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活体心肌细胞NAD(P)H荧光的光谱分辨的荧光寿命光谱研究
1
作者 程颖 ANEBA Swida +7 位作者 Swida CHORVAT Jr.Dusan Jr.Dusan BASSIEN-Capasa Valerie Valerie 臧伟进 CHORVATOVA Alzbeta Alzbeta 《透析与人工器官》 2012年第4期20-37,共18页
目的 研究实验动物心肌线粒体氧化还原状态,监测缺血时线粒体功能改变的早期信号.方法 线粒体呼吸链主要电子供应者烟酰胺腺嘌呤(磷酸)二核苷酸,或NAD(P)H荧光为无创荧光标记,用光谱分辨的时间相关单光子计数(TCSPC)检测紫外光(UV)激发... 目的 研究实验动物心肌线粒体氧化还原状态,监测缺血时线粒体功能改变的早期信号.方法 线粒体呼吸链主要电子供应者烟酰胺腺嘌呤(磷酸)二核苷酸,或NAD(P)H荧光为无创荧光标记,用光谱分辨的时间相关单光子计数(TCSPC)检测紫外光(UV)激发的心肌自发荧光(AF)光谱和荧光寿命.结果 需用至少3个荧光寿命池0.4～0.7 ns,1.2～1.9 ns和8.0～13.0 ns描述心肌AF.相关衰减光谱(DAS)显示4个NAD(P)H荧光固有光谱,分别为峰值470 nm的短荧光寿命池,及450 nm,470 nm和490 nm的中间和长荧光寿命池.酮体增加线粒体NADH产量,提高AF强度,但不改变荧光寿命.线粒体呼吸阻断剂Rotenone,显著增加AF强度和缩短平均荧光寿命.氧化磷酸化解偶联剂Dinitrophenol (DNP),显著降低AF强度,在520 nm处增宽荧光光谱并显著延长平均荧光寿命.这些结果和NADH荧光动力学离体实验(in vitro)及模拟缺血状态实验有可比性.结论 研究可解释NADH构象改变,以及从NADH到异戎酸脱氢酶(LipDH)结合的黄素蛋白间能量转移的荧光动力学变化.光谱分辨的荧光寿命显微技术提供了在细胞水平上研究心肌能量代谢或线粒体功能障碍的新工具. 展开更多
关键词 NAD(P)H 自发荧光 光谱分辨的荧光寿命 线粒体 存活心肌细胞
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光谱分辨的NAD(P)H荧光寿命光谱学对心肌氧化代谢的评估
2
作者 程颖 任明明 +4 位作者 牛延艳 乔建华 Aneba S. Chorvat Jr.D. Chorvatova A. 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1191-1200,共10页
应用光谱分辨的NAD(P)H荧光寿命光谱学研究心肌细胞线粒体氧化代谢状态,监测病理情况下线粒体功能改变的早期信号。研究将NAD(P)H作为无创荧光探针,用光谱分辨的时间相关单光子计数记录375nm紫外光激发的心肌自发荧光(AF)光谱和寿命,测... 应用光谱分辨的NAD(P)H荧光寿命光谱学研究心肌细胞线粒体氧化代谢状态,监测病理情况下线粒体功能改变的早期信号。研究将NAD(P)H作为无创荧光探针,用光谱分辨的时间相关单光子计数记录375nm紫外光激发的心肌自发荧光(AF)光谱和寿命,测试影响NADH生产或线粒体呼吸时AF动态衰减。结果显示:在420～560nm光谱区域,需用至少3个荧光寿命池0.4～0.7ns、1.2～1.9ns和8.0～13.0ns描述细胞AF。酮体增加NADH水平,提高AF强度,但不改变荧光寿命。线粒体呼吸阻断剂Rotenone,显著增加AF强度,缩短平均荧光寿命。氧化磷酸化解偶联剂(DNP),显著降低AF强度,在520nm处增宽荧光光谱,延长平均荧光寿命。这些结果和NADH荧光动力学离体实验(invitro)有可比性。研究证实光谱分辨的荧光寿命技术测定心肌NAD(P)H荧光有很好的重复性,增加了心肌氧化代谢或线粒体功能障碍在细胞水平上的知识,为临床诊断和治疗线粒体功能障碍开拓了新视野。 展开更多
关键词 烟酰胺腺嘌呤(磷酸)二核苷酸 自发荧光 光谱分辨的荧光寿命 线粒体 存活心肌细胞
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术前血清NT-proBNP水平及心肌细胞存活数对冠心病合并慢性缺血性心衰患者行单纯搭桥手术疗效的影响
3
作者 杨敏烈 刘峻豪 孙寒松 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2009年第2期111-114,共4页
目的评价术前血清N末端脑钠肽前体水平及心肌细胞存活数对于单纯的冠状动脉旁路移植术治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病合并慢性缺血性心衰患者疗效的影响。方法回顾北京阜外医院自1996年10月至2007年12月,102例冠心病合并慢性缺血性心衰... 目的评价术前血清N末端脑钠肽前体水平及心肌细胞存活数对于单纯的冠状动脉旁路移植术治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病合并慢性缺血性心衰患者疗效的影响。方法回顾北京阜外医院自1996年10月至2007年12月,102例冠心病合并慢性缺血性心衰患者行单纯冠状动脉旁路移植术的临床资料,其中24例术前行血清N末端脑钠肽前体检测,77例行心肌灌注核素扫描,运用统计学原理分析两者对于手术疗效的影响。结果全组术后及早期随访的超声心动图指标较术前有显著改善(P<0.05);术后心功能改善的程度与术前心肌细胞存活数的多少呈正相关,与术前血清N末端脑钠肽前体水平的高低呈负相关。结论对冠心病合并慢性缺血性心衰患者,单纯的心肌再血管化是确切、有效的治疗方法。没有明确心肌梗死病史或有心肌梗死区但尚有存活心肌,术前血清N末端脑钠肽前体水平较低,疗效更显著。 展开更多
关键词 N末端脑钠肽前体 存活心肌细胞 冠状动脉粥样硬化性心脏病 慢性缺血性心衰 单纯冠状动脉旁路移植术
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应用心肌自发荧光评估存活心肌线粒体氧化代谢状态
4
作者 程颖 任明明 +3 位作者 刘云奇 Aneba S. Chorvat Jr.D. Chorvatova A. 《华西医学》 CAS 2009年第7期1767-1771,共5页
目的：应用心肌自发荧光（AF）研究心肌线粒体氧化代谢状态，监测线粒体功能改变的早期信号。方法：烟酰胺腺嘌呤（磷酸）二核苷酸ENAD（P）HI作为荧光探针，用光谱分辨的时间相关单光子计数（TCSPC）记录375nm紫外激光激发的心肌AF光... 目的：应用心肌自发荧光（AF）研究心肌线粒体氧化代谢状态，监测线粒体功能改变的早期信号。方法：烟酰胺腺嘌呤（磷酸）二核苷酸ENAD（P）HI作为荧光探针，用光谱分辨的时间相关单光子计数（TCSPC）记录375nm紫外激光激发的心肌AF光谱和荧光寿命，测试影响线粒体呼吸时AF动态衰减。结果：在420～560nm光谱区域，至少需用3个荧光寿命池0．4～0．7ns，1．2～1．9ns和8．0～13．0ns描述细胞AF。线粒体呼吸阻断剂鱼藤酮可显著增加AF强度，缩短平均荧光寿命。氧化磷酸化解偶联剂二硝基酚可显著降低AF强度，在520nm处增宽荧光光谱，延长平均荧光寿命。这些结果和NADH荧光动力学离体实验（invitro）有可比性。结论：光谱分辨的荧光寿命技术测定心肌NAD（P）H荧光有很好的重复性，在细胞水平上增加了心肌氧化代谢或线粒体功能障碍的知识，为临床诊断和治疗线粒体功能障碍开拓了新视野。 展开更多
关键词 烟酰胺腺嘌呤(磷酸)二核苷酸 自发荧光 光谱分辨的荧光寿命 线粒体 存活心肌细胞
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