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柔嫩艾美耳球虫各阶段虫体纯化方法的改进 被引量：65
1
作者 蒋建林 蒋金书 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第5期99-102,共4页
本文报道了改进的柔嫩艾美耳球虫各阶段虫体纯化方法。用胃蛋白酶消化盲肠道组织，铜筛过滤除去大颗粒杂质后，以1．1mol·mL－1蔗糖离心漂浮卵囊，然后用小于0．5mol·mL－1蔗糖溶液反复漂洗，最后以5％次氯酸钠消毒处理，获... 本文报道了改进的柔嫩艾美耳球虫各阶段虫体纯化方法。用胃蛋白酶消化盲肠道组织，铜筛过滤除去大颗粒杂质后，以1．1mol·mL－1蔗糖离心漂浮卵囊，然后用小于0．5mol·mL－1蔗糖溶液反复漂洗，最后以5％次氯酸钠消毒处理，获得了大量纯化柔嫩艾美耳球虫卵囊。孢子化卵囊经研磨，消化，游离出子孢子后，过DEAE-纤维素52层析柱，以0．05mol·mL-1，Tris－HCl，（pH＝80，0．15mol·mL1-NaCl）洗脱，层析往高5cm，洗脱液水柱高3cm，流速为2mL·min－1，纯化出了子孢子。取人工感染球虫鸡的120h后的盲肠，游离出第二代裂殖子，铜筛过滤后，过柱方法同前，纯化出了第二代裂殖子。结果证明本法分离的子孢子和第二代裂殖子活性好，回收率达87％。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 卵囊 子孢子 第二代裂殖子
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中缅边境(西段)传疟媒介的初步调查 被引量：20
2
作者 施文琦 周晓俊 +5 位作者 张仪 周晓农 胡铃 王学忠 王剑 李艳君 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期134-137,共4页
目的了解中缅边境(西段)传疟媒介的分布与构成。方法 2008年8～9月,在中缅边境的中国云南省盈江县及其相邻的缅甸昔懂县6个自然村,用诱蚊灯在人房和牛棚共进行20次通宵诱捕。将捕获的蚊虫以传统方法进行形态学鉴定,然后用复合PCR法鉴别... 目的了解中缅边境(西段)传疟媒介的分布与构成。方法 2008年8～9月,在中缅边境的中国云南省盈江县及其相邻的缅甸昔懂县6个自然村,用诱蚊灯在人房和牛棚共进行20次通宵诱捕。将捕获的蚊虫以传统方法进行形态学鉴定,然后用复合PCR法鉴别微小按蚊、乌头按蚊和杰普按蚊。同时,抽提部分蚊虫标本总基因组DNA,以巢式PCR方法检测蚊体内的疟原虫感染情况。结果共捕获各类蚊虫4 571只,隶属9属50种,其中按蚊属是优势蚊种,占总量的54.32%(2 483/4 571)。人房和牛棚的按蚊蚊种构成差异有统计学意义,其中人房以腹簇按蚊、微小按蚊和中华按蚊为主,而牛棚以腹簇按蚊(223只)、环纹按蚊(184只)、迷走按蚊(131只)和杰普按蚊(129只)为主。对比有牛村和无牛村中人房的蚊种构成发现,有牛村的人房以微小按蚊(260只)和腹簇按蚊(49只)为主,而无牛村人房则以腹簇按蚊(481只)和中华按蚊(124只)为主。巢式PCR检测1 075只按蚊,其中9只检出疟原虫阳性,分别为微小按蚊(7/408)、乌头按蚊(1/125)和伪威氏按蚊(1/101)。经测序鉴定均为恶性疟原虫感染,目的条带长204 bp。结论中缅边境(西段)蚊虫密度高、种类多,在传疟作用中以微小按蚊最为重要,乌头按蚊和伪威氏按蚊亦为当地的传播媒介。 展开更多
关键词 传疟媒介 复合PCR 巢式PCR 子孢子 中缅边境
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斯氏艾美耳球虫子孢子的移行途径 被引量：18
3
作者 索勋 孔繁瑶 +1 位作者 李安兴 殷佩云 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期252-255,共4页
关于斯氏艾美耳球虫Ｅｉｌｎｅｒｉａｓｔｉｅｄａｉ（Ｓｐｏｒｏｚｏａ：Ｅｉｍｅｒｉｉｄａｅ）子孢子的移行途径争议尚大。作者借光镜和电镜互补的手段研究了子孢子从肠腔到肝内胆管上皮细胞的移行。所取材料为人工感染５～５０万卵... 关于斯氏艾美耳球虫Ｅｉｌｎｅｒｉａｓｔｉｅｄａｉ（Ｓｐｏｒｏｚｏａ：Ｅｉｍｅｒｉｉｄａｅ）子孢子的移行途径争议尚大。作者借光镜和电镜互补的手段研究了子孢子从肠腔到肝内胆管上皮细胞的移行。所取材料为人工感染５～５０万卵囊的１月龄幼兔的血液、肠道、淋巴结、脾和肝，取材料时间为感染后２～７２ｈ（２ｈ的间隔）至４～６６（１６的间隔）。依据子孢子大量出现于肠系膜淋巴结和小量出现于脾脏而未见于其它部位淋巴结，以及肝内胆管周围营养血管（胆管周毛细血管丛）中有大量子孢子出现等观察结果，提出了子孢子移行途径的新假说，即子孢子进入肠固有层淋巴管、肠系膜淋巴结、经乳糜池转入血循环、由肝动脉至汇管区胆管周毛细血管丛并由此处侵入胆管上皮细胞。 展开更多
关键词 斯氏 艾美耳球虫 子孢子 移行
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堆型艾美耳球虫cSZ1基因在减毒沙门氏菌的表达及免疫保护效果研究 被引量：12
4
作者 覃宗华 谢明权 +2 位作者 蔡建平 艾哈迈德 叶秀华 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2005年第1期6-13,共8页
用PCR方法扩增堆型艾美耳球虫广东株子孢子表面抗原基因cSZ1的阅读框架 (ORF) ,与质粒表达载体pYA3342连接后转化大肠杆菌E-coliX6 2 12 ,获得阳性重组质粒后将其电转化至减毒鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurium)X4 5 5 0。经IPTG诱... 用PCR方法扩增堆型艾美耳球虫广东株子孢子表面抗原基因cSZ1的阅读框架 (ORF) ,与质粒表达载体pYA3342连接后转化大肠杆菌E-coliX6 2 12 ,获得阳性重组质粒后将其电转化至减毒鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurium)X4 5 5 0。经IPTG诱导获得了cSZ1基因在减毒S typhimurium的高效表达 ,表达产物占菌体总蛋白的 9 2 % ,重组蛋白分子量约为 19kDa。将重组减毒S typhimurium分别以 10 8或 10 9CFU 鸡经口免疫 4日龄岭南黄肉鸡 ,免疫后两周血清中可检测到抗cSZ1的特异性IgG ,3周时抗体水平达到峰值 ;2 5日龄时可在肠道检测到特异性IgA的分泌。免疫后 3周 ,试验鸡分别经口攻击感染 5 0 0个E acervulina孢子化卵囊 ,结果显示免疫组与非免疫组有相似的排卵囊曲线 ;计数攻虫感染后第 3 5～ 9 5天卵囊总产量 ,2个免疫组分别能降低 2 5 . 1%和 4 6 . 4 %的卵囊产生。 展开更多
关键词 堆型艾美耳球虫 减毒沙门氏菌 效果研究 免疫保护 大肠杆菌E.coli 减毒鼠伤寒沙门氏菌 表面抗原基因 质粒表达载体 特异性IgG PCR方法 孢子化卵囊 重组质粒 高效表达 IPTG 表达产物 重组蛋白 抗体水平 子孢子 广东株 电转化
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疟疾患者血小板减少及其机制探讨 被引量：17
5
作者 区德锦 邹春燕 黄亚铭 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期382-384,共3页
近年来，随着血常规自动细胞检测仪在临床检验中的普遍应用，疟疾患者血小板明显减少的现象被关注，如疟疾患者血小板减少可否作为疟疾诊断、治疗和预后的临床辅助参考指标，机体受到子孢子攻击直至血内出现疟原虫期间血小板何时开始下... 近年来，随着血常规自动细胞检测仪在临床检验中的普遍应用，疟疾患者血小板明显减少的现象被关注，如疟疾患者血小板减少可否作为疟疾诊断、治疗和预后的临床辅助参考指标，机体受到子孢子攻击直至血内出现疟原虫期间血小板何时开始下降，感染不同种类疟原虫患者血小板减少之间的差异，血小板减少与疟原虫密度变化的关系，以及各种药物对血小板减少及恢复的影响等。本文对国内外在该领域的研究进展进行了综述。 展开更多
关键词 血小板减少 疟疾患者 临床检验 疟疾诊断 原虫密度 检测仪 血常规 子孢子
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温度对蚊虫发育历期的影响及与疾病的关系 被引量：12
6
作者 刘凤梅 甄天民 +1 位作者 胡玉祥 孙传红 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 1998年第3期185-187,共3页
目的：观察温度对蚊虫发育历期的影响及与疾病发生的关系。方法：在实验室不同恒温条件下，观察中华按蚊各虫期发育情况及间日疟原虫在该蚊体内子孢子繁殖时间；用直线回归公式求出各虫期发育起点温度（Ｃ值）和有效积温（Ｋ值日度）。... 目的：观察温度对蚊虫发育历期的影响及与疾病发生的关系。方法：在实验室不同恒温条件下，观察中华按蚊各虫期发育情况及间日疟原虫在该蚊体内子孢子繁殖时间；用直线回归公式求出各虫期发育起点温度（Ｃ值）和有效积温（Ｋ值日度）。结果：蚊虫各历期均以２５～２８℃时发育时间短，繁殖快；蚊虫体内子孢子增殖快，密度高。并结合不同地区气温，预测了各地蚊虫生长繁殖的高峰期为７～９三个月，证实与疟疾流行情况相一致。结论：蚊虫的发育历期随温度升高而缩短；间日疟原虫子孢子在中华按蚊体内增殖，温度以２５～２８℃最为适宜。 展开更多
关键词 中华按蚊 发育历期 子孢子 温度 疟疾
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堆型艾美耳球虫(E.acervulina)单克隆抗体细胞株的建立 被引量：9
7
作者 王承民 秦建华 +3 位作者 赵月兰 冯雪领 郝延刚 李铁栓 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期26-28,共3页
利用细胞融合技术 ,将堆型艾美耳球虫 (Eimeria acervulina)的子孢子可溶性抗原免疫的小鼠脾细胞和 SP2 / 0骨髓瘤细胞融合 ,通过间接 EL ISA方法筛选 ,得到能稳定分泌针对堆型艾美耳球虫子孢子的特异性抗体细胞株 5 B4和5 G7。用间接 E... 利用细胞融合技术 ,将堆型艾美耳球虫 (Eimeria acervulina)的子孢子可溶性抗原免疫的小鼠脾细胞和 SP2 / 0骨髓瘤细胞融合 ,通过间接 EL ISA方法筛选 ,得到能稳定分泌针对堆型艾美耳球虫子孢子的特异性抗体细胞株 5 B4和5 G7。用间接 EL ISA方法对这 2株细胞的腹水效价进行测定 ,结果 5 G7细胞株的腹水效价为 1∶ 2 6 2 14 4 ,5 B4细胞株的腹水效价为 1∶ 1310 72。腹水经正辛酸 -硫酸铵二步法纯化 ,SDS- PAGE结果表明 ,此方法对 5 G7细胞株纯化效果较好 ,但对 5 展开更多
关键词 堆型艾美耳球虫 子孢子 单克隆抗体 药物防治
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瑞香素抗红外期疟原虫作用的研究 被引量：8
8
作者 刘云光 王琴美 +2 位作者 徐月琴 倪齐珍 倪奕昌 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期30-32,共3页
目的　研究瑞香素 (DPNT)抗红外期疟原虫的作用。方法　于ICR小鼠腹腔注射约氏疟原虫子孢子后 0 5h灌胃给药 ,连续 4d。不同剂量的DPNT及DPNT伍用伯氨喹 (PQ)的抗疟作用 ,分别以d7ICR小鼠阴性率及d1 1 或d1 2 ICR小鼠每千个红细胞被原... 目的　研究瑞香素 (DPNT)抗红外期疟原虫的作用。方法　于ICR小鼠腹腔注射约氏疟原虫子孢子后 0 5h灌胃给药 ,连续 4d。不同剂量的DPNT及DPNT伍用伯氨喹 (PQ)的抗疟作用 ,分别以d7ICR小鼠阴性率及d1 1 或d1 2 ICR小鼠每千个红细胞被原虫感染数作评价 ,并观察DPNT对ICR小鼠血红蛋白浓度的影响。结果　DPNT的剂量范围为每天 10～ 10 0mg/kg ,连服 4d ,d7原虫阴性小鼠数及d1 1 红细胞被感染程度与对照组相比其差异均无显著性 ;DPNT每天 5 0mg/kg和每天PQ5mg/kg配伍组的d7小鼠阴性率与PQ每天 10mg/kg组相当。ICR小鼠DPNT每天 5 0mg/kg组与对照组血红蛋白浓度在d8天有差异。结论　DPNT单独用药 ,无明显抗红外期疟原虫作用 ,但DPNT每天 5 0mg/kg与PQ每天 5mg/kg伍用的抗疟效果与PQ每天 10mg/kg相当。DPNT在短期内可致小鼠贫血。 展开更多
关键词 瑞香素 约氏疟原虫 子孢子 红外期
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抗隐孢子虫子孢子ScFv-PE40免疫毒素表达质粒的构建及其在大肠杆菌中的表达 被引量：4
9
作者 尹继刚 张西臣 +2 位作者 李建华 朱平 柳增善 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2005年第3期139-142,共4页
用PCR方法扩增抗隐孢子虫子孢子ScFv片段,插入表达载体pET-28a中,构建重组质粒pET-28-ScFv,然后,将绿脓杆菌外毒素(PE40)片段定向克隆到ScFv基因的下游,构建免疫毒素表达质粒pET28ScFv-PE40。经酶切分析、PCR检测和测序进行鉴定。成功... 用PCR方法扩增抗隐孢子虫子孢子ScFv片段,插入表达载体pET-28a中,构建重组质粒pET-28-ScFv,然后,将绿脓杆菌外毒素(PE40)片段定向克隆到ScFv基因的下游,构建免疫毒素表达质粒pET28ScFv-PE40。经酶切分析、PCR检测和测序进行鉴定。成功地构建了免疫毒素表达质粒pET28ScFv-PE40。将上述质粒转化受体菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导,成功地表达了目的蛋白。免疫毒素ScFv-PE40大小约为66kDa,表达量约占菌体蛋白总量的14%。 展开更多
关键词 隐孢子虫 子孢子 ScFv-PE40 免疫毒素 免疫毒素 表达质粒 隐孢子虫 子孢子 构建 大肠杆菌 ScFv基因 绿脓杆菌外毒素 PCR方法
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环介导等温扩增技术检测蚊体内间日疟原虫子孢子的研究 被引量：11
10
作者 朱韩武 曹俊 +7 位作者 周华云 李菊林 朱国鼎 顾亚萍 王伟明 刘耀宝 陶志勇 高琪 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期158-163,共6页
目的建立一种简便、快速和高敏感度的蚊体内间日疟原虫检测的环介导等温扩增方法(LAMP)。方法针对间日疟原虫环子孢子蛋白(CSP)基因种属特异性保守区域6个位点设计2对引物,以感染性按蚊、阴性按蚊、恶性疟原虫及正常人血DNA为模板评价L... 目的建立一种简便、快速和高敏感度的蚊体内间日疟原虫检测的环介导等温扩增方法(LAMP)。方法针对间日疟原虫环子孢子蛋白(CSP)基因种属特异性保守区域6个位点设计2对引物,以感染性按蚊、阴性按蚊、恶性疟原虫及正常人血DNA为模板评价LAMP的特异性。将间日疟原虫CSP基因质粒DNA梯度稀释,并与阴性按蚊DNA按1.0μl加1.3×106、1.3×105、1.3×104、1.3×103、1.3×102、1.3×101、1.3×100拷贝混合后为模板进行LAMP反应,观察其检测敏感性;将感染性按蚊与阴性按蚊DNA作1:2、1:4、1:8、1:16、1:32、1:64、1:128、1:256稀释,然后以稀释样本为模板进行LAMP反应,观察批量检测的敏感性。再用此方法与镜检解剖、巢式PCR同时检测同批次人工感染的67只按蚊,评价其应用价值。结果此法检测感染性按蚊阳性,对照组均为阴性;检测不同比例稀释的间日疟原虫CSP基因质粒DNA与按蚊DNA混合物,最低可检测1.3×102拷贝的间日疟原虫CSP基因质粒DNA与按蚊DNA的混合物;检测不同比例感染按蚊与阴性按蚊DNA混合样本,最低可检测出在128个按蚊中有1个感染按蚊的混合样本;用此法检测67只同批次人工感染的按蚊,检出率为47.76%,解剖镜检检出率为25.37%(χ2=7.24,P<0.01),巢式PCR检出率为40.30%(χ2=0.73,P>0.05)。以镜检解剖作为金标准,LAMP敏感性为100%,巢式PCR敏感性为100%。结论LAMP检测蚊体内间日疟原虫简便、快速、敏感性高,具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 环介导等温扩增技术 间日疟原虫 子孢子 蚊媒
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柔嫩艾美耳球虫的抗原分析 被引量：5
11
作者 蒋建林 蒋金书 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期146-151,共6页
本文采用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳，免疫印渍技术，用抗柔嫩艾美耳球虫（Ｅ．ｔｅｎｅｌｌａ）抗体分析了第二代裂殖子、子孢子和未孢子化卵囊的蛋白质。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳银染表明第二代裂殖子主要蛋白质为：１７．６Ｋ... 本文采用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳，免疫印渍技术，用抗柔嫩艾美耳球虫（Ｅ．ｔｅｎｅｌｌａ）抗体分析了第二代裂殖子、子孢子和未孢子化卵囊的蛋白质。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳银染表明第二代裂殖子主要蛋白质为：１７．６ＫＤ，２９．９ＫＤ，３８．９ＫＤ和５３．７ＫＤ，但用抗Ｅ．ｔｅｎｅｌａ抗体免疫印渍法检测出的主要抗原为：７８．０ＫＤ，８３．２ＫＤ和９５．５ＫＤ，这说明并不是含量高的蛋白质就是产生抗体的抗原；子孢子蛋白质含量相对较高的有：４０．３ＫＤ，４１．７ＫＤ，４４．７ＫＤ，４６．８ＫＤ，另有分子量＞１００ＫＤ的４种蛋白质的含量也相对较高，用抗Ｅ．ｔｅｎｅｌａ抗体免疫印渍法检测出一条＞１００ＫＤ的抗原带，以及４１．２ＫＤ，４３．２ＫＤ，４６．７ＫＤ，５５．０ＫＤ和５８．９ＫＤ抗原带；未孢子化卵囊主要蛋白质为：１７．２ＫＤ，２８．５ＫＤ，３６．５ＫＤ和５８．９ＫＤ，但用抗Ｅ．ｔｅｎｅｌａ抗体免疫印渍法未能检测出抗原。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 抗原分析 卵囊 子孢子 第二代裂殖子
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抗隐孢子虫子孢子表膜单链抗体基因的克隆和核苷酸序列分析 被引量：5
12
作者 尹继刚 张西臣 +5 位作者 朱平 张国利 李建华 何宏轩 田宗成 杨举 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期166-169,共4页
应用 RT- PCR技术 ,从分泌具有抗隐孢子虫子孢子表膜单克隆抗体 (Mc Ab)的杂交瘤细胞 3D6中扩增出抗体VH 和 VL 基因 ,用 linker(Gly4 Ser) 3基因 ,将 VH 和 VL 基因连接成 Sc Fv基因 ,并将其克隆至 p MD- 18T载体中。经核苷酸序列分析... 应用 RT- PCR技术 ,从分泌具有抗隐孢子虫子孢子表膜单克隆抗体 (Mc Ab)的杂交瘤细胞 3D6中扩增出抗体VH 和 VL 基因 ,用 linker(Gly4 Ser) 3基因 ,将 VH 和 VL 基因连接成 Sc Fv基因 ,并将其克隆至 p MD- 18T载体中。经核苷酸序列分析证实 ,VH、VL 基因和 linker基因拼接正确 ,基因全长为 72 0 bp。经计算机分析 ,VH 和 VL 基因均为新发现的基因序列 ,符合功能性重排的鼠抗体可变区基因特征。VH和 VL 基因分别属于鼠免疫球蛋白重链 (A)和轻链 κ 家族。 展开更多
关键词 序列分析 隐孢子虫 子孢子 单链抗体 基因克隆 核苷酸序列
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广东省媒介按蚊的子孢子自然感染率调查 被引量：9
13
作者 潘波 朱泰华 +5 位作者 黄祺林 杨灼宏 吴旭光 叶来添 阳文胜 何群 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 1997年第1期43-46,共4页
近几年，在广东省疟疾流行区的23市县区166个疫点（村）中，以人诱半通宵捕蚊方法进行媒介按蚊调查，共捕获按蚊7种，其中有我省传疟媒介嗜人按蚊、中华接蚊、微小按蚊和日月潭按蚊，分别占捕获按蚊总数的24．0％、48．8％、14．1％和8... 近几年，在广东省疟疾流行区的23市县区166个疫点（村）中，以人诱半通宵捕蚊方法进行媒介按蚊调查，共捕获按蚊7种，其中有我省传疟媒介嗜人按蚊、中华接蚊、微小按蚊和日月潭按蚊，分别占捕获按蚊总数的24．0％、48．8％、14．1％和8．1％，其余按蚊占5．0％。而在12个市县36个点（村）中，以牛房全捕法共捕获按蚊11种，上述4种媒介按蚊分别占捕蚊总数的0．3％、26．4％、42．4％和9．5％，其他按蚊占21．4％。全省有11个市县发现嗜人按蚊。历年媒介按蚊及其传疟作用的调查结果表明，我省4种传疟媒介的子孢子自然感染率嗜人按蚊为0．35～0．54％，中华接蚊为0．15～0．93％，微小按蚊为0．23～5．94％，日月潭按蚊为0．05％。 展开更多
关键词 按蚊 媒介昆虫 子孢子 自然感染率 疟疾
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微小隐孢子虫子孢子表面蛋白CP15/60编码基因核酸疫苗的研究 被引量：5
14
作者 何宏轩 张西臣 +2 位作者 尹继刚 李建华 杨举 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1357-1361,共5页
将编码CP15 / 6 0的基因插入真核表达载体pcDNA3(+)中构建重组质粒pcDNA3 15 / 6 0 ,然后经鼻粘膜免疫怀孕成年山羊 ,观察其免疫应答的产生情况及其对后代的保护力。结果为抗CP15 / 6 0抗体存在于免疫山羊的血浆和初乳中。pcDNA3 15 / ... 将编码CP15 / 6 0的基因插入真核表达载体pcDNA3(+)中构建重组质粒pcDNA3 15 / 6 0 ,然后经鼻粘膜免疫怀孕成年山羊 ,观察其免疫应答的产生情况及其对后代的保护力。结果为抗CP15 / 6 0抗体存在于免疫山羊的血浆和初乳中。pcDNA3 15 / 6 0经鼻粘膜免疫的怀孕山羊产生的免疫力能传给子代 ,使子代对微小隐孢子虫 (Cryp tosporidiumparvum)感染产生保护。CP15 / 6 0 DNA免疫母羊的后代比非免疫母羊的后代排出卵囊少且排卵时间短。这就表明重组质粒pcDNA3 15 / 6 展开更多
关键词 微小隐孢子虫 子孢子 表面蛋白 CPl5/60编码基因 核酸疫苗 鼻粘膜接种
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微小隐孢子虫子孢子表面蛋白质粒DNA接种诱导Balb/c小鼠的免疫应答 被引量：4
15
作者 何宏轩 张西臣 +4 位作者 尹继刚 李建华 杨举 刘明远 宣华 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期263-265,共3页
目的　探讨微小隐孢子虫子孢子表面蛋白CP2 3重组质粒pCR3.1～ 2 3DNA疫苗诱导机体产生体液和细胞免疫应答的效果。方法　用重组的DNA疫苗于Balb/c小鼠后腿胫骨前肌注射免疫 ,于 0、3、6周共免疫 3次 ,10 0 μg/次。免疫后不同时间检测... 目的　探讨微小隐孢子虫子孢子表面蛋白CP2 3重组质粒pCR3.1～ 2 3DNA疫苗诱导机体产生体液和细胞免疫应答的效果。方法　用重组的DNA疫苗于Balb/c小鼠后腿胫骨前肌注射免疫 ,于 0、3、6周共免疫 3次 ,10 0 μg/次。免疫后不同时间检测体液和细胞免疫应答指标。并用 1× 10 6卵囊进行攻虫试验。结果　pCR3.1～ 2 3可诱导机体产生相应的特异性抗体 ,对C .parvum卵囊攻击具有保护作用。结论　微小隐孢子虫子孢子表面蛋白CP2 3重组质粒pCR3.1～ 2 3有可能作为侯选的隐孢子虫DNA疫苗 ,值得进一步深入研究。 展开更多
关键词 子孢子 表面蛋白 微小隐孢子虫 DNA疫苗 免疫应答 重组质粒 隐孢子虫病
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微小隐孢子虫cDNA文库的构建及P23、CP15/60基因的克隆 被引量：4
16
作者 徐卫东 张西臣 +6 位作者 孔庆昌 刘明远 尹继刚 李建华 杨举 何宏轩 吕亚坚 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期281-284,共4页
目的　微小隐孢子虫地方株cDNA文库构建及P2 3、CP15 60基因的克隆。　方法　提取微小隐孢子虫总RNA、mRNA ,逆转录合成cDNA。将cDNA与 pUC18DNA连接 ,导入DH5α宿主细胞中生成cDNA文库。根据文献分别设计并合成两对PCR引物 ,从上述文... 目的　微小隐孢子虫地方株cDNA文库构建及P2 3、CP15 60基因的克隆。　方法　提取微小隐孢子虫总RNA、mRNA ,逆转录合成cDNA。将cDNA与 pUC18DNA连接 ,导入DH5α宿主细胞中生成cDNA文库。根据文献分别设计并合成两对PCR引物 ,从上述文库中筛选保护性基因 ,对PCR产物克隆、测序。　结果　文库容量为 1.9× 10 6个重组子 ,文库中cDNA插入片段大小介于 0 .4× 10 3～ 6.5× 10 3bp。从该文库中克隆出编码 2 3kDa、15 60kDa子孢子表面蛋白的核苷酸序列。　结论　成功地用 pUC18质粒载体构建了C .parvumcDNA文库。 展开更多
关键词 微小隐孢子虫 CDNA文库 子孢子 表面抗原 基因克隆
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柔嫩艾美耳球虫孢子发育阶段虫体抑制性消减文库的构建 被引量：4
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作者 韩红玉 林矫矫 +5 位作者 赵其平 董辉 姜连连 王鑫 韩静芳 黄兵 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期1005-1010,共6页
为了分离鉴定柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)孢子发育阶段虫体的差异表达基因,分别以柔嫩艾美耳球虫未孢子化卵囊和孢子化卵囊为驱动组、子孢子为实验组,或未孢子化卵囊为驱动组、孢子化卵囊为实验组,利用抑制性消减杂交(SSH)技术,构... 为了分离鉴定柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)孢子发育阶段虫体的差异表达基因,分别以柔嫩艾美耳球虫未孢子化卵囊和孢子化卵囊为驱动组、子孢子为实验组,或未孢子化卵囊为驱动组、孢子化卵囊为实验组,利用抑制性消减杂交(SSH)技术,构建了2个子孢子cDNA消减文库和1个孢子化卵囊cDNA消减文库。随机从3个cDNA消减文库中分别挑取50个克隆,经PCR鉴定2个子孢子cDNA消减文库的重组率都为96%,孢子化卵囊cDNA消减文库的重组率为98%。从每个文库中随机挑取50个克隆测序,并进行同源性比较分析,结果显示:从孢子化卵囊cDNA消减文库中获得了13个单一有效序列,其中8个EST与已知蛋白同源性很高;从2个子孢子cDNA消减文库中共获得了40个单一有效序列,其中9个EST与已知蛋白同源,其余可能为柔嫩艾美耳球虫的新基因。这些结果为分离柔嫩艾美耳球虫新功能基因和进一步探索防治球虫病的方法提供了理论基础。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 未孢子化卵囊 孢子化卵囊 子孢子 抑制性消减杂交
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刚地弓形虫表面抗原研究进展 被引量：4
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作者 汪琦 林宇光 洪凌仙 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第4期91-92,85,共3页
关键词 刚地弓形虫 表面抗原 速殖子 缓殖子 子孢子
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陕西省绵、山羊球虫种类的调查 被引量：6
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作者 张宝详 郭海浚 《中国兽医科学》 CAS 1987年第12期-,共5页
由于球虫的寄生常常引起羔羊大批死亡和生长发育受阻、生产性能下降。我们为了摸清陕西省绵、山羊球虫的种类、分布和感染状况,于1986年5月～10月份采集了200只山羊和100只绵羊的材料,进行了研究。
关键词 子孢子 绵羊 极帽 小肠 山羊 球虫种类 卵囊 藏卵器 极粒 卵膜孔 陕西省
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青蒿素阻断疟疾传播研究回顾 被引量：2
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作者 周隆参 曾炜林 +10 位作者 覃宇城 吴艳瑞 潘茂华 陈熙 覃丕恩 向征 李黄羿 邹春燕 林康明 杨照青 黄亚铭 《医学动物防制》 2023年第10期985-988,共4页
本世纪以来WHO强烈推荐青蒿素衍生物作为抢救和治疗疟疾的一线药物,该类药物对疟疾患者体内无性体疟原虫有高效、速效和对机体低毒的作用,在全球挽救了无数患者的生命。国内外科学家研究发现并证实,该类药物同时对疟原虫的有性体在传疟... 本世纪以来WHO强烈推荐青蒿素衍生物作为抢救和治疗疟疾的一线药物,该类药物对疟疾患者体内无性体疟原虫有高效、速效和对机体低毒的作用,在全球挽救了无数患者的生命。国内外科学家研究发现并证实,该类药物同时对疟原虫的有性体在传疟按蚊体内的发育期有阻断作用,单独一种抗疟药同时有治疗和阻断疟疾传播的双重作用,这在奎宁类药物中是不具备的,且该类药物在流行病学方面意义重大。 展开更多
关键词 青蒿素 青蒿素衍生物 阻断传播 预防传播 传疟按蚊 子孢子
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