尼妥珠单抗联合适形放疗及化疗治疗局部晚期鼻咽癌的疗效 被引量：29

1

作者 唐武兵 杨文 +5 位作者 曹洋 伍楚蓉 潘兴喜 刘振桁 张永胜 陈永发 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1658-1662,共5页

目的探讨尼妥珠单抗联合同期适形放疗及紫杉醇铂剂化疗方案治疗Ⅲ、Ⅳa期鼻咽癌的疗效及不良反应。方法经组织病理确诊的Ⅲ、Ⅳa期(2008分期)鼻咽癌初诊患者123例随机分为对照组和观察组。对照组(n=60)采用三维适形放疗或调强适形放疗... 目的探讨尼妥珠单抗联合同期适形放疗及紫杉醇铂剂化疗方案治疗Ⅲ、Ⅳa期鼻咽癌的疗效及不良反应。方法经组织病理确诊的Ⅲ、Ⅳa期(2008分期)鼻咽癌初诊患者123例随机分为对照组和观察组。对照组(n=60)采用三维适形放疗或调强适形放疗及同期和序贯紫杉醇铂剂方案化疗;观察组(n=63)除上述治疗外,每周一放疗前行尼妥珠单抗静脉滴注100 mg治疗,共6～7次。结果放疗结束后2个月原发灶完全缓解率、颈部淋巴结完全缓解率观察组为98.4%、96.8%,高于对照组的81.7%、78.3%(P<0.05);观察组及对照组治疗后1年的局部控制率、无转移生存率分别达到100%、97.4%和94.1%、85.3%,治疗后1年总评价为97.4%、79.4%(P<0.05);随后的治疗后2年、3年局部控制率、无转移生存率观察组均高于对照组。两组主要不良反应为放射性咽喉炎、放射性皮炎和恶心呕吐、白细胞减少、疲乏等,无皮疹及过敏反应发生,不良反应耐受性好。发生3度以上放射性咽喉炎观察组较对照组偏高(P<0.05)。结论尼妥珠单抗联合适形放疗及紫杉醇及铂剂同期和序贯化疗治疗局部晚期鼻咽癌完全缓解率及局部控制率、无远处转移生存率提高,耐受性好。 展开更多

关键词 鼻咽癌 放射治疗 适形放疗 尼妥珠单抗 单克隆抗体 紫杉醇 铂剂 化学治疗 表皮生长因 子受体

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ECT2通过调控EGFR介导的上皮间质转化促进胰腺癌转移 被引量：5

2

作者 王俊雄 朱圣韬 张澍田 《临床和实验医学杂志》 2020年第14期1460-1464,共5页

目的研究上皮细胞转化因子2(ECT2)在胰腺癌转移的作用及其可能的诱导表皮生长因子受体(EGFR)相关的上皮-间充质转化(EMT)机制。方法使用免疫组织化学和Western blotting方法检测ECT2在胰腺癌组织及细胞系中的表达情况。在胰腺癌细胞中降... 目的研究上皮细胞转化因子2(ECT2)在胰腺癌转移的作用及其可能的诱导表皮生长因子受体(EGFR)相关的上皮-间充质转化(EMT)机制。方法使用免疫组织化学和Western blotting方法检测ECT2在胰腺癌组织及细胞系中的表达情况。在胰腺癌细胞中降低ECT2的表达,通过细胞划痕实验测定胰腺癌的细胞迁移变化,使用Transwell实验检测胰腺癌细胞的侵袭力。通过Western blotting方法测定EMT标志物和EGFR的表达变化。结果ECT2在胰腺癌组织和细胞中显著上调,并提示不良预后。ECT2调控胰腺癌细胞的侵袭和迁移。ECT2沉默下调EGFR表达同时抑制EMT。结论ECT2可能通过EGFR信号通路相关的EMT促进胰腺癌细胞的侵袭性。 展开更多

关键词 胰腺癌 上皮细胞转化因子2 上皮间质转化 表皮生长因 子受体

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趋化因子受体5在乳腺浸润性导管癌组织的表达及意义 被引量：14

3

作者 王栋 郭满盈 郭葆玉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期657-659,共3页

目的:探讨趋化因子受体5(CCR5)在乳腺浸润性导管癌组织的表达及意义方法:采用酶标记免疫组织化学方法检测30例乳腺浸润性导管癌及10例乳腺良性肿瘤组织中CCR5的表达情况,并应用ELISA双抗体夹心方法检测了相应患者血清中相关趋化因子MIP1... 目的:探讨趋化因子受体5(CCR5)在乳腺浸润性导管癌组织的表达及意义方法:采用酶标记免疫组织化学方法检测30例乳腺浸润性导管癌及10例乳腺良性肿瘤组织中CCR5的表达情况,并应用ELISA双抗体夹心方法检测了相应患者血清中相关趋化因子MIP1α,MIP1β及RANTES的含量。结果:在乳腺浸润性导管癌组织检测到CCR5的表达(16/30,表达率53.3%),而乳腺良性肿瘤组织中无1例表达;与乳腺良性肿瘤患者相比,在乳腺浸润性导管癌患者血清中RANTES含量明显升高[(41.8±10.2)vs(16.5±2.4)ng/ml,P<0.01],而MIP1α,MIP1β无明显变化。结论:在人乳腺浸润性导管癌组织上发现CCR5的表达,其在乳腺癌的发生发展中可能起重要作用,而RANTES可能是与其相互作用的主要配体。 展开更多

关键词 趋化N子受体5 癌 导管 乳腺 RNATES 巨噬细胞炎性蛋白质1

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开心解郁丸上调PPARα/FGF21/FGFR1通路改善慢性不可预知温和应激模型大鼠的抑郁样行为

4

作者 翟吴剑文 杨凤梅 +4 位作者 金雨静 杨芮 黄世敬 潘菊华 陈宇霞 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2023年第12期3829-3836,共8页

目的探究开心解郁丸(KJP)对抑郁症模型大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、血清及海马组织成纤维生长因子21(FGF21)和海马组织成纤维生长因子受体1(FGFR1)的影响。方法通过慢性不可预知温和应激法(CUMS)建立抑郁症大鼠模... 目的探究开心解郁丸(KJP)对抑郁症模型大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、血清及海马组织成纤维生长因子21(FGF21)和海马组织成纤维生长因子受体1(FGFR1)的影响。方法通过慢性不可预知温和应激法(CUMS)建立抑郁症大鼠模型,观察抑郁行为学改变;使用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清FGF21含量;免疫组织化学法(IHC)检测海马组织中FGF21和FGFR1的定位、表达变化;使用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马组织中FGF21、FGFR1和肝脏PPARα蛋白表达水平;实时荧光定量法(RT-qPCT)检测FGF21、FGFR1、PPARα的mRNA表达趋势。结果CUMS模型大鼠PPARα、FGF21、FGFR1的蛋白与mRNA表达水平与正常组相较均显著下降(P<0.001)。KJP可显著改善CUMS模型大鼠抑郁样行为(P<0.001);显著提升血清中FGF21水平(P<0.001);有效提升肝脏PPARα蛋白表达水平(P<0.05),显著改善其mRNA表达水平(P<0.001);明显改善海马组织FGF21、FGFR1的蛋白和mRNA表达水平(P<0.01)。结论PPARα/FGF21/FGFR1通路可能参与了抑郁症发病过程;上调PPARα/FGF21/FGFR1通路可能与KJP抗抑郁机制有关。 展开更多

关键词 开心解郁丸 抑郁症 过氧化物酶体增殖物激活受体Α 成纤维生长因子21 成纤维生长因 子受体1 肝主疏泄

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地塞米松对人骨髓间充质干细胞成脂分化的基因调控 被引量：29

5

作者 李月白 曹亚伟 +1 位作者 吴学建 王义生 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1522-1523,共2页

目的观察地塞米松对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)内成脂转录因子PPARγmR- NA和成骨基因Osteocalcin mRNA表达的影响。方法取健康自愿者骨髓,通过梯度离心、贴壁分离培养获得hBMSCs。传代培养第2代hBMSCs 8 d,随机分为两组,实验组给予10-... 目的观察地塞米松对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)内成脂转录因子PPARγmR- NA和成骨基因Osteocalcin mRNA表达的影响。方法取健康自愿者骨髓,通过梯度离心、贴壁分离培养获得hBMSCs。传代培养第2代hBMSCs 8 d,随机分为两组,实验组给予10-7 mol／L地塞米松,对照组不给予地塞米松,5 d后收集细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测两组细胞中PPARγmRNA和Osteocalcin mRNA的表达。结果用地塞米松处理细胞5 d,RT-PCR检测结果显示,实验组hBMSCs内PPARγmRNA呈高表达,对照组hBMSCs内PPARγmRNA呈低表达,两组差异有统计学意义(P<0．01)。实验组hBMSCs内Osteocalcin mRNA呈低表达,对照组hBMSCs内Osteocalcin mRNA呈高表达,两组间差异有统计学意义(P<0．01)。结论地塞米松能够调控hBMSCs内成脂转录因子高表达,而抑制其成骨表达,这可能与激素性骨坏死的发生机制有关。 展开更多

关键词 人骨髓间充质干细胞 过氧化物酶体增殖子活化受体-γ 骨钙素 地塞米松

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柴胡皂苷D对H2O2诱导大鼠心肌细胞H9c2损伤保护机制研究 被引量：16

6

作者 丁雨 陈雪梅 吴思思 《浙江医学》 CAS 2019年第24期2571-2575,2650,I0002,共7页

目的探讨柴胡皂苷D对H2O2诱导大鼠心肌细胞H9c2损伤保护作用及机制。方法培养H9c2细胞,利用H2O2(400μM,4h)建立心肌细胞损伤模型。设立空白对照组、心肌损伤模型组(H2O2组)、柴胡皂苷D组(4μM),加入柴胡皂苷D预作用3h后,换成含浓度为40... 目的探讨柴胡皂苷D对H2O2诱导大鼠心肌细胞H9c2损伤保护作用及机制。方法培养H9c2细胞,利用H2O2(400μM,4h)建立心肌细胞损伤模型。设立空白对照组、心肌损伤模型组(H2O2组)、柴胡皂苷D组(4μM),加入柴胡皂苷D预作用3h后,换成含浓度为400μM H2O2的完全培养基,继续培养4h后,应用多功能酶标仪检测细胞内活性氧水平,Hoechst 33258染色、流式细胞仪检测细胞凋亡变化,利用检测试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)含量,同时利用荧光定量PCR(real-time PCR)技术检测过氧化物酶体增殖子活化受体(PPARγ)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)基因水平的表达变化。结果 Hoechst 33258染色和流式细胞检测结果显示:与对照组比较,H2O2组凋亡细胞升高,而柴胡皂苷D组的凋亡细胞量明显少于H2O2组(均P<0.05);细胞内活性氧(ROS)含量检测结果显示:H2O2组的细胞内ROS含量明显高于对照组,而柴胡皂苷D组明显低于H2O2组(均P<0.05);与对照组比较,H2O2组细胞LDH、MDA含量明显升高,柴胡皂苷D组细胞LDH、MDA含量明显降低(均P<0.05);柴胡皂苷D组的PPARγ、Nrf2、HO-1在m RNA水平的表达较H2O2组升高(均P<0.05)。结论柴胡皂苷D能够降低H2O2诱导H9c2心肌细胞产生的氧化应激反应,对心肌细胞具有保护作用。 展开更多

关键词 心肌细胞 柴胡皂苷 D 乳酸脱氢酶 丙二醛 过氧化物酶体增殖子活化受体

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吡格列酮预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护研究 被引量：13

7

作者 刘晓军 邵宏涛 +3 位作者 申翼 胡小南 罗立国 景华 《医学研究生学报》 CAS 2008年第2期148-152,I0003,共6页

目的:通过建立大鼠心肌缺血再灌注模型,研究吡格列酮对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法:取心电图无异常的大鼠34只,随机分为T1组和T2组,T1组再分为对照组(n=5)和吡格列酮组(n=5),T2组分为假手数组(n=8)、对照组(n=8)、吡格列... 目的:通过建立大鼠心肌缺血再灌注模型,研究吡格列酮对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法:取心电图无异常的大鼠34只,随机分为T1组和T2组,T1组再分为对照组(n=5)和吡格列酮组(n=5),T2组分为假手数组(n=8)、对照组(n=8)、吡格列酮组(n=8)。假手数组只开胸不结扎冠状动脉。其余各组均结扎冠状动脉30 min,再灌注4 h。吡格列酮组给予吡格列酮3 mg/(kg.d)灌胃1周,第8 d冠状动脉结扎前1 h再灌胃1次。对照组给予等量等渗盐水灌胃处理。T1组用于测量各组缺血再灌注后心肌梗死面积的变化。T2组用于观察各组再灌注4 h后血清中磷酸激酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)水平,并用凝胶电泳迁移率(EMSA)实验检测过氧化物增殖子激活受体-γ(PPAR-γ)、核因子-kappa B(NF-κB),用酶联免疫吸附实验(ELASA)检测心肌组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达变化情况。使用光学显微镜观察心肌组织病理变化。结果:与对照组相比,①吡格列酮组心肌梗死面积明显降低(P<0.01),血清CK-MB、LDH水平下降明显(P<0.01),光镜观察心肌组织病理变化明显减轻;②应用吡格列酮后,能够增强缺血再灌注心肌PPAR-γ表达,而NF-κB、MCP-1表达明显降低(P<0.01)。结论:吡格列酮对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,且这种保护作用可能是通过激活PPAR-γ而抑制NF-κB表达,从而下调MCP-1表达实现的。 展开更多

关键词 缺血再灌注 吡格列酮 过氧化物增殖子激活受体

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siRNA腺病毒载体对兔骨髓基质细胞成脂分化的干扰效应 被引量：8

8

作者 王义生 王少华 +3 位作者 李月白 赵国强 刘鸣 王小刚 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期519-521,F0004,共4页

目的观察靶向过氧化物酶体增殖子活化受体-1（PPARy）基因siRNA腺病毒载体阻断乙醇诱导兔骨髓基质细胞（MSCs）的成脂分化。方法培养兔MSCs随机分为7组：N：对照组，M：模型组，CO：感染空载体组，C1：感染无关siRNA组，S1、S2、S3：干... 目的观察靶向过氧化物酶体增殖子活化受体-1（PPARy）基因siRNA腺病毒载体阻断乙醇诱导兔骨髓基质细胞（MSCs）的成脂分化。方法培养兔MSCs随机分为7组：N：对照组，M：模型组，CO：感染空载体组，C1：感染无关siRNA组，S1、S2、S3：干扰1、2、3组。将重组腺病毒载体转染细胞，检测MSCs内PPAR叫mRNA、osteocalcinmRNA、PPARγ蛋白表达、甘油三酯、ALP活性和培养液骨钙素含量，并计数脂肪细胞。结果N、M、CO、C1组PPARγmRNA和osteocalcinmR—NA表达值分别为（0．39±0．02）、（0．75±0．03）、（0．74±0．03）、（0．73±0．02）和（1．09±0．19）、（0．50±0．10）、（0．46±0．12）、（0．49±0．13），M、CO、C1组脂肪细胞多，甘油三酯高，ALP活性与骨钙素量均低。S1、S2、S3组PPARγmRNA和osteocalcinmRNA表达值分别为（0．28±0．03）、（0．30±0．03）、（0．31±0．01）和（0．92±0．09）、（0．87±0．32）、（0．93±0．25），脂肪细胞数、甘油三酯量、ALP活性值与骨钙素含量均接近正常，与M、CO、C1组间差异有统计学意义（P〈0．05），与N组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论该腺病毒载体能阻断乙醇诱导的MSCs成脂分化。 展开更多

关键词 RNA干扰 过氧化物酶体增殖子活化受体1 腺病毒载体 骨髓基质细胞 乙醇

原文传递

白色脂肪组织棕色化调控机制的研究进展 被引量：8

9

作者 倪鸣 王金焱 王璟 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第7期771-775,共5页

脂肪组织棕色细胞和白色细胞具有截然不同的代谢特征。白色脂肪细胞推动动脉粥样硬化的形成与发展,而棕色脂肪细胞在动脉粥样硬化的防治中发挥重要作用,两者可以相互转化。文中从转录因子(如PPARγ、PRDM16、PGC-1α)、共调节因子、激... 脂肪组织棕色细胞和白色细胞具有截然不同的代谢特征。白色脂肪细胞推动动脉粥样硬化的形成与发展,而棕色脂肪细胞在动脉粥样硬化的防治中发挥重要作用,两者可以相互转化。文中从转录因子(如PPARγ、PRDM16、PGC-1α)、共调节因子、激素、信号分子、氧化应激和miRNAs的调控等方面对白色脂肪组织棕色化调控机制作一综述。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 棕色脂肪组织 白色脂肪组织 过氧化物酶体增殖子激活受体γ 含PR结构域的锌指蛋白16 PPARγ共激活因子1α

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腺病毒穿梭载体介导RNA干扰对激素诱导兔骨髓间充质干细胞成脂分化的作用 被引量：7

10

作者 李月白 刘鸣 +4 位作者 李劲峰 李洁 宋石 赵国强 王义生 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1343-1346,共4页

目的观察腺病毒穿梭载体介导RNA干扰对激素诱导骨髓间充质干细胞（BMSCs）成脂分化的影响。方法选取新西兰兔制备BMSCs并随机分为6组，RNA干扰1组、2组和3组（s1、s2和s3）；无关序列组（Con）；模型组（M）；正常对照组（N）。加入激... 目的观察腺病毒穿梭载体介导RNA干扰对激素诱导骨髓间充质干细胞（BMSCs）成脂分化的影响。方法选取新西兰兔制备BMSCs并随机分为6组，RNA干扰1组、2组和3组（s1、s2和s3）；无关序列组（Con）；模型组（M）；正常对照组（N）。加入激素终质量浓度为1×10-7mol／L地塞米松。将重组腺病毒穿梭载体转染细胞，采用TaqMan逆转录一聚合酶链反应（RT．PCR）和Westernblot方法分别检测各组BMSCs内过氧化物酶体增殖子活化受体γ（PPARγ）mRNA及其蛋白表达，测定细胞甘油三酯含量，用苏丹Ⅲ染色细胞并计数脂肪细胞。结果处理细胞7d时，s1、s2、s3、Con、M、N组中，PPARs,mRNA相对表达值分别为0．406±0．012、0．401±0．009、0．410±0．042、0．621±0．045、0．628±0．008、0．399±0．014，PPAR＇yWesternblot灰度扫描值分别为0．246±0．027、0．235±0．015、0．257±0．025、0．800±0．017、0．793±0．019、0．244±0．010。S1、S2、S3、N组中PPARγ mRNA及其蛋白表达均明显低于M、Con组，差异均有统计学意义（P〈0．05），S1、s2、s3组和N组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。s1、s2、s3、N组中脂肪细胞计数、甘油三酯含量均明显低于M、Con组，差异均有统计学意义（P〈0．05），s1、s2、S3组和N组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论靶向PPARγ基因的腺病毒穿梭载体介导RNA干扰能够有效地抑制激素诱导的BMSCs成脂分化。 展开更多

关键词 RNA干扰 腺病毒穿梭载体 激素 过氧化物酶体增殖子活化受体-γ 成脂分化

原文传递

动物脂肪性状相关基因的效应调控研究进展 被引量：3

11

作者 毕晋明 王永军 《中国畜牧兽医》 CAS 2006年第7期49-51,共3页

脂肪细胞不仅是机体贮存能量的器官,还可通过一些细胞因子参与能量稳态的调节。在肉品质评价上,适量的皮下脂肪是不可缺少的指标之一。为此,研究脂肪特性就成了动物营养与育种工作的主要任务。作者通过对脂肪性状相关基因的特性及作用... 脂肪细胞不仅是机体贮存能量的器官,还可通过一些细胞因子参与能量稳态的调节。在肉品质评价上,适量的皮下脂肪是不可缺少的指标之一。为此,研究脂肪特性就成了动物营养与育种工作的主要任务。作者通过对脂肪性状相关基因的特性及作用机理作一综述,以便为日后进一步研究提供参考。 展开更多

关键词 脂肪细胞 过氧化物增殖子激活受体 瘦素

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过氧化物酶体增殖子激活受体-γ激动剂对心肌缺血再灌注损伤的保护作用的研究进展 被引量：6

12

作者 刘晓军 景华 《医学研究生学报》 CAS 2008年第4期416-419,共4页

随着冠状动脉再通技术的发展,心肌缺血再灌注损伤的问题也越来越受到重视。过氧化物酶体增殖子激活受体(PPAR)-γ在大鼠心肌分布,而PPAR-γ激动剂除了具有胰岛素增敏作用外,还能抑制细胞炎症反应及细胞凋亡等发挥保护作用,本文就PPAR-... 随着冠状动脉再通技术的发展,心肌缺血再灌注损伤的问题也越来越受到重视。过氧化物酶体增殖子激活受体(PPAR)-γ在大鼠心肌分布,而PPAR-γ激动剂除了具有胰岛素增敏作用外,还能抑制细胞炎症反应及细胞凋亡等发挥保护作用,本文就PPAR-γ激动剂对心肌缺血再灌注的保护作用的研究进展做一综述。 展开更多

关键词 过氧化物酶体增殖子激活受体 缺血再灌注损伤 炎症反应 细胞凋亡 噻唑烷二酮类化合物

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非甾体类抗炎药抗阿尔采末病作用的研究进展 被引量：6

13

作者 郝丽娜 张庆柱 于天贵 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期988-992,共5页

神经炎症过程可能是阿尔采末病(AD)的重要发病原因之一。AD的流行病学研究显示,长期服用非甾体类抗炎药(NSAIDs)可减低AD的发病率;实验研究还发现,NSAIDs的作用除了调节COX机制外,还可能涉及一些非COX机制。

关键词 阿尔采末病 非甾体类抗炎药 环氧合酶 Β淀粉样蛋白 过氧化物酶体增殖子活化受体γ

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丹参多酚酸盐对H_(2)O_(2)所致心肌细胞氧化应激损伤及PPARγ/Nrf2/HO-1通路的影响 被引量：5

14

作者 李兵 《中西医结合心脑血管病杂志》 2021年第20期3493-3499,共7页

目的探讨丹参多酚酸盐(SAL)对过氧化氢(H_(2)O_(2))所致H9c2心肌细胞氧化应激损伤的影响及过氧化物酶体增殖子活化受体(PPARγ)/核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/抗血红素加氧酶-1(HO-1)通路在其中的调控作用。方法以100μmol/L的H_(2)O_(2... 目的探讨丹参多酚酸盐(SAL)对过氧化氢(H_(2)O_(2))所致H9c2心肌细胞氧化应激损伤的影响及过氧化物酶体增殖子活化受体(PPARγ)/核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/抗血红素加氧酶-1(HO-1)通路在其中的调控作用。方法以100μmol/L的H_(2)O_(2)干预对数生长期H9c2细胞4 h建立心肌细胞氧化损伤模型,设置H_(2)O_(2)组、SAL 50 mg/L组、SAL 100 mg/L组、SAL 200 mg/L组;另取对数生长期H9c2细胞作为正常组。药物干预24 h后,四唑盐(MTT)法和Annexin V-FITC/PI双染法分别检测细胞增殖和凋亡率,2,7-双乙酸二氯荧光(DCFH-DA)探针检测细胞活性氧(ROS)含量,生化分析法检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)漏出量,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化法、钼酸铵法分别检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性,蛋白免疫印迹法(Western Blotting)检测PPARγ、Nrf2、HO-1、核转录因子-κB(NF-κB)、激活型半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved Caspase-3)蛋白表达。结果与H_(2)O_(2)组比较,SAL 50 mg/L组、SAL 100 mg/L组、SAL 200 mg/L组细胞增殖率升高且凋亡率降低,ROS含量和CK-MB、LDH漏出量降低,MDA含量降低且SOD、CAT活性升高,PPARγ、Nrf2、HO-1蛋白表达上调且NF-κB、Cleaved Caspase-3表达下调,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论SAL对H_(2)O_(2)所致H9c2心肌细胞氧化应激损伤具有保护作用,其作用机制可能与激活PPARγ/Nrf2/HO-1通路有关。 展开更多

关键词 心肌细胞 丹参多酚酸盐 过氧化氢 氧化应激损伤 过氧化物酶体增殖子活化受体 核转录因子E2相关因子2 抗血红素加氧酶-1 核转录因子-ΚB 实验研究

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沉默过氧化物酶体增殖子活化受体γ表达降钙素基因相关肽基因重组载体的构建与鉴定 被引量：5

15

作者 王义生 李宁博 +4 位作者 李劲峰 施佳辰 孙俊魁 李月白 赵国强 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期142-145,共4页

目的 构建与鉴定沉默过氧化物酶体增殖子活化受体γ（PPARγ）同时表达降钙素基因相关肽（CGRP）基因重组载体.方法 选用pGFP-V-RS载体,将PPARγ小干扰RNA（siRNA）寡核苷酸靶序列连接入pGFP-V-RS载体,酶切鉴定及测序正确后得到重组载体... 目的 构建与鉴定沉默过氧化物酶体增殖子活化受体γ（PPARγ）同时表达降钙素基因相关肽（CGRP）基因重组载体.方法 选用pGFP-V-RS载体,将PPARγ小干扰RNA（siRNA）寡核苷酸靶序列连接入pGFP-V-RS载体,酶切鉴定及测序正确后得到重组载体pGFP-V-RS-siPPARγ;将CGRP片段与Mlu Ⅰ酶切,并与末端羟基化的线性质粒pGFP-V-RS重组连接,得到重组载体pGFP-V-RS-exCGRP.将获取的CGRP基因片段连接入线性化重组载体pGFP-V-RS-siPPARγ,酶切鉴定及测序正确后得到重组载体pGFP-V-RS-siPPARγ-exCGRP.收集第3代HEK-293细胞,将细胞分为4组：CON组：转染空载体pGFP-V-RS质粒,作为对照；SI组：转染重组载体pGFP-V-RS-siPPARγ质粒；EX组：转染重组pGFP-V-RS-exCGRP质粒；DOU组：转染重组双基因载体pGFP-V-RS-siPPARγ-exCGRP质粒.每组电极杯中加入5x106个细胞,并分别加入上述质粒2.5μl,给予直流电低压脉冲1次,时间15 ms.培养48 h后收集各组细胞,用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）与Western blot检测细胞内PPAR、CGRP mRNA及蛋白的表达.结果 重组双基因载体pGFP-V-RS-siPPARγ-exCGRP经酶切鉴定及测序结果与设计完全一致.电转染HEK-293细胞后,DOU组细胞PPARγ基因呈低表达,PPARγmRNA与其蛋白的相对表达量为0.036±0.003、0.108 ±0.031,与EX组（0.156±0.014、0.778±0.103）及CON组（0.148±0.014、0.742 ±0.143）比较,差异有统计学意义（P＜0.05）,与SI组（0.054±0.005、0.135 ±0.039）比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.DOU组细胞CGRP基因呈高表达,CGRP mRNA与其蛋白的相对表达量为1.144±0.106、1.244±0.184,与SI组（0.320±0.030、0.370±0.089）及CON组（0.444 ±0.041、0.274±0.062）比较,差异有统计学意义（P＜0.05）,与EX组（1.021 ±0.095、1.221±0.181）比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 成功构建出沉默PPARγ基因并表达CGRP基因的重组载体pGFP-V-RS-siPPARγ-exCGRP,能够有效阻断PPARγ基因表达,同时促 展开更多

关键词 RNA干扰 过氧化物酶体增殖子活化受体-γ 降钙素基因相关肽 重组载体

原文传递

siRNA腺病毒载体预防兔酒精性股骨头坏死的动物实验研究 被引量：5

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作者 王少华 王义生 李月白 《中国骨与关节外科》 2010年第1期62-67,共6页

目的观察靶向PPARγ基因siRNA腺病毒载体预防兔酒精性股骨头坏死(ONFH)的作用效果。方法新西兰种家兔60只,随机分为5组,每组12只。正常对照组(N):采用灌胃法,给予10%葡萄糖溶液10ml/(kg·d);单纯马血清致敏组(H):马血清致敏后,给予... 目的观察靶向PPARγ基因siRNA腺病毒载体预防兔酒精性股骨头坏死(ONFH)的作用效果。方法新西兰种家兔60只,随机分为5组,每组12只。正常对照组(N):采用灌胃法,给予10%葡萄糖溶液10ml/(kg·d);单纯马血清致敏组(H):马血清致敏后,给予同量10%葡萄糖灌胃,作为对照;马血清致敏+酒精组(M):马血清致敏后,采用灌胃法,给予烈性白酒(含酒精46%,V/V)10ml/(kg·d),作为模型组;酒精+空载体组(CO):马血清致敏后灌酒,将空载体组病毒滴液注入动物一侧股骨头内;马血清致敏+酒精+重组腺病毒组(S):实验组,马血清致敏后灌酒,将siRNA腺病毒滴液注入动物一侧股骨头内。在灌酒后第4、8周末分批处死动物,观察其股骨头病理学变化。RT-PCR检测股骨头组织中PPARγmRNA和Osteocalcin mRNA的表达。结果M、CO组中,PPARγmRNA高表达,Osteocalcin mRNA低表达,空骨陷窝百分比及最大脂肪细胞平均直径明显增大、骨小梁面积分数降低,与N、H组相比差异均有统计学意义;S组中,PPARγmRNA低表达,Osteocalcin mRNA高表达,空骨陷窝百分比、最大脂肪细胞平均直径、骨小梁面积分数均与H、N组接近,差异均无统计学意义。结论靶向PPARγ基因siRNA腺病毒载体能够有效阻断酒精诱导的家兔股骨头内骨髓基质细胞内PPARγmRNA表达及成脂分化,预防酒精性ONFH的发生。 展开更多

关键词 过氧化物酶体增殖子活化受体-γ siRNA腺病毒载体 预防 酒精 股骨头坏死

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辛伐他汀通过活化过氧化物增殖子激活受体γ减轻缺血-再灌注心肌炎症反应 被引量：4

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作者 钱建军 李忠东 +2 位作者 吴海卫 张雷 景华 《医学研究生学报》 CAS 2010年第6期569-574,共6页

目的炎性反应在心肌缺血-再灌注(ischemia reperfusion,IR)损伤过程中发挥重要作用。文中旨在观察辛伐他汀预处理对再灌注心肌炎性因子表达的影响,探讨过氧化物增殖子激活受体(peroxisome proliferators activated receptor,PPAR)-γ参... 目的炎性反应在心肌缺血-再灌注(ischemia reperfusion,IR)损伤过程中发挥重要作用。文中旨在观察辛伐他汀预处理对再灌注心肌炎性因子表达的影响,探讨过氧化物增殖子激活受体(peroxisome proliferators activated receptor,PPAR)-γ参与辛伐他汀调控再灌注心肌炎症反应的机制。方法通过冠状动脉结扎法建立大鼠心肌IR模型。实验动物分为假手术组、对照组和辛伐他汀组。辛伐他汀组将按照5 mg/(kg.d)的剂量术前7 d起辛伐他汀灌胃。采用不同方法检测各组血清心肌酶谱、脂质水平、心肌细胞凋亡指数、心肌肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白细胞介素(inferleukin,IL)-6和单核细胞趋化因子(monocyte chemoattractant protein,MCP)-1的含量,心肌组织PPAR-γ、核因子(nuclear factor,NF)-κB活性,及PPAR-γ在心肌组织中的表达。结果与对照组相比,辛伐他汀预处理能显著减少凋亡心肌细胞数,降低血清磷酸激酶同工酶(creatine kinase-MB,CK-MB)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平,下调再灌注心肌组织TNF-α、IL-6和MCP-1的含量,而各组血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglycerides,TG)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)及高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)未见差异。再灌注后,心肌组织PPAR-γ、NF-κB活性均显著增高,辛伐他汀预处理能进一步增加PPAR-γ活性,同时抑制NF-κB活性。结论辛伐他汀预处理能降低IR心肌炎性因子的表达,其抗炎作用通过活化PPAR-γ、抑制NF-κB活性实现。 展开更多

关键词 缺血-再灌注 心肌 辛伐他汀 过氧化物增殖子激活受体 炎性因子

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肝型脂肪酸结合蛋白研究进展 被引量：3

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作者 蔡璨 姜政 《医学综述》 2011年第1期34-37,共4页

肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)是脂肪酸结合蛋白超家族中的重要成员,主要功能是机体对脂肪酸的吸收、转运及细胞内长链脂肪酸的转运,以及脂肪酸在细胞器内的再分布利用。L-FABP调节过氧化物酶体增殖子激动受体α介导的靶基因转录,影响机... 肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)是脂肪酸结合蛋白超家族中的重要成员,主要功能是机体对脂肪酸的吸收、转运及细胞内长链脂肪酸的转运,以及脂肪酸在细胞器内的再分布利用。L-FABP调节过氧化物酶体增殖子激动受体α介导的靶基因转录,影响机体的脂质代谢和能量平衡,起到信号转导分子的作用。L-FABP与代谢性疾病及组织器官缺血损伤等密切相关,有望成为肝、肠、肾等组织损伤的敏感标志物,并可能成为某些代谢性疾病的药物治疗靶点。 展开更多

关键词 肝型脂肪酸结合蛋白 过氧化物酶体增殖子激动受体 调控机制 组织损伤

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靶向过氧化物酶体增殖子活化受体-γ基因siRNA腺病毒载体的构建与鉴定 被引量：4

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作者 王义生 王少华 +5 位作者 李月白 赵国强 张弛 李振伟 殷力 刘宏建 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期656-657,共2页

目的构建、鉴定靶向过氧化物酶体增殖子活化受体-γ（PPAR-γ）基因的siRNA腺病毒载体。方法遵循siRNA片段的设计原则，依据GenBank中PPAR吖基因（AF013266）的序列，设计3个特异性靶序列（36～54位、73～91位和404～422位）；体外合成... 目的构建、鉴定靶向过氧化物酶体增殖子活化受体-γ（PPAR-γ）基因的siRNA腺病毒载体。方法遵循siRNA片段的设计原则，依据GenBank中PPAR吖基因（AF013266）的序列，设计3个特异性靶序列（36～54位、73～91位和404～422位）；体外合成对应发卡样DNA片段，经退火后，将其克隆入pSIREN．Shuttle载体，通过PCR和I-CeuI和PI-SceI酶切鉴定后，再亚克隆入pAdeno-X腺病毒载体。对插入序列进行DNA序列分析。结果发卡样siRNA单链DNA寡核苷酸退火后，电泳可见明亮靶条带；PCR扩增和酶切鉴定得到阳性克隆pSIREN-Shuttle—siPPAR-γ1、pSIREN-Shuttle—siPPARγ-2和pSIREN-Shuttle—siPPARγ-3。亚克隆重组腺病毒载体pAdeno—X．siPPAR^t-1、pAdeno—X-siPPARγ-2和pAdenc-X—siPPARγ-3，经测序鉴定证实插入DNA序列与设计完全一致。结论成功构建3个靶向PPARγ基因的siRNA重组腺病毒载体，为进一步的基因治疗研究奠定了实验基础。 展开更多

关键词 RNA干扰 过氧化物酶体增殖子活化受体-γ 腺病毒载体

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siRNA阻断PPARγ基因表达预防酒精性股骨头坏死的实验研究 被引量：4

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作者 王义生 王少华 +4 位作者 王兴 张林锋 李月白 殷力 张驰 《河南医学研究》 CAS 2010年第2期138-143,共6页

目的:观察靶向PPARγ基因siRNA腺病毒载体阻断酒精诱导兔骨髓基质细胞(MSCs)的成脂分化预防酒精性股骨头坏死(ONFH)的作用效果。方法:采用RNA干扰技术,构建重组PPARγ的siRNA腺病毒表达载体;将腺病毒载体感染家兔体外MSCs以及活体股骨头... 目的:观察靶向PPARγ基因siRNA腺病毒载体阻断酒精诱导兔骨髓基质细胞(MSCs)的成脂分化预防酒精性股骨头坏死(ONFH)的作用效果。方法:采用RNA干扰技术,构建重组PPARγ的siRNA腺病毒表达载体;将腺病毒载体感染家兔体外MSCs以及活体股骨头内MSCs,检测MSCs内PPARγmRNA及蛋白表达、甘油三酯、ALP活性和培养液骨钙素含量,并计数脂肪细胞;观察股骨头病理学变化。结果:干扰组体外MSCs内PPARγmRNA表达值、脂肪细胞数、甘油三酯、ALP活性值与骨钙素含量均接近正常,与模型组、感染空载体组、感染无关siRNA组间差异有统计学意义(P<0.05),与对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。活体实验干扰组股骨头内PPARγmRNA和蛋白均呈低表达、空骨陷窝计数、脂肪细胞及最大脂肪细胞平均直径未见明显增加,与正常对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:靶向PPARγ基因siR-NA腺病毒载体能够有效阻断酒精诱导的家兔体外MSCs及活体股骨头MSCs内PPARγ基因表达,阻止其成脂分化,预防酒精性ONFH的发生。 展开更多

关键词 RNA干扰 过氧化物酶体增殖子活化受体-γ 股骨头坏死 酒精 腺病毒载体

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