘佐君 刘宝华 孟凡彪 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第42期25-28,共4页

目的观察雷帕霉素对衰老细胞生物节律关键基因的调控作用。方法通过传代诱导人皮肤成纤维细胞复制性衰老,获得衰老的人皮肤成纤维细胞。加入50%的马血清刺激诱导细胞同步化,将细胞分为观察组和对照组,分别加入100 mmol/L的雷帕霉素和DMS... 目的观察雷帕霉素对衰老细胞生物节律关键基因的调控作用。方法通过传代诱导人皮肤成纤维细胞复制性衰老,获得衰老的人皮肤成纤维细胞。加入50%的马血清刺激诱导细胞同步化,将细胞分为观察组和对照组,分别加入100 mmol/L的雷帕霉素和DMSO培养24 h。采用荧光定量PCR法检测生物节律关键基因芳烃受体核转位蛋白3(BMAL1)、节律周期蛋白2(PER2)、蓝光受体蛋白1(CRY1)、孤儿核受体α(Rev-erbα)、孤核受体α(Rorα)mRNA表达,利用JTK-CYCLE软件分析各基因的节律周期,Western blotting法检测BMAL1、PER2、CRY1蛋白表达。结果观察组PER2、CRY1、Rev-erbα、RorαmRNA表达高于对照组(P均<0.05)。对照组BMAL1、CRY1、Rev-erbα、Rorα基因的节律周期为24 h,PER2基因的节律周期为28 h。观察组BMAL1、CRY1、Rorα基因的节律周期为24 h,Rev-erbα基因的节律周期为27.5 h,PER2的节律周期为24 h。观察组CRY1蛋白表达高于对照组(P<0.05),PER2蛋白表达低于对照组(P<0.05),两组BMAL1 mRNA及蛋白表达比较无统计学差异。结论雷帕霉素可以提高衰老的人皮肤成纤维细胞生物节律关键基因BMAL1、PER2、CRY1、Rev-erbα、RorαmRNA的表达,缩短PER2的节律周期,对紊乱的节律钟功能具有调控作用。 展开更多

关键词 生物节律 雷帕霉素 生物节律关键基因 芳烃受体核转位蛋白3 节律周期蛋白2 蓝光受体蛋白1 孤儿核受体α 孤核受体α 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白

下载PDF 职称材料

RORα miRNA真核表达载体构建及对人胃癌细胞增殖的影响 被引量：6

2

作者 凌晖 陈真伟 +4 位作者 曾铁兵 文玲 苏琦 彭娟 张杨 《中国现代医药杂志》 2011年第2期1-4,共4页

目的构建RORα(Retinoid acid receptor related orphan receptorα,维甲酸相关孤核受体α)miRNA真核表达载体,分析其对人胃癌MGC803细胞RORα蛋白表达及细胞增殖的影响。方法构建针对设计RORαmiRNA表达的3对miRNA干扰序列,克隆入pcDNA... 目的构建RORα(Retinoid acid receptor related orphan receptorα,维甲酸相关孤核受体α)miRNA真核表达载体,分析其对人胃癌MGC803细胞RORα蛋白表达及细胞增殖的影响。方法构建针对设计RORαmiRNA表达的3对miRNA干扰序列,克隆入pcDNATM6.2-GW/EmGFP miRNA真核表达载体,在测序鉴定无误后将含RORαmiRNA转染人胃癌MGC803细胞,用Western blo检测MGC803细胞转染前后RORα蛋白的表达水平变化。MTT法检测对转染MGC803细胞增殖的影响。结果 Western blot结果证实,MGC803细胞转染RORαmiRNA后24h RORα蛋白表达水平明显低于转染阴性组(P<0.05)。MTT结果显示,转染RORαmiRNA后细胞增殖率(光吸收值)高于转染阴性组(P<0.05)。结论 miRNA靶向抑制RORα表达后,可促进人胃癌MGC803细胞增殖,提示RORα是一个潜在的胃癌基因及药物治疗的靶点。 展开更多

关键词 胃癌 维甲酸相关孤核受体α 微小RNA 增殖

下载PDF 职称材料

维甲酸受体相关孤核受体α作为肿瘤治疗潜在靶点的研究进展 被引量：4

3

作者 陈海飞 王天笑 +3 位作者 石焕英 钟明康 李群益 施孝金 《上海医药》 CAS 2021年第23期8-11,82,共5页

维甲酸受体相关孤核受体α(retinoic acid receptor-related orphan nuclear receptorα,RORα)属于核受体甾体激素受体家族成员,其是一种转录因子,在多种生理、病理过程中起着关键的调节作用。近年来,越来越多的证据表明,RORα参与多... 维甲酸受体相关孤核受体α(retinoic acid receptor-related orphan nuclear receptorα,RORα)属于核受体甾体激素受体家族成员,其是一种转录因子,在多种生理、病理过程中起着关键的调节作用。近年来,越来越多的证据表明,RORα参与多种恶性肿瘤的发生、发展过程,故被认为是肿瘤治疗的潜在靶点。本文介绍RORα在几种常见肿瘤中的作用及其机制的研究进展,为RORα在肿瘤治疗领域的基础研究和临床转化研究提供参考。 展开更多

关键词 维甲酸受体相关孤核受体α 肿瘤治疗靶点 转录因子

下载PDF 职称材料

RORα过表达病毒载体尾静脉注射对多柔比星诱导小鼠心脏毒性的抑制作用及其机制

4

作者 赵小华 李艳 +2 位作者 张卫泽 徐臣年 刘治国 《山东医药》 CAS 2024年第23期36-40,共5页

目的观察维甲酸相关孤核受体α(RORα)过表达病毒载体尾静脉注射对多柔比星(DOX)诱导小鼠心脏毒性(DIC)的影响,并探讨其可能的机制。方法将80只雄性C57BL/6小鼠随机分为Con组、DIC组、DIC+RORα组、DIC+RORα+EX527组,每组20只。DIC+RO... 目的观察维甲酸相关孤核受体α(RORα)过表达病毒载体尾静脉注射对多柔比星(DOX)诱导小鼠心脏毒性(DIC)的影响,并探讨其可能的机制。方法将80只雄性C57BL/6小鼠随机分为Con组、DIC组、DIC+RORα组、DIC+RORα+EX527组,每组20只。DIC+RORα组和DIC+RORα+EX527组经尾静脉注射过表达RORα基因的腺相关病毒9型(AAV9)载体,DIC组经尾静脉注射AAV9空白对照载体;AAV9载体注射3周后,除Con组外均采用尾静脉注射DOX的方法建立DIC小鼠模型;DIC+RORα+EX527组每次DOX注射后腹腔注射沉默信息调节因子(SIRT1)信号通路特异性阻断剂EX527。各组分组处理后4周,经胸超声心动图检查测算左心室射血分数(LVEF)和左心室缩短分数(LVFS),处死后取眼眶血和心肌组织。采用HE染色观察心肌组织病理情况,ELISA法检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌钙蛋白I(cTnI)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α),TUNEL染色后计算细胞凋亡率,二氢乙锭法检测心肌组织活性氧(ROS)表达,比色法检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)表达,免疫荧光染色观察心肌组织巨噬细胞浸润和NF-κB p65表达,Western blotting法检测心肌组织cleaved Caspase-3、RORα、SIRT1蛋白表达并计算Ac-NF-κB p65/NF-κB p65、Ac-Foxo1/Foxo1,实时荧光定量PCR法检测心肌组织RORα、SIRT1 mRNA表达。结果与Con组比较,DIC组小鼠心肌纤维排列紊乱且断裂明显,心肌细胞空泡化显著;与DIC组、DIC+RORα+EX527组比较,DIC+RORα组小鼠心肌纤维断裂及心肌细胞空泡化均减轻。LVEF、LVFS及心肌组织SOD、GSH-Px:Con组>DIC+RORα组>DIC组、DIC+RORα+EX527组(P均<0.05)。血清CK-MB、LDH、cTnI、IL-1β、IL-6、TNF-α及心肌组织细胞凋亡率、cleaved Caspase-3蛋白、ROS、MDA、巨噬细胞浸润、NF-κB p65:Con组<DIC+RORα组<DIC组、DIC+RORα+EX527组(P均<0.05)。RORαmRNA及蛋 展开更多

关键词 维甲酸相关孤核受体α 多柔比星 心脏毒性 氧化应激 炎症反应 沉默信息调节因子1

下载PDF 职称材料

维甲酸相关孤核受体α抗肝纤维化作用研究进展 被引量：2

5

作者 袁灿 王正根 《现代医药卫生》 2014年第3期391-393,共3页

肝纤维化是肝脏对各种致病因子（相关肝炎病毒、慢性酒精中毒、脂肪性肝炎等）所致的慢性损伤的一种慢性炎性反应过程，

关键词 受体 胞质和核 肝硬化 孤核受体 维甲酸相关孤核受体α WNT信号传导通路 综述

下载PDF 职称材料

稳定高表达RORα基因的人胃癌MGC803细胞系的构建与鉴定 被引量：3

6

作者 赵晓红 向姝霖 +5 位作者 刘芳 夏红 曾希 苏波 凌晖 苏琦 《中南医学科学杂志》 CAS 2016年第1期5-10,共6页

目的构建维甲酸相关孤核受体α(RORα)基因的真核表达载体,并建立稳定高表达RORα的人胃癌MGC803细胞,为研究RORα的功能奠定基础。方法根据RORα基因的c DNA全序列,设计一对带有限制性酶切位点的引物。从人胃癌MGC803细胞中提取mRNA作... 目的构建维甲酸相关孤核受体α(RORα)基因的真核表达载体,并建立稳定高表达RORα的人胃癌MGC803细胞,为研究RORα的功能奠定基础。方法根据RORα基因的c DNA全序列,设计一对带有限制性酶切位点的引物。从人胃癌MGC803细胞中提取mRNA作为模板合成RORαc DNA第一链,并用上述引物扩增目的基因全序列,然后经双酶切插入到真核表达载体pc DNA3.1(+),转化大肠杆菌DH5α;用氨苄青霉素筛选pc DNA3.1(+)-RORα的阳性菌株,双酶切和测序进行鉴定。用经鉴定的重组质粒pc DNA3.1(+)-RORα转染MGC803细胞,G418筛选获得RORα/MGC803细胞株;Real-time PCR和Western blot检测该细胞株RORα的表达情况。结果经双酶切鉴定,构建的真核表达载体pc DNA3.1(+)-RORα包含有大约1 640 bp的插入片段,与预期大小一致;表达载体经测序鉴定,其插入片段碱基序列与RORα基因的c DNA序列完全一致。用构建的真核表达载体pc DNA3.1(+)-RORα转染MGC803细胞后,筛选到可稳定传代的RORα/MGC803细胞株。Real-time PCR与Western blot检测显示,RORα/MGC803细胞RORαmRNA和蛋白表达增高。结论成功构建真核表达载体pc DNA3.1(+)-RORα和建立高表达RORα基因的RORα/MGC803细胞。 展开更多

关键词 维甲酸相关孤核受体α 真核表达 转染 人胃癌MGC803细胞

下载PDF 职称材料

维甲酸相关孤核受体α(RORα)在奥曲肽抗大鼠肝纤维化中的作用 被引量：3

7

作者 龚义飞 张超 +3 位作者 何新苗 骆会来 张慧平 张冲 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第6期841-844,共4页

目的观察奥曲肽(OCT)对实验性肝纤维化大鼠肝组织病理学及肝脏血清学的影响,探究维甲酸相关孤核受体α(RORα)在奥曲肽抗大鼠肝纤维化的作用。方法将36只雄性SD大鼠随机分成3组:对照组、模型组、OCT组。实验采用四氯化碳(CCl4)建立肝纤... 目的观察奥曲肽(OCT)对实验性肝纤维化大鼠肝组织病理学及肝脏血清学的影响,探究维甲酸相关孤核受体α(RORα)在奥曲肽抗大鼠肝纤维化的作用。方法将36只雄性SD大鼠随机分成3组:对照组、模型组、OCT组。实验采用四氯化碳(CCl4)建立肝纤维化模型(模型组和OCT组),饲养8周后处死大鼠并随机采集标本,使用HE及VG染色法观察大鼠肝细胞的病理改变;检测大鼠血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、透明质酸(HA)、大鼠层粘连蛋白(LN)、大鼠Ⅲ型前胶原氨基端原肽(PⅢNP)、大鼠Ⅳ型胶原(COL4)含量;使用Ishak评分系统分析各组肝细胞的炎症活动度及纤维化程度;Western blot法检测肝组织RORα受体的表达情况。结果与对照组比较,模型组和OCT治疗组大鼠肝脏细胞的病理变化程度、肝脏炎症活动度、肝脏纤维化程度、肝脏血清AST、ALT、HA、LN、PⅢNP、COL4含量均显著上升,RORα显著下降(P<0.01)。与模型组比较,OCT治疗组大鼠肝脏细胞的病理变化程度、肝脏炎症活动度、肝脏纤维化程度、肝脏血清AST、ALT、HA、LN、PⅢNP、COL4含量显著下降,RORα下降程度降低(P<0.05)。结论OCT可降低大鼠体内RORα的下降程度,减少肝功能损害及肝纤维化程度,治疗实验性大鼠肝纤维化效果确切。 展开更多

关键词 维甲酸相关孤核受体α 奥曲肽 肝纤维化 肝功能损害

下载PDF 职称材料

视黄酸相关孤核受体α对脓毒症小鼠心肌损伤的影响 被引量：1

8

作者 韩士超 赵欢 +2 位作者 徐永强 李珍珍 胡大海 《心脏杂志》 CAS 2019年第3期249-253,共5页

目的 本研究旨在探索视黄酸相关孤核受体α(RORα)对脓毒症炎症反应及其所致的心脏功能损害影响。方法 通过腹腔注射脂多糖(LPS)建立小鼠脓毒症模型,通过LPS刺激巨噬细胞,建立脓毒症细胞模型,采用细胞转染和小鼠尾静脉注射过表达质粒,... 目的 本研究旨在探索视黄酸相关孤核受体α(RORα)对脓毒症炎症反应及其所致的心脏功能损害影响。方法 通过腹腔注射脂多糖(LPS)建立小鼠脓毒症模型,通过LPS刺激巨噬细胞,建立脓毒症细胞模型,采用细胞转染和小鼠尾静脉注射过表达质粒,以在细胞和组织中过表达RORα,进而探究RORα在脓毒症炎症反应和脓毒症所致心肌损伤中的作用。采用实时定量PCR试验、蛋白免疫印记试验检测RORα、NF-κBp65和炎症因子的变化,采用酶联免疫试验、病理切片等检测脓毒症小鼠心肌损伤的变化。结果 RORα在LPS刺激巨噬细胞中显著降低(P<0.05);过表达RORα能够显著抑制LPS刺激巨噬细胞中炎症因子白介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达(P<0.05)、NF-κBp65的核移位水平(P<0.05)、脓毒症小鼠血清中炎症因子IL-1β和TNF-α的释放、降低脓毒症小鼠肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量以及改善脓毒症所致的心肌病理损害。结论 RORα能够通过抑制NF-κBp65的核移位进而负性调控LPS刺激巨噬细胞中的炎症反应,从而缓解脓毒症小鼠的炎症反应及心肌损害。 展开更多

关键词 视黄酸相关孤核受体α 巨噬细胞 脓毒症 脂多糖 心肌损伤

下载PDF 职称材料

RORα miRNA转染对DADS抑制胶质瘤U251细胞增殖的影响

9

作者 凌晖 李振丰 +4 位作者 曾铁兵 文玲 刘芳 李艳兰 朱亚平 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期99-102,共4页

背景与目的:维甲酸相关孤核受体α(retinoid acid receptor related orphan receptorα,RORα)可能参与肿瘤的调控。本实验室前期研究发现,二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)可抑制人胶质瘤U251细胞增殖,其抑制增殖作用可能与诱导RO... 背景与目的:维甲酸相关孤核受体α(retinoid acid receptor related orphan receptorα,RORα)可能参与肿瘤的调控。本实验室前期研究发现,二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)可抑制人胶质瘤U251细胞增殖,其抑制增殖作用可能与诱导RORα蛋白表达上调有关。为了明确RORα在DADS抑制人胶质瘤细胞增殖中的作用,本研究采用miRNA干扰技术抑制RORα表达,观察其对DADS抑制U251细胞增殖的影响。方法:首先将RORαmiRNA转染人胶质瘤U251细胞,运用Western blot检测转染前后RORα蛋白表达情况。实验分为未转染组、脂质体转染组和RORαmiRNA转染组及分别经30 mg/L DADS处理后的3组,共6组。MTT法检测RORα表达下调对DADS抑制胶质瘤U251细胞增殖的影响。结果:Western blot结果显示,转染RORαmiRNA细胞的RORα蛋白表达(0.09±0.05)明显低于未转染组(0.81±0.11)和脂质体转染组(0.89±0.15),其蛋白表达下调了89.5%(P<0.05)。MTT结果显示,U251细胞增殖活性在RORαmiRNA转染后48 h A570值为(0.98±0.15),高于未转染组(0.47±0.11)和脂质体转染组(0.45±0.10)(P<0.05),其增殖率高达108.5%。并且RORαmiRNA转染削弱了DADS对U251细胞的增殖抑制作用,转染RORαmiRNA细胞加入DADS后的细胞增殖率(A570值为0.69±0.20)明显高于DADS处理的未转染组(0.28±0.13)和脂质体转染组(0.25±0.12)(P<0.05),其抑制率由40.4%下降为29.6%。结论:miRNA干扰RORα表达可促进U251细胞增殖,并且削弱了DADS对U251细胞的增殖抑制作用,说明RORα参与了DADS抗胶质瘤U251细胞增殖的作用。 展开更多

关键词 胶质瘤 维甲酸相关孤核受体α 微小RNA 二烯丙基二硫 增殖 U251细胞

下载PDF 职称材料

维甲酸相关孤核受体α抵抗小鼠压力负荷型心肌损伤的作用及机制研究

10

作者 杨家昌 张彬 +6 位作者 朱瀚朝 李霞云 江丽青 金振晓 刘金成 段维勋 俞世强 《中国体外循环杂志》 2023年第6期360-367,共8页

目的探究维甲酸相关孤核受体α(RORα)在小鼠压力负荷引起的心肌损伤中的具体作用。方法通过小鼠主动脉弓缩窄手术(TAC)后8周建立压力负荷型心肌损伤模型。实验小鼠分为以下4组:假手术(Sham)+空载病毒(null)处理组(Sham+null组)、Sham+... 目的探究维甲酸相关孤核受体α(RORα)在小鼠压力负荷引起的心肌损伤中的具体作用。方法通过小鼠主动脉弓缩窄手术(TAC)后8周建立压力负荷型心肌损伤模型。实验小鼠分为以下4组:假手术(Sham)+空载病毒(null)处理组(Sham+null组)、Sham+心肌特异性过表达RORα病毒处理组(Sham+RORα组)、TAC+null组、TAC+RORα组。TAC后8周检测心肌RORα表达水平;心脏收缩功能;心肌纤维化指标包括心肌血管周纤维化百分比、组织间隙纤维化百分比、结缔组织生长因子(CTGF)、I型胶原蛋白(CollagenⅠ)表达水平;心肌肥厚指标包括心脏体重比、心肌细胞平均横截面积、脑钠肽(BNP)表达水平;氧化应激指标包括活性氧(ROS)产量、丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性、核因子红系2相关因子2(Nrf2)、超氧化物歧化酶2(SOD2)表达水平;炎症反应指标包括核因子-κ-基因结合(NF-κB)含量、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平。结果与TAC+null组相比,TAC+RORα组小鼠心脏RORα表达水平明显增高;心脏收缩功能显著改善;心肌纤维化指标包括心肌血管周纤维化百分比、组织间隙纤维化百分比、CTGF、CollagenⅠ表达水平显著降低;心肌肥厚指标包括心脏体重比、心肌细胞平均横截面积、BNP表达水平显著降低;氧化应激指标包括心肌ROS生成、MDA含量显著降低,而Nrf2、SOD2表达水平明显增高;炎症反应指标包括心肌NF-κB、TNF-α表达水平显著降低(均P<0.05)。结论心肌特异性过表达RORα处理可通过抑制心肌组织氧化应激和炎症反应、延缓TAC所致的心肌肥厚和心肌纤维化,最终发挥减轻压力负荷型心肌损伤的保护作用。 展开更多

关键词 维甲酸相关孤核受体α 压力负荷 心肌损伤 氧化应激 炎症反应

下载PDF 职称材料

二烯丙基二硫在RORα抑制人胃癌细胞上皮间质转化中的作用 被引量：1

11

作者 刘芳 苏坚 +5 位作者 曾颖 夏红 苏波 凌晖 曾希 苏琦 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第18期7-14,共8页

目的探讨二烯丙基二硫(DADS)是否上调维甲酸相关孤核受体α(RORα)抑制人胃癌细胞株MGC803细胞上皮-间质转化(EMT)。方法相差显微镜观察MGC803细胞形态的改变。逆转录PCR(RTPCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)、免疫荧光与免疫组织化... 目的探讨二烯丙基二硫(DADS)是否上调维甲酸相关孤核受体α(RORα)抑制人胃癌细胞株MGC803细胞上皮-间质转化(EMT)。方法相差显微镜观察MGC803细胞形态的改变。逆转录PCR(RTPCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)、免疫荧光与免疫组织化学检测EMT的相关分子表达。裸鼠实验检测DADS与沉默RORα对移植瘤生长的影响。结果相差显微镜显示,沉默RORα细胞较MGC803细胞大小与形状差异更明显。DADS作用后,细胞大小较一致,呈圆形或椭圆形,梭形细胞减少,异型性下降。RT-PCR与Western blot显示,DADS处理后较处理前各组RORαm RNA与蛋白表达上调(P<0.05)。DADS作用对照组与空载体组较沉默组效果更为明显(P<0.05)。RORα沉默较对照组和空载体组细胞锌指转录因子(Snail)和波形蛋白(Vimentin)m RNA与蛋白表达上调,而E-钙黏蛋白(E-cadherin)m RNA与蛋白下调(P<0.05)。DADS处理后,各组Snail蛋白下调、Vimentin m RNA与蛋白下调和E-cadherin m RNA与蛋白上调(P<0.05)。免疫荧光显示,沉默组细胞Snail与Vimentin阳性表达较对照组增强,而E-cadherin阳性表达减弱。DADS作用后,结果相反。裸鼠移植瘤实验显示,RORα沉默组移植瘤较对照组生长加快和体重增加(P<0.05),增殖细胞核抗原(Ki-67)、Snail、CD34及Vimentin阳性表达较对照组增加,而E-cadherin阳性降低。DADS处理各组移植瘤生长与体积减慢与减小,Ki-67、Snail、CD34与Vimentin阳性表达较对照组减弱,而E-cadherin阳性表达增强。结论 DADS通过上调RORα可体内外抑制人胃癌MGC803细胞EMT。 展开更多

关键词 二烯丙基二硫 维甲酸相关孤核受体α 人胃癌MGC803细胞 上皮-间质转化

下载PDF 职称材料

二烯丙基二硫对人胶质瘤U251细胞增殖及RORα表达的影响 被引量：1

12

作者 凌晖 曾铁兵 +4 位作者 文玲 张峰华 刘芳 彭娟 张杨 《中国现代医药杂志》 2010年第5期1-4,共4页

目的探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对人胶质瘤U251细胞增殖及维甲酸相关孤核受体α(RORα)蛋白表达的影响。方法采用MTT比色实验、群体倍增时间分析DADS对人胶质瘤U251细胞的生长抑制效应;Western blot技术分析RORα蛋白在D... 目的探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对人胶质瘤U251细胞增殖及维甲酸相关孤核受体α(RORα)蛋白表达的影响。方法采用MTT比色实验、群体倍增时间分析DADS对人胶质瘤U251细胞的生长抑制效应;Western blot技术分析RORα蛋白在DADS处理U251细胞前后的表达改变。结果DADS浓度从15、22.5、30、37.5到45mg/L处理U251细胞,其吸光值比对照组低,而且随浓度增加逐渐降低(P<0.05);相反,随着浓度增加,DADS对细胞增殖的抑制率从32.88%、41.83%、49.50%、59.42%到68.53%逐渐增强(P<0.05);未处理的U251细胞群体倍增时间为21.86h,而DADS处理后的细胞,细胞群体倍增时间延长至36.69h(P<0.05);Western blot结果发现,DADS处理U251细胞24、48h后,RORα蛋白表达(0.69±0.13、1.37±0.25)较未处理组(0.22±0.16)明显上调(P<0.05),且48h处理组高于24h处理组(P<0.05)。结论DADS可抑制人胶质瘤U251细胞增殖,其抑制增殖作用可能与诱导RORα蛋白表达上调有关。 展开更多

关键词 胶质瘤 二烯丙基二硫 细胞增殖 维甲酸相关孤核受体α

下载PDF 职称材料

肝细胞癌组织中维甲酸相关孤核受体α的表达变化及其意义 被引量：1

13

作者 谷锋 杨继宏 +4 位作者 李琮 张洪安 康明 段文都 刘岩 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第35期90-92,共3页

目的观察肝细胞癌(HCC)组织中维甲酸相关孤核受体α(RORα)的表达变化,并探讨其临床意义。方法取92例HCC患者,术中获取HCC组织和癌旁正常肝组织各92例份。分别采用免疫组化法及Western blotting法检测HCC组织和癌旁正常肝组织中的RORα... 目的观察肝细胞癌(HCC)组织中维甲酸相关孤核受体α(RORα)的表达变化,并探讨其临床意义。方法取92例HCC患者,术中获取HCC组织和癌旁正常肝组织各92例份。分别采用免疫组化法及Western blotting法检测HCC组织和癌旁正常肝组织中的RORα、VEGF,分析RORα表达与HCC临床病理参数的关系。结果HCC组织及正常肝组织中RORα阳性分别为31(33.7%)、62(67.3%)例,VEGF阳性分别为74(80.4%)、17(18.5%)例。HCC组织中RORα阳性表达率低于正常肝组织,VEGF阳性表达率高于正常肝组织(P均<0.05)。HCC组织及正常肝组织中RORα相对表达量分别为0.52±0.07、1.70±0.03,VEGF相对表达量分别为1.94±0.08、0.55±0.07。HCC组织中RORα相对表达量低于正常肝组织,VEGF相对表达量高于正常肝组织(P均<0.05)。HCC组织中RORα与VEGF表达无相关性(P>0.05)。RORα阳性表达与HCC患者的年龄、性别、肿瘤直径、临床分期、淋巴结转移情况等无关(P均>0.05)。HCC病理分级为Ⅰ~Ⅱ级者RORα阳性表达比例高于Ⅲ级者(P<0.05)。结论 HCC组织中RORα表达下调,且与HCC的病理分级有关。RORα表达异常可能参与了HCC的发生发展。 展开更多

关键词 肝肿瘤 肝细胞癌 维甲酸相关孤核受体α 血管内皮生长因子

下载PDF 职称材料

维甲酸相关孤核受体α及其激动剂SR1078的研究进展

14

作者 张翼臻 周秀田 苏琦 《现代医药卫生》 2015年第19期2942-2945,共4页

在过去的一段时间,一些关于维甲酸相关孤核受体α（retinoid acid receptor related orphan receptorα,RORα）研究迅速增加。RORα在一些病理生理功能中的潜在作用机制,特别是ROR缺陷小鼠和基因表达分析的特性RORα的关键功能,为其各... 在过去的一段时间,一些关于维甲酸相关孤核受体α（retinoid acid receptor related orphan receptorα,RORα）研究迅速增加。RORα在一些病理生理功能中的潜在作用机制,特别是ROR缺陷小鼠和基因表达分析的特性RORα的关键功能,为其各种生理过程的调节提供了解释。RORα进一步参与各种代谢途径的调节,使体内能量平衡。此外，ROR（x调节生物钟几个组件的表达，可能参与生物钟的整合和节奏下游（代谢）基因的表达模式。 展开更多

关键词 受体 维甲酸 受体 胞质和核 维甲酸相关孤核受体α SR1078 激动剂 综述

下载PDF 职称材料

鸡RORα真核表达载体的构建及其在MSB1细胞中的表达

15

作者 尤钊 左珂朦 +5 位作者 余祖华 丁轲 王垚垚 刘彤 张梦珂 邱静静 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第7期1791-1797,共7页

为构建鸡维甲酸相关孤核受体α(retinoid acid receptor related orphan receptorα,RORα)的真核表达载体,并检测其在MSB1细胞中的表达效果,本研究参照GenBank中鸡RORα基因序列(登录号:NM_001289887.1)设计特异性引物,从鸡肝脏组织中... 为构建鸡维甲酸相关孤核受体α(retinoid acid receptor related orphan receptorα,RORα)的真核表达载体,并检测其在MSB1细胞中的表达效果,本研究参照GenBank中鸡RORα基因序列(登录号:NM_001289887.1)设计特异性引物,从鸡肝脏组织中提取总RNA,经反转录合成cDNA,以此为模板进行PCR扩增,将扩增的特异性RORα基因片段连接pMD18-T载体,构建克隆载体pMD18-T-RORα,再用SalⅠ和BamHⅠ双酶切克隆载体pMD18-T-RORα和真核表达载体pEGFP-N1,将酶切回收的RORα与pEGFP-N1片段进行连接,构建重组真核表达载体pEGFP-N1-RORα,经PCR、酶切和测序验证准确性后,将其转染MSB1细胞,于转染后48h荧光显微镜下观察EGFP的表达情况,并采用实时荧光定量PCR检测鸡RORα在MSB1细胞中的表达水平。结果显示,从构建的重组质粒pEGFP-N1-RORα中可扩增出大小约1 600bp的特异性片段,用SalⅠ和BamHⅠ可切出大小约4 700和1 600bp的两条带。实时荧光定量PCR结果显示,转染MSB1细胞48h后,与对照组相比,重组真核表达载体转染组中鸡RORα基因mRNA水平显著增加(P<0.05)。表明本试验成功构建了鸡RORα的真核表达载体,该载体可在MSB1细胞中表达鸡RORα,为进一步研究鸡RORα对MSB1细胞增殖的影响奠定基础。 展开更多

关键词 鸡 甲酸相关孤核受体α(RORα)基因 真核表达载体 MSB1细胞 表达

下载PDF 职称材料

维甲酸相关孤核受体α(RORα)在头颈部鳞癌中的表达及意义

16

作者 孙京宇 蔡振林 钱永 《赣南医学院学报》 2022年第4期355-361,共7页

目的:观察并探讨维甲酸相关孤核受体α(Retinoid orphan nuclear receptorα,RORα)参与头颈部鳞癌侵袭转移的作用机制。方法:通过免疫组织化学染色检测RORα在头颈部鳞癌组织中的表达;再采用RORα激活剂(SR1078)干预及转染RORαcDNA两... 目的:观察并探讨维甲酸相关孤核受体α(Retinoid orphan nuclear receptorα,RORα)参与头颈部鳞癌侵袭转移的作用机制。方法:通过免疫组织化学染色检测RORα在头颈部鳞癌组织中的表达;再采用RORα激活剂(SR1078)干预及转染RORαcDNA两种技术手段,激活头颈部鳞癌细胞中RORα的表达,而后观察细胞的体外增殖、迁移及侵袭能力及肿瘤侵袭转移相关因子表达水平的变化。结果:RORα在头颈部鳞癌组织及体外培养的两种头颈部鳞癌细胞株中不表达或仅呈极低表达,而在癌旁正常组织标本中则呈较为恒定的高表达;采用RORα激活剂(SR1078)进行干预处理及转染RORαcDNA两种方法激活头颈部鳞癌细胞株中RORα表达后,癌细胞增殖、迁移及体外侵袭能力均显著受到抑制,E-cadherin表达明显上调,MMP-2、MMP-9表达明显下调,MTA-1及β-catenin表达水平稍有下降;两种方法所获得的结果基本一致。结论:RORα表达下调在头颈部鳞癌侵袭转移中发挥重要作用;采用SR1078干预或转染RORαcDNA的技术手段激活头颈部鳞癌细胞中RORα的表达,可显著抑制癌细胞的增殖、迁移及侵袭活性。 展开更多

关键词 头颈部鳞癌 维甲酸相关孤核受体α 侵袭 转移

下载PDF 职称材料

RORα与G6PD在胃癌组织中的表达及临床意义

17

作者 蔡想想 史维俊 刘牧林 《江苏医药》 CAS 2020年第9期881-884,F0002,共5页

目的探讨维甲酸相关孤核受体α(RORα)与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)在胃癌组织中的表达及临床意义。方法收集60例胃癌患者胃癌组织及其对应的正常胃组织,采用免疫组化染色及Western blot检测RORα与G6PD的表达,分析两者在胃癌组织中的... 目的探讨维甲酸相关孤核受体α(RORα)与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)在胃癌组织中的表达及临床意义。方法收集60例胃癌患者胃癌组织及其对应的正常胃组织,采用免疫组化染色及Western blot检测RORα与G6PD的表达,分析两者在胃癌组织中的表达与临床病理特征的关系。结果RORα在正常胃组织的表达高于胃癌组织;随着TNM分期的增加,RORα在胃癌组织中的表达逐渐降低(P<0.05)。G6PD在正常胃组织表达较胃癌组织低,随着TNM分期的增加而表达增高(P<0.05)。RORα与G6PD在胃癌组织的表达与与肿瘤TNM分期及有无淋巴结转移密切相关(P<0.05),但与患者年龄、性别、肿瘤大小和位置无明显关联(P>0.05)。RORα与G6PD在胃癌组织的表达具有相关性(P<0.01)。结论胃癌组织中RORα和G6PD的表达与肿瘤TNM分期及有无淋巴结转移相关,可能参与胃癌的发生和发展。 展开更多

关键词 维甲酸相关孤核受体α 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 胃癌

原文传递

二烯丙基二硫对人胃癌细胞维甲酸相关孤核受体α表达的影响

18

作者 石莺 黄建军 +4 位作者 唐章文 谭亚丽 吉晓霞 凌晖 苏琦 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第15期1678-1680,共3页

目的探讨二烯丙基二硫(DADS)处理前后人胃癌细胞中维甲酸相关孤核受体α(RORα)表达变化情况。方法 将胃癌SGC7901、MGC803细胞分为对照组和DADS处理组,进行体外细胞培养及细胞形态学观察,采用免疫细胞化学、Western blot分析RORα的表... 目的探讨二烯丙基二硫(DADS)处理前后人胃癌细胞中维甲酸相关孤核受体α(RORα)表达变化情况。方法 将胃癌SGC7901、MGC803细胞分为对照组和DADS处理组,进行体外细胞培养及细胞形态学观察,采用免疫细胞化学、Western blot分析RORα的表达;半定量RT-PCR检测RORα核酸水平的表达。结果 DADS处理24 h后,胃癌SGC7901、MGC803细胞形态学发生明显改变;RORα在人胃癌SGC7901、MGC803细胞核中呈强阳性表达,与对照组比较表达显著上调;半定量RT-PCR灰度扫描定量分析结果显示,DADS处理24 h后,SGC7901、MGC803细胞中RORα的表达量[(1.09±0.01)与(0.97±0.01)]较对照组[(0.45±0.03)与(0.44±0.02)]显著上调,差异均有统计学意义(P<0.01);Western blot分析及灰度扫描显示,DADS处理人胃癌MGC803、SGC7901细胞8、12、24 h后,RORα蛋白表达量较未处理组显著上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 DADS可诱导人胃癌细胞分化,其诱导分化作用可能与上调RORα表达有关。 展开更多

关键词 二烯丙基二硫 维甲酸相关孤核受体α 胃肿瘤 细胞分化

下载PDF 职称材料

内蒙古绒山羊孤核受体RORα部分cDNA克隆及序列分析 被引量：1

19

作者 赵艳红 孙永明 +2 位作者 刘志红 张燕军 李金泉 《内蒙古农业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2010年第3期1-4,共4页

依据已发表的牛、狗、人、小鼠等哺乳动物孤核受体RORα基因序列设计跨内含子引物,以内蒙古绒山羊cD-NA为模板进行RT-PCR扩增,得到417bp的基因序列,将扩增产物进行克隆测序后与GeneBank数据库进行序列同源性比较分析:绒山羊RORαcDNA扩... 依据已发表的牛、狗、人、小鼠等哺乳动物孤核受体RORα基因序列设计跨内含子引物,以内蒙古绒山羊cD-NA为模板进行RT-PCR扩增,得到417bp的基因序列,将扩增产物进行克隆测序后与GeneBank数据库进行序列同源性比较分析:绒山羊RORαcDNA扩增序列与牛、狗、猪和小鼠的同源性分别为98.3%、95.4%、95.2%和87.8%;与牛、猪、人、马、鼠相比RORα基因氨基酸序列同源性非常高,说明所获得序列为内蒙古绒山羊RORαcDNA序列,而且各种哺乳动物的RORα基因保守性较强。 展开更多

关键词 绒山羊 孤核受体RORα 克隆 序列分析

下载PDF 职称材料